葡萄卷叶病的研究进展

葡萄卷叶病(Grapevine leafroll disease)是葡萄上的一种重要的病毒病,现已研究表明,引起该病的病毒不止一种,目前国际上承认的已有5种(GLRaVI-III),其中葡萄卷叶伴随病毒III(GLRaV-III)是最主要的一种,它分布最广,造成的经济损失最大,而且也是这几种病毒中唯一具有自然介体的病毒.本文根据生产实际,系统阐述了目前关于葡萄卷叶病毒病原、检测和脱毒技术的研究进展.     

葡萄卷叶病研究及问题

葡萄卷叶病是葡萄生产上重要的病毒病。引起这一病害的病毒,统称葡萄卷叶病毒(Grapevine leaf-roll virus,GLRV)。现在看来引起本病的病毒,不止一个,是比较复杂的。本病18世纪中叶在欧洲已有记述,19世纪意大利西西里人的蜡叶标本里也有类似此症的材料(Martelli,1986)。至今本病在世界各葡萄产区分布甚广。欧、美主要酿酒葡萄品种几乎普遍有此病的发生。日本的无味果葡萄亦认为与卷叶病毒关系密切。我国近年葡萄卷叶病发生亦较多,虽尚无详细损失资料,估计一般损失约在5～15%。作者等调查(1986～1988),如玫瑰香(抚顺)、贝塔、汉普(沈阳)、龙眼(沈阳、北镇)、伊豆锦(熊岳)、巨峰(沈阳、北镇、朝阳)均有卷叶病发生,发病率约为5～75%。     

医用抗病毒剂脱除葡萄病毒的初步研究

以携带葡萄(Vitis spp.)斑点病毒(GFkV)、沙地葡萄茎痘伴随病毒(GRSPaV)、葡萄病毒A(GVA)、葡萄卷叶伴随病毒-1(GLRaV-1)、葡萄卷叶伴随病毒-2(GLRaV-2)、葡萄卷叶伴随病毒-3(GLRaV-3)和葡萄卷叶伴随病毒-6(GLRaV-6)等病毒的8个葡萄品种试管苗样品为材料,采用不同质量浓度的医用抗病毒剂利巴韦林注射液进行脱毒处理。结果发现,葡萄植株的死亡率较高,设置的4个质量浓度处理中,只有加入25 mg/L利巴韦林注射液处理的试管苗样品获得了再生植株。对分离成活的茎尖进行RT-PCR检测,结果表明,获得的5个葡萄品种的9株再生植株中,只有维多利亚的2株检测带有GRSPaV,其余均不带有所检病毒。     

四川葡萄病毒病田间普查及血清学鉴定

对四川葡萄主产区病毒病的发生和危害状况进行田间普查,并采集了48份葡萄枝条样本进行病毒病的血清学检测和鉴定。经双抗体和三抗体夹心酶联免疫法测试后．从采自四川的这批样本中分别检测出了葡萄茎沟病毒(GVA)、葡萄栓皮病毒(GVB)、葡萄扇叶病毒(GFLV)、葡萄斑点病毒(GFkV)、葡萄卷叶病毒-2(GLRaV-2)和葡萄卷叶病毒-3((GLRaV-3)6种危险性的病毒(株系),它们的检出率分别为14.6％、8．3％、10．4％、27.1％、14.6％和20．8％,另外两种靶标病毒(株系)葡萄卷叶病毒-1(GLRaV-1)和南芥菜花叶病毒(ArMV)则未被发现。在四川省内一些老龄葡萄园内．以及部分引进的葡萄新品种上,病毒病的发生和流行极为普遍,并给葡萄的正常生长和生产造成了严重危害。     

葡萄卷叶病的防治

葡萄卷叶病由葡萄卷叶病毒侵染引起，该病危害重，可造成葡萄减产20％～50％。一、病害识别 叶片向下翻卷，果穗小，着色浅。由于品种、环境的不同，卷叶上呈现淡红色斑点，或脉间淡红色，或脉间褪绿等变色症状。     

葡萄病毒病研究进展与方向

国内已报道的葡萄扇叶病、卷叶病、茎沟病与栓皮病、斑点病等六种病毒病在我国各葡萄产区分布广泛,其中对扇叶病、卷叶病研究较多。在同等栽培条件下,感染扇叶病毒的植株,平均萌芽率、生产量和株产均明显低于正常植株;而感染卷叶病毒的蛇龙珠在植株上较无病株小1/3,穗重减少41.     

葡萄卷叶病的防治

葡萄卷叶病由葡萄卷叶病毒侵染引起。该病危害重,可造成葡萄减产20%～50％。     

嘉兴市主栽葡萄品种中主要病毒病原的检测

为调查嘉兴市主栽葡萄品种上病毒发生状况,本研究采集了嘉兴市5个县区的6个主栽葡萄品种162份样品,采用RT-PCR技术结合PCR产物测序对葡萄扇叶病毒(GFLV)、葡萄卷叶病毒1(GLRaV-1)、葡萄卷叶病毒3(GLRaV-3)、葡萄病毒A(GVA)、葡萄病毒B(GVB)、沙地葡萄茎痘病毒(GRSPaV)和葡萄斑点病毒(GFkV)发生情况进行检测。结果表明,嘉兴市葡萄主栽品种带病毒率高达91.4%,且复合侵染率为60.5%。以上7种病毒,除GFLV以外,其他6种病毒均可检测到,且GFkV发生率高达84%。     

葡萄卷叶伴随病毒Ⅲ基因的克隆及序列分析

根据葡萄卷叶伴随病毒 美国分离物的 GLRa V- 3CP基因序列 ,设计并合成了 1对该病毒的 PCR引物 ,利用 IC- RT- PCR成功地检查到合适大小的 PCR产物 ;同时将PCR产物克隆到中间载体 PGEM- 3Zf上 ,转化大肠杆菌 DH5α菌株 ,筛选阳性克隆。通过双酶切以及序列分析表明 ,扩增样品与美国分离物的同源性为 94.1 %。     

葡萄扇叶病和卷叶病的研究现况

葡萄病毒病是葡萄病害中认识较迟而危害最大的病害之一。近年逐渐受到人们的重视,公认的葡萄病毒病约20余种,其中以葡萄扇叶病和卷叶病发生最为普遍。 一、葡萄扇叶病 扇叶病原系欧亚种葡萄(Vitis vinifera)上的一个古老病害,19世纪初叶已有记     

葡萄病毒病的发生与防治

葡萄病毒病主要的有4种,即葡萄扇叶病、葡萄卷叶病、葡萄栓皮病、葡萄茎痘病.我区葡萄病毒病以扇叶病和卷叶病为主,发生重的也有扇叶病和卷叶病回合发生.葡萄扇叶病毒病严重发生时可减产20%～80%,甚至导致植株死亡.葡萄卷叶病毒病一般减产20%左右,含糖度降低20%或更多.     

天津地区葡萄病毒病源种类检测初报

<正> 1988～1990年用10种抗血清对270～700份葡萄标样用 ELISA 的间接法和双抗体夹心法检测出南芥菜花叶病毒(ArMV)、葡萄卷叶病毒(GLRV)、葡萄扇叶病毒(G-FV)、番茄黑环病毒(TBRV)、烟草环斑     

PAS-ELISA检测GFLV和GLRaV-3技术的研究

以中国农业科学院郑州果树研究所国家葡萄资源圃的葡萄品种为试材,对葡萄扇叶病毒(GFLV)和葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了A蛋白酶联免疫吸附测定(PAS-ELISA)的检测技术的研究。从阴、阳性对照及抗血清或抗体浓度的选择,到不同时期、检测部位对结果的影响,建立了一套完整的ELISA检测GFLV和GLRaV-3程序;通过试验分析,该方法快速,简便,经济且灵敏度高,不失为葡萄病毒检测的一种新方法。通过检测,还了解到GFLV的发病高峰在春季,主要发病部位在上部叶片,而GLRaV-3的发病高峰在秋季,重要发病部位在下部叶片。     

葡萄病毒病与脱毒技术

危害葡萄常见的病毒病有40种以上，中国已鉴定明确的有4种。笔者综述了有关葡萄扇叶病、葡萄卷叶病、葡萄栓皮病和葡萄茎痘病的症状以及葡萄的脱毒技术。     

甘肃葡萄扇叶病毒和卷叶病毒的检测

采用 DAS-ELISA 检测方法对甘肃地区的葡萄主要品种进行扇叶病毒和卷叶病毒的调查和测定。结果表明,这两种病毒病在甘肃地区的主要葡萄产区均有发生。兰州地区和一些老的葡萄产区葡萄带病毒病较严重。通过对比植株下部枝条的幼叶、幼茎、老叶和老茎病原的检测结果,说明植株下部幼嫩组织是卷叶病毒最适的检测部位。     

宁夏玉泉营地区葡萄卷叶病田间自然发病调查及检测

对宁夏玉泉营地区葡萄圃内的50多个品种和砧木的卷叶病自然发病情况进行调查研究。结果表明：在美洲种群、东亚种群中没有发现卷叶病症状；欧亚种群的品种卷叶病症状比例最高，且程度严重；具有欧血统的欧美杂种、欧山山葡萄杂种均有表现卷叶病的品种，但发病率、严重度低于欧亚种。欧亚种中，以鲜食品种为主的东方品种比以酿酒品种为主的西欧和黑海品种卷叶病发病率低。检测结果表明不同酿酒品种带毒率有差异。     

冬种马铃薯卷叶病田间调查及RT-PCR检测技术研究

对惠州市冬种马铃薯卷叶病发病情况进行调查研究,建立了马铃薯卷叶病毒(PLRV)RT-PCR检测技术。结果表明,马铃薯卷叶病发病率为3.0%～29.7%。比较LiCl、异硫氰酸胍和试剂盒3种方法提取马铃薯卷叶病毒总RNA,以异硫氰酸胍和试剂盒提取效果较好,LiCl次之;根据卷叶病毒外壳蛋白基因序列设计引物,从感染马铃薯卷叶病毒的马铃薯叶片中提取出病毒RNA,合成cDNA并运用RT-PCR技术进行体外扩增,得到一条长度约336bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的外壳蛋白基因大小一致,而健康叶片RNA扩增未得到任何产物。应用RT-PCR技术对马铃薯试管苗和种薯进行了卷叶病毒检测。     

贺兰山东麓主栽葡萄品种病毒病鉴定及健康状况评价

对贺兰山东麓7个葡萄主产区的9个葡萄品种,共计52份样本进行葡萄病毒病的ELISA检测和健康状况分析。9个测试葡萄品种中,2个酿酒品种感染了葡萄卷叶病毒(GLRaV-3),病毒感染率为22.22%;1个酿酒葡萄品种感染了葡萄扇叶病毒(GFLV),病毒感染率为11.11%;1个鲜食葡萄品种感染了卷叶病毒(GLRaV-3),病毒感染率为11.11%。在2个受测目标病毒中,GLRaV-3的发生和危害最为严重,其单个采样点的样本感染率为14.29%~50.00%;其次为GFLV,单个采样点的样本感染率为100.00%。蛇龙珠是贺兰山东麓携带GLRaV-3的主要葡萄品种,西拉是携带GFLV的主要葡萄品种。     

葡萄卷叶病毒主要检测技术比较

葡萄卷叶病(GLRaV)是葡萄上的一种重要病毒病害。本文主要阐述了该病的病原、分布及近些年来各种检测技术在该病检测中的应用情况,分析了各种检测技术的优势和不足及如何在该病检测中对各种方法做合理的搭配应用,优势互补,提高效率。     

宁夏玉泉营地区葡萄卷叶病田间自然发病调查及检测

对宁夏玉泉营地区葡萄圃内的50多个品种和砧木的卷叶病自然发病情况进行调查研究,结果表明在美洲种群、东亚种群中没有发现卷叶病症状;欧亚种群的品种卷叶病症状比例最高,且程度严重;具有欧亚血统的欧美杂种、欧山山葡萄杂种均有表现卷叶病的品种,但发病率、严重度低于欧亚种.欧亚种中,以鲜食品种为主的东方品种比以酿酒品种为主的西欧和黑海品种卷叶病发病率低.检测结果表明不同酿酒品种带毒率有差异.