中短链聚羟基脂肪酸酯的低成本生产与应用

聚羟基脂肪酸酯(PHA)是在不平衡生长条件下由微生物产生的聚酯。由于其单体组成及排列方式的多样性,PHA不仅具有生产生活中常见塑料材料的优良物理性能,同时具有良好的生物相容性、生物可降解性、可加工性等优良的生物性能,在众多领域都有良好的应用潜能。但与传统石化塑料相比,PHA的生产成本较高,使其生产和应用受到限制。如何降低PHA的生产成本成为当今研究的热点话题。本文主要综述了聚羟基脂肪酸酯的多样性、低成本生产及其应用,以期为今后的相关研究提供一定参考。     

淋巴细胞转化试验在鸭体上的应用——Ⅱ.鸭瘟病毒对鸭外周血淋巴细胞转化能力的影响

试验鸭32只分4组,第1组接种鸭瘟强毒,第2组接种鸭瘟弱毒,第3组先接种鸭瘟弱毒,2周后再接种鸭瘟强毒,第4组为对照。采用外周血淋巴细胞转化试验,检测鸭瘟病毒对鸭外周血淋巴细胞转化能力的影响,结果鸭瘟强毒和鸭瘟弱毒对鸭淋巴细胞的PHA反应性均有抑制作用。其中鸭瘟强毒的作用迅速而且强烈,在很短的时间内即造成宿主淋巴细胞对PHA的反应剧烈下降,并很快导致动物死亡,出现典型的鸭瘟病变,但也有个别鸭能够耐过强毒的攻击而生存下来,耐过鸭淋巴细胞对PHA的反应性逐渐恢复正常,剖检未见有鸭瘟病变;鸭瘟弱毒的抑制作用是暂时的,宿主淋巴细胞对PHA的反应性很快即恢复正常,剖检也未见有鸭瘟病变;对于接种鸭瘟弱毒以后再攻强毒的鸭,其对PHA刺激的反应性未受到影响,攻毒后2周,宿主还表现出对PHA的反应能力有增强的趋势,剖检未见有鸭瘟病变。此结果与其他病毒所致的PHA反应抑制和加强作用相类似。     

PHA复方制剂对鸡新城疫疫苗的免疫增强作用

PHA复方制剂由植物血凝素(PHA)为主药组成,为探讨其对鸡新城疫(ND)疫苗的免疫增强作用,将复方制剂按体重0.05、0.2和0.3 g.kg-1三个剂量灌服,对Lasota疫苗免疫鸡ND的抗体效价、免疫球蛋白、血液中T淋巴细胞进行检测,攻毒后计算攻毒保护率。结果表明,PHA复方制剂0.05、0.2 g.kg-1组可显著提高抗体、IgG和IgA(P<0.05),提高血中T淋巴细胞数(P<0.05)和攻毒保护率,显示PHA复方制剂对ND疫苗有免疫增强作用及免疫保护作用。     

芸豆凝集素受体在小鼠生殖细胞上的分布及作用研究

[目的]探讨芸豆凝集素（PHA）受体在小鼠精子和卵母细胞上的分布及作用。[方法]应用异硫氰酸荧光素（FITC）标记的芸豆凝集素作为分子探针,确定其PHA受体在小鼠精子和卵母细胞上的分布。通过不同浓度PHA处理精子和卵母细胞,研究PHA预处理对精子获能和顶体反应,以及对卵母细胞FITC—PHA染色的影响。l结果]PHA受体主要表达于小鼠精子整个尾部区域和顶体反应后的头部质膜,2mg／mlPHA预处理有抑制顶体反应的作用;卵母细胞透明带和细胞膜都有PHA受体的存在。不同浓度PHA处理卵母细胞对其透明带阿FTIC—PHA染色影响不大,但对其细胞膜染色有较大影响,且不同浓度之间差异明显。[结论]芸豆凝集素受体是小鼠精子和卵母细胞受体的重要组成部分,且在精卵质膜融合过程中发挥重要作用。     

肝硬变患者血清胆碱酯酶的测定及其临床意义

目的 :探讨肝硬变患者血清胆碱酯酶 (CHE)与病情发展的关系。方法 :采用全自动生化分析仪检测 4 4例肝硬变患者和 4 4例急性肝炎患者的 CHE、丙氨酸转移酶 (AL T)、白蛋白 (AL B)、总胆红素 (TBIL) ,并与 35例对照组比较。结果 :肝硬变患者血清 CHE活性显著降低 (P<0 .0 1) ,并与血清 AL B值呈正相关 ,与血清 AL T、TBIL 值呈负相关 (P<0 .0 1)。结论 :血清 CHE活性的测定对肝硬变患者的病情变化和预后判断有一定的临床意义。     

一株产聚-β-羟基脂肪酸酯嗜盐菌的筛选与鉴定

以大庆地区盐碱土壤为样品经苏丹黑B染色、尼罗蓝染色分离出6株具有聚-β-羟基脂肪酸酯(PHA)合成能力的菌株,选取产量较高的DQ-4进行鉴定,通过细菌形态学鉴定、16S rRNA分析并结合其生理生化特性,将菌株DQ-4鉴定为嗜盐单胞菌(Halomonas sp.)。GC-MS分析表明,菌株DQ-4合成的聚合物具有与PHA标样相似的峰值。FT-IR分析显示,菌株DQ-4合成的聚合物在1 726、2 980、2 934、2 876 cm~(-1)处出现了PHA的特征性吸收峰。因此,将其产物确定为PHA类化合物。菌株DQ-4的最适生长条件,温度38℃、p H值=9、转速160 r·min~(-1)、500 m L锥形瓶的装液量为100 m L,此条件下菌株DQ-4的PHA产量可达5.88 g·L~(-1)。     

一株产聚－β－羟基脂肪酸酯嗜盐菌的筛选与鉴定1）

以大庆地区盐碱土壤为样品经苏丹黑B染色、尼罗蓝染色分离出6株具有聚－β－羟基脂肪酸酯（ PHA）合成能力的菌株,选取产量较高的DQ－4进行鉴定,通过细菌形态学鉴定、16S rRNA分析并结合其生理生化特性,将菌株DQ－4鉴定为嗜盐单胞菌（ Halomonas sp．）。 GC－MS分析表明,菌株DQ－4合成的聚合物具有与PHA标样相似的峰值。 FT－IR分析显示,菌株DQ－4合成的聚合物在1726、2980、2934、2876 cm－1处出现了PHA的特征性吸收峰。因此,将其产物确定为PHA类化合物。菌株DQ－4的最适生长条件,温度38℃、pH值＝9、转速160 r· min－1、500 mL锥形瓶的装液量为100 mL,此条件下菌株DQ－4的PHA产量可达5．88g · L－1。     

腐殖酸磷肥中的腐殖酸对磷迁移的影响及机理

【目的】比较腐殖酸磷肥中的腐殖酸（PHA）与常规腐殖酸（HA）对肥料磷迁移、Ca²⁺及磷酸盐吸附特征的差异,明晰腐殖酸在磷肥增效过程中的作用。【方法】在实验室分别制备腐殖酸、腐殖酸磷肥及普通磷肥,利用腐殖酸“碱溶酸析”的原理,通过调节腐殖酸磷肥溶液pH分离得到PHA。研究磷肥配施两种添加量的HA和PHA对肥料磷迁移状况的影响,HA和PHA的配施量分别为施磷量的0.5%与5%,代号分别为0.5HA+P、0.5PHA+P、5HA+P及5PHA+P,同时设置单施磷肥（P）及不施肥（CK）两个处理。并通过HA和PHA对Ca²⁺及磷酸盐的吸附特征解释二者对肥料磷迁移存在差异的原因。【结果】HA和PHA配施磷肥,肥料磷的迁移距离与迁移量均高于P处理：P处理肥料磷可以迁移到距施肥层垂直距离42 mm处,而配施HA和PHA处理可以分别到达距施肥层46与50 mm处,这与HA和PHA对土壤Ca²⁺存在较高的吸附容量,进而减少土壤对磷的固定有关。距施肥层42 mm以后,土壤速效磷总量占总施磷量的累积百分数基本趋于不变,且0.5HA+P ≈ 5PHA+P>5HA+P>0.5PHA+P>P处理。PHA对肥料磷迁移的促进作用会随其添加量的提高而增强,而提高HA用量反而会减弱其对肥料磷迁移的促进作用,这与PHA移动性强于HA,对磷酸盐的吸附弱于HA有关。HA与PHA对Ca²⁺ 的吸附均是膜扩散与颗粒内扩散综合作用的结果,但是与HA相比,Ca²⁺向PHA颗粒表面扩散的难度降低,在PHA颗粒内部扩散的难度变大。Langmuir等温吸附模型可以很好地拟合HA或PHA和Ca²⁺的等温吸附曲线,HA对Ca²⁺理论最大吸附量高于PHA,然而PHA对Ca²⁺的吸附以化学吸附为主。【结论】腐殖酸磷肥中的腐殖酸与普通腐殖酸均对Ca²⁺存在一定的吸附能力,因此均可以促进肥料磷的迁移,但是磷肥配施腐殖酸磷肥中的腐殖酸,肥料磷的迁移距离大于常规腐殖酸,这可能是腐殖酸磷肥中腐殖酸增效磷肥的一个原因。     

植物血凝素对鸡免疫功能的影响

选用罗曼蛋公鸡270羽,随机分为9组,连续3次肌肉注射不同剂量植物血凝素(PHA)后,对其血清蛋白、免疫器官指数及新城疫的攻毒保护效果进行检测.结果表明:肌注2.4 mg/kg.bw PHA组与对照组相比,可显著提高鸡的血液生化指标(P<0.05),极显著提高对鸡新城疫的保护率(P<0.01);肌注1.2 mg/kg.bw PHA组与对照组相比,可显著提高胸腺指数和新城疫攻毒保护率(P<0.05).     

聚羟基脂肪酸酯的生物合成研究进展

综述了近年来聚羟基脂肪酸酯（PHA）合成中碳源的选择以及基因工程技术在PHA合成中的应用研究进展,并展望了PHA研究的发展方向。     

制备皱纹盘鲍染色体标本方法的比较研究

以皱纹盘鲍Haliolis discus Hannai的鳃、外套膜、上足触手为材料,采用植物血球凝集素（PHA）和秋水仙素体内注射法,通过滴片制备染色体标本,统计细胞分裂数。结果表明,鳃、外套膜、上足触手3种组织注射PHA后,细胞分裂指数比没有注射PHA的对照组均有显著提高,其中以PHA2次注射为最高。在3种组织中,鳃组织的细胞分裂指数最高,其次是外套膜、上足触手。用3种组织制备的染色体标本,均获得大量形态清晰、长度适中、分散良好的中期分裂相。     

PHA产生菌的筛选与鉴定

从15个污泥样品中分离筛选出5株PHA产生菌,其中A-0603-11为产PHA最好菌株,经苏丹黑染色镜检发现有2~3个PHA颗粒,黑色部分的体积占菌体50%以上。生理生化试验表明,该菌为革兰氏阴性杆状,单鞭毛运动,好氧,氧化酶阳性,接触酶阳性,不发酵D-葡萄糖和其它糖类。经分子生物学鉴定,该菌为Delftia sp.,属于Comamonadaceae丛毛单胞菌科。     

鲫鱼淋巴细胞转化PHA刺激剂量及流式细胞仪检测参数探讨

从异育银鲫外周血中分离淋巴细胞,利用RPM I-1640培养基培养48 h后,采用流式细胞仪分析方法研究不同浓度的植物凝集素(phytohem agglutin in,PHA)(0μg/mL、80μg/mL、200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL、1 000μg/mL、1 200μg/mL)对外周血淋巴细胞转化率的影响,旨在探索异育银鲫外周血淋巴细胞体外转化最适刺激剂量。结果表明:(1)在PHA浓度0~400μg/mL的范围内,随着PHA浓度的增加,淋巴细胞转化率也增加,呈浓度依赖的关系,但当PHA的浓度增加到1 200μg/mL,淋巴细胞转化率明显下降。其中PHA浓度为400μg/mL时,淋巴细胞转化率最高,显著高于低浓度组(80μg/mL)和高浓度组(1000μg/mL、1200μg/mL)(P<0.05),略高于中浓度组(200μg/mL、600μg/mL、800μg/mL),差异不显著(P>0.05)。由此可见,在本试验条件下,PHA体外刺激异育银鲫淋巴细胞转化的最适剂量为400μg/mL。(2)用流式细胞仪检测细胞内DNA合成情况,Mu lticyc le AV软件进...     

鲫鱼淋巴细胞转化PHA刺激剂量及流式细胞仪检测参数探讨

从异育银鲫外周血中分离淋巴细胞,利用RPM I-1640培养基培养48 h后,采用流式细胞仪分析方法研究不同浓度的植物凝集素(phytohem agglutin in,PHA)(0μg/mL、80μg/mL、200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL、1 000μg/mL、1 200μg/mL)对外周血淋巴细胞转化率的影响,旨在探索异育银鲫外周血淋巴细胞体外转化最适刺激剂量。结果表明:(1)在PHA浓度0~400μg/mL的范围内,随着PHA浓度的增加,淋巴细胞转化率也增加,呈浓度依赖的关系,但当PHA的浓度增加到1 200μg/mL,淋巴细胞转化率明显下降。其中PHA浓度为400μg/mL时,淋巴细胞转化率最高,显著高于低浓度组(80μg/mL)和高浓度组(1000μg/mL、1200μg/mL)(P<0.05),略高于中浓度组(200μg/mL、600μg/mL、800μg/mL),差异不显著(P>0.05)。由此可见,在本试验条件下,PHA体外刺激异育银鲫淋巴细胞转化的最适剂量为400μg/mL。(2)用流式细胞仪检测细胞内DNA合成情况,Mu lticyc le AV软件进...     

菌株0206产PHA的发酵条件优化

[目的]优化菌株0206产PHA株的发酵条件。[方法]以菌株0206为试验菌株,对碳源、氮源、培养基p H和培养时间进行了单因素试验和正交试验。[结果]从活性污泥中分离筛选到高产PHA的菌株0206,通过生理生化鉴定,菌株0206为芽孢杆菌属,菌株0206产PHA最优发酵条件为葡萄糖10 g/L,硫酸铵10 g/L,氯化钠2 g/L,培养基p H 7.0,培养时间48 h。[结论]优化了菌株0206产PHA的发酵条件,为PHA的发酵提供参考。     

不同来源PHA对人血淋巴细胞分裂影响的差异研究

研究了不同来源PHA对人外周血淋巴细胞分裂的影响.研究表明:自提不同来源的PHA对细胞均有刺激细胞分裂和凝集的效应,其中以四川花豆刺激分裂的效应最好,其次为山西产奶花云豆、红花豆、白云豆.建议在实际中均可以不同浓度使用.     

不同pH值对酶联免疫法检测生猪尿样中瘦肉精含量的影响

意大利试剂盒与三方圆试剂盒检测生猪尿样的瘦肉精含量及pH值,试验结果表明,在一定pH值范围内瘦肉精含量与样品pH值呈极显著负相关关系;不同试剂盒对样品的pH值要求不同,样品pH值的变化对其检测结果影响的总体趋势相同,但影响程度不同;在试剂盒所对应的推荐pH值范围以内,样品pH值的变化对检测结果的影响较小,反之,样品pH值每调节1个单位所得的检测结果间显著差异。     

黄瓜棒孢叶斑病菌实时荧光定量PCR方法的建立与应用

黄瓜棒孢叶斑病是近年来生产中流行的一种气传病害,易与霜霉病、炭疽病等病害混淆,具有传播迅速、难以防治的特点,严重威胁黄瓜生产。研究旨在开发一种快速、灵敏的实时荧光定量PCR方法,用于定量检测叶片中黄瓜棒孢叶斑病菌(Corynespora cassiicola)并应用于田间监测。基于黄瓜棒孢叶斑病菌的actin序列设计并合成一对特异性引物CAF2/CAR2,以标准品DNA构建实时荧光定量PCR标准曲线并优化实时荧光定量PCR反应体系。当退火温度60℃,DNA模板量3μL(10 ng·μL~(-1)),引物量0.2μL (10 mmol·L~(-1))时为最佳体系条件。此方法检测黄瓜棒孢叶斑病菌DNA最低浓度为1.36×10~(-6)ng·μL~(-1)。验证实时荧光定量PCR体系组内与组间重复性和稳定性,其变异系数均小于2%。应用所建立的实时荧光定量PCR体系,检测5种不同抗性黄瓜品种接种棒孢叶斑病菌后不同时间叶片中病菌动态变化,发现4～8 h(Cq值30)时,黄瓜棒孢叶斑病菌开始侵染高感和感病品种,8～12 h时开始侵染中抗、抗病和高抗品种,且随时间延续侵染量逐渐增加,根据黄瓜棒孢叶斑病病情分级标准,当Cq值21时,病情级别为1;Cq值19时,病情级别为2;Cq值17,病情级别为3;Cq值14,病情级别为4。研究为黄瓜棒孢叶斑病诊断及监测提供技术支持。     

植物凝集素的部分生物学作用分析

通过血凝反应、凝集效价测定以及凝集素对淋巴细胞的凝集作用,探讨部分植物凝集素凝集作用及活性强弱.结果表明:其中RCA、PHA、PSL、VFL对血红细胞及淋巴细胞均有凝集作用,且凝集活性强弱顺序依此为RCA>PHA>VFL>PSL.6种凝集素中RCA与正常人血红细胞主要唾液酸糖蛋白的作用最强 ,而SBA和PNA与正常人血红细胞主要唾液酸糖蛋白可能无相互作用.小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞有和RCA、PHA、PSL、VFL作用的对应受体,而无SBA受体和PNA受体,因此,RCA、PHA、PS L、VFL对淋巴细胞均产生凝集作用.     

鼻咽癌病人及其患病风险者EB病毒与机体细胞免疫反应关系的研究——Ⅴ.有丝分裂原诱导的T调节细胞对EB病毒感染鼻咽癌病人和EB病毒血清学阳性者外周血单个核细胞的影响

本文探讨了鼻咽癌病人、IgA/VCA阳性和阴性健康成人外周血单个核细胞(PBMC)经PHA和ConA诱导后对EB病毒(EBV)感染自身PBMC早期变化的影响.结果显示:PHA诱导细胞对EBV感染自身PBMC后的EBV核抗原(EBNA)阳性细胞数和~3H-TdR掺入量均有抑制作用,但对Ig分泌多数有促进趋势,特别是