青霉素喷施防治柑橘黄龙病试验初报

柑橘黄龙病是世界性分布的柑橘毁灭性病害,严重制约着柑橘产业的发展．为探究青霉素对柑橘黄龙病的防治效果,本试验采用喷施的方式对柑橘黄龙病病树进行处理,同时结合实时荧光定量ＰＣＲ技术对病树内黄龙病菌量进行动态监测,确定青霉素对柑橘黄龙病的相对防效．结果表明连续喷施４次青霉素３个月和７个月后病树中黄龙病菌含量均出现不同程度的上调,相对防效分别为－１７０.１６％和－６３.９６％．以上结果表明喷施的方式进行青霉素处理黄龙病病树对柑橘黄龙病并不能取到防治效果．     

柑橘黄龙病病原培养及分子检测技术研究进展

柑橘黄龙病（Huanglongbing）由韧皮部杆菌属细菌（Candidatus Liberobacter sp.）侵染引起,是柑橘生产上的毁灭性病害,当前正在世界柑橘产区迅速蔓延,已成为制约柑橘产业健康发展的关键因素之一。介绍了柑橘黄龙病的症状以及病原的分离培养研究进展,阐述了病原的分子检测技术,包括PCR、双重PCR、实时荧光定量PCR和LAMP快速检测技术,并对病害的防控进行展望。     

柑橘黄龙病亚洲种RPA快速检测方法的建立

黄龙病是世界柑橘产业的毁灭性病害,引起柑橘黄龙病的病原分为亚洲种、非洲种和美洲种共3个种,目前我国柑橘黄龙病均由亚洲种引起,建立一套快速检测技术对我国柑橘黄龙病的防控具有重要意义.本研究根据柑橘黄龙病亚洲种16S rDNA基因序列设计引物,建立了基于重组酶聚合酶等温扩增(RPA)的检测方法,并评价了该方法的灵敏度和检测准确性.结果表明,本研究所建立的柑橘黄龙病亚洲种RPA快速检测方法特异性强、灵敏度高、操作过程简便,检测灵敏度比常规PCR提高10倍,为基层农技人员开展柑橘黄龙病的快速检测提供了一种新方法.     

探讨柑橘黄龙病疫情监测与防控技术

黄龙病是侵染柑橘的一种毁灭性病害，一旦爆发与蔓延，将会严重影响柑橘的产量与品质，甚至是导致柑橘树大量的枯死，给果农带来严重的经济损失。为确保柑橘产业持续健康地发展，就必须重视黄龙病对柑橘产业造成的危害。基于此，文章以广西南宁市武鸣区的柑橘种植为例，对其黄龙病疫情监测进行了分析，并提出了一些黄龙病的防控技术，以期为广大柑橘种植户在防控黄龙病方面提供借鉴，进而促进柑橘产业持续健康地发展。     

柑橘黄龙病综合防治技术探析

在柑橘种植的过程之中,黄龙病是最具有影响力的毁灭性的柑橘病害,会致使柑橘的大量减产,给予柑橘种植业巨大的经济损失,所以需要在重视柑橘黄龙病综合防治技术的基础之上,探究柑橘黄龙病综合防治技术,从而推动柑橘产业的较好发展。     

湘南地区柑橘黄龙病的PCR检测

针对近年湘南部分柑橘产区出现叶片黄化、果实畸形及全株矮化、橘树枯死等柑橘黄龙病疑似症状,应用多聚酶链式反应(PCR)技术对湘南8个柑橘产区的柑橘进行了检测,结果发现6个柑橘产区有柑橘黄龙病为害.同时建立了一套快速、准确的柑橘黄龙病PCR检测技术体系.     

柑橘黄龙病检测方法研究进展

黄龙病是柑橘生产上的一种毁灭性病害,该病在北美、南美、西亚、东亚和南亚的一些国家和地区时有发生,造成巨大的经济损失,严重威胁着世界柑橘产业。柑橘黄龙病的传统检测方法有病害田间诊断、指示作物鉴定、病原显微镜观察、血清学、DNA-DNA杂交和PCR检测等方法。近年来,美国一些科学家把高光谱图像技术应用在柑橘黄龙病检测领域,提高了检测速度,降低了检测成本。综述了国内外关于柑橘黄龙病检测诊断方面的研究进展,介绍了该领域传统检测方法的特点和存在问题以及高光谱图像检测技术的主要特点,着重介绍了高光谱图像技术在黄龙病检测方面的最新应用技术、设备和实例。提出了柑橘黄龙病诊断领域,在实现无损检测的前提下,降低成本、提高检测实时性和诊断速度的发展趋势。     

砂糖桔黄龙病3种检测引物灵敏性比较研究

柑橘黄龙病是柑橘毁灭性病害,给世界柑橘产业造成了巨大的损失.利用PCR检测黄龙病病原菌是目前柑橘黄龙病诊断的可靠方法,具有快速、特异、高效灵敏等优点.前期已有文献报道过用于常规PCR检测的黄龙病检测引物,但尚无比较这些引物的灵敏性的报道.为了验证相关文献报道的3对引物检测柑橘黄龙病的灵敏度,本研究选择感病砂糖桔样品作为反应模板,并设置相同PCR反应条件下,分别利用3对特异性引物(P1/P2, P3/P4和OI1/OI2c)对10份砂糖桔感病样本总DNA进行扩增.结果表明,引物P1/P2灵敏度最低,扩增不出条带;引物P3/P4灵敏度较好,扩增条带明显,但个别样品扩增条带不明显;引物OI1/OI2c灵敏度最好,所有样品扩增条带均明显.     

潜伏期柑橘黄龙病宿主糖代谢及近红外光谱特征

柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing)是柑橘最具有毁灭性的病害,传染性极强,严重影响柑橘产业的健康发展。及时发现潜伏期未显症的病树并挖除,能够更加有效地阻碍黄龙病的传播。为此,特研究潜伏期染病叶片的糖代谢以及叶片组织光学特性的变化规律。结果表明,淀粉、蔗糖、葡萄糖和果糖在染病未显症叶片中已经出现了异常累积,分别是健康叶片的3.58、2.16、3.41、1.70倍,同时,近红外光谱的反射率出现了升高的趋势。进一步采用Random Frog算法选择前6个敏感波段(1 015、1 331、1 065、1 334、1 022、951 nm),并结合Naïve Bayes(NB)模型对潜伏期未显症柑橘黄龙病叶片进行判别,得到了97.5%的分类正确率,对阳性样本的漏检率为0,说明采用近红外高光谱技术能够实现对未显症柑橘黄龙病的检测,可为田间柑橘黄龙病的快速普查提供新的方法。     

梅州地区柑橘黄龙病的常规PCR与实时荧光定量PCR检测技术研究与应用

本文利用TaqMan探针实时荧光定量PCR(qPCR)检测技术对梅州地区疑似柑橘黄龙病样品进行检测,并与常规PCR检测进行对比。结果表明,实时荧光定量PCR用于检测柑橘黄龙病菌结果快速、准确、可靠且无污染。采用2种方法对梯度稀释的阳性样本进行检测发现,实时荧光定量PCR的灵敏度较常规PCR更高,能够检出样品中痕量的病原菌。本研究在梅州地区建立了以实时荧光定量PCR方法进行柑橘黄龙病疑似植株的检测,可以为梅州地区提供更准确、更灵敏、快速的黄龙病检测技术。     

柑桔黄龙病PCR检测技术体系优化分析

根据柑桔黄龙病病菌亚洲种16S rDNA基因序列设计特异引物,建立了检测柑桔黄龙病的快速PCR方法,并研究了PCR体系的各主要组分对PCR反应的影响,确立了黄龙病菌的PCR检测优化体系。应用PCR检测方法对大田植株及柑桔脱毒苗进行抽样检测,结果表明:PCR检测优化体系具有快速、灵敏度高、重复性好、检测成本低等优点,适用于柑桔黄龙病的早期诊断及无病毒苗木的大量检测。     

湿度对田间自然热罩防治柑橘黄龙病的影响

比较加湿处理后热罩和自然条件下热罩对黄龙病的防治效果,结果表明自然条件处理后30 d叶片平均病菌浓度下降了85％以上,而加湿条件下叶片平均病菌浓度仅下降3.7％,与自然条件处理间差异达到显著水平;自然条件热罩处理后90 d叶片平均病菌浓度下降了97％以上,而加湿处理病树叶片平均病菌浓度下降了38％,与自然条件处理间的差异达到极显著水平。对照组叶片平均病菌浓度处理后30 d和90 d均有略微增加;加湿未热罩处理叶片平均病菌浓度在处理后30 d和90 d分别增加了4.5倍和8.7倍,但与对照组无显著差异。本研究结果表明加湿热罩处理病树显著减弱了其杀灭黄龙病菌效果,同时表明增加土壤湿度对黄龙病菌繁殖可能具有一定的促进作用。     

梅州市柑橘黄龙病的调查与综合防控措施

柑橘黄龙病(cirtus Huanglongbing,HLB)是细菌性病害,本文作者通过聚合酶链式反应(PCR)对梅州地区柑橘黄龙病发生情况进行调查,对梅州地区一共761个疑似黄龙病样本进行检测分析,并在此基础上提出梅州市柑橘黄龙病的综合防治策略,为梅州的柑橘产业发展提供参考。     

柑橘黄龙病的传播途径及鉴定方法

在生产中,柑橘类果树由于长期无性繁殖,往往感染1种或几种病毒、类病毒病害。柑橘黄龙病是一种毁灭性病害,大多数柑橘品种都易感病,主要发生在亚洲和非洲的40多个国家。全面认识柑橘黄龙病的传播途径及鉴定方法,对柑橘类果树生产具有重要的指导意义。     

柑橘黄龙病菌基因组学的研究进展

柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing,HLB)是柑橘生产上最具毁灭性的病害,严重威胁着世界柑橘产业的发展。该病害由难培养细菌——候选韧皮部杆菌(Candidatus Liberibacter spp.)所引起,通过带病苗木和媒介昆虫进行传播蔓延。近年来,随着DNA测序技术和生物信息学的发展,基因组学被广泛应用于柑橘黄龙病的研究,并为克服黄龙病菌难培养所造成的研究瓶颈提供了新的方法和思路。柑橘黄龙病菌基因组学的研究,不仅有助于探究黄龙病菌与寄主植物的互作关系,而且可为抗病栽培和病害早期检测提供重要的理论基础。本文结合当前柑橘黄龙病的研究概况、病原全基因组的测序策略及基因组的特征描述,重点综述基因组学在黄龙病致病机理、病原遗传多样性与分子检测等方面的研究进展。     

基于光谱信息的柑橘黄龙病无损检测及分级模型构建

柑橘黄龙病(Huanglongbing,HLB)是世界柑橘生产上最具毁灭性的病害,给果农和相关产业造成了巨大的损失.以柑橘叶片为载体,利用高光谱图像技术采集柑橘叶片表面的高光谱图像,用ENVI4.7进行图像处理,提取感兴趣区域(Region of Intest,ROI),统计感兴趣区域平均光谱数据,并进行相关植被植物的运算,最后通过PLS-DA(Partial Least Squares Discrimination Analysis)判别法进行鉴别并分类.结果表明:基于平均光谱值和植被指数的PLS-DA判别模型都能对健康、缺锌和HLB叶片进行鉴别.其中基于平均光谱值的PLS-DA模型鉴别健康柑橘叶片样品的灵敏度为100％,特异度为100％,准确度为100％;鉴别缺锌柑橘叶片样品的灵敏度为80.6％,特异度为91.7％,准确度为88.9％;鉴别HLB叶片的灵敏度为89.3％,特异度为88.3％,准确度为88.9％.基于植被指数的PLS-DA判别模型鉴别健康柑橘叶片样品的灵敏度为100％,特异度为100％,准确度为100％;鉴别缺锌柑橘叶片样品灵敏度为92.5％,特异度为89.3％,准确度为90.1％;鉴别HLB叶片的灵敏度为86.4％,特异度为95.3％,准确度为90.1％.识别正确率较高,说明利用高光谱进行柑橘黄龙病病情分类是可行的.     

Citrus disease recognition based on weighted scalable vocabulary tree

Citrus Huanglongbing (HLB) is a destructive disease in citrus production that causes huge economic damage to citrus producers and related industries in the world. Early and accurate detection of HLB is a critical management step to control the spread of this disease. However, existing HLB detection methods cannot be widely adopted in citrus production due to long-time and high-cost detection period in specific laboratory environments. In view of this, a fast-response and low-cost computer vision technique is investigated for diagnosing HLB in citrus leaves. Specifically, the Gaussian mixture density (GMD) is performed to extract the leaf object from the citrus image, followed by the feature extraction and recognition of the existence of HLB in the leaf based on scalable vocabulary tree. A citrus leaf image dataset is constructed, and the experimental results show that the proposed HLB recognition method with GMD object extraction performs 95–100 % accuracy within 1 s.     

晚熟温州蜜柑NBS-LRR类抗病基因同源序列的克隆及分析

为加深对柑橘黄龙病抗性机理的了解和为黄龙病抗性基因的克隆提供依据,根据已知植物抗病基因NBS-LRR保守结构域设计简并引物,以柑橘黄龙病抗性品种"晚熟温州蜜柑"为供试材料,对其基因组DNA进行PCR扩增、克隆和序列测定,结果共获得17条抗病基因同源序列(resistance gene analogs,RGAs),其在NCBI中的登录号为KJ019189~KJ019199,KR815564~KR815569。序列分析表明,这17个RGAs与甜橙、柚等柑橘属中推测的一些抗病蛋白基因或其他相关蛋白基因具有显著高的同源性。其中一些RGAs与拟南芥抗霜霉病RPP13基因、柑橘抗衰退病毒基因Ctv或烟草抗TMV基因N具有51.7%~79.0%的氨基酸序列同源性。依据论文结果,笔者认为,晚熟温州蜜柑中存在较丰富的NBS-LRR类抗病基因,但具体哪些病基因与抗黄龙病相关尚需进一步研究。