北太平洋鱿鱼缠卵腺抗氧化酶解寡肽的制备

为探讨北太平洋鱿鱼(Todarodes pacificus)缠卵腺酶解寡肽的制备和抗氧化活性,以北太平洋鱿鱼缠卵腺为原料,选择碱性蛋白酶进行酶解,以水解度和DPPH自由基清除率为指标,经单因素和正交试验方法获得最佳酶解条件,超滤得到不同分子段多肽,通过测定还原能力、DPPH清除率、Fe~(2+)螯合能力、OH自由基清除率、超氧阴离子清除率评价不同分子量酶解多肽的抗氧化性,得出最佳分子段;采用琼脂糖凝胶G-25对最佳分子段进行分离,检测各峰对DPPH清除能力,得出最佳峰段后经HPLC进一步分离获得单一组分,由氨基酸测序仪进行N端降解测序得出目标肽序列。结果表明,碱性蛋白酶的酶解条件为温度50℃、酶解时间7 h、加酶量3 500 U/g、pH 9.0、料液比1∶6。经超滤得到的3～5 ku分子段抗氧化活性最强,经琼脂糖凝胶G-25分离得到3个峰,其中峰Ⅰ组分对DPPH清除率最好,当浓度为0.5 mg/m L时其DPPH的清除率为61.87%。经HPLC纯化得到单一峰,氨基酸序列测定为Ala-Tyr-Ala-Ser-Ser,相对分子质量为497.50。北太平洋鱿鱼缠卵腺酶解寡肽有较好的抗氧化活性。     

大西洋鳕鱼皮多肽体外抗氧化活性研究

[目的]探讨大西洋鳕鱼皮多肽的体外抗氧化活性。[方法]选择胰蛋白酶酶解鳕鱼皮,分别以氨基氮滴定法和DPPH自由基清除率作为筛选指标,通过正交试验,筛选出酶解的最优条件;将超滤液分成5段,分别进行DPPH自由基清除率、ABTS自由基力及亚铁离子螯合能力的体外抗氧化活性。[结果]胰蛋白酶酶解大西洋鳕鱼皮的最优条件为料液比1∶1,加酶量2 500 U/g、酶解时间4 h、温度45℃、pH 9.0。当分子量小于5 k D时,DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和Fe2+离子螯合能力最强。[结论]经胰蛋白酶酶解,获得的大西洋鳕鱼皮多肽存在较好的抗氧化活性。     

乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性研究

[目的]探讨乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性。[方法]以乌贼内脏为原料,用胰蛋白酶对其进行水解,采用单因素和正交试验方法研究酶解温度、酶解时间、加酶量和pH对水解度和抗氧化性的影响;通过检测羟自由基清除率、DPPH清除率和还原力评价不同分子量水解物多肽的抗氧化性。[结果]当酶解温度为35℃,时间为5 h,加酶量为5 000 U/g,pH为7.5时,水解度最大;当酶解温度为40℃、时间为7 h、加酶量为4 500 U/g,pH为8.0时,水解物对羟自由基清除率最大。超滤后不同分子量多肽对羟自由基的清除率为3～5 kD3 kD以下5～10 kD;DPPH清除率:3～5 kD3 kD以下5～10 kD;还原力:3 kD以下3～5 kD5～10 kD。[结论]乌贼内脏酶解多肽具有较好的抗氧化活性,不同分子量多肽的活性不同。     

藏鸡蛋卵白蛋白酶解制备抗氧化肽及其体外抗氧化活性

采用碱性蛋白酶水解藏鸡蛋卵白蛋白,制备抗氧化活性肽,以水解度和超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除率为指标,通过单因素试验和正交试验确定最佳酶解参数,并对酶解多肽的体外抗氧化活性进行测定。结果表明:碱性蛋白酶酶解的最适条件为底物质量分数2%、酶解时间5 h、酶添加量7 000 U/g;在最适条件下,碱性蛋白酶酶解所得抗氧化肽的O_2~-·、DPPH自由基、羟基自由基(·OH)清除率分别为71.75%、56.47%、84.46%;还原力、抗脂质过氧化能力分别为0.87、82.83%。     

7种不同来源灵芝热水提物体外抗氧化活性研究

[目的]比较不同地区灵芝热水提物的体外抗氧化活性。[方法]分别从总还原力、清除羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)和DPPH自由基4个方面对7种灵芝子实体热水提物的体外抗氧化活性进行了初步研究。[结果]在相同浓度下,猫儿山野生灵芝热水提物的总还原力最强,吸光度高达2.48;·OH清除能力最高,清除率99.46%;清除DPPH自由基能力最强,清除率为96.62%;清除O_2~-·能力排第三。[结论]猫儿山野生灵芝热水提取物在总还原力、清除·OH、DPPH自由基3个方面的抗氧化能力表现出最强,说明猫儿山野生灵芝具有非常好的开发潜力。     

鲍内脏抗氧化活性肽制备工艺研究

为建立鲍内脏抗氧化活性肽制备工艺,在单因素试验基础上,利用响应面法优化酶解工艺条件,建立了酶解时间、酶添加量、酶解温度与DPPH自由基清除率之间的数学模型;经超滤分离获得了不同分子质量的酶解产物,采用DPPH自由基和超氧阴离子自由基(O_2~-·)的清除能力评价其抗氧化性,经MALDI-TOF/TOF分析其分子质量分布。结果表明:酶法提取鲍内脏抗氧化肽的最佳工艺为料液比1∶1、酶解时间4.8h、酶添加量3 000U·g~(-1)、酶解温度54℃;获得的分子质量为2~6ku的组分具有较强的自由基清除能力,DPPH自由基和O-2·清除能力分别为94.76%和60.24%。     

罗非鱼肉蛋白酶解液及其超滤液 的抗氧化活性研究

通过研究罗非鱼肉蛋白酶解液及其5 ku超滤液的体外抗氧化活性,为罗非鱼深加工及高值化利用提供理论基础。主要采用分光光度法分别检测了酶解液和超滤液的还原力,对·OH、O2-·、DPPH·自由基的清除能力以及在亚油酸体系中抗氧化能力并对其抗氧化活性的差异性进行分析讨论。结果发现,当浓度为1.25~2.5 mg/m L时,超滤液的还原力、在亚油酸体系中抗氧化能力低于酶解液,当浓度为2.5~10.0 mg/m L时,超滤液活性强于酶解液;以IC50计算,超滤液对自由基清除能力均优于酶解液;超滤液中亮氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、组氨酸和酪氨酸的含量均高于酶解液,其分子量小于3 ku与1 ku组分的比例也高于酶解液。罗非鱼肉蛋白酶解液经5 ku超滤处理后,其体外抗氧化活性增强。     

乌贼墨多肽体外抗氧化活性研究

[目的]研究乌贼墨多肽体外抗氧化活性。[方法]采用分光光度法测定多肽对2,2’-连氮基-双-（3-乙基苯并二氢噻唑林-6-磺酸）二铵盐（ABTS）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、羟自由基（·OH）的清除能力和还原能力,利用琼脂糖凝胶电泳检测多肽对羟自由基诱导的DNA损伤的保护作甩。[结果]乌贼墨多肽具有明显清除ABTS自由基（半数有效浓度EC。为3．45mg／ml）、·DPPH自由基（EG。为4．34mg／m1）和羟自由基（E‰为3．30mg／ml）的能力;当乌贼墨多肽的浓度达到5．00mg／ml时,还原力达到0．387。[结论]乌贼墨多肽具有较好的抗氧化活性。     

碱性蛋白酶酶解核桃粕蛋白产物抗氧化特性研究

采用碱性蛋白酶对核桃粕蛋白进行酶解,测定了不同酶解时间下的酶解液抗氧化性;用葡聚糖凝胶分离活性肽段并测定其抗氧化性。结果表明,酶解条件为酶用量3 000 U/g底物、底物质量浓度为40mg/mL、pH为8.5、温度为50℃下酶解210 min,酶解液的抗氧化活性较高,OH.清除率为72.3%,氧自由基清除率为83.1%,DPPH.清除率为102.6%,总抗氧化能力为162.986 U/mL;通过葡聚糖凝胶分离并与已知标准品对照表明碱性蛋白酶酶解核桃粕蛋白产物抗氧化活性多肽的分子量主要集中在1 321~607 u,该多肽片段对OH.清除率为70.23%,氧自由基清除率为62.57%,DPPH.清除率为99.56%,总抗氧化能力为118.987 U/mL。     

沙棘油复合蛋白多肽液抗氧化性研究

复合蛋白液是以核桃、燕麦、藜麦蛋白为原料,依据蛋白质互补作用的原理及必需氨基酸的参考模式,采用氨基酸比值系数的方法来评价各蛋白产品的营养价值,从而将3种蛋白液按照不同比例进行科学复配。利用碱性、中性、风味3种蛋白酶对复合蛋白液酶解后进行沙棘油脂的强化,通过测定溶液总还原能力、DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、总抗氧化能力,研究复合蛋白多肽液经沙棘油强化前后抗氧化活性的变化情况。结果表明,3种酶经最优条件酶解后,多肽质量浓度为17.43 mg/m L,复合蛋白多肽液和沙棘油复合蛋白多肽液,其还原力的半清除率分别为3.84,1.86 mg/m L,DPPH自由基的半清除率分别为94.72,74.29μg/m L,羟基自由基的半清除率分别为1.52,1.01 mg/m L,超氧阴离子自由基的半清除率分别为2.09,1.33 mg/m L,2种多肽液的总抗氧化能力分别为26.76,65.74 U/m L。复合蛋白多肽液和沙棘油复合蛋白多肽液均具有一定的体外抗氧化活性,而且后者的抗氧化能力明显强于前者,其总还原能力,DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除率与质量浓度呈量效关系。