陕南蔬菜根结线虫种类的同工酶酶谱鉴定

在形态学鉴定的基础上,运用同工酶电泳技术,对采自陕南3市18县区的37个为害蔬菜的根结线虫种群进行鉴定。结果表明:在所鉴定的种群中,32个种群为南方根结线虫(Meloidogyne incognita),2个种群为花生根结线虫(M.arenaria),1个种群为北方根结线虫(M.hapla),1个种群为南方根结线虫和花生根结线虫的混合群体,1个种群为南方根结线虫和北方根结线虫的混合群体;其中南方根结线虫是陕南为害蔬菜的主要根结线虫。     

三七病原根结线虫核糖体基因ITS区段的克隆测序及其在检测中的应用

根据NCBI基因库中根结线虫属rDNA序列,设计通用引物M18s/M28s,对采自云南文山、砚山、马关、蒙自等地的4个三七病原根结线虫种群(Meloidogyne hapla)rDNA区段进行聚合酶链式反应(PCR)扩增,并将扩增到的目的片段克隆到pGEM-T载体上。对重组克隆进行测序和序列分析,结果表明:4个种群rDNA同源性为100%,ITS区序列长度为479 bp,其中ITS1序列长度为213 bp,5.8S序列长度为159 bp,ITS2序列长度为107 bp。根据此序列设计-对特异性寡聚核苷酸引物Mhf/Mhr,应用PCR技术,以北方根结线虫(Meloidogynehapla)、南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、花生根结线虫(Meloidogyne arenaria)和爪哇根结线虫(Meloido-gyne javanica)全基因组DNA为对照,对三七病原根结线虫全基因组DNA进行特异性扩增。结果表明,该对引物能从供试的北方根结线虫和三七病原根结线虫种群全基因组DNA中扩增到462 bp长度的分子片段,而南方根结线虫、花生根结线虫和爪哇根结线虫则无扩增产物。该引物可用于三七病原根结线虫的检测。     

昌乐县根结线虫病发生情况调查

调查发现目前昌乐地区瓜菜上危害的根结线虫有南方根结线虫（Meloidogyne incognita）、北方根结线虫（M.hapla）、爪哇根结线虫（M.javanica）和花生根结线虫（M.arenaria）,其中南方根结线虫是绝对优势种群,占95%以上。易感病或高感病的品种有：西瓜、黄瓜、丝瓜、苦瓜、南瓜、番茄、芹菜、姜等。     

西班牙根结线虫rDNA特性及其检测方法

通过对rDNA的ITS区和IGS2区进行PCR扩增并对产物测序,比较分析了西班牙根结线虫与中国4种常见的南方根结线虫、爪哇根结线虫、花生根结线虫和北方根结线虫群体rDNA的ITS区和IGS2区的序列差异,选择限制性内切酶TaqⅠ对IGS2区的PCR扩增产物进行酶切,获得了西班牙根结线虫的554 bp的特异性条带.表明用此方法可以明显将西班牙根结线虫与其他4种常见的根结线虫群体区分开,其灵敏度可达到单条根结线虫二龄幼虫.     

西班牙根结线虫rDNA特性及其检测方法

通过对rDNA的ITS区和IGS2区进行PCR扩增并对产物测序,比较分析了西班牙根结线虫与中国4种常见的南方根结线虫、爪哇根结线虫、花生根结线虫和北方根结线虫群体rDNA的ITS区和IGS2区的序列差异,选择限制性内切酶TaqⅠ对IGS2区的PCR扩增产物进行酶切,获得了西班牙根结线虫的554 bp的特异性条带.表明用此方法可以明显将西班牙根结线虫与其他4种常见的根结线虫群体区分开,其灵敏度可达到单条根结线虫二龄幼虫.     

枯萎病菌和根结线虫对黄瓜复合侵染研究

黄瓜枯萎病和根结线虫病是三明地区黄瓜的2种重要病害，经鉴定黄瓜枯萎病的病原为尖镰孢（Fusarium axysporum)，黄瓜根结线虫的种类有南6方根结线虫（Meloiddogyne indcoginta)、爪哇根结线虫（M.jauanica)、花生根结线虫（M.arenaria)，接种试验证实尖镰孢和南方根结线虫在黄瓜上能复合侵染，引起重大损失。     

甘肃省蔬菜根结线虫种群鉴定及其对主栽品种的致病性测定

对甘肃省6个蔬菜主产区的根结线虫发生与危害程度进行系统调查,根结线虫在各主产区均大量发生,土样中根结线虫检出率为58.02%。采用雌虫会阴花纹形态、Mdh Est同工酶以及ITS PCR技术,将采自甘肃省内13种蔬菜上的18个根结线虫种群鉴定为两类,在茄子与芹菜上发生花生根结线虫（Meloidogyne arenaria）,其余作物上均为南方根结线虫（Meloidogyne incognita）,南方根结线虫占检测种群的88.89%。在田间进行9大类共23个蔬菜主栽品种和嫁接砧木的根结线虫抗性鉴定,参试辣椒品种、番茄品种“金鹏M215”和茄子砧木“托鲁巴姆”在田间未发生根结线虫病害,其余蔬菜各品种均为感病类型。     

马铃薯培养根结线虫效果的研究

在比较根结线虫Meloidogyne spp．在番茄Lycopersicum esculentum和马铃薯Solanum tuberosum上培养效果的基础上，研究了不同马铃薯品种对根结线虫的培养效果．结果表明，南方根结线虫M．incognita在所有4种供试马铃薯品种上均能较好地繁殖，在大西洋和958品种上繁殖效果明显好于其他2个供试品种；南方根结线虫、爪哇根结线虫M,javanica和花生根结线虫M.arenaria均可在马铃薯958品种上进行良好繁殖，但不同根结线虫的繁殖效果有一定差异，其中南方根结线虫的繁殖最好，而爪哇根结线虫和花生根结线虫则相对较差．     

30种作物要结线虫病的病原鉴定

从广东省和海南省的１３个县市的３０种作物上，采集了根结线虫病标本５２个，对其病原采用形态特征观察，鉴别寄主反应，电镜扫描和染色体数目等方法进行分类鉴定，其中，柑桔，花生，甘蔗、节瓜的根结线虫病的病原属于花生根结线虫８号小种；大蕉、香蕉、茄、茶、胡椒、大红花根结线虫病的病原为瓜哇根结线虫；葡萄、番石榴、木瓜、丝瓜、南瓜、黄瓜、番茄、辣椒、菜豆、蕹菜、橡胶、益智、甘薯和木棉等根结线虫病的病原为南方根结     

侵染江苏猕猴桃的北方根结线虫(Meloidogyne hapla)形态学描述和分子特征分析

根结线虫病长期以来对猕猴桃安全生产造成了严重威胁.调查发现江苏省连云港市部分猕猴桃种植园根结线虫病发生普遍,组织切片可见根部出现根结线虫诱导的特异的巨细胞.形态学观察和分子检测结果显示,尽管与其他群体存在一定差异,但仍确定本次分离自猕猴桃的根结线虫(种群编号:CN43)为北方根结线虫(Meloidogyne hapla).基于内转录间隔区(ITS)和COⅡ-16S序列构建的遗传进化树显示,CN43分离群体与已知的北方根结线虫位于同一进化分支,而与其他种类的根结线虫明显区分开来.以ITS序列构建的中接网络将34个北方根结线虫分离群体划分为10个单倍型,其中CN43属于最大的单倍型群组;然而,单倍型分析不能确定各分离群体在地理分布上的关联性.综上,本研究首次报道了北方根结线虫在中国猕猴桃上的侵染和发生,其分离群体的形态学描述和分子特征分析可为揭示猕猴桃根结线虫的种群多样性和种间变异提供参考.     

中国南方地区作物根结线虫种和小种的鉴定

对采自中国南方地区34种作物的根结线虫83个种群进行了单卵块纯化和培养，在形态学研究的基础上，结合利用全自动快速水平电泳系统测定了雌虫的酯酶和苹果酸脱氢酶，鉴定出南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、爪哇根结线虫(M.javanica)、花生根结线虫(M.arenaria)和番禺根结线虫(M.panyuensis)。其中南方根结线虫是最主要的根结线虫。鉴别寄主试验表明，南方根结线虫的优势小种是1号小种。     

陕南蔬菜根结线虫群体的mtDNA-PCR-RFLP快速种类鉴定

[目的]运用mtDNA-PCR-RFLP技术快速鉴定陕南蔬菜根结线虫,为根结线虫的有效防治提供参考。[方法]在形态学、同工酶鉴定的基础上,运用mtDNA-PCR-RFLP电泳技术,对采自陕南3市18县区的37个为害蔬菜的根结线虫种群进行了鉴定。[结果]在所鉴定的种群中,32个种群为南方根结线虫（Meloidogyne incognita）,2个种群为花生根结线虫（M.arenaria）,1个种群为北方根结线虫（M.hapla）,1个种群为南方根结线虫和花生根结线虫的混合群体,1个种群为南方根结线虫和北方根结线虫的混合群体;其中南方根结线虫是陕南为害蔬菜的主要根结线虫。[结论]形态学方法应仅作为辅助鉴定手段,而同工酶表型和mtDNA-PCR-RFLP分析均可作为快速而可靠地鉴定中国常见根结线虫种类的方法。     

云南省部分烟区根结线虫形态和分子鉴定

[目的]明确当前云南省部分烟草种植区根结线虫的种类和分布,为烟草根结线虫病综合防治及烟草品种布局提供理论依据.[方法]2015年8~10月,在云南省主要烟草种植区昆明、曲靖和玉溪市采集54份烟草根结线虫病根样本,采用雌成虫会阴花纹形态观察及分子生物学检测(rDNA-ITS区和SCAR特异性鉴定)对病原根结线虫种类进行鉴定.[结果]采集的54份样本中有24份样本的病原为花生根结线虫(Meloidogynearenaria),占44.44%;7份样本为南方根结线虫(M.incognita),占12.96%;1份样本为爪哇根结线虫(M.javanica),占1.85%;11份样本为爪哇根结线虫和花生根结线虫的复合种群,占20.37%;5份样本为南方根结线虫和花生根结线虫的复合种群,占9.26%;3份样本为南方根结线虫和爪哇根结线虫的复合种群,占5.56%;3份样本为南方根结线虫、爪哇根结线虫和花生根结线虫3种线虫的复合种群,占5.56%.[结论]当前危害云南省部分烟草种植区(昆明、曲靖和玉溪烟区)的根结线虫种类主要有南方根结线虫、爪哇根结线虫和花生根结线虫3种,以花生根结线虫为优势种群.     

海南省番石榴根结线虫病病原的种类鉴定及其寄主范围的测试

对源白海南省3地侵染番石榴的9个根结线虫群体进行了形态观察和同工酶分析，对4个代表性群体在10种常见经济作物15个品种上的繁殖力进行了测试。同工酶鉴定结果表明，病原线虫为象耳豆根结线虫（Meloidogyne enterolobii）。生物测试发现或证实：携带Mi基因的抗性番茄以及菜豆、豇豆、茄子、黄瓜、西瓜、辣椒、烟草为供试象耳豆根结线虫群体的高度适宜寄主，大豆为低度适宜寄主，棉花为非寄主。寄主范围的测试结果提示，象耳豆根结线虫可潜在地对农业生产造成巨大的经济损失。     

云南植物根结线虫种类调查与鉴定

 1986年以来,从云南省的昆明市及10个地区(州)约30个县(市)的60种(或品种)作物上采集到150个根结线虫种群,根据形态特征与鉴别寄主反应试验,对141个种群进行了种与寄主小种的鉴定,绝大多数为4种常见根结线虫,优势种为南方根结线虫,其余依次为爪哇根结线虫,北方根结线虫和花生根结线虫,南方根结线虫中,优势小种为1号小种,其次为2号小种和3号小种,未发现4号小种。花生根结线虫中,鉴定出2号小种,未发现1号小种。     

榆中县黄瓜根结线虫鉴定及根系定殖效果测定

为了明确甘肃榆中县温室大棚黄瓜根结线虫种类及根际定殖情况,采用形态和分子生物学鉴定其种类,并室内测定和显微观察其在根际定殖效果。结果表明,甘肃榆中县黄瓜根结线虫不同虫态形态、大小和雌虫会阴花纹特征等均具有典型南方根结线虫(Meloidogyne incognita)形态特征。基于线粒体COI基因序列比对和构建系统发育树,鉴定发现榆中县黄瓜根结线虫线粒体COI基因序列与已报道的南方根结线虫台湾株系(KU517167)聚为一类,其相似性为99.75%;根结线虫多序列特异位点鉴定发现其与南方根结线虫孟加拉国株系(MN196556)和南方根结线虫印度株系(MN728697)聚为一类,相似性分别为100%和96.91%。经致病性测定发现,待接种根结线虫2龄幼虫30 d后其能够侵染黄瓜根系并形成大量根结,经染色发现黄瓜幼苗根系组织内寄生大量线形蠕虫、雌虫和卵囊,且镜检观察发现其形态与田间采集后分离的线虫形态一致。综上可知,引起甘肃省榆中县黄瓜根结线虫病的病原为南方根结线虫。     

福建猕猴桃根结线虫病病原鉴定

对从福建省建宁县中华猕猴桃(Actinidia chinensis)根部采集的30个根结线虫群体进行鉴定,结果表明侵染猕猴桃的线虫群体是由爪哇根结线虫(Meloidogyne javanica)和南方根结线虫(M.incognita)组成的混合种群,爪哇根线虫为优势种。     

江苏省瓜蒌根结线虫种类鉴定

本文对江苏瓜蒌上根结线虫样本进行广泛采集,单卵块纯化培养后,运用形态学方法和分子生物学方法对其进行了鉴定。根据雌虫会阴花纹、雌虫、雄虫和2龄幼虫的相关测量值等形态学鉴定特征,并结合特异引物的PCR扩增图谱,鉴定出该病原为南方根结线虫(Meloidogyne incognita)。结果表明,江苏省瓜蒌根结线虫群体类型为南方根结线虫,将进一步为该病害传播、流行和控制提供可行的理论依据。