Identifying the ploidy of ginkgo pollen using laser scanning confocai and scanning electron microscope.

以经秋水仙碱诱导获得的银杏大花粉为材料,以未经处理的正常银杏花粉为对照,利用扫描电子显微镜和激光扫描共聚焦显微镜分别观察2种花粉表面形态,并分析对比其细胞内的DNA相对荧光量与银杏大花粉核内染色体倍性关系,为正确检出银杏二倍体花粉奠定重要工作基础。研究结果表明,此方法用于花粉粒的倍性鉴定科学准确,所需试验样本少,实用性强,在植物花粉倍性鉴定中有着较好的应用前景。     

苎麻花粉形态学与倍性的相关性

以不同倍性苎麻为材料,对其花粉粒形状、大小进行比较观察,结果表明:花粉大小与染色体倍性呈正相关,相关系数r=0.9708,单倍体、二倍体、三倍体和四倍体平均直径分别为16.30μm、17.81μm、22.00μm和24.76μm,品种对这一性状没影响。单倍体花粉大小变化较大,并且存在一定数量的畸形、空壳花粉;三倍体存在少量的小粒花粉。这一特征对于苎麻倍性鉴定具有一定的参考价值。     

枸杞花药离体培养获得单倍体植株

利用枸杞花药离体培养获得单倍体植株,枸杞单倍体植株是新品种选育和基因组测序、制作遗传图谱、研究遗传规律的良好材料。以"宁杞1号"花药为试验材料,采用MS+5%蔗糖+0.7%琼脂+0.8%活性炭为基本培养基,添加不同浓度的6-BA和NAA,进行花药离体培养,获得花粉植株。利用流式细胞仪检测花培植株的倍性,再经根尖细胞染色体数目鉴定花粉植株的倍性。结果表明,在基本培养基中添加1.0 mg/L 6-BA和0.1 mg/L NAA时,花药离体培养花粉胚状体诱导率最高。花粉植株经过流式细胞仪倍性鉴定,其DNA在荧光通道值100处有一条很明显的尖峰,说明获得的花粉植株为单倍体。又经根尖细胞染色体数目鉴定,染色体数为12条,验证了来自花药中花粉发育成的花粉植株为单倍体植株。     

银杏雄株花粉特征观察与分类研究

连续2年采集分布在江苏省的89株银杏雄株的花序,通过光学显微镜、扫描电镜和透射电镜观察银杏雄株花粉,探讨银杏雄株种质资源的分类情况。结果表明:①银杏雄株花粉表面纹饰主要表现为4种类型,即球珠镶嵌型、贝甲镶嵌型、线纹镶嵌型和弧纹镶嵌型。②银杏雄株花粉壁厚度为0.861～1.076μm,外壁厚度是内壁的2～6倍。③经对花粉形状指数进行三元变量系统聚类分析,供试雄株可分为4种类型,与花粉形状指数的分类数相同,Ⅰ类4株,Ⅱ类34株,Ⅲ类47株,Ⅳ类4株,证明雄株间花粉表面纹饰和壁厚度性状指标存在显著或极显著差异。     

银杏花粉生活力测定及贮藏方法的优化

以银杏花粉为试验材料,研究了花粉在离体培养条件下,培养基中蔗糖、硼、钙对其萌发率的影响,优化了培养基配方;并比较了3种不同的染色法对银杏花粉生活力的测定效果。结果表明：培养5d是进行花粉萌发率测定的最佳时期,蔗糖对银杏花粉萌发至关重要,在培养基中添加3%蔗糖可有效提高花粉萌发率,达到50%左右;硼和钙对银杏花粉萌发有一定的促进作用,最佳培养基配方为蔗糖3%＋硼60mg/L＋钙100mg/L。TTC染色法测定的银杏花粉生活力与离体萌发法测定的结果可以相互代替和印证,是一种较为准确的测定银杏花粉生活力的染色法。4℃冰箱干燥保存利于保持银杏花粉生活力。     

大白菜小孢子植株群体染色体倍性鉴定方法

大白菜小孢子植株群体染色体倍性鉴定方法有直接法和间接法2种。直接法通常是以根尖、茎尖、愈伤组织、胚乳等为材料制备染色体标本,在显微镜下观察染色体数目的方法;间接法是利用流式细胞仪、细胞形态学、花粉、植株形态学等观察手段来鉴定植株的倍性。分析了各种方法的优缺点,并指出流式细胞仪鉴定是目前较好的鉴定方法。     

草莓花药培养再生植株的细胞起源

以草莓品种丰香为材料，取花粉发育处于单核期的花药进行培养。培养初期花粉细胞和花药其它组织的细胞学变化连续观察结果表明，尽管培养初期少数花粉启动分裂，但分裂几次后均趋向解体。本研究的花药再生植株均起源于花丝断裂处的体细胞。采用染色体计数和DNA组分测定2种方法对43个再生株系进行了倍性鉴定，结果显示，其中39个株系为八倍体（2n=8x=56），4个株系为十六倍体（2n=16x=112），未获得与花粉染色体倍性相同的植株。     

银杏雄株叶片和花粉主要类黄酮成分含量分析

【目的】研究江苏省46个银杏实生雄株(系)叶片和花粉类黄酮化合物主要成分及其含量,为合理开发利用银杏雄株种质资源提供理论依据。【方法】运用HPLC技术分析不同株系叶片和花粉甲醇(乙醇)-盐酸水解溶液中主要黄酮苷元的含量,并采用三因子法计算总黄酮苷含量。【结果】不同银杏雄株叶片和花粉的黄酮含量存在较大差异,通过设定黄酮苷元和总黄酮含量的选择域值,发现扬州有4个品系(扬州03、04、10、20)、泰州有2个品系(泰州08、13)、徐州有2个品系(徐州04、09)符合叶用标准,扬州有10个品系(扬州02、03、04、08、09、10、12、15、18、20)符合花粉用标准。银杏雄株叶片和花粉均含有槲皮素、山奈酚和异鼠李素3种黄酮苷元,但含量不同,叶片中三者差别不大,而花粉中以山萘酚为主,花粉总黄酮平均含量约为叶片的1.42倍。【结论】通过黄酮苷元和总黄酮含量的分析,根据设定的选择指标,可以得到优良的叶用或花粉用单株供生产利用,为银杏雄株资源的综合利用提供了参考。     

辽伏等8个苹果品种花粉萌发特性研究

以辽伏等8个苹果品种花粉为试材,分别进行了花粉发芽率、花粉寿命的试验调查,同时按照倍性不同分成2组,统计二者平均花粉发芽率.结果表明:不同品种花粉发芽率不同;品种倍性不同花粉发芽率不同,二倍体品种花粉发芽率显著高于三倍体品种;不同品种花粉寿命不同,萌发能力与花粉寿命呈明显的正相关.     

银杏花粉及其发酵饮料对小鼠的急性毒性评价

[目的]评价银杏花粉及其发酵饮料的食用安全性。[方法]选择健康小鼠进行急性毒性试验,开展了大剂量预试验及小鼠最大给药量试验,并测定了该剂量下的小鼠胸腺系数和脾脏系数。[结果]大剂量预试验小鼠均未死亡,未有异常反应,不能测出LD50。最大给药量试验显示,小鼠灌胃给药后除银杏花粉组1只小鼠意外死亡外,其他小鼠均未发生死亡或中毒症状,活动、脏器等均未见异常。银杏花粉和银杏花粉发酵饮料的最大给药量分别为21.1 g/kg体重和80.0 m L/kg体重,此最大给药量远高于可能摄入的最高剂量;同时在此剂量下银杏花粉及其发酵饮料能够增加雄性小鼠的胸腺系数和脾脏系数。[结论]银杏花粉及其发酵饮料对小鼠没有急性毒性作用,并且提示对雄性小鼠可能具有一定的免疫增强作用。     

秋水仙碱诱导银杏花粉染色体加倍的研究

该试验以北京地区银杏雄花芽为材料,探索利用不同浓度的秋水仙碱人工诱导花粉染色体加倍的方法和可能性.用浓度为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%的秋水仙碱溶液,分别对水培和自然非离体条件下诱导雄配子染色体加倍的方法进行了探索,比较了两种情况下不同处理浓度和处理方法诱导效果的差异.结果表明:自然非离体状态下棉浸法处理得到了大花粉,但得率较低,最高为7%,若进一步加大药液处理浓度或适当延长处理时间,将有可能较大幅度提高大花粉得率;水培条件下的棉浸法和注射法处理均未得到大花粉,其原因和适宜的诱导方法还有待进一步探索.以正常花粉作对照,用激光扫描共聚焦显微镜(简称LSCM)对经秋水仙碱处理诱导出的大花粉进行了DNA含量的定量测定,初步确认该试验诱导的大花粉是一种二倍体花粉.      

秋水仙素诱导厚皮甜瓜倍性研究

为了成功获得厚皮甜瓜四倍体,研究其倍性特征,本试验用二倍体厚皮甜瓜M01-3为试材,用0.1%、0.3%、0.5%和0.7%的秋水仙素溶液通过涂抹法对子叶期和一叶一心期幼苗进行处理,并通过染色体计数法和细胞学鉴定法分析倍性。结果表明,已获得同源四倍体甜瓜,0.3%和0.5%的诱导率最高;与二倍体相比,四倍体植株长势好,叶形指数小,茎增粗,花冠大,花色艳,果肉变厚,可溶性固形物含量增加,气孔变大,叶绿体数目增多。     

大花香石竹多倍体育种研究

对102个大花香石竹品种的染色体倍性进行鉴定,二倍体、三倍体和四倍体品种分别占77％、6％和17％,当前生产上的主栽品种马斯特、达拉斯和卡曼(具有大花苞性状)都是二倍体品种,71％的四倍体品种为花边复色类型。初步认为部分香石竹四倍体栽培品种是远缘杂交的后代。通过用秋水仙碱处理香石竹品种马斯特的试管苗,获得两株四倍体植株,其花蕾直径增大,而节间变短。     

菊花染色体倍性鉴定研究

[目的]综述菊花染色体倍性鉴定的常用方法及其在育种中的应用。[方法]重点介绍了染色体计数法和流式细胞术法,简要介绍了染色体倍性鉴定在菊花品种鉴定和育种中的应用情况。[结果]染色体计数法一般分为取材、预处理、固定、解离、染色、制片、镜检和制作永久玻片等步骤。流式细胞术鉴定法目前已成为倍性鉴定的主要方法,尤其适合大量样品的染色体倍性分析。介绍了流式细胞仪的结构与工作原理、使用方法与操作步骤。染色体倍性鉴定方法在菊花品种鉴定和育种中的应用主要在品种鉴定、杂交组合的选配、杂交后代材料的提前筛选和亲缘关系的鉴定4个方面。[结论]染色体计数法和流式细胞术法2种方法的结合有利于提高染色体倍性鉴定的效率和准确性。     

烟草花粉植株染色体倍性苗期快速鉴定

为了提高烟草单倍体育种中花粉苗的利用效率,采用气孔保卫细胞叶绿体计数法对花粉植株染色体倍数性鉴定进行了研究.结果表明:单倍体、二倍体、多倍体的叶绿体数平均值分别为11.559,20.458,35.056个,差异极显著;通过对叶片进行失水处理,解决了幼嫩叶片不易制片的问题,结合第3,5,8,13,17叶的叶绿体数分布,将鉴定时期提到了移栽前的第5叶,得出了每株只计数1个气孔叶绿体数的一种快速、准确的计数方法--叶绿体数倍性分界法.该方法准确率高达98.5%.     

鹤望兰2n配子诱导研究初报*

 以多年生开花鹤望兰植株为试验材料，采用不同浓度秋水仙素（0.05%,0.10%,0.20%）对鹤望兰处于减数分裂Ⅰ期的幼小花蕾进行诱导。结果表明：0.20%浓度的秋水仙素诱导效果最好。与对照相比，在形态学上，花瓣、萼片、柱头，花粉粒大小等变化较明显。细胞学上，配子出现了明显的加倍现象,并检测到导致2n花粉形成的异常减数分裂现象：（1）中期Ⅱ和后期Ⅱ的小孢子母细胞中发生异常的纺锤体定位，表现为平行、八字形、融合纺锤体；（2）末期Ⅱ4个子核呈两极分布，每极2核，或呈三极分布，其中一极2核，另两极单核；（3）四分体时期观察到了二分体、三分体情况。并且2n花粉频率的估测值（20.30%）与实测值（17.30%）相接近。因纺锤体定位异常而产生的2n配子在遗传上等同于FDR型，因而在有性多倍化育种中具有重要的利用价值。     

用西瓜叶片气孔保卫细胞叶绿体数鉴定西瓜染色体倍性

为了寻求简便、快速的西瓜染色体倍性鉴定方法,以二倍体西瓜TS和0517及其同源四倍体为试材,通过观察叶片气孔保卫细胞叶绿体数来鉴定西瓜染色体倍性.结果表明,两倍性间的叶绿体数差异显著.二倍体叶绿体数在15个以下,四倍体叶绿体数大于等于15个;气孔叶绿体数随染色体倍性的增加而增加,用气孔保卫细胞叶绿体数预测植株倍性的准确率可达90.2%,因此,用万能荧光显微镜观察叶绿体数可以在苗期快速、准确地确定植株的染色体倍性.     

银杏雌雄株性别鉴别研究进展

综述了银杏雌雄株特性及性别鉴别方面的研究，将其概括为形态学、生理生化、细胞学、同工酶及化学药剂处理等几个方面，通过形态特征来鉴别银杏雌雄株性别，相对比较简单易行；生理生化指标在已知性别的成年植株之间进行分析测定，结果存在着一定的差异性；用化学药剂处理，结果也有区别，但上述方法均欠准确可靠，染色体形态特征是进行银杏雌雄性别鉴定的重要方法之一，也是最直接的遗传学证据；用同工酶谱进行银杏雌雄株性别鉴定研究，同样具有一定的效果，但这2种方法要求较高，比较烦琐。特异蛋白质技术和分子生物学技术是近年来发展起来的鉴别植物雌雄株性别的新技术新方法，具有相对准确可靠的特点，在银杏雌雄株性别的鉴定上可以一试。参42。     

由小麦×玉米获得的小麦DH系花粉母细胞减数分裂观察

研究了由小麦×玉米远缘杂交获得的小麦双单倍体DH2代花粉母细胞减数分裂过程。结果表明,大多数双单倍体小麦与异源六倍体普通小麦染色体数目相同,这是染色体经秋水仙素成功加倍的结果。同时在少数细胞中观察到了染色体的“块状移动”,在这些“块”中存在少数“染色体落后”现象,这可能是由于在染色体加倍过程中部分细胞染色体数目发生变异造成的。     

未名玫瑰葡萄秋水仙素诱导与鉴定

[目的]研究未名玫瑰葡萄秋水仙素处理的最适浓度和时间,及适宜的倍性鉴定方法。[方法]以秋水仙素为诱变剂,利用不同浓度的秋水仙素浸泡种子不同时间,对二倍体葡萄未名玫瑰品种进行加倍诱导,并采用流式分析仪对诱变植株的细胞DNA含量进行鉴定。[结果]从诱导成活率和四倍体诱变率综合考虑,诱变四倍体未名玫瑰种子的适宜条件:当种子胚根长1.0 cm时,用0.5%秋水仙素处理96 h,其成活率和四倍体率分别为11.33%和5.12%。[结论]用倍性分析仪测定细胞倍性是一条简便快捷的鉴定方法。处理时间是影响成活率、四倍体率和变异率的主要因素。