亮菌菌索多糖脱蛋白方法研究

[目的]得到最佳的去除亮菌菌索糖复合物蛋白的方法。[方法]分别用Sevag法、酶法、三氯乙酸脱法、酶法与Sevag法结合法去除亮菌菌索糖复合物蛋白,筛选最佳脱蛋白方法。[结果]酶法与Sevag法结合脱蛋白的效果好,这时蛋白质含量仅为0.18%;酶法的最佳的条件：酶用量为0.5%,温度为40℃,水浴时间为0.5h,pH为6。[结论]酶法与Sevag法结合法是较好的脱蛋白法。     

绣球菌水溶多糖的提取及其抑菌效果

[目的]从绣球菌中提取水溶多糖,研究其抑菌的效果,为绣球菌的开发利用提供试验依据。[方法]采用水煮醇沉法获得绣球菌水溶粗多糖,并采用三氯乙酸法对其进行脱蛋白后,通过滤纸片法和平板打洞法研究水溶粗多糖与脱蛋白后多糖的抑菌效果。[结果]水溶粗多糖含量与得率分别为28.5%、3.0%;脱蛋白后糖含量与得率分别为48.9%、2.2%。绣球菌水溶多糖与去蛋白多糖对大肠杆菌抑菌效果明显,滤纸片法去蛋白多糖最小抑菌浓度低于1.6 mg/ml;平板打洞法去蛋白多糖最小抑菌浓度低于25 mg/ml,对酿酒酵母、根霉菌、黑曲霉具有抑菌效果;去蛋白水溶多糖抑菌效果较水溶粗多糖好。[结论]绣球菌水溶多糖对不同菌具有不同的抑菌效果。     

阿胶粗多糖脱蛋白方法比较及抑制酪氨酸酶活性研究

[目的]研究阿胶多糖的分离提纯工艺及其抑制酪氨酸酶活性。[方法]针对阿胶多糖提取中蛋白质的干扰,通过对几种脱蛋白方法(TCA法、Sevage法、蛋白酶法)的比较,优选出阿胶多糖提取液的脱蛋白方法,并探讨阿胶多糖对酪氨酸酶的抑制作用。[结果]TCA法、Sevage法及蛋白酶法的脱蛋白率分别为78.94%、87.73%和29.97%,多糖保留率分别为73.96%、32.14%和72.57%。所得阿胶多糖对酪氨酸酶有一定的抑制作用,当浓度为1 mg/mL时,抑制率为24.42%。[结论]TCA法脱蛋白率较高、多糖损失率较低,筛选方法可有效去除阿胶粗多糖中的蛋白,所得阿胶多糖具有良好的抑制酪氨酸酶作用。     

桑黄多糖脱蛋白方法与条件的优化

[目的]对桑黄多糖提取液中的蛋白质去除方法和条件进行了优化,并比较了2种方法对蛋白质去除的影响。[方法]采用Sevag法与三氯乙酸（TCA）法去除桑黄多糖中的游离蛋白质。[结果]三氯乙酸法去除蛋白质的效果优于Sevag法,其最佳脱蛋白条件为：5%三氯乙酸用量,处理3次,反应时间30min,。在此条件下,蛋白质去除率为82%,多糖损失率为10.8%。[结论]TCA法为最佳的桑黄多糖脱蛋白方法。     

酶-Sevag法除酸浆果实多糖蛋白工艺的研究

[目的]优化木瓜蛋白酶-Sevag法去除酸浆(Physalis alkekengi L.)果实多糖中蛋白质的工艺条件。[方法]以蛋白脱除率和多糖保留率为指标,通过对酶解温度、时间、p H及酶添加量进行单因素试验及L9(34)正交试验确定酶解条件,并结合Sevag试剂除蛋白。[结果]各因素对酶解法脱酸浆果多糖液蛋白的影响程度大小依次为:酶解温度、酶解时间、p H、酶添加量。在酶解温度60℃、酶解时间2.0 h、p H 6.0、酶添加量2.5%条件下,粗多糖液蛋白脱除率为62.07%,多糖保留率为93.16%。原料经酶处理后,可使游离蛋白和部分与多糖结合的蛋白质被水解,再经Sevag试剂(氯仿∶正丁醇为4∶1)处理2次,蛋白质脱除率为81.65%,多糖保留率为89.43%,可达到较理想的脱蛋白质效果和较高的粗多糖保留率。[结论]采用酶和Sevag试剂相结合的方法除酸浆果多糖中的蛋白质,效果良好,操作简单,可为酸浆果多糖的纯化提供理论依据,但其对多糖结构和生物活性的影响还有待于进一步研究。     

玉米须多糖sevag法脱蛋白的方法研究

[目的]优化玉米须多糖sevag法脱蛋白质的工艺条件。[方法]在单因素试验基础上,通过4因素3水平正交试验研究脱蛋白质工艺。4因素为正丁醇与氯仿体积比、多糖样液与sevag试剂体积比、振荡时间和脱蛋白次数。[结果]最优脱蛋白工艺为氯仿与正丁醇比5∶1,样液与试剂比2∶1,振荡时间8min,脱蛋白次数4次。[结论]在最佳脱蛋白条件下,蛋白脱除率为64.2%,多糖损失率为34.3%,多糖纯度由11.5%提高为32.3%。     

刺梨果多糖提取过程中脱蛋白和脱色方法研究

[目的]筛选出梨果粗多糖水提醇沉过程中最佳的蛋白质和色素的脱除方法。[方法]以蛋白质脱除率、多糖保留率以及数据加权平均法构成的综合评分为评价指标,选用三氯乙酸法、三氯乙酸-Sevage法、三氯乙酸-正丁醇法、Sevage法、木瓜蛋白酶法、木瓜蛋白酶-Sevage法、木瓜蛋白酶-三氯乙酸法、木瓜蛋白酶-三氯乙酸-正丁醇法和盐酸法9种脱蛋白方法对刺梨果粗多糖水提物的脱蛋白效果进行对比;同时在单因素试验的基础上,通过正交试验优化三氯乙酸-正丁醇法对刺梨果粗多糖水提物的脱蛋白工艺条件。并以脱色率和多糖保留率为评价指标,比较过氧化氢溶液与活性炭粉末对刺梨果多糖水提物的脱色效果。[结果]三氯乙酸-正丁醇法脱蛋白效果最佳,三氯乙酸-正丁醇法脱蛋白的最佳工艺条件为样液与试剂体积比为1∶2、三氯乙酸与正丁醇体积比为1∶10、振荡时间为60 min,此时脱蛋白率为78.64%,多糖保留率为86.59%。活性炭粉末对刺梨果粗多糖的脱色素和多糖保留率均优于过氧化氢溶液。[结论]该试验优选出的方法具有实际可操作性,可有效脱除刺梨果粗多糖中的蛋白质和色素,最终确定三氯乙酸-正丁醇法和活性炭粉末作为刺梨果多糖初步纯...     

粒毛盘菌多糖脱蛋白方法及其条件优化

分别采用Sevage法、三氯乙酸-正丁醇(TCA-NBA)法、酶-Sevage法以及酶-TCA-NBA法对粒毛盘菌YM281胞外多糖进行脱蛋白。结果表明:用酶-TCA-NBA法对粒毛盘菌YM281胞外多糖脱蛋白的效果最佳,蛋白脱除率为51.57%,且此时多糖损失率(3.46%)为最低;进一步采用均匀设计优化该方法的脱蛋白条件,所得最优脱蛋白条件为:粒毛盘菌YM281多糖溶液20mL、木瓜蛋白酶溶液11mL、温度42.2℃、pH 4、酶解时间3.5h;除去变性蛋白后,再利用TCA-NBA法脱蛋白2次即可;采用所得的最优方法和条件脱蛋白,其蛋白脱除率高达72.3%,多糖损失率仅为2.93%。     

不同方法对红托竹荪多糖的脱蛋白效果

为保证多糖的药理活性,以蛋白脱出率和多糖损失率为考察指标,比较Sevag法、TCA法、木瓜蛋白酶法和酶-Sevag联用法对红托竹荪粗多糖脱蛋白的效果。结果表明:木瓜蛋白酶法脱蛋白效果最佳,其最佳脱蛋白条件为木瓜蛋白酶浓度4%、酶解温度55℃、酶解时间3h,酶液pH 6.0,在此条件下,蛋白脱出率为77.97%,多糖损失率为19.31%。该法用于脱除红托竹荪多糖蛋白质的工艺简单,成本低,具有一定的应用价值。     

铁皮石斛多糖Sevage法脱蛋白效果分析

采用纤维素酶与果胶酶等量混合酶解法提取铁皮石斛多糖,分析Sevage法脱多糖溶液蛋白效果。结果表明,Sevage法脱多糖溶液蛋白1次,脱蛋白率为21.9%,多糖损失率为28.3%;脱蛋白2次或2次以上,脱蛋白率提高不明显,但多糖损失严重,损失率高达56.6%-62.1%。因此,铁皮石斛多糖Sevage法脱除蛋白次数以1次为宜。     

DPPH检测碱提香菇菌丝体多糖的抗氧化性能研究

[目的]探讨碱提香菇菌丝体粗多糖抗氧化能力的影响因素。[方法]按Sevag法去除粗多糖中蛋白质,以考马斯亮蓝法、苯酚-硫酸法和DPPH法分别测定碱提香菇菌丝体粗多糖在脱蛋白过程中多糖含量、蛋白含量和清除自由基能力的变化。[结果]碱提香菇菌丝体水溶性多糖经Sevag洗脱后,多糖含量降低了33.10%;蛋白含量降低了97.08%;自由基清除率降低了74.38%。[结论]碱提香菇菌丝体多糖具有较高的抗氧化能力,并与其糖蛋白浓度成正相关,过分脱除香菇菌丝体多糖提取物结合态蛋白会降低其抗氧化活性。     

石斛粗多糖脱蛋白方法的研究

[目的]研究石斛多糖中蛋白质的有效去除方法。[方法]以蛋白脱除率和多糖损失率作为检测指标,考察3种不同方法对石斛粗多糖液去除蛋白质的效果。[结果]三氯乙酸法脱蛋白效果最好,且其多糖损失率最低。[结论]该方法简单、易行,适合于石斛粗多糖中蛋白质的去除。     

榴莲壳多糖微波提取及脱蛋白方法

[目的]优化榴莲壳多糖的微波提取及脱蛋白最佳工艺。[方法]采用L9(34)正交试验,以多糖含量为评价指标,利用苯酚-硫酸法测定多糖的含量,确定多糖的提取工艺;以脱蛋白率与多糖损失率为指标,选择最佳脱蛋白方法。[结果]最佳提取工艺为料液比1∶30g/ml,微波功率450 W,提取时间6 min,提取次数为1次;三氯乙酸法(TCA)为最佳脱蛋白方法。[结论]优化后的工艺条件稳定可行,可为榴莲壳多糖工业化生产提供理论依据。     

玉米须多糖的提取及脱蛋白研究

[目的]比较不同时期玉米须多糖含量的差异及蛋白质的纯化。[方法]采用热回流法提取多糖及木瓜蛋白酶除去蛋白质。通过单因素和正交试验找到木瓜蛋白酶的最优条件。[结果]吉林和松原乳熟期多糖含量为9．87％、10．15％,成熟期为4．85％、4．55％,乳熟期平均产率花柱为7．90％,柱头为12．58％,成熟期平均产率花柱为4．91％,柱头为3．51％。酶水解正交试验最优条件：酶底比1．00％,pH值5．5,体系在水浴中水解1．5h,温度为40℃。[结论]乳熟期多糖含量高于成熟期;乳熟期柱头含量最高,酶法可作为玉米须多糖的脱蛋白的工艺,除蛋白率60．31％,损失率为14．71％。     

红稗多糖的分离纯化工艺

为研究红稗粗多糖不同的脱蛋白工艺,并确定DEAE-52纤维素交换层析柱纯化分离红稗多糖的最优条件。用Sephadex G-100柱层析分离纯化得到的红稗多糖并采用柱前衍生化高效液相色谱法对纯化后的红稗精多糖的单糖组成种类进行测定。结果表明:红稗粗多糖的最佳上样浓度为5 mg/mL,洗脱速度0.5mL/min,上样体积25mL;采用Sevage法除蛋白3次,得到的蛋白清除率以及多糖保存率均较高,通过DEAE-52纤维素的柱层析分离纯化后可得到大组份多糖;再由Sephadex G-100柱层析分离纯化得到的大组份红稗中性多糖;再利用柱前衍生化高效液相色谱法(HCLP)测定分离纯化后的红稗多糖主要由L-鼠李糖(rhamnose,Rham)、D-葡萄糖醛酸(glucuronic acid,Glu)和葡萄糖(glucose,Glc)3种单糖组成。     

不同生态型云南引种玛咖的多糖含量及多糖纯化工艺研究

[目的]探讨不同生态型玛咖中的活性成分总多糖含量间的差异,并研究玛咖多糖的提取工艺.[方法]苯酚-硫酸法分别测定了云南丽江地区引种的4种生态型的玛咖块根中的多糖含量,并进行分析比较.玛咖多糖的基本纯化步骤为水提、醇沉、脱蛋白、脱色.[结果]依照颜色不同而划分为4种不同生态型的玛咖中总多糖含量有所不同,几种玛咖块根的总多糖含量顺序为黑色＞紫色＞绿色＞黄色.多糖纯化的最优方法为80％乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白.[结论]玛咖多糖的含量与其生态型有一定的关系,因此不同生态型的玛咖,其生理活性可能有一定的差别.     

复合酶法提取大青叶多糖的工艺研究

[目的]优化大青叶多糖的提取工艺。[方法]以山东大青叶为材料,采用复合酶（纤维素酶、果胶酶、胰蛋白酶）水解、乙醇沉淀法提取其中的多糖,并通过正交试验确定复合酶的最佳配比及浸提温度、浸提时间、pH值等对多糖得率的影响。[结果]复合酶的最佳配比为：纤维素酶1.5%,果胶酶2.0%,胰蛋白酶1.5%;最佳反应条件为温度40℃,pH值5,时间90min,此条件下大青叶多糖的平均得率为18.24%。[结论]该研究确定了复合酶法提取大青叶多糖的最佳工艺。