龙葵多糖抗肿瘤和免疫调节作用的研究

[目的]研究龙葵多糖对小鼠荷宫颈癌(U14)生长的抑制及对荷瘤小鼠免疫调节作用。[方法]MTT法检测龙葵多糖体外对U14细胞增殖的影响;建立U14宫颈癌腹水瘤模型,观察给药后,对腹水型肿瘤的抑制作用和对荷瘤小鼠存活时间的影响;用ELISA法检测龙葵多糖干扰对荷瘤小鼠血清中IL-44和IFN-γ水平的影响。[结果]龙葵多糖体内有显著抑制小鼠宫颈癌U14细胞生长的作用,并且能够显著延长荷瘤小鼠的生命周期。细胞因子检测结果表明,龙葵多糖可显著增加荷瘤小鼠血清IFN-γ水平,显著降低血清中IL-44的水平。[结论]龙葵多糖具有抑制腹水型肿瘤U14生长、延长荷瘤小鼠存活时间的作用,推测该多糖可能是通过激活机体内免疫系统的活动,进而调节细胞因子的分泌而发挥其抗肿瘤作用。     

异叶败酱多糖的体内抗肿瘤活性研究

【目的】研究异叶败酱多糖抑制U14宫颈癌实体瘤小鼠肿瘤生长的作用机制。【方法】建立小鼠宫颈癌(U14)实体瘤模型,以灌胃生理盐水和皮下注射环磷酰胺(25mg/kg)分别作为阴性和阳性对照,观察异叶败酱多糖不同剂量(30,60,90mg/kg)灌胃给药14d后,对小鼠肿瘤生长抑制作用的影响;检测异叶败酱多糖对荷瘤小鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)和碱性磷酸酶(AKP)活性的影响;用原位末端标记(TUNEL)法检测肿瘤细胞的凋亡情况;利用免疫组织化学法分析与细胞凋亡密切相关蛋白(突变型p53、Bcl-2、Bax)的表达情况。【结果】与阴性对照组相比,异叶败酱多糖中、高剂量组瘤质量显著下降,荷瘤小鼠血清LDH活性显著降低,Bax蛋白表达量显著升高,突变型p53和Bcl-2蛋白表达量显著下降(P0.05);异叶败酱多糖各组肿瘤组织的细胞凋亡数较阴性对照组均显著提高(P0.05),荷瘤小鼠血清AKP活性有所升高,但与阴性对照差异不显著(P0.05)。与阳性对照组相比,异叶败酱多糖中、高剂量组抗U14宫颈癌效果接近于临床化疗药环磷酰胺。【结论】异叶败酱多糖具有抑制实体瘤U14生长的作用,揭示该多糖可能通过调节细胞凋亡相关基因的表达,进而促进肿瘤细胞的凋亡而发挥其抗肿瘤作用。     

榄香烯复合抗肿瘤疫苗免疫的效应机制

 以小鼠H22腹水型肝癌和L615白血病为实验模型，采用榄香烯或／和热休克等为应激原(stressor)，对小鼠H22腹水型肝癌细胞和L615白血病细胞进行不同浓度榄香烯、不同时间热休克处理，用透射电镜观察肿瘤细胞的形态变化；采用直接免疫荧光法流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞凋亡百分率及对肿瘤细胞膜HSP70、HSP90表达的影响；进而分离纯化不同应激原(榄香烯、丝裂霉素-C)诱导的H22和L615肿瘤细胞的HSP70－肽复合物，并用之免疫Balb/c和615小鼠，进行体内抗瘤免疫效应的研究。透射电镜显示，榄香烯或热休克处理都能引起2种肿瘤细胞的凋亡和坏死，L615白血病细胞较H22肝癌细胞更敏感，形态学变化更剧烈；流式细胞术检测进一步证明，榄香烯与热休克都能诱导2种肿瘤细胞发生凋亡，两者复合作用更能促进肿瘤细胞的凋亡，在一定范围内L615细胞凋亡与榄香烯的浓度和热休克的时间呈明显的依赖关系；用榄香烯或MMC诱导的2种肿瘤细胞分离纯化的HSP70－肽复合物给Balb/c和615小鼠进行主动免疫，免疫组小鼠在1个月内全部存活。而buffer D免疫对照组小鼠无一存活。     

茶多酚复方制剂抑瘤效果试验

为探讨茶多酚复方制剂对荷瘤小鼠的抑瘤效果及可能的机制，采用动物移植性肿瘤试验法，建立荷瘤（S180）小鼠模型，用茶多酚复方制剂治疗10d后，处死后剥离肿瘤，测试抑瘤率．观察肿瘤组织HE染色切片的肿瘤细胞凋亡情况，并提取肿瘤细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳．结果表明，药物组的抑瘤率达26．5％，并能使肿瘤切片出现大量细胞发生凋亡特征性改变．琼脂糖凝胶电泳，从电泳带可见到细胞发生凋亡的特征性DNA梯状条带．茶多酚复方制剂可以抑制荷瘤小鼠肿瘤生长，有明显的抑瘤作用，其抑瘤机制与诱导肿瘤细胞凋亡的机理有关．     

纳米硒对小鼠学习记忆能力的影响

用亚硒酸钠和纳米硒两种硒源分别以每只1、2、4μg/d(以Se计)的水平对小鼠进行灌胃,运用Y型迷宫试验测试纳米硒对小鼠学习记忆能力的影响,并测定各组小鼠血清中的过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)等抗氧化指标来确定其抗氧化能力。结果表明,纳米硒3个剂量组小鼠的学习记忆成绩均有明显提高,血清CAT活性、GSH-Px活性及T-AOC明显升高,MDA含量显著降低,且均优于同剂量的亚硒酸钠组。可见,纳米硒能提高小鼠的学习记忆能力,且效果优于传统硒源亚硒酸钠,其作用机制可能是通过增强机体抗氧化能力来实现的。     

硒对砷致雄性小鼠睾丸组织损伤的修复作用

为了研究硒对砷致雄性小鼠睾丸组织损伤的修复作用,试验选取雄性小鼠18只,随机分为3组,分别为:正常组(C组)、加砷组(砷的饮水质量分数为50 mg/kg,A组)和硒砷联合组(砷的饮水质量分数为50 mg/kg,硒的灌胃量0.5 mg/kg,A+Se组),测量小鼠和睾丸组织的质量,检测抗氧化指标以及睾丸的组织形态和细胞凋亡。结果表明,A组小鼠食欲下降,生长迟缓,出现严重掉毛现象;砷染毒小鼠经硒联合作用后,A+Se组小鼠饮食活动正常,生长发育状态良好,C组和A+Se组小鼠体质量显著高于A组小鼠,A+Se组小鼠睾丸组织质量显著高于A组;A+Se组小鼠血清和睾丸组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化力(T-AOC)的活性极显著高于A组,显著高于C组,A+Se组小鼠血清中丙二醛(MDA)含量显著高于C组,极显著低于A组;砷染毒并加硒的A+Se组,各级生精细胞的数量都较A组有所增加,形态结构也比较完整;A+Se组睾丸组织中的细胞凋亡数极显著低于A组,凋亡只发生于精原细胞,初级精母细胞和睾丸间质细胞没有发生细胞凋亡。硒对砷的毒性起到明显拮抗作用,能够有效修复砷致小鼠睾丸组织的损伤。     

IL-18基因转染对大鼠胶质瘤体内生长及肿瘤细胞凋亡的影响

目的分析转染外源性IL-18基因后9L胶质瘤细胞体内成瘤及对肿瘤细胞凋亡的影响。方法用立体定向技术将体外用逆转录病毒转染IL-18基因的9L胶质瘤细胞(9L/IL-18)、转染空载体的9L胶质瘤细胞(9L/LXSN)及未转染的9L细胞接种到F344大鼠颅内建立实验动物模型,观察各组细胞对大鼠的致瘤性,计算成瘤率;原位末端标记法(TUNEL法)检测肿瘤组织中肿瘤细胞凋亡情况,计算各组肿瘤细胞的凋亡率;RT-PCR和Westen Blot法检测肿瘤组织中Bax和Bcl-2的表达。结果三组大鼠成瘤率均为100%;TUNEL法检测结果显示,接种9L/IL-18细胞组肿瘤组织内出现大量凋亡细胞,凋亡率为(22.2±1.02)%,明显高于接种9L/LXSN[(5.7±0.32)%]及9L[(6.4±0.51)%]细胞组(P0.05);接种9L/IL-18细胞组肿瘤组织中Bax的表达较其他两组升高,Bcl-2的表达较其他两组降低。结论 9L胶质瘤细胞转染外源性IL-18基因后,可通过上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达促进肿瘤细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用。     

贵州凤岗富锌富硒绿茶对小鼠抗氧化抗衰老作用的研究

[目的]采用分子生物学技术,探讨贵州凤岗富锌富硒绿茶对小鼠抗氧化、抗衰老的作用及机制。[方法]腹腔注射D-半乳糖建立小鼠衰老模型,空白组给予腹腔注射0.9%生理盐水。造模14 d后,根据中国营养学会推荐每日饮茶量及实验动物药物剂量比例,给小鼠灌胃富锌富硒绿茶,1次/d。连续灌胃21 d后,采用Morris水迷宫进行行为学实验。处死小鼠,采用蛋白免疫印迹法(western-blotting)检测各小鼠肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的表达。采取RT-PCR法,测定各小鼠肝脏组织中SOD和GSH-Px的mRNA转录水平。[结果]富锌富硒绿茶对衰老小鼠学习记忆能力有一定的改善作用,并且提高SOD和GSH-Px的mRNA及蛋白质表达水平(P0.01)。[结论]富锌富硒绿茶提高机体的抗氧化能力及免疫功能,在一定程度上具有延缓衰老的作用。     

富硒女贞子对热应激卵巢细胞的影响

以42℃作为热应激模型温度、37℃作为对照温度,于42℃培养的卵巢细胞中分别添加富硒女贞子水煎液、齐墩果酸、蛋白质和多糖,采用四唑盐(MTT)法检测细胞增殖活性、流式细胞仪检测细胞凋亡、黄嘌呤氧化酶法检测细胞培养上清中超氧化物歧化酶(SOD)活性,探讨富硒女贞子及其主要成分对高温体外培养卵巢细胞生长、凋亡及抗氧化功能的影响。结果表明:富硒女贞子水煎液及多糖能显著提高热应激状态下卵巢细胞的增殖活性(P0.05)、显著降低细胞的凋亡率(P0.05)、显著提高细胞培养上清中SOD活性(P0.05),且富硒女贞子效果明显优于女贞子;富硒女贞子蛋白质及齐墩果酸效果并不显著。说明富硒女贞子水煎液、多糖对热应激引起的卵巢细胞增殖活性降低及细胞凋亡有明显的改善作用,并能提高卵巢细胞的抗氧化功能。     

富硒沼泽红假单胞菌对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化系统的影响

用沼泽红假单胞菌和富硒沼泽红假单胞菌灌喂衰老模型小鼠(用D-半乳糖制备),60 d后检测小鼠血液、血清、肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力和丙二醛(MDA)含量及T-AOC能力。结果表明:富硒沼泽红假单胞菌可显著提高D-半乳糖衰老模型小鼠血液、血清、肝组织SOD活力、GPX-PX活力,使T-AOC能力明显增高,使衰老小鼠体内MDA含量明显下降。富硒沼泽红假单胞菌可显著提高D-半乳糖衰老模型小鼠的抗氧化能力。     

Study on the Antitumor Effects of Low—energy Laser Irradiation Combined with Cyclophosphamide

1　Introduction　　 Surgery,irradiation and chemical treatment are three main therapies in treating cancers,and thesethree treatments usually combined together to obtain better effects,but irradiation and chemical treatmentcan cause immunosuppressive effects.The relationship between tumor,body,irradiation and chemical treat-ment is very complicated.How to protect immunity of the body and kill tumor at the most has become akey problem in treating malignanttumor.It was proved that proper dosages…     

Therapy-induced acute recruitment of circulating endothelial progenitor cells to tumors

The contribution of bone marrow-derived circulating endothelial progenitor cells (CEPs) to tumor angiogenesis has been controversial, primarily because of their low numbers in blood vessels of untreated tumors. We show that treatment of tumor-bearing mice with vascular disrupting agents (VDAs) leads to an acute mobilization of CEPs, which home to the viable tumor rim that characteristically remains after such therapy. Disruption of this CEP spike by antiangiogenic drugs or by genetic manipulation resulted in marked reductions in tumor rim size and blood flow as well as enhanced VDA antitumor activity. These findings also provide a mechanistic rationale for the enhanced efficacy of VDAs when combined with antiangiogenic drugs.     

Immunologic enhancement of tumor xenografts by pepsin-degraded immunoglobulin

The serums from guinea pigs previously injected with mouse Ehrlich ascites tumor cells were fractionated to obtain gamma(2)-immunoglobulin. This immunoglobulin was degraded with pepsin to obtain an F(ab')(2) fragment. Fresh tumor cells were incubated with immunoglobulin or the fragment and injected into normal guinea pigs. The growth of these cells as tumor xenografts was inhibited by the gamma(2)-immunoglobulin and enhanced by the F(ab')(2) fragment. Similar incubation of tumor cells with normal guinea pig gamma(2)-globulin or its derived F(ab')(2) fragment did not alter subsequent tumor growth.     

Tumor regression by targeted gene delivery to the neovasculature

Efforts to influence the biology of blood vessels by gene delivery have been hampered by a lack of targeting vectors specific for endothelial cells in diseased tissues. Here we show that a cationic nanoparticle (NP) coupled to an integrin alphavbeta3-targeting ligand can deliver genes selectively to angiogenic blood vessels in tumor-bearing mice. The therapeutic efficacy of this approach was tested by generating NPs conjugated to a mutant Raf gene, ATPmu-Raf, which blocks endothelial signaling and angiogenesis in response to multiple growth factors. Systemic injection of the NP into mice resulted in apoptosis of the tumor-associated endothelium, ultimately leading to tumor cell apoptosis and sustained regression of established primary and metastatic tumors.     

茶氨酸溴香酰胺对人宫颈癌细胞体内外生长的抑制作用

将茶氨酸为母体合成的茶氨酸衍生物茶氨酸溴香酰胺(TBrC)与茶氨酸作比较,评估茶氨酸溴香酰胺对人宫颈癌细胞体内外生长的抑制作用与其分子机制。应用MTT等方法检测不同浓度的TBrC对人宫颈癌细胞体外生长的影响,运用蛋白质印迹法检测解析这些人宫颈癌细胞中与凋亡和生长密切相关蛋白的表达和药物可能的作用靶点。此外,通过建立动物肿瘤模型,评价TBrC对荷瘤裸鼠人宫颈癌生长的抑制效果。实验结果显示,TBrC抑制人宫颈癌细胞体内外生长的活性超过其母体化合物茶氨酸多倍,对小鼠生长无明显毒性;TBrC作用的分子机制之一可能与抑制VEGFR1-Bcl-2/Bax信号传导通路相关。研究结果提示,TBrC具有广泛应用于临床治疗和(或)辅助治疗人宫颈癌和其他癌症的潜力。     

迷果芹粗多糖(SGS)药理学活性的初步研究

[目的]研究迷果芹粗多糖(SGS)对荷瘤(肝癌H22)小鼠的影响。[方法]用小鼠建立体内肿瘤模型,通过动物试验研究SGS对荷瘤小鼠体重的影响及对小鼠方向辨别障碍的保护作用。[结果]阳性对照药环磷酰胺明显增加了荷瘤小鼠瘤体重量,减轻了小鼠体重;SGS对荷瘤小鼠瘤体重量无明显影响,其3个剂量组的小鼠体重增长均明显高于阳性对照药环磷酰胺组。说明SGS对小鼠没有明显的副作用,或者说与阳性对照药环磷酰胺组相比,毒副作用较小。3个剂量组小鼠的胸腺指数和脾指数均高于环磷酰胺组,但无统计学意义。SGS的所试剂量对小鼠方向辨别障碍有一定的保护作用,但无统计学意义。[结论]SGS的毒副作用小且能增强机体的免疫力。     

Extracellular acidosis protects Ehrlich ascites tumor cells and rat renal cortex against anoxic injury

The present study indicates that extracellular acidosis protects Ehrlich ascites tumor cells and rat kidney cortex cells against injury from anoxia. Parameters measured included cell potassium, adenosine 5'-triphosphate, and uptake of vital dyes. Cells survived longer at a pH of 5.6 to 6.5 than at a pH of 7.4; pH 7.9 was most detrimental. These findings indicate that production of protons by anoxic cells may be a protective feedback mechanism.     

牛蒡子醇提物抑制小鼠宫颈癌U14生长的研究

通过建立小鼠宫颈癌U14实体瘤与腹水瘤2种动物模型,观察牛蒡子醇提物对实体瘤抑瘤率和腹水瘤生命延长率的影响。结果发现,以阴性对照组为基础,牛蒡子醇提物3个剂量组及环磷酰胺(CTX)阳性对照组实体瘤各组抑瘤率分别为31.7%、49.7%、57.4%和83.6%(P<0.01);腹水瘤各组生命延长率分别为39.8%、46.6%、62.5%和91.6%(P<0.01)。表明牛蒡子醇提物对小鼠宫颈癌U14的生长有一定的抑制作用。     

鬼针草90%醇提物对U14荷瘤小鼠的抑瘤效应

以U14细胞株接种小鼠制成荷瘤模型,研究鬼针草90%醇提物对荷瘤小鼠的抑瘤效应.结果表明,90%鬼针草醇提物通过提高机体免疫力抑制小鼠肿瘤生长.     

豆类丝核菌次级代谢产物与阿霉素在小鼠体内联合抑瘤作用

探讨豆类丝核菌次级代谢产物与阿霉素(ADR)对小鼠肉瘤的体内联合抑制作用.建立小鼠肉瘤S180动物模型,分别用豆类丝核菌次级代谢产物、阿霉素、两药联合进行处理.计算抑瘤率、脾指数,测定小鼠T淋巴细胞活化指数、腹腔巨噬细胞吞噬活性,并对小鼠进行病理学观察.试验结果表明,两药联合能提高抑瘤率,次级代谢产物能显著提高小鼠的脾指数,使T淋巴细胞活化指数升高,腹腔巨噬细胞吞噬活性增强,同时能使瘤细胞密度降低,瘤组织出现大量变性坏死.豆类丝核菌次级代谢产物具有免疫增强作用,该产物与阿霉素联合对抑制小鼠移植性肉瘤S180具有相加作用.