刺槐、紫穗槐、黄檀根瘤菌抗逆性的初步研究

对30株分离自四川省凉山州的刺槐、紫穗槐、黄檀根瘤菌进行了耐酸碱、耐盐、耐高温或低温的抗逆性研究.结果表明,该区的刺槐、紫穗槐、黄檀根瘤菌具有很强的耐酸碱性,所有菌株都能耐受pH值5～12的环境,76.7%的菌株在pH值4～12的环境中仍有活力.耐盐性普遍较差,有86.7%的菌株不能在1%的NaCl平板上生长,13.3%的菌株能在4%的NaCl平板上生长.黄檀根瘤菌耐盐性一般强于刺槐和紫穗槐根瘤菌.对温度的适应范围较宽,对温度的耐受性上表现出较大的多样性,有17.6%的菌株在4～60℃均能生长,黄檀、紫穗槐根瘤菌耐60℃高温和4～10℃低温的能力均强于刺槐根瘤菌.供试根瘤菌对温度的抗性主要受宿主植物的影响,在一定程度上还受海拔高度和土壤类型的影响.筛选到抗逆性强的优良菌株是:黄檀根瘤菌Spar18、Spar19,紫穗槐根瘤菌Spar28、Spar29,刺槐根瘤菌Spar8.     

我国中东部地区紫穗槐、紫荆、紫藤根瘤菌的数值分类及16SrDNA PCR-RFLP研究

 从分离自我国中东部地区紫穗槐、紫荆和紫藤 3种宿主根瘤菌中 ,选取 5 9个菌株和 2 9个参比菌株 ,对它们进行了 135个表型性状测定的数值分类分析和 16SrDNAPCR RFLP研究。试验结果表明 ,数值分类聚类在82 %相似性水平上、16SrDNAPCR RFLP聚类在 92 %相似性水平上均聚为 7个群 ,各宿主根瘤菌基本上按参比菌株各属归群。其中绝大多数紫穗槐根瘤菌归属于中慢生根瘤菌属 ,而且在种水平上表现出一定程度的地理环境多样性 ;紫荆根瘤菌基本上属于慢生根瘤菌属 ,在分群方面未表现出明显的地区差异 ;而紫藤根瘤菌则基本上归属于快生菌。其中来自江、浙地区的紫藤根瘤菌与来自其它地区的紫藤根瘤菌存在着明显的地理环境差异 ,并且紫藤根瘤菌较其它 2种宿主根瘤菌表现出较强的抗逆能力 ,如能够耐某些高浓度 (30 0 μg·ml-1)的抗生素 ,可在高盐环境 (3%NaCl)和强碱环境 (pH 11.0 )下生长。这将为我国进行荒山造林、扩种豆科树种提供有意义菌种。另外 ,数值分类结果亦表明 ,以紫穗槐根瘤菌为代表的群 2、以紫荆根瘤菌为代表的群 5和以紫藤根瘤菌为代表的群 7在种水平上均独立成群 ,预示着可能有新种的出现     

沙冬青根瘤菌表型特征和16SrDNAPCR-RFLP分析

应用表型数值分类和16S rDNA PCR-RFLP 分析方法,对分离自宁夏和内蒙古部分地区的沙冬青根瘤菌进行表型和遗传多样性研究.通过分离纯化获得44株供试根瘤菌,选取37株未知菌和11株参比菌株进行唯一碳氮源利用、抗生素和染料抗性、耐盐性、初始pH生长、生长温度范围和脲酶共94项生理生化性状测定,以及16S rDNA 基因扩增和扩增产物的限制性酶切分析.结果表明,沙冬青根瘤菌在碳源利用、抗生素敏感性和染料抗性方面存在差异;对15项所选氨基酸氮源均能利用,无明显差异;具有较强的耐盐碱和耐高温能力.经过数值分类和16S rDNA PCR-RFLP比较分析,测试菌株具有丰富的表型和遗传多样性.测试菌株和参比菌株在80%的相似水平上产生2个表观群,表观群I和表观群II在鉴别特征上存在差异.数值分类中聚群的根瘤菌菌株在16S rDNA PCR-RFLP分析中也聚群,2种分析方法有基本的一致性.     

河南省豆科植物根瘤菌表型多样性研究

在河南省根瘤菌资源调查的基础上 ,选取 2 9株快生根瘤菌和 34株参比菌株 ,进行了 10 2项表型性状测定和聚类分析。结果表明 :不同地理来源、甚至同一地理来源或同种寄主的不同菌株在碳氮源利用、抗生素抗性、耐逆性等方面存在着较大的多样性。有 7株菌对链霉素、青霉素和白霉素有较强的耐受性 ;有 2 3株和 2 5株菌可分别耐受 2 .0 g/ L的香酚兰和中性红 ;有 2株菌可在含 5 0 g/ L Na Cl的 YMA培养基上生长 ;有 6株菌在 p H值 11条件下能够生长。在 84 %的相似性水平上未知菌株构成了 2个独立的表观群 ,其中 Cluster 1有 7株菌 ,中心菌株为 H 0 38;Cluster 2有 3株菌 ,中心菌株为 H0 2 6。     

根瘤菌的聚类分析初探

本试验根据形态、抗生素敏感性、碳源的利用和对染料的反应等方面的136个编码特征,对36株菌(其中34株为根瘤菌,2株为土壤杆菌)作了聚类分析。在0.74的相似水平上。试验中的35株菌(除16号外,形成了五个组:(一)苜蓿和草木樨的根瘤菌;(二)三叶草、莱豆、豌豆、山黧豆、蚕豆、胡枝子、补骨脂和大豆的根瘤菌;(三)茎麻根瘤菌和土壤杆菌;(四)紫云英、洋槐和紫穗槐的根瘤菌;(五)花生、大翼豆、柱花草、大豆、羽扇豆和铃当刺的根瘤菌。其中;(一)—(四)组为快生型,第五组为慢生型。通过特征分析,选出了可用于分组鉴定的12个编码特征。用 P.H.A.Sneath 介绍的 DV(Vigour)和 DP(Pattern)方法,分析了花生的根瘤菌(3 G_4B_(20))与大豆的根瘤菌(Bj110)及刺桐的根瘤菌(351)之间存在的差异,认为其部分差异可能与生长速度不同有关。     

加热处理对紫穗槐种子萌发、内生根瘤菌及植株生长的影响

对采用不同温度和时间水浴加热处理的紫穗槐种子,进行种子萌发、内生根瘤菌数量以及植株生长检测.结果显示,不同温度、时间加热处理对种子萌发率、内生根瘤菌数目及植株生长影响不同.适宜的加热温度与时间增加种子萌发率,降低休眠率,但随加热温度升高和时间延长,种子死亡率增高.在相同温度下,种子内生根瘤菌数目随着加热时间延长而减少;在相同时间内,种子内生根瘤菌数目随温度升高也下降.植株结瘤率、株高、地上生物量都与种子加热温度的高低及加热时间的长短相关,而结瘤植株的固氮酶活性与处理温度及时间无明显相关性.     

紫穗槐丛枝菌根(AM)根系分泌物诱导根瘤菌结瘤因子及作用研究

为了进一步揭示丛枝菌根(AM)真菌促进紫穗槐结瘤数量及提高固氮能力的机制,试验采用高效液相色谱法(HPLC)并结合结瘤因子生物检测法,研究了菌根化紫穗槐苗木根系分泌物对根瘤菌结瘤因子的诱导效果,以及结瘤因子紫穗槐苗木生长的作用。结果表明,菌根分泌物能够显著诱导根瘤菌产生结瘤因子,HPLC检测图谱33min出现的色谱峰物质能够诱导紫穗槐的根毛产生变形;结瘤因子回接盆栽紫穗槐实生苗结果表明,在灭菌基质上播种的紫穗槐苗木能够产生根瘤原基并结瘤,且双接种结瘤因子和AM真菌处理的紫穗槐苗木产生根瘤原基的数量显著高于单独接结瘤因子处理的苗木;结瘤因子提高了紫穗槐的菌根侵染率,结瘤因子的量越大,AM真菌对紫穗槐的侵染效果越显著;结瘤因子与AM真菌混合接种能显著提高紫穗槐苗木的生物量。     

马占相思根瘤菌生物学特性的研究

为了探讨马占相思根瘤菌的生物学特性,从广西高峰林场马占相思林分采集分离到9株根瘤菌,并对其生理生化特性、抗逆性和固N酶活性进行研究。结果表明,大部分菌株能较好利用供试糖源,所有供试菌株在3－酮基乳糖反应、牛肉膏蛋白胨、明胶水解、淀粉水解试验中呈阴性;在B．T．B反应、无机N源利用、柠檬酸盐利用呈阳性,硝酸盐还原试验大多呈阳性;石蕊牛奶试验除MZ02、MZ04产酸外,其余菌株产碱。所有供试菌株在温度30℃时生长最好,耐盐、耐酸碱范围较宽,MZ04在含盐浓度为2.0%环境还能生长良好,MZ04、MZ10在pH9.0环境仍能生长较好;所有菌株对250 μg /mL 庆大霉素（Sm3）均无抗性,不同菌株对其余供试抗菌素表现出不同的抗性,MZ02抗性最差,对所供试的抗生素均无抗性;MZ04、MZ08、MZ09抗性相对较强。所有供试菌株都具有固N酶活性,其中MZ02、MZ06、MZ08的固N酶活性最高。根据广西马占相思栽培区的生态条件,筛选出MZ02和MZ06为优良菌株。西北林学院学报21卷第5期韦原莲等马占相思根瘤菌生物学特性的研究     

哈茨木霉T2-16发酵产物对豇豆土著根瘤菌的多样性及其抗逆性影响的研究

研究了哈茨木霉T2-16在改良后的GPF培养基中培养所获得的发酵产物,对豇豆根瘤菌菌株耐逆性及对抗生素抗性等多个表型性状的影响。结果表明,经该发酵产物处理后,供试的一些根瘤菌菌株的耐高温、耐盐碱能力有所提高,对一些抗生素的抗性也有一定的增加,显示了木霉发酵产物在提高土著根瘤菌固氮活性方面的潜能。     

抗生素对国槐愈伤组织诱导和生长的影响

由于不同植物不同外植体对抗生素的反应不同,在进行国槐农杆菌介导的遗传转化研究之前,必须对新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)有抗性的抗生素种类及其使用浓度进行探讨.结果表明,卡那霉素在浓度达到150mgL时仍然没有完全抑制国槐叶片和茎段的生长;而遗传霉素在低浓度下对国槐愈伤组织的诱导和生长的抑制作用较卡那霉素明显.随着遗传霉素浓度的增加,愈伤组织形成的频率降低,外植体的死亡率上升.当遗传霉素的浓度超过10mgL时,叶片和茎段愈伤组织的诱导和生长已完全受到抑制.另外,研究发现不同外植体对遗传霉素的敏感程度不同,茎段较强,叶片稍弱茎段的抗生素致死浓度在8～10mgL之间,叶片的抗生素致死浓度8mgL左右.