TCM199对奶牛冻精活力的研究

在奶牛常规冻精稀释液中添加TCM199对奶牛精液进行冷冻试验,并在冻后30min解冻保存,在不同保存时间进行活力对比测定。试验结果,试验组和对照组冻精活力分别为0．363±0．0412和0．366±0．0477．差异不显著（P〉0．05）。解冻保存2h、4h、6h、8h、10h各组精子活力分别为：试验组0．369±0．0269,0．359±0．0354,0．345±0．0347,0．318±0．0257,0．275±0．0366;对照组0．360±0．0338,0．358±0．0289,0．305±0．0292,0．258±0．0358,0．192±0．0492。从组内看,随时间的延长两组精子活力均呈下降趋势。两组相比,试验组下降缓慢,保存10h精子活力低于正常值,对照组下降较快,保存8h精子活力开始低于正常值。试验表明,TCM199对奶牛精液在冷冻过程中没有直接提高活力的作用,在奶牛冻精解冻后对精子的活力有保护作用,能提高精子的生存能力。     

保存温度对奶牛细管冻精解冻后有效活力的影响

为探讨0.25 mL奶牛细管冻精解冻后的最佳保存环境和适宜的输精时段,本试验对奶牛细管冻精40℃下20 s解冻后在0℃～4℃,14℃～16℃,25℃～27℃下分别保存2,4,6,8,10h的活力进行了测定.结果表明:在本次实验中,奶牛细管冻精解冻后在0℃～4 ℃和14℃～ 16℃保存到10h精子活力0.434±0.0167和0.423±0.0196与初解冻精子活力(0.441±0.030)差异不显著(P＞0.05);在25℃～27℃随保存时间延长精子活力呈下降趋势,保存6h精子活力和初解冻相比差异显著(P＜0.05),保存8,10h差异极显著(P＜0.01).从而得出,奶牛细管冻精解冻后在0℃～4℃和14℃～16℃保存10h以内,精子活力仍然维持在一个较高水平,符合输精要求,在此温度和时间范围内进行长距离携带,对精液质量影响小,可以达到预期的输精效果;环境温度在25℃左右时,冻精解冻后宜于6h以内进行输精.     

不同解冻方法对奶牛细管冻精活力的影响

研究探讨了不同解冻方法对0.25 mL奶牛细管冻精解冻后的影响,细管冻精分别在5,15,40,75,90℃下不同时间（1～120 s）进行解冻操作,通过评定精子冻后活率、顶体完整率、尾膜完整率,筛选出最佳的奶牛细管冻精的解冻方法。结果表明：（1）奶牛细管冻精采用75℃解冻3 s,精子的活率最高,解冻效果最好;其次在接近体温40℃解冻20 s,效果也较好;在低温5℃和室温15℃解冻,精子活率低于0.3;在90℃高温解冻条件下不稳定,不适合生产使用;（2）90℃解冻精子的顶体完整率、尾膜完整率明显低于40℃和75℃,差异显著（P＜0.05）,但是精子畸形率却高于40℃与75℃的处理组（P＜0.05）,而后两者间差异不显著（P＞0.05）;（3）不同解冻温度解冻后精子在37℃时保持有效存活时间存在较大差异,表现为：40℃＞75℃＞90℃。因此,在生产实践中对奶牛细管冻精进行解冻时,可根据具体情况选用适合的解冻方法。若解冻后立即输精的,建议采用75℃下3 s解冻;解冻后不能立即输精的,为了使精子在较长时间内保持活力,宜采用40℃下20 s解冻。     

细管冻精不同解冻方法对荷斯坦牛受胎效果的影响

为研究探讨奶牛细管冻精不同解冻方法对荷斯坦牛受胎效果的影响,试验对奶牛细管冻精经不同方法解冻后精子活力、有效存活时间以及输精后第一情期受胎率进行了研究,结果表明:(1)在5℃和15℃解冻时精子活率低于0.35,差异不显著(P>0.05);90℃解冻后活率显著低于40℃、75℃组(P<0.05),其中75℃解冻3 s精子的活率最高,解冻效果最好;在40℃解冻20 s效果较好.(2)在40℃和75℃解冻后,精子存活时间随解冻温度升高而缩短,其中40℃解冻后精子有效存活时间较75℃差异极显著(P<0.01).(3)冻精采用75℃3 s解冻后输精较40℃解冻20 s第一情期受胎率高5.45%,差异不显著(P>0.05).     

解冻温度对大额牛(Bos frontalis)精子活率及形态的影响

分别用32、35、38、41和44 ℃水浴解冻大额牛细管冻精,解冻后在常温(平均温度18.06±1.50 ℃,相对湿度46.64±4.52 %)下保存40 h,分别在0、6、12、18、24、30、36、38、39和40 h取样在显微镜下观察记录精子活率和活力;并在解冻后0、6、12、18和24 h用姬姆萨染色,在显微镜下观察记录精子形态,统计分析5个时段的精子畸形率.研究结果:①35 ℃解冻的精子复苏率为68.80 %,极显著高于44 ℃解冻的54.2 %(P<0.01),但与其它3个解冻温度比较差异不显著(P>0.05).②以38～44 ℃解冻的精子存活时间在38～39 h之间,以32 ℃解冻的存活时间最短,仅为36 h.④解冻后0 h的精子活率在42.50 %～50.00 %之间,不同解冻温度间差异不显著(P>0.05);保存6、12和18 h时,分别以35、38和41 ℃显著高于44 ℃(P<0.05);保存24 h后,各解冻温度间差异不显著P>0.05).④解冻后0 h的精子活力以35 ℃极显著高于44 ℃(P<0.01);保存6 h以32～41 ℃显著高于44 ℃(P<0.05);保存18 h,以32和41 ℃高于44 ℃(P<0.05);保存24 h后各解冻温度间差异不显著(P>0.05).⑤用41和44 ℃解冻的总精子畸形率极显著高于38 ℃(P<0.01),显著高于35 ℃(P<0.05),32、35和38 ℃间及32、41和44 ℃间差异不显著(P>0.05),用35和38 ℃解冻对精子形态损伤较小.研究表明:解冻温度越高大额牛冻精的精子活率和活力降低速度越快,精子畸形率也高,且解冻温度对精子头部和尾部形态的影响最大;大额牛细管冻精宜用38±3 ℃水浴10s解冻,解冻后在18 ℃以下常温下保存6h对其精子活力等影响不大.     

驴细管冻精不同解冻方法的研究

目前我国在细管冻精方面应用主要是在牛羊方面,在驴方面,细管冻精使用的较少。采取细管冻精结合人工授精的方法可以提高优秀种公畜的利用率,加快品种改良速度,提升生产性能。【目的】研究出更适合驴细管冻精的解冻方法,使解冻后的精子质量与活力更优良,以提高母驴受孕率。【方法】通过用5℃、38℃水浴锅解冻以及手搓的方法对驴细管冻精进行解冻,跟踪观察记录精子活力与存活时间,对数据进行分析找到更适合于解冻驴细管冻精的解冻方法。【结果】38℃水浴锅解冻30s时精子活力最高,活力为25.46±0.25,且P0.05,对精子活力的影响差异显著。     

冻精解冻温度、离心速度及精卵共培养时间对延边黄牛卵母细胞体外受精的影响

进行延边黄牛冻精解冻温度、离心速度及精卵共培养时间等因素对延边黄牛体外受精效果影响的研究,旨在找出适用于延边黄牛体外受精的技术体系,为延边黄牛体外胚胎的产业化生产奠定基础．结果表明,在39℃下解冻精子,其顶体反应率和受精率分别为85．47％和75．85％,高于37,38和40℃等处理组,差异显著（P〈0.05）;采用1500r／min离心速度对精子进行离心处理,其顶体反应率和受精率分别为82．47％和72．15％,高于900和1800r／min处理组,但差异不显著（P〉0．05）;精卵共培养24h时卵母细胞受精率为75．33％,高于6和12h组,但差异不显著（P〉0．05）．     

牛的冷配技术（下）

值得提请注意的是:每支解冻液限解冻1粒冻精,如超过1粒时,应分别解冻,绝对不能在1支解冻液中同时放入2粒冻精。镜检精子质量时,玻片上的精液厚薄要均匀。观察精子活力时,不能根据一开始看到的精子的运动情况而判定精子的活力等级,因为精子的复苏需要一定的时间。镜检时要多看几     

不同解冻方法对奶牛冻精活力的影响

将 5头荷斯坦种公牛细管冻精在不同温度、不同时间下进行解冻 ,对解冻后的精液品质进行检测。结果表明 :解冻后顶体正常率、精子活率随解冻温度升高而升高 ,而畸形率随解冻温度升高而降低 (P<0 .0 1) ;高温(37℃ ,75℃ )下随着解冻时间延长 ,活率增高 (P<0 .0 5 ) ;低温 (5℃ )、室温 (15℃ )下解冻 ,活率与解冻时间长短没有明显关系 (P>0 .0 5 ) ;精子顶体正常率、畸形率、存活时间与解冻时间无显著关系。在实践中建议使用 75℃ 2～6 s解冻。     

五指山猪精液冷冻保存研究

试验利用液氮熏蒸法进行颗粒冻精,以1组冷冻保护液为对照,2组,3组冷冻保护液以氨基酸代替部分糖类物质,以解冻后的精子活力、活率和顶体完整性为判断标准,比较了4种冷冻保护液及不同冷冻-解冻程序对五指山猪精液冷冻的影响。结果表明:解冻后精子2组,3组的3个判断标准均显著高于1组(P<0.05);4组(2.5 mL DMSO)冷冻保护液解冻精子的活力和活率显著低于2组(2 mL甘油)和3组(1.25 mL DMSO 1 mL甘油)(P<0.05)。精清保留量为0 mL/10 mL时解冻精子的活率和活力显著低于0.5 mL/10 mL和1 mL/10 mL(P<0.05)。干解法解冻后精子活率显著高于湿解法(P<0.05)。