硫酸化香菇多糖对新城疫疫苗免疫效果的影响

试验Ⅰ:免疫应答试验:取450只雏鸡随机均分为9组,在14日龄用新城疫Ⅳ系疫苗免疫,同时分别肌肉注射高、低剂量的3种硫酸化香菇多糖(sLNT_1、sLNT_2、sLNT_3)和香菇多糖(LNT)。分别于首免前和首免后连续6周检测血清HI抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖的动态变化。试验Ⅱ:免疫保护试验:取350只雏鸡随机均分为7组,除非免疫组外其余组用新城疫Ⅳ系疫苗免疫,同时3个sLNT组和LNT组分别注射sLNT_1、sLNT_2、sLNT_3和LNT。于免疫后第21天,除无佐剂对照组第2组外各组鸡均肌肉注射NDV强毒攻毒,观察保护效果,并分别于攻毒前和攻毒后第3、6、9、12和15天测定血清HI抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖的动态变化。结果表明:3种sLNT在首免后28 d内比LNT显著提高血清抗体效价最高2个滴度(高剂量的效果优于低剂量),促进淋巴细胞增殖(低剂量的效果强于高剂量);攻毒鸡发病率和死亡率降低,保护率提高最多达17.5%,加速攻毒后血清抗体生成和T淋巴细胞增殖,病鸡最快可以在攻毒后6 d恢复正常。综合评价以sLNT_2的效果最好。揭示:硫酸化修饰能显著提高LNT的免疫增强活性,增强新城疫疫苗的...     

Trap抗原诱导细胞免疫对S.aureus免疫保护作用的研究

金黄色葡萄球菌(S.aureus)是奶牛乳房炎的主要致病菌.实验利用S.aureus的Trap基因构建Trap/PET-32a表达质粒,IPTG诱导表达后柱层析纯化Trap蛋白,与弗氏佐剂混合制备疫苗,小鼠肌肉免疫,二免后7 d,分离小鼠脾细胞,经Trap抗原刺激后检测细胞因子,二免后14 d,小鼠眼球采血制备血清检测...     

不同剂量双表达蛋白VP2-IL-18免疫原性的比较

【目的】基于IL-18具有双向免疫调节作用,摸索利用Bac-to-Bac系统双表达的蛋白VP2-IL-18的最佳免疫增强剂量。【方法】采用腿部肌肉多点注射方法将不同剂量VP2-IL-18免疫14日龄SPF鸡,14 d后加强免疫1次;一免后第0、7、14、21、28和35天采集外周血检测ELISA抗体效价和CD4~+T、CD8~+T细胞的数量;一免后第35天用vvIBDV-GX8/99毒株进行攻毒。【结果】各剂量VP2-IL-18免疫雏鸡后均能提高抗体滴度,促进CD4~+T和CD8~+T淋巴细胞增殖以及提高攻毒保护率,且200μg VP2-IL-18免疫组效果最佳,要优于低剂量免疫组和高剂量免疫组,差异显著(P0.05)。【结论】VP2-IL-18具有良好的免疫原性,且200μg为最佳免疫剂量,不呈现高剂量依赖。     

紫锥菊提取物对环磷酰胺免疫抑制小鼠免疫功能影响研究

将雄性小鼠150只随机分成正常对照组、免疫抑制对照组、紫锥菊提取物高、中、低剂量组,每组3个重复,每个重复10只。除正常对照组外,各组小鼠连续3 d腹腔注射100 mg·kg~(-1)BW环磷酰胺,建立免疫抑制模型小鼠。建模后高、中、低剂量组分别以240、120、60 mg·kg~(-1)BW水平,正常对照组和免疫抑制对照组给予等量的纯化水,连续灌胃给药30 d。结果表明,中、高剂量组小鼠碳廓清能力与免疫抑制组比较有显著性增高(P0.05);各剂量组免疫器官指数有显著性增高(P0.05);中、高剂量组血清溶血素值有显著性提高(P0.05),高剂量组脾淋巴细胞增殖转化能力有显著性增强(P0.05)。说明紫锥菊提取物具有调节免疫抑制小鼠非特异性和特异性免疫的作用,是一种效果极好的免疫调节剂。     

丹参水提取液在小鼠体内抑菌效果及大肠杆菌感染的预防作用

【目的】通过对小鼠灌服一段时间的丹参水提取液,研究丹参对小鼠的体内抑菌效果,丹参水提取液对作用于大肠杆菌O_(101)的小鼠的预防效果,从而探讨丹参在体内的抗菌作用。【方法】用试验动物小鼠验证丹参的体内抑菌作用,对灌服不同时间段丹参水提取液小鼠的肠道内容物进行细菌计数,同时观察小鼠体质量增加、脾脏指数、肝脏指数等指标与灌服丹参水提取液之间的关系;同时通过对饲喂一段时间丹参水提取液的小鼠进行大肠杆菌O_(101)攻毒试验,进行体内抑菌试验,通过观察小鼠的存活率以及攻毒后肠道菌群计数判定丹参水提取液的体内抑菌效果。【结果】丹参水提取液提高了小鼠的生长性能,中剂量组、高剂量组体质量增加效果差异极显著(P0.001);中剂量组、高剂量组对乳酸杆菌的增菌效果差异显著(0.001P0.01)或极显著(P0.001);高剂量组对金黄色葡萄球菌抑菌作用极显著(P0.001)、高剂量组对大肠杆菌抑菌作用极显著(P0.001);对大肠杆菌感染具有防护作用。对饲喂28 d丹参水提取液的小鼠进行大肠杆菌O_(101)攻毒,空白组死亡6只,低剂量组死亡4只,中剂量组死亡3只,高剂量组死亡4只。【结论】丹参水提取液有增加肠道内乳酸杆菌数量并减少大肠杆菌和金黄色葡萄球菌数量的趋势,对其成长性能,免疫器官发育都有促进作用。攻毒后小鼠的盲肠内容物菌群分别有促进或抑制的作用,对益生菌起到促进作用,对病原菌起到抑制的作用,同时减少小鼠死亡数量。     

卵清蛋白特异性免疫耐受的诱导及鉴定

【目的】建立对卵清蛋白(OVA)免疫耐受的Babl/c小鼠模型。【方法】分别设立A、B、C、D、E、F试验组及相应对照组。A、B组小鼠口服OVA,隔天1次,共服5次,口服剂量分别为50或100μg/只;C、D、E、F组小鼠经尾静脉注射OVA 1次,剂量分别为5,10,50和100μg/只;分别于口服完成7 d后或尾静脉注射5 d后免疫小鼠,免疫后15 d,MTT法测定小鼠OVA特异性淋巴细胞增殖情况,间接ELISA测定小鼠血清抗OVA的IgG水平。C、D组小鼠分别进行二、三次免疫并检测抗体。【结果】A、B组小鼠淋巴细胞增殖的刺激指数(Simulate index,SI)分别为0.603±0.03和0.715±0.08,增殖效果不佳;C、D组小鼠SI值分别为0.096±0.01和0.083±0.01,淋巴细胞不增殖;E、F组小鼠淋巴细胞增殖效果与正常小鼠无差异。第一次免疫后,各组小鼠OVA抗体效价与相应对照组小鼠的OVA抗体无显著差异;C、D组在二免、三免后抗体水平持续下降,不呈现再次应答规律。【结论】小鼠口服小剂量OVA可以建立不完全细胞免疫耐受,经尾静脉注射小剂量OVA可以建立完全免疫耐受。     

牛乳源金黄色葡萄球菌ClfA与FnBPA-A重组质粒小鼠免疫保护效果分析

为比较金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)重组质粒ClfA、FnBPA-A以不同组合方式和不同剂量免疫昆明小鼠的免疫效果。提取构建的ClfA、FnBPA-A重组质粒,分别以不同组合和不同剂量免疫昆明小鼠。通过ELISA法检测血清中抗体水平、效价以及对S.aurues的识别能力;通过攻毒后的免疫保护力、脏器菌体含量以及病理组织学观察评价不同免疫策略的免疫效果。结果显示ClfA、FnBPA-A以及联合组免疫后均能产生有效免疫应答和免疫保护力。各项免疫指标的检测均显示联合免疫组的免疫效果优于ClfA、FnBPA-A单独免疫组,高剂量免疫组的免疫效果优于低剂量免疫组。高剂量联合免疫组抗体效价可达1∶12 800,高于其他免疫组,免疫保护力可达100%。脏器菌体含量以及病理组织学观察结果也表明高剂量联合免疫组(ClfA+FnBPA-A)有较强抵抗S.aurues感染的能力。     

复方人参皂苷纳米乳对OVA接种小鼠免疫功能的影响

旨在研究口服复方人参皂苷纳米乳对抗原免疫效果的影响。将小鼠分为正常对照组、卵清白蛋白(OVA)对照组、空白纳米乳组、盐酸左旋咪唑纳米乳组、人参皂苷纳米乳组、人参皂苷-盐酸左旋咪唑水溶液组和复方人参皂苷纳米乳组(高、中、低剂量),皮下注射OVA抗原2次,在首次和第2次注射前3d连续灌胃给药,第2次注射后14d,测定血清(IgG、IgG1和IgG2a)抗体水平、脾细胞因子(IFN-γ和IL-4)水平以及脾淋巴细胞增殖刺激指数。结果表明,复方人参皂苷纳米乳中剂量(50mg·kg-1)组IL-4、IgG和IgG1水平显著或极显著高于复方人参皂苷纳米乳低剂量组和盐酸左旋咪唑纳米乳组,IFN-γ、IgG2a及OVA诱导脾淋巴细胞增殖刺激指数显著或极显著高于人参皂苷纳米乳组、人参皂苷-盐酸左旋咪唑水溶液组、盐酸左旋咪唑纳米乳组、复方人参皂苷纳米乳高剂量组和低剂量组。口服复方人参皂苷纳米乳能诱导OVA免疫小鼠产生Th1/Th2混合型免疫反应,表明人参皂苷和盐酸左旋咪唑能协同增强小鼠的细胞免疫和体液免疫功能。     

鸽源大肠杆菌油乳剂灭活疫苗免疫原性

评价了按1:3油包水比例制成的多价大肠杆菌油乳剂灭活疫苗在鸽体内的免疫原性.将75只4周龄雏鸽分为5组,第1组及第2组分别经颈部皮下接种0.5 ml疫苗,于8周龄用同源菌株经气囊攻毒;第3组及第4组鸽不免疫,用大肠杆菌攻毒对照;第5组作为阴性对照.用低剂量菌液攻毒后,没有免疫鸽死亡,而低剂量攻毒对照组死亡率20%;而用高剂量菌液攻毒后,免疫鸽死亡率为13.3%,未免疫鸽高剂量攻毒死亡率为60%;免疫鸽在气囊、肝脏及心包的病变程度比非免疫鸽的显著轻微,且比非免疫鸽能更有效地清除攻入体内的大肠杆菌.     

左旋咪唑对金黄色葡萄球菌粘附素 ClfA重组 DNA 疫苗免疫效果的影响

为了探究左旋咪唑（LMS）作为免疫增强剂对金黄色葡萄球菌粘附素 ClfA 重组 DNA 疫苗免疫效果的影响.分别用含左旋咪唑的 ClfA 重组 DNA 疫苗、ClfA 重组 DNA 疫苗及空载体免疫昆明白小鼠,通过巨噬细胞吞噬试验、MTT 实验、免疫血清对金黄色葡萄球菌识别能力、酶联免疫吸附试验和攻毒试验验证免疫效果.结果表明,含左旋咪唑 DNA 疫苗组在巨噬细胞吞噬指数、脾脏淋巴细胞增殖、免疫血清对金黄色葡萄球菌识别能力方面有增强作用,与其他两组相比差异显著（P ＜0．05）,含左旋咪唑 DNA 疫苗组小鼠抗体水平及攻毒实验保护率高于单独 ClfA 重组 DNA 组和空载对照组,LMS 能够对 ClfA 重组 DNA 疫苗免疫效果起到增强作用.     

金黄色葡萄球菌蛋白A单克隆抗体的制备

为获得稳定性好、特异性强、效价较高的抗金黄色葡萄球菌蛋白A单克隆抗体,用热灭活的金黄色葡萄球菌wol-04菌体抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,以金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)为筛选抗原进行克隆筛选,并对各株单抗的生物学特性进行分析和鉴定.结果表明:试验获得了3株稳定分泌SPA单克隆抗体的杂交瘤细胞,其中单克隆抗体3B11、4F7为SPA表面抗原表位的单克隆抗体,与金黄色葡萄球菌wol-04菌体和SPA有较强的免疫反应性,免疫球蛋白亚类分别为IgG1和IgG3,具有稳定性好、特异性强、效价较高的特点.     

芒柄花黄素对实验小鼠免疫功能的影响

[目的]研究芒柄花黄素对实验小鼠免疫功能的影响。[方法]取SPF级雄性昆明小鼠40只,随机分为低、中、高剂量芒柄花黄素试验组和对照组,连续注射芒柄花黄素4周后检测各组小鼠巨噬细胞的吞噬功能、小鼠脾细胞凋亡率及转化率、小鼠血清中溶菌酶、IgG、IFN-γ及IL-4的含量。[结果]中、高剂量芒柄花黄素组小鼠巨噬细胞吞噬率及血清溶菌酶含量高于对照组及低剂量组,差异显著(P<0.05)。低、中、高剂量芒柄花黄素组小鼠脾细胞凋亡率低于对照组,差异显著(P<0.05)。中、高剂量组小鼠脾细胞转化率高于低剂量组及对照组,差异显著(P<0.05)。中、高剂量芒柄花黄素组小鼠血清IgG含量高于对照组及低剂量组,差异显著(P<0.05)。低、中、高剂量芒柄花黄素组小鼠血清中IL-4含量高于对照组,差异显著(P<0.05),而小鼠血清中IFN-γ含量在各组间差异不显著(P>0.05)。[结论]芒柄花黄素可以提高小鼠的固有免疫功能,抑制脾细胞凋亡并提高其转化率。     

桑杜口服液增强猪蓝耳疫苗免疫效果

拟考察桑杜口服液对猪蓝耳疫苗的免疫效果。选择100头健康仔猪,平均分为桑杜口服液高、中、低剂量组,免疫对照组和空白对照组。33日龄首次免疫接种猪蓝耳疫苗,1个月后进行二免,每次免疫前3 d灌胃桑杜口服液,每天1次,连用7 d。分别于首免后7、14、21、28 d采血,测定血清中猪蓝耳病特异性抗体水平,以及首免后7、14、21 d血清IL-2、IFN-γ、IgG含量,并于30日龄和60日龄时称体质量,比较各组指标的变化。结果表明,桑杜口服液高、中剂量组在首免后大部分时间均能显著提高血清中猪蓝耳病特异性抗体水平与血清IL-2、IFN-γ、IgG含量,并且中剂量组具有显著的促生长作用。表明桑杜口服液高、中剂量口服给药可显著提高猪蓝耳病疫苗免疫效果,可开发为中药免疫增强剂。     

3种中药多糖对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响（英文）

14日龄健康、非免疫罗曼蛋公鸡240只,随机均分为8组,用鸡新城疫疫苗首次免疫和二次免疫前3 d、当日及后3d,试验组分别灌胃0.5 ml高、低剂量黄芪多糖(ASP)、淫羊藿多糖(EPP)和板蓝根多糖(IRPS)溶液,空白对照组和免疫对照组灌胃等量生理盐水。各组分别于首免后连续4周随机取鸡10只称量体重、测定抗体效价和T淋巴细胞增殖变化。结果表明,3种中药多糖均可促进鸡只增重,提高新城疫HI抗体效价,促进外周血T淋巴细胞增殖,其中低剂量的IRPS效果最好。     

猪瘟病毒弱毒C株ST细胞传代疫苗对仔猪的免疫效果

将猪瘟病毒弱毒C株ST细胞苗以不同剂量(106 TCID50和105 TCID50)免疫28日龄仔猪,通过临床症状观察、病理剖检和组织病理学观察、抗体检测、特异性淋巴细胞增殖试验及抗原检测等方法评价疫苗免疫效果。结果表明:该疫苗接种仔猪后无任何临床症状,无病毒血症,无排毒现象;不同剂量免疫组,在2免后10 d左右猪瘟特异性抗体阳转,抗体水平于2免后20 d左右达到峰值。以上结果表明,猪瘟弱毒疫苗毒株C株的ST细胞传代疫苗对仔猪安全有效。     

鸡IL-18真核表达质粒及原核表达蛋白对IBD死苗的免疫增强作用

将80只14日龄SPF鸡随机分为4组,Ⅰ组为对照组,Ⅱ组为单纯疫苗试验组,Ⅲ组为质粒试验组,Ⅳ组为蛋白试验组。通过T淋巴细胞增殖试验、ELISA抗体检测和攻毒保护试验研究其对IBD灭活疫苗的免疫增强作用。结果显示,从一免后21 d起,Ⅲ组和Ⅳ组都与Ⅱ组T淋巴细胞增殖和抗体水平差异显著(P0.05),且Ⅳ组效果最好。一免42 d后进行攻毒保护性试验,Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组保护率依次为60%、80%和75%。结果表明,鸡IL-18的真核表达质粒和原核表达蛋白都具有显著增强IBD灭活疫苗免疫效果的作用。     

金钗石斛复方对小鼠免疫功能的影响

为了研究金钗石斛复方对小鼠免疫功能的影响,将实验小鼠随机分为对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组;采用Con A诱导小鼠淋巴细胞转化试验及迟发性变态反应试验测试试验组小鼠的细胞免疫功能;采用抗体生成细胞检测及溶血试验测试其体液免疫功能;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验测试其特异性免疫功能.结果表明,与对照组比较,金钗石斛复方能够明显提高脾淋巴细胞增殖能力、溶血空斑数、小鼠抗体积数、巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力;金钗石斛复方对提高小鼠NK细胞活性能力无显著影响.金钗石斛复方对正常小鼠的细胞免疫、体液免疫及巨噬细胞功能均有明显的增强作用.     

重组Pen-2乳杆菌的抗感染作用及其对小鼠免疫功能的影响

[目的]在实验室成功构建了含有对虾抗菌肽基因Pen-2的重组乳杆菌L.casei 393/pen的基础上,研究重组乳杆菌L.casei 393/pen经口服小鼠后的抗感染和免疫促进作用.[方法]将昆明系小鼠和balb/c系小鼠随机分为生理盐水组、乳杆菌L.casei 393组和重组乳杆菌L.casei 393/pen组,口服灌胃小鼠.每隔7d测量小鼠体重,28 d后检测小鼠的免疫器官指数和细胞因子IL-6的浓度,并用金黄色葡萄球菌对其进行腹腔注射攻毒.[结果]灌胃28 d后,重组乳杆菌L.casei 393/pen组的体重、免疫器官指数和细胞因子IL-6浓度均明显高于其他2个试验组;用金黄色葡萄球菌攻毒后,重组乳杆菌L.casei 393/pen组的死亡率比乳杆菌L.casei 393低50％,比生理盐水组低83.3％.[结论]重组乳杆菌L.casei 393/pen经口服小鼠后,具有显著的抗金黄色葡萄球菌感染和较好的免疫促进作用.     

中药成分复方及其组分对新城疫疫苗免疫应答的影响

将14日龄非免疫健康罗曼蛋公鸡594羽随机均分为11组,1~9组分别为OM-APS、OM和APS的高、中、低剂量组,10组为免疫对照组,11组为空白对照组。除空白对照组外均用NDV-Ⅳ系疫苗滴鼻、点眼免疫,28日龄重复免疫。在首次免疫的同时,1~9组分别口服高、中、低剂量药物,疫苗对照组和空白对照组口服等量生理盐水,每天1次,连续3 d。分别于14、21、28、35、42日龄采血,用MTT法测定T淋巴细胞增殖的变化,用β-微量法测定血清抗体效价变化。于14、21、28、35日龄,每组随机抽取4羽,称体质量,剖杀,摘取法氏囊和脾脏并称体质量,计算免疫器官指数。于69日龄用新城疫强毒攻毒,观察保护率。结果表明,OM-APS、OM、APS的高、中浓度在各时间点均能促进T淋巴细胞增殖;OM-APS高、中浓度在各时间点抗体效价明显高于免疫对照组;OM-APS的高、中、低浓度在各时间点的脾指数、高、中浓度各时间点的法氏囊指数均明显高于免疫对照组;OM-APS、APS的高、中、低浓度,OM中、低浓度的攻毒保护率均高于或明显高于免疫对照组。     

3种中药多糖对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响

14日龄健康、非免疫罗曼蛋公鸡240羽,随机均分为8组,用鸡新城疫疫苗首次免疫和二次免疫前3 d、当日及后3 d,试验组分别灌胃0．5 mL高、低剂量黄芪多糖（ASP）、淫羊藿多糖（EPP）和板蓝根多糖（IRPS）溶液,空白对照组和免疫对照组灌胃等量生理盐水。各组分别于首免后连续4周随机取鸡10羽称量体质量、测定抗体效价和T淋巴细胞增殖变化。结果表明,3种中药多糖均可促进鸡体质量增加,提高新城疫HI抗体效价,促进外周血T淋巴细胞增殖,其中低剂量的IRPS效果最好。