不同药剂防治柑橘溃疡病田间药效试验

为筛选出适合防治柑橘溃疡病的药剂,开展了不同药剂防治柑橘溃疡病药效试验。结果表明,47%春雷·王铜可湿性粉剂600倍液+80%乙蒜素乳油2 000倍液对柑橘溃疡病春梢防效为74.01%、秋梢防效为81.06%,50%多·锰锌可湿性粉剂500倍液+30%松脂酸铜乳油800倍液对柑橘溃疡病春梢防效为75.04%、秋梢防效为64.02%,3%噻霉酮可湿性粉剂3 000倍液+80%乙蒜素乳油2 000倍液+十八烯酸植物油助剂1 300倍液对柑橘溃疡病春梢防效为74.31%、秋梢防效为75.11%;这3种药剂组合的防效与77%氢氧化铜可湿性粉剂500倍液对柑橘溃疡病春梢防效(75.62%)、秋梢防效(83.36%)相当,在生产上可以用于推广应用。     

不同药剂防治柑桔(井冈蜜柚)红蜘蛛药效初报

柑橘红蜘蛛是吉安市井冈蜜柚生产上最重要害虫之一,其分布广,繁殖快,发生普遍,主要为害井冈蜜柚、脐橙等柑橘类的果树,是典型的难防害虫。近年来柑橘红蜘蛛为害加重,严重影响了井冈蜜柚生产,针对目前市场上常用的防治柑桔(井冈蜜柚)红蜘蛛的药剂进行药效比较,客观科学评价其防效和安全性。     

内生细菌GN232发酵条件优化及其对脐橙溃疡病的防效测定

试验以前期分离筛选到的一株柑橘溃疡病生防内生细菌GN232为对象,采用单因素法优化其摇瓶发酵条件并测定其对脐橙苗期和成株期溃疡病的防治效果。结果表明,当菌株GN232采用YPD培养液、种子液按照5%量接种到100 mL、初始pH值为7的培养液中,在30℃、转数为200 r/min的振荡器中培养60 h后,获得的发酵液对柑橘溃疡病菌的抑制效果最强;内生细菌GN232在脐橙苗期和成株期树均表现出对溃疡病有一定的防治效果,其中当菌悬液稀释10倍时对脐橙苗期溃疡病的防效高于农用链霉素,菌悬液稀释50倍时对脐橙成年树溃疡病的防效能达到与农用链霉素相当的程度。试验结果为柑橘溃疡病的生物防治奠定了基础,亦可为生防内生细菌GN232的进一步研究和应用提供理论依据和技术支持。     

海南琼中绿橙溃疡病田间药剂防治试验初报

柑橘溃疡病是琼中绿橙主要病害之一,为有效控制柑橘溃疡病的发生,选择4种药剂进行田间药效对比试验。试验结果表明,47%春雷?王铜WP500倍处理和20%噻菌铜SC500防效最好,达到87.8%~91.79%;27.12%碱式硫酸铜SC600倍和77%硫酸铜钙WP500倍处理防效达到73.66%~82.05%,防治效果也较为理想,以上药剂对琼中绿橙安全,可以轮换使用。     

200克/升四螨嗪悬浮剂防治柑橘(井冈蜜柚)红蜘蛛药效评估报告

柑橘红蜘蛛是吉安市井冈蜜柚生产上最重要害虫之一,其分布广,繁殖快,发生普遍,主要为害井冈蜜柚等柑橘类的果树,是比较典型的难防害虫。近年来柑橘红蜘蛛为害加重,严重影响了井冈蜜柚生产,针对目前市场上常用的防治柑橘(井冈蜜柚)红蜘蛛的药剂进行药效比较,客观科学评价其防效和安全性。     

不同药剂防治柑橘溃疡病药效评价试验初报

试验选用20%龙克菌、47%王铜等9种药剂进行柑橘溃疡病药效比较试验,试验得出20%龙克菌防效最好,为80.22%;47%加瑞农防效次之,为77.92%;20%噻唑锌防效第三,为74.41%;申嗪霉素、多抗霉素等防效较差,建议采用龙克菌、加瑞农等药剂进行防治,并做到交替使用。     

不同药剂防治柑橘溃疡病的效果

为了筛选出防治柑橘溃疡病的最佳药剂,选择市场上常用药剂20%乙酸铜(铜筋铁骨)水分散粒剂800倍液,53.8%氢氧化铜(禾腾)水分散粒剂800倍液和新药剂噻唑锌500倍液、300倍液进行了柑橘溃疡病的防治试验。结果表明:20%噻唑锌悬浮剂300倍液,53.8%氢氧化铜(禾腾)水分散粒剂800倍液防治柑橘溃疡病的效果较好,防效分别为72%和70%。     

柑橘溃疡病菌的药剂筛选及抗药性分析

柑橘溃疡病是柑橘生产上重要细菌病害,药剂防治是其主要的防治措施.本文通过平板抑菌圈试验,测定了来自广东和江西等地的21个柑橘溃疡病细菌对8种化学药剂的敏感性.结果表明:叶枯唑1 000×、新植霉素2 800×、水合霉素1 300×等3种药剂对供试的21个柑橘溃疡病菌菌株均没有抑菌作用;链霉素、中生菌素、溃疡克星、氢氧化铜.锌和必备等5种药剂对溃疡病菌表现不同程度的抑菌作用,其中,链霉素的抑菌作用最强;部分溃疡病菌株对这5种药剂产生了不同程度的抗药性.田间试验结果表明,链霉素、中生菌素对溃疡病防治效果较好.     

不同杀菌剂防治沃柑溃疡病效果试验

选取8种常用杀菌剂对沃柑溃疡病进行田间药效对比试验。结果表明,8种杀菌剂的防效由高到低依次为27.12%碱式硫酸铜悬浮剂500倍液、57.6%氢氧化铜水分散粒剂1 000倍液、20%噻森铜悬浮剂500倍液、47%春雷·王铜可湿性粉剂650倍液、1.8%辛菌胺醋酸盐水剂500倍液、20%噻菌铜悬浮剂500倍液、20%噻唑锌悬浮剂500倍液、33.5%喹啉铜悬浮剂1 000倍液,且防效均达到79%以上,对沃柑生产安全,是防治沃柑溃疡病的理想药剂。     

柑橘溃疡病抗性SNP验证及其相关钙依赖性蛋白激酶基因诱导表达

【目的】前期根据转录组数据挖掘柑橘单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,通过关联分析获得14个与柑橘溃疡病耐/感性关联的SNP。以此为基础,本研究利用柑橘杂交群体验证这些位点与柑橘溃疡耐/感性的相关性,以期获得显著相关的SNP,并对其相关的基因进行柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp. citri,Xcc)和植物激素诱导表达分析。【方法】以抗病和敏感柑橘品种及其杂交F1代群体共143个材料为试材,采用离体叶片针刺接种法进行溃疡病抗性鉴定;利用高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)技术,对F1群体进行SNP分型;使用DPS软件对F1群体的溃疡病耐/感性表型和SNP基因型进行相关分析;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)分析其中一个SNP相关的柑橘钙依赖性蛋白激酶基因(calcium-dependent protein kinase gene,CDPK)的诱导表达模式。【结果】供试杂交F1代群体的病斑面积在0.75—3.29 mm2;病情指数在30.2—100,而抗病品种‘金弹’病情指数为11.1,敏感品种‘冰糖橙’病情指数为100。病情指数较低的杂交后代,其亲本至少有1个为耐病性品种,母本耐病性强的居多。根据病情指数确定免疫材料1个,高抗17个,中抗31个,中感38个,高感56个。SNP分型结果显示,14个SNP位点在143个供试材料间均有多态性,可分为3种不同的基因型,2种纯合型和1种杂合型。简单相关分析结果表明,多个SNP位点的基因型与病斑面积及病情指数相关性显著。典型相关分析结果显示,其中5个SNP位点与病斑面积相关性较高,相关系数绝对值均0.2,其编号分别为HP31、HP42、HP85、HP87、HP170,可利用这5个SNP位点的基因型预测柑橘溃疡病耐性的强弱。其中SNP位点HP31位于CsCDPK(CAP ID:Cs4g10370)的编码区,对柑橘离体叶片接种溃疡病菌诱导处理6、12、24、48和72 h后进行基因相对表达量分析,发现‘金弹’(高抗)、‘新生系3号椪柑’(中抗)和‘冰糖橙’(高感)中该基因的表达量均呈先升后降趋势,且均在48 h其相对表达量达到最高;接菌处理后12 h,‘金弹’中该基因的相对表达量为对照的3倍,而‘新生系3号椪柑’和‘冰糖橙’中无明显差异。此外,CsCDPK受水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(MeJA)和脱落酸(ABA)诱导表达,且在不同溃疡病耐/感性品种中该基因诱导表达的模式不同。【结论】获得5个与溃疡病耐/感性显著相关的SNP,可用作柑橘溃疡病耐/感性筛选标记。SNP位点HP31相关的CsCDPK受溃疡病菌和SA、MeJA和ABA诱导表达,该基因可能在柑橘应答溃疡病菌侵染的信号转导过程中具有重要功能。     

柑橘溃疡病抗性SNP验证及其相关钙依赖性蛋白激酶基因诱导表达

【目的】前期根据转录组数据挖掘柑橘单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）位点,通过关联分析获得14个与柑橘溃疡病耐/感性关联的SNP。以此为基础,本研究利用柑橘杂交群体验证这些位点与柑橘溃疡耐/感性的相关性,以期获得显著相关的SNP,并对其相关的基因进行柑橘溃疡病菌（Xanthomonas citri subsp. citri,Xcc）和植物激素诱导表达分析。【方法】以抗病和敏感柑橘品种及其杂交F₁代群体共143个材料为试材,采用离体叶片针刺接种法进行溃疡病抗性鉴定;利用高分辨率熔解曲线（high resolution melting,HRM）技术,对F₁群体进行SNP分型;使用DPS软件对F₁群体的溃疡病耐/感性表型和SNP基因型进行相关分析;实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,qRT-PCR）分析其中一个SNP相关的柑橘钙依赖性蛋白激酶基因（calcium-dependent protein kinase gene,CDPK）的诱导表达模式。【结果】供试杂交F₁代群体的病斑面积在0.75—3.29 mm²;病情指数在30.2—100,而抗病品种‘金弹’病情指数为11.1,敏感品种‘冰糖橙’病情指数为100。病情指数较低的杂交后代,其亲本至少有1个为耐病性品种,母本耐病性强的居多。根据病情指数确定免疫材料1个,高抗17个,中抗31个,中感38个,高感56个。SNP分型结果显示,14个SNP位点在143个供试材料间均有多态性,可分为3种不同的基因型,2种纯合型和1种杂合型。简单相关分析结果表明,多个SNP位点的基因型与病斑面积及病情指数相关性显著。典型相关分析结果显示,其中5个SNP位点与病斑面积相关性较高,相关系数绝对值均>0.2,其编号分别为HP31、HP42、HP85、HP87、HP170,可利用这5个SNP位点的基因型预测柑橘溃疡病耐性的强弱。其中SNP位点HP31位于CsCDPK（CAP ID: Cs4g10370）的编码区,对柑橘离体叶片接种溃疡病菌诱导处理6、12、24、48和72 h后进行基因相对表达量分析,发现‘金弹’（高抗）、‘新生系3号椪柑’（中抗）和‘冰糖橙’（高感）中该基因的表达量均呈先升后降趋势,且均在48 h其相对表达量达到最高;接菌处理后12 h,‘金弹’中该基因的相对表达量为对照的3倍,而‘新生系3号椪柑’和‘冰糖橙’中无明显差异。此外,CsCDPK受水杨酸（SA）、茉莉酸甲酯（MeJA）和脱落酸（ABA）诱导表达,且在不同溃疡病耐/感性品种中该基因诱导表达的模式不同。【结论】获得5个与溃疡病耐/感性显著相关的SNP,可用作柑橘溃疡病耐/感性筛选标记。SNP位点HP31相关的CsCDPK受溃疡病菌和SA、MeJA和ABA诱导表达,该基因可能在柑橘应答溃疡病菌侵染的信号转导过程中具有重要功能。     

6株土壤链霉菌的抑真菌活性及其发酵液对采后香蕉果实炭疽病的防效

测定了从海南土壤中分离获得的6株链霉菌(Streptomycessp.)LA5、BM9、BM10、BM11、BM19和BW的抑真菌活性及其发酵液对采后香蕉果实炭疽病的防效。香蕉果实接种香蕉炭疽病菌[Colletotrichummusae(BerkeleyetCurtis)vonArx]0h(指接种后立即浸果处理)和24h后,用6菌株的无菌发酵液浸果。结果表明,这6株放线菌活菌及其无菌发酵液对香蕉炭疽病菌均有较强的抑制作用;接种0h后蘸果处理中,LA5菌株的防效最好,达80.0%,与50%多菌灵800倍液的防效相当;接种24h后蘸果处理中以BW菌株防效最好,达75.0%,显著高于50%多菌灵500倍液的防效(64.6%)。     

6种杀菌剂对柑橘溃疡病的室内毒力测定及田间防治效果评价

为明确6种杀菌剂对柑橘溃疡病菌的室内毒力和田间防治效果,筛选出防治柑橘溃疡病的有效药剂以及为高效、安全混配药剂的研发提供数据支持,本试验测定了6种杀菌剂对柑橘溃疡病菌的室内毒力及防治柑橘溃疡病的田间效果。结果表明:药剂浓度为2000μg/mL时,6种杀菌剂对溃疡病菌的抑菌率分别为77.14%、78.76%、42.86%、39.24%、37.66%和34.25%。施药3次后,3%噻霉酮微乳剂60mg/kg、77%氢氧化铜水分散粒剂385mg/kg、84%王铜水分散粒剂840mg/kg和30%碱式硫酸铜悬浮剂1000mg/kg对柑橘叶片溃疡病的平均防效分别为74.89%、81.74%、79.79%和75.40%。结合室内毒力测定和田间防治试验,3%噻霉酮微乳剂和77%氢氧化铜水分散粒剂对柑橘溃疡病菌有较强的抑制效果和有较好的田间防治效果。     

8种杀菌剂防治沃柑溃疡病的田间药效对比试验

本文选取8种常用杀菌剂对沃柑溃疡病进行田间药效对比试验,结果表明,8种杀菌剂的防效由高到低依次为27.12%碱式硫酸铜SC 500倍液、57.6%氢氧化铜WG 1000倍液、20%噻森铜SC 500倍液、47%春雷.王铜WP 500倍液、1.8%辛菌胺醋酸盐AS 500倍液、20%噻菌铜SC 500倍液、20%噻唑锌SC 500倍液、33.5%喹啉铜SC 1000倍液,且防效均达到79%以上,对沃柑生产安全,是防治沃柑溃疡病的理想药剂。     

几种农药防治柑橘蚜虫药效研究

[目的]研究几种农药防治柑橘蚜虫的药效,为柑橘生产提供科学依据。[方法]于无翅蚜为害期喷雾高、中、低3种剂量的阿维菌素、蛇床子素、高效氯氰菊酯和阿维菌素＋吡虫啉（1∶2）,以剂量25mg/kg的吡虫啉为药剂对照,设清水为空白对照,分析几种农药防治柑橘蚜虫的效果。[结果]5种供试药剂中阿维菌素、高效氯氰菊酯、阿维菌素＋吡虫啉及吡虫啉单剂对柑橘蚜虫均有很好的防效,速效性、持效性均接近或超过95%。生物农药蛇床子素低剂量和中剂量处理后1d对蚜虫防效较低,分别为44.14%和69.74%;高剂量药后3d防效开始上升,药后10d防效达94.76%,药后14d防效可达98.87%。5种供试药剂均有很好的持效性,所有处理药后2周的防效均在95%以上。[结论]为柑橘蚜虫的防治提供了借鉴,并有效保证了高毒农药的取代工作。     

广东和江西省柑橘溃疡病菌的遗传多样性分析

【目的】明确来自广东和江西两省柑橘溃疡病菌菌株之间的分子水平差异.【方法】使用ERIC引物,通过REP-PCR技术,对来自我国广东和江西省12个市(县)12个柑橘品种的71个柑橘溃疡病菌株进行遗传多样性研究.根据DNA指纹特征,并用NTSYS软件聚类分析.【结果和结论】71个菌株在相似值为0.64时,可以分为A、B两簇,其中来自江西赣州6个市县的所有溃疡病菌株全部聚在A簇,而来自广东有50%的菌株聚在B簇.取相似值为0.88时,A、B簇又各自分为6个遗传组.广东和江西两省柑橘溃疡病菌存在明显的遗传多样性,不同地理来源和不同柑橘品种之间的溃疡病细菌多样性差异明显.     

利用qPCR技术检测柑橘溃疡病菌的灵敏度分析

以常规PCR为对照,分析了实时荧光定量PCR(q PCR)检测柑橘溃疡病菌DNA和柑橘溃疡病菌菌量的灵敏度,并对接种柑橘溃疡病菌后的冰糖橙样品进行了动态监测。结果显示,q PCR检测柑橘溃疡病菌DNA和柑橘溃疡病菌菌量的灵敏度比常规PCR高1~3个数量级,且常规PCR对柑橘溃疡病菌DNA的检测会受到寄主植物DNA的干扰,q PCR不受寄主植物DNA影响;对接种后冰糖橙样品的分析,q PCR即时就能检测到柑橘溃疡病菌,并能实时观察到柑橘溃疡病菌在寄主叶片的增殖情况,而常规PCR要接种后2 d才能检测到柑橘溃疡病菌。     

4种天然源农药对有机橘园柑橘全爪螨的防治技术研究

为明确有机管理背景下印楝素、苦参碱、鱼藤酮和SK绿颖农用喷洒油4种经过有机论证的天然源药剂对柑橘全爪螨的防效,进行了4种供试药剂一次喷雾施药和二次喷雾施药两种处理防治柑橘全爪螨的田间试验。一次施药处理结果表明,0.6%苦参碱水剂2 000倍液的速效性最好,药后1 d对柑橘全爪螨的防效为98.57%,显著高于其他药剂;4药剂中,仅0.5%印楝素乳油1 000倍液的防效在供试期间内呈现逐渐上升的趋势,其余3药剂在施药3 d后的防效均逐步下降;药后21 d印楝素的防效较其他药剂显著为高,达97.54%,其次为SK绿颖农用喷洒油,再次为苦参碱、鱼藤酮和对照药剂阿维菌素。二次施药处理试验结果显示,印楝素、苦参碱和SK绿颖农用喷洒油3药剂的防效均在96.69%以上,但2.5%鱼藤酮乳油800倍液的防效较低,在88.95%～92.17%;且印楝素、苦参碱及SK绿颖农用喷洒油对柑橘全爪螨的防效优于或相当于对照药剂阿维菌素。从以上结果可知,供试4种天然源药剂对有机柑橘园的害螨均具有良好的防效,且二次施药处理的效果更为理想。     

柑橘溃疡病相关基因CsPGIP的克隆与表达

【目的】克隆CsPGIP并分析其表达特性,转化柑橘得到超表达转基因株系,并进行柑橘溃疡病抗性评价,为柑橘溃疡病分子育种提供理论依据。【方法】从晚锦橙和四季橘中克隆柑橘CsPGIP,使用MEGA6进行多序列比对并构建系统发育树;采用在线软件BaCelLo和SignalP 4.0进行亚细胞定位和信号肽预测并用GFP瞬时表达确定CsPGIP在细胞内的定位;利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）比较接种溃疡病菌前后高感品种和高抗品种中柑橘CsPGIP的表达特性,分析溃疡病菌侵染与CsPGIP表达的相关性;农杆菌介导遗传转化晚锦橙,采用GUS染色初筛、PCR鉴定和qRT-PCR相结合的方法鉴定超表达转基因株系;观察转基因和野生型株系表型变化,分析其株高、叶片表型;离体针刺法对超表达转基因株系和野生型株系进行柑橘溃疡病抗性评价,统计病斑面积和病情指数,分析CsPGIP表达对柑橘抗、感溃疡病的影响。【结果】晚锦橙和四季橘CsPGIP均编码328个氨基酸,与已报道的柑橘中的PGIP同源性高达99.39%,都包含2个PGIP基因典型的LRR结构域（LRR_1和LRR_2）;构建系统进化树发现甜橙中的CsPGIP与葡萄中的PGIP（GSVIVT01033370001）遗传距离最近,相似度达到62.97%,推测CsPGIP与葡萄中的PGIP具有类似的抗病效果。亚细胞定位和信号肽预测结果表明CsPGIP属于分泌蛋白,GFP洋葱瞬时表达证明柑橘CsPGIP定位在细胞膜和细胞壁,与预测结果一致。高感品种晚锦橙和高抗品种四季橘接种溃疡病菌后CsPGIP的表达特性不同,在高感品种中表达显著下调,而高抗品种中表达显著上调且维持在较高水平,推测CsPGIP与柑橘溃疡病的抗性相关。构建CsPGIP超表达载体并转化晚锦橙,通过PCR鉴定和qRT-PCR确定其中9个（OE1、OE3、OE4、OE5、OE6、OE9、OE10、OE12和OE14）为CsPGIP超表达阳性株系。通过对转基因株系的表型观察发现OE3、OE14株系表型与野生型株系相比差异明显,植株表现为较矮小,其中OE14出现叶片卷曲、增厚的表型变化。对CsPGIP超表达转基因株系（8个株系）进行离体抗溃疡病评价,结果显示超表达转基因株系可以使柑橘溃疡病病斑面积降至野生型的24.11%—83.88%,其中OE1株系的病斑面积最小;从病情指数来看,除OE3株系外,其余株系的病情指数均比野生型显著下降（为野生型的23.12%—75.49%）,其中OE1下降最显著,综上结果可知超表达CsPGIP可以有效抑制柑橘溃疡病菌的生长。【结论】CsPGIP是柑橘响应溃疡病菌侵染的重要基因,可抑制或减轻柑橘溃疡病的发病程度,在柑橘抗溃疡病机理研究方面具有较大的应用价值,也可作为柑橘抗溃疡病分子育种的一个候选基因。     

一株马铃薯干腐病病原菌的鉴定与药剂筛选

分离了一株马铃薯干腐病病原菌,经ITS序列分析证实其为尖刀镰孢菌(Fusarium oxysporum),通过培养后喷雾接种感病品种AC0338,接种3 d后采用5种药剂进行防治。结果表明,5种药剂处理对马铃薯块茎干腐病均有一定的防治效果,其中以40%多菌灵悬浮剂500倍液处理防效最好,防治效果为72.49%,能有效地控制马铃薯干腐病菌的扩展和蔓延。