中医药通过调节Th17细胞分化在自身免疫性炎症性疾病中作用的研究进展

辅助性T淋巴细胞17（T helper 17,Th17）与多种炎症性疾病、自身免疫性疾病及肿瘤密切相关。在自身免疫性炎症性疾病中大多存在偏向Th17一侧的分化失衡,Th17细胞的分化程度往往决定了炎症程度及持续时间。中医药在治疗炎症性疾病方面积累了丰富的经验,具有一定的优势和潜力,许多中药及中药复方被证实有明显的免疫调节及抗炎作用。本文就Th17细胞的分化调节及中医药在类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎、强直性脊柱炎及慢性前列腺炎等疾病中对Th17细胞的调节作用研究进展进行综述。     

连翘酯苷A对内毒素致鸡脾淋巴细胞白介素-17的影响

[目的]研究内毒素和连翘酯苷A对鸡脾淋巴细胞中白介素-17(IL-17)水平的影响。[方法]将1日龄雏鸡正常饲养至50日龄时,心脏采血处死,表面消毒后,剖检用脾淋巴细胞分离液分离脾淋巴细胞,将脾淋巴细胞分为20个组,具体为4个剂量组×5个时间点。4个剂量组分别为:对照组、LPS组(5μg/m L)、连翘酯苷A预防低剂量组(200μg/m L连翘酯苷A+5μg/m L LPS)、连翘酯苷A预防高剂量组(400μg/m L连翘酯苷A+5μg/m L LPS)。5个时间点分别为0、6、12、24、48 h。通过采用ELISA和Real time-PCR方法检测脾脏淋巴细胞中IL-17水平。[结果]ELISA结果显示,与正常组相比,LPS组脾脏淋巴细胞中炎症因子IL-17含量升高;与LPS组比较,连翘酯苷A组脾脏淋巴细胞中上述炎症因子含量下降,表明脾脏中炎症因子的变化呈正相关性,通过抑制LPS诱导的鸡脾脏中上述炎症因子的升高,减轻炎症反应。Real time-PCR结果显示,与正常组相比,LPS组脾脏淋巴细胞中炎症因子IL-17 mRNA表达量升高;与LPS组比较,连翘酯苷A组预防组脾脏淋巴细胞中上述炎症因子表达量下降,变化呈相关性,试验表明连翘酯苷A可以通过转录水平抑制LPS诱导的鸡脾脏淋巴细胞中上述炎症因子表达量的升高,减轻炎症反应。[结论]连翘酯苷A抑制鸡脾脏淋巴细胞中IL-17水平,可起到抗炎功能。     

Th17介导炎症反应在动脉粥样硬化中的作用

动脉粥样硬化(AS)是一组称为动脉硬化的血管病中最常见、最重要的一种.目前认为AS是一种炎症性疾病,多种免疫细胞参与AS炎症反应.T淋巴细胞介导的反应是其发展过程的关键.Th17细胞是近年发现的一个Th细胞亚群,在AS的发生、发展中发挥重要作用.本文就Th17细胞介导的炎症反应在AS中的作用作一综述.     

白细胞介素-17和嗜酸性粒细胞趋化因子与上呼吸道变应性病变相关性的研究进展

Th17细胞是一种新的效应CD4+T细胞亚群,可产生白细胞介素(IL)-17,IL-6,肿瘤坏死因子(TNF)等多种细胞因子,而IL-17是Th17细胞最主要的分泌产物,参与多种炎症反应、自身免疫性疾病的发生发展;嗜酸性粒细胞(EOS)浸润是气道变应性病变的主要特征,嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)是EOS特异性趋化因子,与气道炎症及变应性疾病的发生发展有着密切的关系。该综述旨在阐述IL-17和Eotax-in与上呼吸道变应性病变的相关性,从而为该类疾病的治疗提供新的靶点。     

IL-17+γδT细胞的研究进展

IL-17是一种重要的炎症介质,最近研究显示γδT细胞是产生IL-17的主要细胞,并且产生IL-17的γδT细胞(IL-17+γδT细胞)参与多种疾病的发生发展,这为临床疾病的治疗提供了新的思路.该文对IL-17+γδT细胞及其在感染性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤等的研究进展进行了综述.     

熊果酸对大鼠CIA模型关节TNF-α、IL-17、PGE2表达的影响

目的 探讨熊果酸（UA）对胶原诱导性关节炎（CIA）模型大鼠关节中TNF-α、IL-17、PGE2表达的影响。方法 首先随机选取8只作为正常对照组,其余复制SD大鼠CIA模型,造模成功后随机分为模型对照组、熊果酸组、甲氨蝶呤组、地塞米松组并给予相应处理。于给药35天后处死大鼠,取关节制作切片,进行HE染色,观察关节骨质的病理改变,免疫组化法检测关节中炎症因子TNF-α、IL-17、PGE2的表达。结果 与CIA模型组比较,UA大鼠组关节炎症因子TNF-α、IL-17、PGE2的表达明显降低（P<0.01）,UA组效果不如甲氨蝶呤组、地塞米松组（P<0.01）。结论 UA能明显缓解CIA大鼠关节炎症及损伤,减少关节中相关炎症因子的表达。     

自细胞介素-17和嗜酸性粒细胞趋化因子与上呼吸道变应性病变相关性的研究进展

Thl7细胞是一种新的效应CD4＋T细胞亚群,可产生白细胞介素（IL）－17,IL－6,肿瘤坏死因子（TNF）等多种细胞因子,而IL-17是Thl7细胞最主要的分泌产物,参与多种炎症反应、自身免疫性疾病的发生发展;嗜酸性粒细胞（EOS）浸润是气道变应性病变的主要特征,嗜酸性粒细胞趋化因子（Eotaxin）是EOS特异性趋化因子,与气道炎症及变应性疾病的发生发展有着密切的关系。该综述旨在阐述IL-17和Eotax—in与上呼吸道变应性病变的相关性,从而为该类疾病的治疗提供新的靶点。     

类风湿关节炎患者关节液中IL-17的定量检测

目的探讨类风湿性关节炎（RA）患者关节液中IL-17的含量与关节炎症损伤的相关性,为研究RA的关节损伤机制提供科学依据.方法应用ELISA方法定量检测RA组40例和对照组40例关节液中IL-17的含量,应用t检验比较两组差异性.结果 RA组关节液中IL-17的含量显著高于对照组（P〈0.01）.结论 RA组关节液中具有较高的IL-17检测值,证实IL-17是RA患者关节滑膜损伤的重要因素之一.     

黄葵胶囊对TNBS诱导实验性小鼠结肠炎的药理研究

以TNBS诱导小鼠建立实验性结肠炎模型,运用黄葵胶囊连续干预14 d后,对小鼠进行疾病活动指数(DAI)、大体形态损伤指数(CMDI)评分;小鼠取血后ELISA法检测血清炎症因子白介素-6 (IL-6)、IL-17、IL-23水平;处死小鼠,分离结肠,制作切片, HE染色,光学显微镜下观察组织形态变化,并进行TDI评分,探讨黄葵对小鼠实验性结肠炎的拮抗作用。结果表明:与模型组相比,黄葵中(1.0 g·kg~(-1))、高剂量(2.0 g·kg~(-1))组小鼠的体重和活动度有所增加, DAI、CMDI评分亦显著降低(P0.05);组织病理形态出现的炎症病理变化随给药剂量的增加而显著减轻, TDI评分显著降低(P0.05);血清IL-6、IL-17、IL-23水平明显降低(P0.05)。这说明黄葵可抑制TNBS诱导的小鼠实验性结肠炎,提示该作用与下调炎症因子表达有关。     

Th17与Treg细胞免疫失衡在慢性乙型病毒性肝炎发病过程中的调节作用

目的:研究Th17/Treg细胞免疫失衡在慢性乙型病毒性肝炎不同阶段的作用.方法:选取重庆医科大学附属第二医院感染科慢性乙肝患者65例,其中包括7例无症状携带者(AsC),38例慢性乙肝轻、中度患者(CHB-LM),20例慢性重型肝炎患者(CSHB).另有10例健康对照者(HC).用流式细胞术检测外周血中Th17与Treg细胞的频数,并用ELISA方法检测相关细胞因子IL-17,IL-1β,IL-6,IL-21和TGF-β的水平.结果:Th17细胞在CSHB组中的频数明显增加,Treg细胞在AsC组中的比例最高,Th17细胞与Treg细胞之间存在负相关,相关细胞因子(IL-1β,IL-6和IL-21)在CSHB组中的表达均增加,TGF-β因子在各组中无明显变化.结论:Th17与Treg细胞在慢性乙型病毒性肝炎不同疾病阶段存在免疫失衡.在免疫耐受阶段(AsC),Treg细胞发挥主要作用,而在严重炎症活动阶段,Th17细胞发挥主要作用.     

Chronic mucocutaneous candidiasis in humans with inborn errors of interleukin-17 immunity

Chronic mucocutaneous candidiasis disease (CMCD) is characterized by recurrent or persistent infections of the skin, nails, and oral and genital mucosae caused by Candida albicans and, to a lesser extent, Staphylococcus aureus, in patients with no other infectious or autoimmune manifestations. We report two genetic etiologies of CMCD: autosomal recessive deficiency in the cytokine receptor, interleukin-17 receptor A (IL-17RA), and autosomal dominant deficiency of the cytokine interleukin-17F (IL-17F). IL-17RA deficiency is complete, abolishing cellular responses to IL-17A and IL-17F homo- and heterodimers. By contrast, IL-17F deficiency is partial, with mutant IL-17F-containing homo- and heterodimers displaying impaired, but not abolished, activity. These experiments of nature indicate that human IL-17A and IL-17F are essential for mucocutaneous immunity against C. albicans, but otherwise largely redundant.     

小鼠脾Th17细胞分化模型中IL-17F、RORα、Stat3 mRNA表达

目的研究小鼠脾Th17细胞分化模型中IL-17F、RORα、Stat3表达。方法提取C57/BL6J小鼠脾淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化CD4-＋CD62L-＋T细胞,分为对照组及Th17分化组。对照组用RPMI1640培养;Th17分化组加抗小鼠CD3ε、CD28、IFN-γ、IL-4单抗及IL-6、TGF-β1、IL-23孵育。培养48 h后,采用Real-time PCR检测两组细胞IL-17F、RORα、Stat3 mRNA表达。结果 Th17分化组IL-17F、RORα、Stat3 mRNA表达明显高于对照组（P〈0.01）。结论小鼠脾Th17细胞分化过程中伴有RORα、Stat3 mRNA表达上调。     

PCV-2感染对PK-15细胞IL mRNA转录水平的影响

【目的】观察猪圆环病毒2型（PCV-2）感染对猪肾传代细胞（PK-15细胞）炎性细胞因子白细胞介素（IL） mRNA转录水平的影响,探讨宿主与病毒之间的作用关系及细胞炎性反应机制。【方法】以未感染PCV-2的PK-15细胞为对照组,运用相对定量PCR技术,测定和分析PCV2感染PK15细胞后,PCV-2 DNA相对含量的变化,以及炎性细胞因子IL-6、IL-8、IL-12p35、IL-12p40、IL-13、IL-17、IL-18 mRNA转录水平在1,6,12,24,48,和72 h的变化。【结果】PCV-2感染后,PK-15细胞的IL-6、IL-13、IL-17、IL-18 的mRNA转录水平在12 h显著增加,24 h后mRNA转录水平下降;IL-8的mRNA转录水平在48 h时最高,为对照组的2.5倍,但72 h时恢复至与对照组水平相当;随着感染时间的延长,IL-12p35、IL-12p40 的mRNA转录水平显著下降。【结论】PCV-2感染后可引起PK-15细胞中IL-6、IL-8、IL-13、IL-17、IL-18等细胞因子mRNA转录水平增加,而IL-12 mRNA转录水平下降,提示PCV-2感染后引起的PK-15细胞炎性反应与其分泌的炎性细胞因子的改变有关。     

鸡IL-6、IL-17和IFN-γ实时荧光定量PCR检测方法的建立

[目的]建立针对鸡白介素6（IL-6）、白介素17（IL-17）和γ干扰素（IFN-γ）的实时荧光定量PCR检测方法,为细胞因子的定量检测及病毒致病机制的研究奠定基础.[方法]根据GenBank已发表的鸡IL-6、IL-17、IFN-γ和3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）基因保守序列,设计并合成4对相应的特异性引物,以鸡胚成纤维细胞的cDNA为模板构建重组质粒,对退火温度、引物浓度等SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应条件进行优化,建立各基因的标准曲线,并进行特异性、敏感性、重复性试验.[结果]GAPDH、IL-6、IL-17和IFN-γ的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR扩增效率分别是98.2％、99.2％、102.0％和100.8％,相应的标准误差为0.00666、0.00813、0.00365和0.00458.特异性试验结果显示各基因的溶解曲线均呈单一溶解峰,敏感性试验结果表明各基因的检测下限均为100拷贝,重复性试验结果表明组内变异系数均小于2.00％.[结论]建立的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR具有敏感性高、重复性好、特异性强等特点,为快速检测和定量鸡源IL-6、IL-17和IFN-γ的表达水平提供了技术平台.     

Reciprocal TH17 and regulatory T cell differentiation mediated by retinoic acid

The cytokine transforming growth factor-beta (TGF-beta) converts na?ve T cells into regulatory T (Treg) cells that prevent autoimmunity. However, in the presence of interleukin-6 (IL-6), TGF-beta has also been found to promote the differentiation of na?ve T lymphocytes into proinflammatory IL-17 cytokine-producing T helper 17 (T(H)17) cells, which promote autoimmunity and inflammation. This raises the question of how TGF-beta can generate such distinct outcomes. We identified the vitamin A metabolite retinoic acid as a key regulator of TGF-beta-dependent immune responses, capable of inhibiting the IL-6-driven induction of proinflammatory T(H)17 cells and promoting anti-inflammatory Treg cell differentiation. These findings indicate that a common metabolite can regulate the balance between pro- and anti-inflammatory immunity.     

密蒙花滴眼液对去势雄兔干眼泪腺组织中ICAM-1、IL-6、IL-17表达的影响

目的 观察不同浓度密蒙花滴眼液对雄兔干眼泪腺组织中炎性细胞因子：细胞间黏附因子-1（intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、白细胞介素-17（interleukin-17,IL-17）表达的影响,从而探讨其疗效。方法 将36只成年新西兰雄兔随机分为空白组（A）,模型组（B）,密蒙花滴眼液低（C）、中（D）、高（E）浓度组,睾酮组（F）组,每组6只。除A组外,其余各组均切除双侧睾丸及附睾,造模成功后,C、D、E组开始双眼滴用滴眼液,F组注射丙酸睾酮注射液。术前及治疗后第4周各组雄兔均测定1次泪膜破裂时间（tear break-up time,BUT）和泪液分泌功能（Schirmer Ⅰ test,SIT）。治疗后第4周处死实验用兔,并摘取其双侧泪腺,采用免疫组化的方法检测ICAM-1、IL-6与IL-17的表达。结果 （1） SIT和BUT：B组自身前后对比,治疗后第4周：B组与C、D、E、F组相比,E组与C、D组相比,F组与C、D、E组相比,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;（2） ICAM-1、IL-6与IL-17电镜下表达的结果：A、F组未见明显表达;B组可以见到大量棕黄色颗粒存在细胞浆与细胞膜中;C、D、E组可见散在的表达;（3）治疗后第4周,组间ICAM-1、IL-6与IL-17的表达相比较：B组与其余各组相比,E组与C、D组相比,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论 密蒙花滴眼液具有拟雄激素的作用,可以抑制炎性细胞因子ICAM-1、IL-6与IL-17的表达,疗效弱于雄激素。不同浓度的密蒙花滴眼液中,高浓度的疗效最佳。     

CD58及雌酮对妊娠早期山羊EML分泌IL—2及IL—4的影响

将妊娠17d山羊子宫内膜淋巴细胞(EML)放入含不同剂量PHA-P,CD58和雌酮的介质中进行体外培养,并分别用生物学方法和双抗体夹心ELISA法测定培养上清液中IL-2和IL-4的水平。结果表明,CD58和雌酮处理组EML分泌的IL-2水平低,与细胞对照组差异不显著,并显著低于PHA-P处理组。3个浓度CD58处理组IL-4分泌水平高达5.40～6.36ng/mL,高浓度雌酮处理组IL-4分泌量也达到4.77ng/mL,与细胞对照组差异均极显著,而且CD58能以剂量依赖方式促进EML对IL-4的分泌。     

银屑平丸对BALB/c小鼠银屑病样模型血清中IL-17、IL-23表达的影响

目的 建造BALB/c小鼠背部银屑病样模型,探讨中成药银屑平丸治疗银屑病的可能作用机制。方法 选取48只BALB/c小鼠,随机分为空白组、模型对照组、雷公藤组、银屑平丸高、中、低剂量组,8只/组。给予除空白组外其余小鼠背部皮肤外涂咪喹莫特软膏连续8 d,1次/d,建立模型小鼠。末次给药后,观察小鼠背部皮肤进行皮损面积和严重程度指数（psoriasis area and serenty index,PASI）评分;检测血清中IL-17、IL-23水平;取背部皮肤组织进行组织病理比较。结果（1）银屑平丸各组和雷公藤组对银屑病样小鼠背部皮肤PASI评分比较无明显的差异（P>0.05）,而较模型对照组和空白组评分均有明显的差异（P<0.05）。（2）各组银屑病样小鼠外周血IL-17和IL-23含量明显高于空白组（P>0.05）。而银屑平丸各组和雷公藤组均与模型对照组外周血中含量有明显的差异（P<0.05）。（3）银屑平丸各组和雷公藤组对银屑病样小鼠背部皮肤组织病理变化较模型对照组和空白组有明显差异（P<0.05）。结论 银屑平丸改善银屑病模型小鼠的作用机制可能通过抑制IL-17、IL-23,起到减轻小鼠银屑病样皮损的发生、发展的作用。