天蚕素在动物生产中的应用

天蚕素具有改善动物生产性能、提高动物机体免疫力及调节动物肠道微生物群落结构等多种生理功能。文章针对天蚕素抗菌肽的组成、构效关系、作用机制、克隆与表达及其在动物生产中的应用作一综述,并展望其应用前景。     

天蚕素抗菌肽的性质、功能及应用研究进展

天蚕素(Cecropin)是发现的第1个动物抗菌肽,具有抗细菌、真菌、病毒、肿瘤、寄生虫等多种生物活性。文章总结了天蚕素抗菌肽的性质、结构,重点综述了天蚕素基因工程重组表达系统、表达策略,生物活性及应用现状等研究,并对相关研究发展趋势进行了展望。     

天蚕素类杂合肽cecropinA-magainin突变体的合成以及在毕赤酵母中的分泌表达

根据天蚕素类抗菌肽作用机制假说,设计引物对前期构建成功的载体天蚕素类杂合肽cecropinA-magainin进行定点突变,使其生成杂合肽的衍生物,测序正确后转化Pichia pastoris受体菌SMD1168,在醇氧化酶(AOX)启动子调控下,分子质量约119ku的cecA-mag杂合抗菌肽突变体获得表达,并通过琼脂扩散试验对表达产物的抑菌活性与cecA-mag进行了比较。结果表明,突变体对金黄色葡萄球菌抑菌活性比cecA-mag提高了1.2倍。     

抗菌肽天蚕素B基因及其串联体在毕赤酵母中的表达

通过重叠区扩增基因拼接法(SOE)合成抗菌肽天蚕素B基因,并在其N端引入Kex2酶切位点.亚克隆天蚕素B并将3个亚克隆串联在一起,每个单体前都加上Kex2酶切位点,将天蚕素B以及串联体克隆至表达载体pPICZαA上,用Sac Ⅰ酶切使之线性化,采用电击法转化毕赤酵母SMD1168,转化子用小瓶发酵.经Tricine-SDS-PAGE检测,在α信号因子的引导下,表达产物可以分泌到培养基中,且具有明显抑菌活性.     

抗菌肽天蚕素B基因及其串联体在毕赤酵母中的表达

通过重叠区扩增基因拼接法(SOE)合成抗菌肽天蚕素B基因,并在其N端引入Kex2酶切位点.亚克隆天蚕素B并将3个亚克隆串联在一起,每个单体前都加上Kex2酶切位点,将天蚕素B以及串联体克隆至表达载体pPICZαA上,用Sac Ⅰ酶切使之线性化,采用电击法转化毕赤酵母SMD1168,转化子用小瓶发酵.经Tricine-SDS-PAGE检测,在α信号因子的引导下,表达产物可以分泌到培养基中,且具有明显抑菌活性.     

逆转录病毒介导的天蚕抗菌肽B在奶牛乳腺中的表达

为了研究天蚕抗菌肽在奶牛乳腺组织长期表达的可行性以及对大肠杆菌的抑制作用,将天蚕抗菌肽B(cecropinB,CB)的基因序列以哺乳动物偏爱的密码子优化后,合成了四条相互重叠的DNA片段,通过重叠延伸PCR法获得了天蚕抗菌肽B的基因,将其亚克隆至T栽体,测序正确后构建逆转录病毒载体pLNCX_bCP-cecB,经过包装细胞的包装,获得含有天蚕抗菌肽B表达框的逆转录病毒,注射入奶牛乳腺组织,通过琼脂板孔穴扩散法检测基因的表达及活性;实验结果表明,克隆的抗菌肽基因在乳腺中获得了表达,表达产物对大肠杆菌具有抑制作用,抑制效果可以持续至13天以上.     

抗菌肽天蚕素对鸡生长性能、肠道黏膜形态、盲肠菌群及免疫功能的影响

为了研究抗菌肽天蚕素对鸡生长性能、肠道黏膜形态、盲肠主要菌群以及血液免疫指标的影响,选取1日龄体质量相近的固始鸡450羽,随机分为5组,对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂分别添加了500 mg/kg抗生素以及100 mg/kg、200 mg/kg、500 mg/kg天蚕素的日粮,试验期为60 d。结果显示,日粮中添加200 mg/kg天蚕素可显著提高1~21日龄鸡平均日增质量、降低料质量比(P0.05);日粮中添加200~500 mg/kg天蚕素能显著增加鸡十二指肠、空肠、盲肠的黏膜厚度和绒毛长度/隐窝深度比值(V/C值)(P0.05);添加500 mg/kg天蚕素能够有效地减少鸡肠道中大肠杆菌和沙门氏菌数量,同时又提高乳酸菌数量,并可显著增加鸡血清IgA、IgG、IgM含量(P0.05),添加200~500 mg/kg天蚕素可显著增加血清补体4(C4)含量(P0.05)。由此可见,日粮中适量添加天蚕素可以提高鸡的生长性能,改善鸡肠道黏膜形态,抑制肠道有害菌的增殖并刺激有益菌的增殖,同时还能提高机体的免疫功能。     

应用基因枪将蚕抗菌肽基因导入水稻获抗白叶枯病株系

将天蚕抗菌肽Ｂ基因应用基因枪法导入水稻发芽种胚，获得转基因植株。经Ｂａｓｔａ抗性鉴定，应用ＰＣＲ技术和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析表明，抗菌肽Ｂ基因已整合到水稻的基因组。Ｔ３抗白叶枯病朱系Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析证明抗菌肽Ｂ基因在ＲＮＡ水平有表达。     

抗菌肽来源及其应用进展

抗菌肽是一种从生物体内分离的小分子多肽。它具有抗细菌、抗真菌、抗病毒和抗肿瘤细胞等活性,在人类生产生活的各方面具有良好的应用前景。就目前分离出抗菌肽的各种生物来源及其作用、动物来源抗菌肽在畜牧中的应用、水生动物来源在水产养殖中的应用以及多种来源抗菌肽在人类其他生产生活中的应用进行了概述,以期拓宽对抗菌肽研究的思维,更好地开展抗菌肽应用工作。     

新疆：我国首次证实绵羊生殖系统中存在抗菌肽

新疆生产建没兵团农垦科学院的专家从绵羊生殖器官中分离出两种天然抗菌肽,这是国内外首次证实绵羊生殖系统中存在抗菌肽．同时抗菌肽在多种动物生殖道天然免疫防御方面起着重要作用。     

基因工程在蚕业上的应用——利用蚕的个体生产有用蛋白质

以蚕的个体为宿主,核型多角体病毒为载体,应用基因工程的手段生产产量有限、价格昂贵的有用蛋白质与以大肠杆菌等原核生物的宿主载体系统生产出来的有用蛋白质相比,具有效价高、有糖链附加功能,更加接近自然蛋白质等优点;与以动物培养细胞为宿主的生产系统相比,成本低、生产效益高,利用蛋的宿主载体系统生产有用蛋白质在重组病毒DNA时,不需要其它特殊的标记,在普通光学显微镜下即可检出重组病毒。该系统安全可靠,可以大规模工厂化生产。     

《草地学报》性质及学科分类

根据期刊性质和学科分类方法,以文献数量为依据对《草地学报》进行分类。结果发现,该刊2009年刊登的论文全属学术性,畜牧、动物医学、蚕、蜂和野生动物保护类文献129篇,占当年发表文献总量的70．88％,其余学科文献均较少,不能划入相应学科。因此应将该刊归类为富牧、动物医学、蚕、蜂和野生动物保护类专业学术期刊。     

那坡县桑蚕生产的气候条件分析

通过对桑蚕生产及那坡县的气候特征分析,从气温、降水、日照及不利气候因素等对桑蚕生产的影响分析,探讨那坡县桑蚕生产的可持续发展道路。结果发现,那坡县属亚热带季风气候,热量丰富,水分充沛,光照充足,年平均温度为18．8℃,得天独厚的气候条件为桑蚕提供了有利的生长环境,表明那坡县发展种桑养蚕具有明显的气候优势。     

《中国草食动物》性质及学科分类

根据期刊性质和学科分类方法,以文献数量为依据对《中国草食动物》进行分类。结果发现,《中国草食动物》2010年刊登的论文以学术性为主,畜牧、动物医学、蚕、蜂和野生动物保护类文献占当年发表文献总量的87.25%,其余学科文献均较少,不能划入相应学科。因此应将该刊归类为畜牧、动物医学、蚕、蜂和野生动物保护类专业学术期刊。     

《中国动物保健》性质及学科分类

根据期刊性质和学科分类方法,以文献数量为依据对《中国动物保健》进行分类。结果发现,《中国动物保健》2010年刊登的文献以技术性为主,畜牧、动物医学、蚕、蜂和野生动物保护类文献达到当年文献总量的78.52%,其余学科文献均较少,不能划入相应学科,因此应将该刊归类为畜牧、动物医学、蚕、蜂和野生动物保护类专业技术期刊。     

我国现代蚕种业的发展现状及对策

为我国现代蚕种业的可持续发展提供参考,介绍了我国蚕种业发展现状,从蚕种生产风险、市场预测、蚕种生产劳动强度及规模、蚕种育种价值等方面分析了存在的问题;从打造新型蚕种生产经营主体、实施品种亲本鉴定制度、建立风险分担及财政支持制度、加强蚕种关键技术研发、推动特殊用途蚕品种审定及利用等方面提出了蚕种业发展的对策。     

《中国兽医科学》性质及学科分类

根据期刊性质和学科分类方法,以文献数量为依据对《中国兽医科学》进行分类。结果发现,《中国兽医科学》2010年刊登的论文全为学术性,畜牧、动物医学、蚕、蜂和野生动物保护类文献占当年发表文献总量的92.56%,生物学类文献数超过该学科"20%区域"文献数均值,其余学科文献均较少,不能划入相应学科。因此应将该刊同时归类为畜牧、动物医学、蚕、蜂和野生动物保护类以及生物学类专业学术期刊。     

蚕种生产大环境中微孢子虫污染情况调查分析

调查分析了2005～2008年广西桂中蚕种场、柳城县蚕种场蚕种生产大环境中微孢子虫的污染情况。结果表明,蚕种生产环境被微孢子虫污染的情况在逐年加重,桑园、桑叶是微孢子病原的重要污染源;同一年内生产环境中微孢子虫的检出情况,总体上呈现出上半年微孢子虫检出率稍高于下半年的现象;野外昆虫微孢子虫检出率呈上升趋势,其严重程度与蚕种发生微粒子病关系密切;环境消毒可以有效杀灭大环境中的微孢子虫,大幅度降低环境中微孢子虫的分布机率。因此,应定期或不定期使用有效药物加强对蚕种生产环境的彻底消毒,可降低环境中微孢子虫的分布机率;而采取桑叶消毒可降低家蚕食下传染微粒子病的机会,达到有效控制蚕种生产微粒子病发生的效果。     

《猪业科学》性质及学科分类

根据期刊性质和学科分类方法,以文献数量为依据对《猪业科学》进行分类,以明确其性质和学科归属。研究表明,《猪业科学》2010年刊登的论文以研究性为主,畜牧、动物医学、蚕、蜂和野生动物保护类文献达到总文献量的84．74％,其余学科文献数量较少,未能形成足够的影响力,因此该刊应划入畜牧、动物医学、蚕、蜂和野生动物保护类专业学术期刊。     

蚕桑标准化生产的推广应用研究

笔者阐述了蚕业标准化的重要作用和蚕桑标准化生产的宣传应用途径,意在促进蚕桑标准化生产的推广应用。