郑州市区犬狂犬病和弓形虫病抗体调查

目的：了解郑州市犬狂犬病的免疫效果和弓形虫病的感染情况。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和间接血凝试验（IHA）检测狂犬病和弓形虫病抗体。结果：郑州市区内犬狂犬病抗体合格率达到98％,没有发现感染弓形虫的犬只。     

猪弓形虫感染的血清肽谱诊断法建立及初步应用

为了根据猪弓形虫感染血清差异表达多肽,建立一种新的质谱检测方法,采集江苏泰州地区部分养殖场育肥猪血清,利用间接血凝法(IHA)分析弓形虫感染状况,将IHA阳性与阴性血清分别归为感染组和对照组,采用磁珠纯化试剂盒富集血清多肽,应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF Mass Spectrometry)检测,并结合flexAnalysis 2.0与Clin Pro Tools软件分析检测图谱并建立检测模型。对海陵、高港、姜堰部分猪场的IHA检测显示,猪弓形虫感染率分别为16%(8/50)、16%(8/50)、18%(9/50)。质谱检测m/z 800~12 000区段发现,弓形虫IHA阳性与阴性相比较,在育肥猪血清中共有9个多肽峰表达有显著性差异,其中m/z 1 608.59、1 971.84、5 004.01、4 617.49、7 808.23的5个多肽峰的表达显著上调,而m/z 1 233.01、8 007.66、2 356.37、3 735.65的4个峰呈显著下调,应用ClinProTools建模方程建立弓形虫感染猪的检测模型。可见MALDI-TOF质谱结合ClinProTools分析可建立猪弓形虫感染检测新方法,为弓形虫的诊断提供了一种新思路。     

安徽部分地区猪弓形虫病的血清学调查研究

为了解安徽地区猪感染弓形虫病的情况,从安徽省部分地区养殖场(户)采取猪血清1 227份,采用间接血凝试验(IHA)检测弓形虫抗体。结果显示:平均阳性率为24.29%,表明安徽地区猪弓形虫病普遍存在。其发生与流行与养殖月份和养殖规模相关。     

重组抗原rMIC3-ELISA检测猪弓形虫抗体的研究

［目的］探讨检测猪弓形虫病的新方法。［方法］应用纯化的重组弓形虫微线体蛋白3（rMIC3）作为包被抗原建立间接ELISA方法,用于猪弓形虫抗体的检测。［结果］该法所用最佳抗原浓度为3.40μg/ml,最适宜的血清稀释倍数为1〖DK〗∶160,与猪瘟病毒等阳性血清不发生交叉反应,与LAT的符合率为92.56%。［结论］该方法快速、特异、重复性好,可用于猪弓形虫病的诊断和流行病学的调查。     

漯河市部分猪场弓形虫病血清学调查与分析

为初步了解河南省漯河市猪弓形虫病感染情况,于2018年3—11月采集漯河市部分地区14个猪场共742份猪血清样品,应用ELISA检测试剂盒对血清样品中弓形虫抗体进行检测与分析。结果显示,742猪血清样品中有267份检测为弓形虫抗体阳性,平均阳性率为35.98%;不同养殖模式猪场弓形虫抗体检出率存在较大差异,其中散养场最高(57.39%),种猪场稍高(38.14%),规模化猪场最低(18.56%);在被调查的4个县市中,舞阳县猪弓形虫抗体检出率最高,为48.82%,召陵区次之,为48.44%,而临颍县和源汇区最低,分别为18.65%和39.62%。调查结果说明漯河市猪弓形虫感染普遍存在,相关有效的防控措施急需制订与实施。     

玉溪地区鸽子弓形虫感染情况调查

为了解玉溪地区鸽子弓形虫的感染情况,为鸽子弓形虫病的防控提供参考。本文运用IHA和巢式PCR两种检测方法,对采自玉溪地区的207份鸽子血液样品进行抗体和抗原的检测。结果显示,IHA检测的血清阳性率为6.28%,巢式PCR检测的阳性率为7.69%;从年龄分析,成年鸽(3.23%)和幼年鸽(6.28%)的血清阳性率之间无显著差异(P=0.4700.05)。结果表明,该地鸽子存在弓形虫感染,但IHA检测结果仅能为弓形虫病血清学检测提供参考依据,并不能完全确定被检鸽子是否携带弓形虫病原体。将两种检测方法结合使用能更准确地掌握鸽子弓形虫的感染情况。     

泰州地区宠物弓形虫感染流行现状调查与防治

为调查泰州地区宠物犬猫弓形虫感染流行现状,随机采集泰州地区不同来源犬与猫的血液样本,采用弓形虫抗体ELISA试剂盒与弓形虫抗体胶体金试纸条2种方法对该地区犬猫弓形虫感染情况进行流行病学调查,并开展治疗试验。结果表明,该地区597份宠物血清样本经ELISA试剂盒与胶体金试纸条2种方法检测出的弓形虫抗体阳性率分别为12.06%(犬8.05%,猫19.34%)、11.60%(犬7.79%,猫18.40%);且农村散养犬和猪与流浪犬和猫的血清弓形虫抗体阳性率最高;成年犬和猫的弓形虫抗体阳性率明显高于幼年犬和猫;春季采集的犬和猫血清样本弓形虫抗体阳性率最高;阳性样本宠物主人血清弓形虫抗体阳性率为8.57%;对于具有临床症状的感染犬猫通过综合治疗措施,治愈率达81.82%。同时数据显示,ELISA试剂盒检测敏感性高于胶体金试纸条,但两者差异不显著。     

河北省猪弓形虫感染情况调查

应用间接血凝试验(IHA)对河北省猪弓形虫病进行了检测,研究猪弓形虫病在河北省分布情况和感染率.结果表明,共检测猪血清1 300份,其中阳性血清464份,阳性率达35.69%.     

江苏省部分地区动物弓形虫病血清学调查

以间接血凝(IHA)试验方法对江苏省部分地区(徐州、连云港、盐城、宿迁、南通、泰州、扬州、南京、常州、宜兴、昆山)动物弓形虫病进行血清学调查。试验血清样品稀释度在1∶64时,致敏血球达到50%以上凝集的血清样品判为阳性。结果在所调查的1 100份血清样品(猪、牛、羊、猫、狗等动物)中弓形虫抗体呈阳性者为145份,占总调查血清数的13.2%,其中939份猪血清样品中阳性样品数120份,占总调查猪血清样品的12.8%,总体反映出江苏省内动物弓形虫病感染的概况。     

鉴别PRRSV野毒感染与弱毒活疫苗TJM-F92免疫d120-ELISA方法的应用

本实验研究了免疫后攻毒的GST-d120特异性抗体血清动力学变化特点,d120-ELISA和IDEXX检测不同免疫状态临床样品S/P值之间的区别与联系,并根据结果判断免疫动物是否发生野毒感染或存在弱毒疫苗的母源抗体。血清动力学实验中,免疫组6头实验动物免疫弱毒活疫苗TJM-F92(简称TJM-F92),对照组4头实验动物注射等体积PBS,第28天2组分别注射强毒TJ F3,采集血清,绘制血清动力学曲线。d120-ELISA检测结果显示,免疫组中5头免疫及攻毒后均为阴性,1头免疫1d~28d为阴性,攻毒后血清抗体水平上升并在第14天转为阳性;对照组4头动物攻毒后17d左右出现抗体阳性转化。IDEXX检测结果显示,免疫组均在第10天左右出现血清阳性转化,抗体水平逐渐上升并维持较高水平,攻毒后血清抗体无较大变化;对照组在攻毒后7d左右出现阳性转化。结果表明,d120-ELISA检出抗体阳性的时间要晚于IDEXX试剂盒10d左右,但d120-ELISA能够检测出IDEXX试剂盒无法检出的免疫TJM-F92后发生强毒感染的动物。临床应用试验中,采集并检测HP-PRRSV的TJM-F92和弱毒活疫苗JXA1-R(简称JXA1-R)免疫14d和28d后的临床血清样品,以及疑似发生PRRSV感染和未发生感染的灭活疫苗免疫猪场的样品。试验结果显示,d120-ELISA检测TJMF92免疫阳性血清为阴性;在免疫14d和28d后,d120-ELISA检出JXA1-R临床免疫血清阳性率为0%(0/15)和86.7%(13/15),相应IDEXX检出阳性率为86.7%(13/15)和100%(15/15)。d120-ELISA和IDEXX检测免疫灭活疫苗并疑似发生PRRSV感染的猪群样品的阳性率分别为45.0%(9/20)和100%(20/20),而检测未感染猪场样品的阳性率分别为0%(0/30)和40%(12/30)。综上所述,血清动力学试验和和临床应用试验结果证明,d120-ELISA可以鉴别野毒感染与TJM-F92或灭活疫苗免疫动物,为组装ELISA试剂盒、筛选并剔除TJM-F92免疫动物中发生野毒感染的动物、净化猪群奠定了基础。     

三种免疫血清学方法检测弓形虫抗体的比较

用斑点酶联免疫吸附试验、金萄菌A蛋白酶联免疫吸附试验及间接血球凝集试验二种血清学方法检测弓形虫感染鼠血清及健康鼠血清各100份,平均阳性率分别为96.0％、94.0％和88.0％,平均假阳性率分别为4.0％、7.0％及8.0％;检测10份阿米巴肝脓肿病人血清及20份日本血吸虫感染兔血清,平均交叉反应率分别为3.3％、10.0％及13.3％。结果表明,三法对弓形虫特异性抗体的检测均有较好的敏感性、特异性、重现性及较低的交叉反应率。三法中,以斑点酶联免疫吸附试验的敏感性最好,且有省试剂、反应快、操作简便等优点,是一种很有实用价值前景的免疫诊断方法。     

仔猪抗E2抗体水平的调查研究

【目的】寻找一种更具针对性、更为可靠的仔猪猪瘟抗体水平检测方法。【方法】分别采用间接ELISA、间接血凝试验（IHA）,对广西某猪场的90份已超免的不同阶段仔猪血清进行抗猪瘟E2抗体和猪瘟全抗体水平监测。【结果】在间接ELISA试验中,阳性样品数为86份,占总样品比例的95．56％;间接血凝试验结果效价在1：16以上（含1：16）的血清样品为88份,占总样品比例的97．78％,两者差异不显著。【结论】仔猪血清中确实存在具有保护性的抗E2抗体,以间接ELISA检测抗E2抗体来监测猪瘟免疫水平是可行的,这为猪瘟免疫水平的监测提供了一种新方法,也为制定免疫程序提供了科学依据。     

仔猪抗E2抗体水平的调查研究

【目的】寻找一种更具针对性、更为可靠的仔猪猪瘟抗体水平检测方法。【方法】分别采用间接ELISA、间接血凝试验（IHA）,对广西某猪场的90份已超免的不同阶段仔猪血清进行抗猪瘟E2抗体和猪瘟全抗体水平监测。【结果】在间接ELISA试验中,阳性样品数为86份,占总样品比例的95.56%;间接血凝试验结果效价在1∶16以上(含1∶16)的血清样品为88份,占总样品比例的97.78%,两者差异不显著。【结论】仔猪血清中确实存在具有保护性的抗E2抗体,以间接ELISA检测抗E2抗体来监测猪瘟免疫水平是可行的,这为猪瘟免疫水平的监测提供了一种新方法,也为制定免疫程序提供了科学依据。     

间接血凝试验检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体

以猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）病毒致敏猪红细胞作诊断液,用间接血凝试验（IHA）检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体。检测了可疑猪场80份血清样本,PRRS阳性32份,阳性率40%,与ELISA试验比较符合率98%。用此方法检测PRRS疫苗免疫猪血清,发现其抗体水平在初免后15天升高,二免后15天达最高峰,二免后45天抗体水平消失。     

广西猪戊型肝炎血清流行病学调查

为了解广西各地猪群戊型肝炎（HE）的感染状况及其流行特点,采用双抗原夹心ELISA检测来自广西11个市34个猪场及南宁市某屠宰场猪血清中的抗HEV抗体,并比较分析不同地区、不同年龄段猪抗HEV抗体阳性率的差异。结果表明,所检测的34个猪场均为抗HEV抗体阳性猪场;537份血清中有448份呈阳性,阳性率为83．4％;其中2月龄以内、3-4月龄和5月龄以上猪的抗体阳性率分别为74．0％、47．0％和95．5％,差异显著（P〈0．05）;广西各地区猪群抗HEV抗体阳性率均在70．0％以上,差异不显著（P〉0．05）。可见,广西猪群普遍存在HEV感染,且母源抗体消失后,猪群抗HEV抗体阳性率随着年龄增长而升高。     

不同猪瘟疫苗对仔猪的免疫效果

选择24头断奶仔猪,随机分成4组,每组6头,其中1组猪瘟细胞苗(A苗)按5和10 mL的剂量进行注射,其他3组猪瘟脾淋苗(依次为B、C、D苗)均按1和2 mL的剂量进行注射。在免疫15 d后,分别采血、分离血清、按照猪瘟正向间接血凝试剂盒使用说明方法检测猪瘟抗体水平。检测结果显示,A苗、B苗、C苗、D苗检出的平均抗体水平与未注射之前的平均抗体水平之比分别为1∶51、1∶91、1∶114、1∶161。统计分析表明,猪瘟脾淋苗免疫效果最好,而猪瘟细胞苗和脾淋苗两者抗体水平差异不显著,但总体上使用4种疫苗免疫15 d后都能使仔猪获得良好的保护力。     

Development of a recombinant pB602L-based indirect ELISA assay for detecting antibodies against African swine fever virus in pigs

African swine fever (ASF), caused by the African swine fever virus (ASFV), is a devastating disease of domestic and wild pigs. There is no effective vaccine, and the control of the disease relies mainly on surveillance and early detection of infected pigs. Previously, serological assays, such as ELISA, have been developed mainly based on recombinant structural viral proteins of ASFV, including p72, p54, and p30. However, the antibodies against these proteins do not provide efficient protection against ASFV infection in pigs. Therefore, new serological assays that can be applied for clinical diagnosis and evaluating serological immune response in vaccinated pigs are still required. In this study, we expressed and purified a recombinant pB602L protein. The purified pB602L protein was then used as an antigen to develop an indirect ELISA assay. This assay has no cross-reaction with the anti-sera against the 15 most common pig pathogens in China, such as classical swine fever virus, pseudorabies virus, and porcine parvovirus. This assay and a commercial ELISA kit were then used to detect 60 field pig serum samples, including an unknown number of anti-ASFV sera. The coincidence of the two assays was 95%. Furthermore, the pB602L-based ELISA was employed to test the antibody responses to the seven-gene-deleted ASFV strain HLJ/18-7GD in pigs. The results showed that the antibody levels in all vaccinated pigs, starting from the 10th day post-inoculation, have increased continuously during the observation period of 45 days. Our results indicate that this pB602L-based indirect ELISA assay can be employed potentially in the field of ASFV diagnosis.     

云南省猪戊型肝炎血清流行病学调查

 为了解云南省猪群戊型肝炎流行情况,从各地养猪场、屠宰场共采集270份血清,应用双抗夹心酶联免疫测定法（DS-ELISA）进行血清学调查。检测结果174份样品呈HEV-IgG抗体阳性,总阳性率64.4%,其中养殖场血清抗体阳性率为55.6%,屠宰厂为68.9%。比较养殖场的各年龄阶段猪群显示,母猪群血清抗体阳性率最高,为71.4%。本研究表明猪戊型肝炎在云南省也有存在,并呈一定的流行趋势,感染率随年龄增长而升高。