黄瓜胚状体途径再生体系的建立

【目的】建立黄瓜高频胚状体再生体系，为黄瓜遗传转化体系的完善奠定基础。【方法】以黄瓜品种津研四号、长春密刺、Q8和14-1为材料，研究不同基因型材料愈伤组织的诱导情况；取14-1品种的子叶、子叶节、下胚轴和成熟胚为外植体，研究不同外植体类型的愈伤组织和胚状体产生情况；以14-1子叶节为外植体，研究不同激素及其质量浓度配比对黄瓜胚状体诱导的影响。【结果】4个不同基因型中，欧洲温室型黄瓜种质14-1可诱导出胚状体。在4种外植体类型中，14-1的子叶节可以高效诱导出愈伤组织和胚状体，其诱导率分别为100.0%和34.1%。激素及其质量浓度组合也会影响胚状体的诱导，在愈伤组织诱导阶段，以MS+1.5 mg/L 2,4-D为培养基对胚性愈伤组织的诱导效果最好，其对14-1子叶节的诱导率为100%；在分化培养阶段，MS+0.1 mg/L 2,4 D+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L IAA有利于体细胞胚的发生，14-1的出胚率为62.5%。显微形态观察发现，黄瓜体细胞胚发育过程包括球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶期胚等时期，这些胚可以发育成正常小植株。【结论】14-1的子叶节经诱导培养基MS+1.5 mg/L 2,4-D和分化培养基MS+0.1 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L IAA培养后，可高效产生胚状体，并可萌发成正常植株。     

籼稻离体胚培养中体细胞胚胎发生的研究

成熟稻胚在含2,4-D的MS培养基上产生胚性愈伤组织以及在胚性愈伤组织表面形成许多瘤状突起的原胚状体,组织学研究表明在诱导培养的不同时期,胚性愈伤组织的细胞分裂产生单核胚性细胞、2细胞、4细胞、多细胞及球形胚。随后移到不含2,4-D的分化培养基上培养,胚性愈伤组织产生与水稻合子胚结构相似的成熟体细胞胚状体。结果表明:2,4-D是胚性愈伤组织诱导的必要激素,但抑制球形胚的发育成熟。不同激素处理结果:Br明显抑制植株再生。研究生理生化指标结果表明:在愈伤组织生长分化过程中不同激素处理Br抑制氧化物酶活性;体细胞胚状体在形成、成熟阶段,酶活性及酶带相应增强和增多;当胚状体萌发形成植株时,酶活性及酶带相应下降和减少,随诱导培养时间延长植株再生率降低。     

小麦胚愈伤组织的诱导和植株再生

对3个小麦品种的成熟胚及幼胚进行培养，研究不同基因型、培养基对愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明，不同培养基对小麦愈伤组织诱导有一定影响；不同基因型的小麦愈伤组织诱导、分化及生根的能力有一定差别。陕280愈伤组织诱导率及分化率最高。同一品种不同外植体经诱导后愈伤组织产生的能力有所不同，同一品种愈伤组织的诱导率幼胚比成熟胚愈伤组织的高。     

人工合成甘蓝型油菜的花药培养

对20个基因型的人工合成甘蓝型油菜进行了花药培养.结果表明,在Keller培养基上可以直接诱导出胚状体,胚状体的诱导率与基因型、培养基的添加物等有关.基因型不同,胚状体的诱导率也不同;在培养基中加入活性炭降低胚状体的诱导率,加入0 1mg·L-1的6 BA和0 1mg·L-1NAA能提高胚状体诱导率.     

小麦×玉米小麦单倍体胚产生频率的研究

采用小麦茎秆注射 2 ,4 -D、GA3,研究其对小麦×玉米杂交小麦得胚率的影响。结果表明 ,2 ,4 -D对小麦单倍体胚的产生有显著的促进作用 ,GA3无效。对不同气候条件下幼胚产生频率的调查分析结果表明 ,光照是影响得胚率的重要因素 ,连续阴雨造成的极端寡照显著降低小麦单倍体胚的得胚率     

玉米基因型对小麦×玉米杂交单倍体胚得胚率的影响

为筛选小麦单倍体胚得胚率高的玉米品种,用糯、甜糯、甜、超甜4种类型共8个玉米品种分别与6个小麦DH系杂交诱导产生小麦单倍体胚,研究不同玉米类型、不同玉米基因型对小麦单倍体胚得胚率的影响。结果表明,同一小麦材料用不同玉米品种授粉,其得胚率可相差1.48～3.10倍,得胚率变幅为15.43%～47.80%,筛选高得胚率玉米品种对提高小麦单倍体产生效率至关重要。4种玉米类型间平均单倍体胚得胚率以甜糯型最高(33.86%)、超甜型最低(29.59%),8个玉米品种以白甜糯的平均单倍体胚得胚率最高(38.17%),云超甜2号最低(28.63%),但相同玉米类型而基因型不同的玉米品种间单倍体胚得胚率差异大于玉米类型间单倍体胚得胚率的差异,因此筛选高得胚率玉米品种,关键是筛选玉米基因型而非玉米类型。小麦基因型与玉米基因型的互作对得胚率有极显著影响,对于小麦×玉米杂交的得胚率,玉米基因型与小麦基因型之间的组合存在"一般配合力"和"特殊配合力"的差异,因此可综合利用多个玉米品种来提高各种小麦材料的整体单倍体胚得胚率和单倍体生产效率。     

川芎组培中胚状体发生和激素光质的交互作用

通过镜检发现,川芎叶片在离体培养下的发育途径为形成体细胞胚。在体细胞胚的子叶、胚轴和胚根上,都可以继续产生次级胚状体,其中体细胞胚的胚轴上较早出现次级胚状体,而且数目也最多。次级胚状体的形成又影响了体细胞胚的成苗数。在相同的基本培养基上诱导体细胞胚成苗时,附加的激素组合中,由于细胞分裂素的种类不同,诱导产生的苗数及生物产量也不同,差异十分显著。光质效应与培养基中的激素组成虽有一定的交互作用,但在4种不同培养基上,除绿光对器官发生有明显的抑制作用外,其他光质对器官发生的影响无明显差别。     

黄瓜胚状体途径再生体系的建立

【目的】建立黄瓜高频胚状体再生体系,为黄瓜遗传转化体系的完善奠定基础。【方法】以黄瓜品种津研四号、长春密刺、Q8和14-1为材料,研究不同基因型材料愈伤组织的诱导情况;分别取14-1的子叶、子叶节、下胚轴和成熟胚为外植体,研究不同外植体类型的愈伤组织和胚状体产生情况;以14-1子叶节为外植体,研究不同激素及其质量浓度配比对黄瓜胚状体诱导的影响。【结果】4个不同基因型中,欧洲温室型黄瓜种质14-1可诱导出胚状体。在4种外植体类型中,14-1的子叶节可以高效诱导出愈伤组织和胚状体,其诱导率分别为100.0%和34.1%。激素及其质量浓度组合也会影响胚状体的诱导,在愈伤组织诱导阶段,以MS+1.5mg/L 2,4-D为培养基对胚性愈伤组织的诱导效果最好,其对14-1子叶节的诱导率为100%;在分化培养阶段,MS+0.1mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT+0.2mg/L IAA有利于体细胞胚的发生,14-1的出胚率为62.5%。显微形态观察发现,黄瓜体细胞胚发育过程包括球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶期胚等时期,这些胚可以发育成正常小植株。【结论】14-1的子叶节经诱导培养基MS+1.5mg/L 2,4-D和分化培养基MS+0.1mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT+0.2mg/L IAA培养后,可高效产生胚状体,并可萌发成正常植株。     

油桃下胚轴再生植株影响因素的研究

为了建立一个稳定的桃再生体系,以晚熟油桃秦光2号为试验材料,对影响其种胚萌发及下胚轴再生的不同激素质量浓度与组合、培养基、预培养时间、低温处理等因素进行了研究。结果表明,种皮对种胚萌发有抑制作用,在种胚培养中应剥去种皮培养;低温处理可以明显提高胚培养的萌发率,胚培养种胚以5℃低温处理70 d萌发率最高,达到93.33%,且经过7 d常温光培养所得下胚轴健壮、幼嫩,更适宜做下胚轴再生的外植体,诱导率达到34.38%,在蔗糖质量浓度为30 g/L时萌发率最高,达到75.66%,用1600 mg/L GA浸泡24 h,诱导率达到62.3%;下胚轴能够再生植株,形态学上部再生率为34.67%,下部为18.67%,二者差异显著,下胚轴再生以QL+TDZ 2.0mg/L+NAA 0.5 mg/L效果最好,再生率达到38.67%,平均再生不定芽数为2.50个,晚熟油桃秦光2号下胚轴可以直接从未产生愈伤组织的切口部位产生不定芽。     

香蕉胚性愈伤组织的诱导及胚性细胞悬浮系的建立

分别以3个香蕉品种的多芽体茎尖和5个香蕉品种的未成熟雄花为外植体，诱导产生胚性愈伤组织．结果分别从2个基因组类型为AAA的品种的多芽体茎尖和未成熟雄花获得了胚性愈伤组织，而未能从基因组类型为AAB或ABB的香蕉品种中获得胚性愈伤组织．胚性愈伤组织的诱导率受基因组类型、品种和培养条件等因素的影响．以上述4个品种的胚性愈伤组织为起始材料成功建立了胚性细胞悬浮系，不同香蕉品种，从其胚性愈伤组织建立胚性细胞悬浮系的难易程度有所不同．     

椰子成熟胚离体培养活性炭浓度效应研究

通过探讨活性炭在椰子胚培养过程中对椰子胚褐变以及生长发育的影响,结果表明活性炭有明显抑制褐化的作用,活性炭浓度过高或过低均不利于椰子成熟胚的萌发和生长,最适合诱导椰子胚的最佳活性炭浓度应该为2~3 g/L。     

国槐槐角种胚细胞悬浮培养的动力学研究

对国槐Sophora japonica槐角种胚细胞悬浮培养的动力学进行研究,在优化细胞接种量的基础上,分析测定培养周期内不同培养阶段的槐角细胞生长和培养基中碳源、氮源、磷源的消耗,以及细胞的鲜质量、干质量和黄酮产量的变化,从而了解细胞生长、营养消耗与次生代谢产物积累的基本规律,为建立结构化动力学模型奠定基础。结果表明:①初始接种量为40.000 gL－1时,最利于细胞的培养;②细胞的培养周期约为27 d,经过27 d的培养,生物量和黄酮的产量达到最高,分别为9.733 gL－1和53.566 mgL－1,对细胞比生长速率和黄酮比合成速率进行分析,得出黄酮的积累和细胞的生长为部分生长偶联型,在6～12 d呈负相关,12～33 d呈正相关;③基质中的碳源、氮源、磷源都是在0~6 d被迅速消耗,到12 d时消耗量达到总量的80.00%以上。在氮源的吸收上,铵态氮（NH4+）先于硝态氮（NO3－）的吸收。碳源、氮源、磷源的消耗与细胞生长和产物的积累密切相关。图10参25     

大棚早熟油桃胚培养技术研究

选大棚栽培的2个早熟油桃品种超五月火和曙光进行胚培实验。结果表明:先带种皮胚培后再剥去种皮胚培的两步胚培方法,不用低温处理,即可获得高的胚培成株率。     

杏鲍菇栽培周期木质素酶变化规律的研究

通过跟踪观察杏鲍菇栽培周期的还原性糖、可溶性蛋白、木质素酶等各项生理指标,初步了解其木质素酶的变化规律。结果表明:杏鲍菇具有分泌漆酶以及锰过氧化物酶的能力,但是不能分泌木质素过氧化物酶;初始培养料中还原性糖含量较高,在整个生长过程中呈现先下降后上升的趋势,峰值与子实体发育相对应;可溶性蛋白整体呈上升趋势;木质素酶在菌丝营养生长阶段活力较高,生殖生长阶段活力较低,菌丝对基质的降解具有一定的次序。     

植物组织培养中降低培养基成本的研究

在马铃薯、菊花和满天星的发根阶段研究了用自来水代替蒸馏水、白糖代替蔗糖的可行性．结果表明：马铃薯、菊花和满天星培养苗的生长在蔗糖与白糖、蒸馏水与自来水的处理间无显著性差异，因此规模化生产上配制培养基时用白糖取代蔗糖，自来水取代蒸馏水完全可行．     

大花卷丹与亚洲百合、东方百合种间杂交及胚培养研究

利用我国东北原产的野生百合大花卷丹(Lilium leichtlinii var.maximowiczii Baker)与亚洲百合杂种系、东方百合杂种系进行正反交,并对杂种胚进行离体培养,研究不同杂交组合、胚龄、激素配比对杂种胚培养的影响.结果表明,大花卷丹与亚洲百合杂种系精粹、多安娜的正反交组合均获得了有胚种子,而大...     

广西木薯胚发育调查及幼胚离体培养

[目的]调查广西3个木薯品种（系）果实、种子和胚的发育情况,进行幼胚离体培养,为广西木薯杂交育种提供参考.[方法]开花期采用开放式自然杂交进行授粉,11月采集3个木薯品种（系）果实约200粒,对果实、种子和胚等相关性状进行分类和测定,并进行相关性分析;通过对幼胚进行胚成熟培养、成苗培养、增殖培养和生根培养,获得幼胚再生植株,计算胚成熟率、成苗率及移栽存活率.[结果]在木薯果实趋于成熟时采收获处于不同发育时期的果实类型中,根据发育阶段可将种皮颜色分为黑色（A）、棕色（B）、棕黄两色（C）、黄色顶端带黑点（D）、黄色（E）和白色（F）6种;各发育阶段单果平均种子数均小于3粒.当3个木薯品种（系）种皮颜色为A、B、C型时,果实较重、直径较长,胚发育较好,平均胚长分别为6.53～8.40、7.31～8.28、4.50～7.10 mm.除NZ199的A、B型外,3个品种（系）胚长均随种皮颜色加深而变长,表现为：A＞B＞C＞D＞E＞F,胚长变化范围为0～10.66mm.可见胚率总体表现为：NZ199＞SC5＞J393;SC5和NZ199种皮为棕黄色时可见胚率最高,分别为66.7％和94.2％;至棕色时可见胚率分别降低至61.9％和80.6％;至黑色时SC5可见胚率降低至59.9％,NZ199则升高至85.2％;J393在种皮为黄色顶端带黑点时可见胚率为50.1％,至棕黄色、棕色时可见胚率分别降至48.8％和41.0％,以黑色种皮的可见胚率最高,为68.2％.3个木薯品种（系）果实重量与果实直径、可见胚率呈极显著正相关,胚长与果实重量、果实直径呈显著正相关.幼胚离体培养胚成熟率为89.3％,成苗率为62.7％,移栽存活率为71.9％.[结论]3个木薯品种（系）同一果实内或相同发育阶段的不同种子内胚发育不一致;通过木薯果实的重量和直径可初步判断胚的大小;宜选择种皮颜色为棕黄色或黄色顶端带黑点的种子进行幼胚离体培养.     

大花蕙兰组织培养及快速繁殖研究

以8个大花蕙兰品种茎尖为材料,采用不同培养基对茎尖原球茎进行诱导、增殖和分化培养,探讨不同浓度6-BA和椰乳对原球茎诱导、增殖和分化的影响效果。结果表明,低激素水平培养基1/2MS 0.5mg/L 6-BA 10%椰乳 2%白糖 适量活性炭对诱导产生原球茎的效果很好,大部分品种的原球茎诱导率达80%以上;在增殖培养基中添加0.5~1.0 mg/L6-BA和15%椰乳,可明显提高5个品种的原球茎诱导率和增殖率。将多次增殖的原球茎转入1/2MS 1.0mg/L 6-BA 0.5mg/L NAA 20%椰乳 1%白糖的分化培养基,原球茎可继续增殖并分化形成许多类胚性的单极丛生芽,再经分化培养后可获得大量根苗完整的再生植株。因此,试验结果可为大花蕙兰的高效低成本组培快繁途径提供依据。     

枣幼胚培养中褐化的研究

研究了建立枣幼胚离体培养体系时品种、外植体、活性炭、接种方式和基本培养基对褐化的影响,其中,外植体是枣幼胚离体培养时褐化的关键因素。取出早脆王胚珠,剥去珠被接种可以有效防止褐化。不同发育时期的胚珠褐化不同,其结果与品种及接种方法有关。完整接种的早脆王胚珠随其成熟度的增加褐化加重,但切开远胚端接种金丝丰和冬枣的幼嫩胚珠更容易褐化。加倍的MS培养基可以促进早脆王幼胚褐化,附加活性炭可以减轻早脆王完整胚珠褐化。     

影响大白菜游离小孢子培养若干因素的研究

影响大白菜游离小孢子培养因素主要有遗传基因、环境条件、培养温度和培养基等因素,研究结果表明:遗传基因对小孢子培养起着决定性的作用;供体植株的营养水平对小孢子胚胎发生有一定的影响;气温稳定在12℃～28℃时,所取的花蕾小孢子胚胎发生正常;33℃±2℃高温预培养能促进胚状体诱导;80次/min低频振荡极大提高出胚数;培养基中13%蔗糖处理、ph值在5.5～6.3对胚状体诱导和发育有促进作用,加入谷氨酰胺,L-丝氨酸,谷胱甘肽对不同基因型胚状体诱导有明显的促进作用。