木瓜蛋白酶提取罗非鱼鱼鳞胶原蛋白的研究

[目的]优化酶法提取鱼鳞胶原蛋白的工艺,充分利用鱼类产品加工副产物。[方法]以罗非鱼鱼鳞为原料,采用木瓜蛋白酶酶解的方法,优化鱼鳞胶原蛋白提取工艺,并分析所得胶原蛋白的性质。[结果]试验表明,木瓜蛋白酶提取罗非鱼鱼鳞胶原蛋白的最佳工艺条件为:酶量为2.5‰,50℃下酶解时间为5 h。[结论]试验所提取的胶原蛋白具有较好的吸水性、保水性和起泡稳定性,有良好的应用前景。     

吉富罗非鱼胃肠道几丁质酶的克隆、组织分布和纯化

【目的】几丁质酶是重要的水解酶,能通过水解β-1,4-糖苷键来降解鱼类食物中虾蟹壳所含的几丁质,帮助鱼类消化。了解几丁质酶在罗非鱼不同组织中的表达状况,以及从罗非鱼胃中所提取几丁质酶的特性。【方法】从吉富罗非鱼胃和肠组织中克隆获得3种几丁质酶tChit1a、tChi3和tChit的开放阅读框序列进行序列分析,并通过Real-time PCR检测其组织分布状况;通过几丁质亲和层析法纯化罗非鱼胃组织中的几丁质酶,并通过4-MU法检测酶活性。【结果】tChit1a、tChi3和tChit几丁质酶基因分别编码453、453和473个氨基酸,同源比对结果显示tChit1a与t Chi3的相似度为83.66%,而tChit与tChit1a、tChi3的相似度则较低,分别为49.89%和50.11%。进化树分析结果显示,这3种几丁质酶是鱼类三型几丁质酶,为非酸性几丁质酶。组织分布结果显示,tChit1a、tChi3和tChit分别在罗非鱼中肠、前肠和中肠后表达量最高。纯化罗非鱼胃几丁质酶的结果显示,SDS-PAGE胶在40 ku附近有两条明显条带,但用斜带石斑鱼1型几丁质酶多克隆抗体检测,没有检测到同源性高的条带。检测纯化产物几丁质酶的活性,结果显示,在最适pH值为5时,纯化产物降解4MU-(GlcNAc)_2和4MU-(GlcNAc)_3分别为1.73、4.89 U/g。【结论】罗非鱼胃组织中所提取的几丁质酶表达量和活性均较低,这可能与罗非鱼为杂食且偏素食的食性有关。     

罗非鱼鱼皮酶解物对罗非鱼鱼片的冷冻保护作用

【目的】以罗非鱼鱼皮为研究对象,评价其酶解产物的冷冻保护活性,为新型安全、高效的无磷 抗冻剂开发提供基础数据。【方法】以水解度为指标,对碱性蛋白酶的酶解温度、pH 值、酶添加量进行单因 素试验,再采用正交试验确定最佳酶解时间,使用高效体积排阻色谱法对优化条件下所得酶解产物进行分子量 测定,以解冻失水率、盐溶性蛋白含量、Ca2+-ATPase 活性、巯基含量为抗冻活性指标对酶解产物的冷冻保护 作用效果进行探究。【结果】使用碱性蛋白酶水解罗非鱼皮,正交试验得到其最优酶解条件为温度 55 ℃、pH 7.5、 酶添加量为 0.7%,确定最佳酶解时间为 3 h;优化条件下的酶解产物分子量主要集中在 367.05~6 264.80 u。在 5% 剂量条件下,6 周冻藏期内酶解产物处理的鱼肉失水率、盐溶性蛋白含量、Ca2+-ATPase 酶活性、总巯基等冷冻 保护作用生化指标均接近或优于含磷抗冻剂处理,并显著优于空白对照。【结论】罗非鱼皮碱性蛋白酶酶解产 物对罗非鱼片的冷冻变性有显著抑制作用。     

制革下脚料酶解物对菠菜生长及品质的影响

[目的]研究制革下脚料酶解物对菠菜生长及品质的影响。[方法]以菠菜品种"先锋388"为试材,施用不同量的制革下脚料酶解物,评价其对菠菜形态学性状、产量和品质的影响。[结果]酶解物最佳施用量为6.00 kg/m~2,施用制革下脚酶解物处理的菠菜形态学性状和产量与施用同类型有机肥相比较无显著性差异,其可溶性总糖和维生素C含量显著提高。[结论]施用制革下脚料酶解物,在保证菠菜产量的同时可以显著提高菠菜的品质。     

尼罗罗非鱼芳香化酶基因的染色体定位

从尼罗罗非鱼的细菌人工染色体基因文库中提取和纯化含有卵巢和脑芳香化酶基因的重组质粒DNA，通过简并PCR制备芳香化酶基因原位杂交探针，并用荧光素进行标记。结果显示，尼罗罗非鱼卵巢和脑芳香化酶基因位于2对不同的小染色体上，而不是位于性染色体上。结果提示：芳香化酶基因不是尼罗罗非鱼主要的性别决定基因。     

超声辅助酶法回收南极磷虾壳中蛋白质的研究

[目的]研究南极磷虾壳的超声辅助酶解工艺,以最大程度地回收南极磷虾加工下脚料中的蛋白质。[方法]探究了不同种类蛋白酶、固液比、p H、酶解时间、酶解温度、酶底物比以及辅助超声功率对蛋白回收率的影响,并通过正交试验优化确定超声辅助酶解工艺参数。[结果]碱性蛋白酶水解蛋白能力最强;超声辅助碱性蛋白酶解最优工艺:自然p H下,控制固液比1∶10 g/m L,辅助超声功率150 W,加入碱性蛋白酶(5 000 U/g蛋白)后,50℃下酶解2.5 h,此时蛋白质回收率达87.42%。[结论]采用优化后的超声辅助酶解工艺可极大程度地回收南极磷虾加工下脚料中的蛋白质,促进磷虾资源的充分利用。     

酶技术在水产加工下脚料利用方面的应用

阐述了酶技术原理及工艺过程,以及酶技术在水产加工中的研究应用状况等,并展望了酶技术在对虾加工下脚料方面的应用和发展前景。     

一种新型生物柴油原料的脂肪酸成分分析

[目的]分析罗非鱼下脚料油化学成分。[方法]用气相色谱法（GC）对成分进行分析,用面积归一化法计算各组分的相对质量分数。[结果]鉴定出22中脂肪酸成分,主要成分为油酸（22.1%）、二十四碳一烯酸（20.8%）、棕榈酸（14.2%）和二十二碳一烯酸（10.1%）。[结论]单不饱和脂肪酸是罗非鱼下脚料油的主要成分,该研究为进一步开发罗非鱼可再生资源提供了科学依据。     

微囊藻毒素MC-LR对罗非鱼（Oreochromis niloticus）肝脏谷胱甘肽含量及其相关酶活性的影响

采用腹腔注射的方式研究了微囊藻毒素MC-LR(注射剂量为500 μg·kg-1BW)胁迫下罗非鱼(Oreochromis niloticus)肝脏谷胱甘肽(GSH)含量及其相关酶γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)、谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性的动态变化.结果表明,MC-LR能够对罗非鱼肝脏GSH含量及其相关酶活性产生明显影响.在MC-LR胁迫下,与对照组相比,GSH含量呈现先下降后上升趋势,总体上被诱导;罗非鱼肝脏γ-GCS和GST在试验过程中出现两次显著升高现象,在GST作用下,GSH与MC-LR结合会造成GSH的消耗,γ-GCS和GR的活性增强能够使GSH含量升高,从而使罗非鱼肝脏GSH能够维持一定水平;GR和GPx的活性均表现为先上升后下降,它们能有效调节罗非鱼肝脏GSH-GSSG缓冲系统,从而在减轻或消除由MC-LR侵入而造成的肝细胞氧化胁迫中发挥重要作用.     

淡水小龙虾下脚料酶解制备抗氧化肽的工艺研究

[目的]研究以淡水小龙虾下脚料为原料酶解制备龙虾抗氧化肽的工艺。[方法]以酶水解产物清除羟自由基能力为指标,采用单因素和响应面试验考察了制备淡水小龙虾抗氧化肽的最佳蛋白酶种类及其酶解工艺。[结果]碱性蛋白酶是制备淡水小龙虾抗氧化肽的优选蛋白酶;最佳酶解工艺条件为：料液比1.0∶1.0（g∶ml）、酶解温度59℃、pH 8.9、加酶量2 000 U/g,水解时间3 h。[结论]此工艺所得酶解液对羟自由基的清除效果最好,清除率为74.66%。