一品红愈伤组织诱导·增殖及悬浮系建立的研究

[目的]为一品红原生质体融合及遗传转化等相关研究奠定基础。[方法]以一品红品种“喜庆红”的顶芽和带芽茎段为外植体，进行愈伤组织诱导、增殖及悬浮系建立的研究。[结果]以浓度0．1％升汞处理顶芽和带芽茎段的时间分别以6min和10min为宜。在MS固体培养基里分别添加活性炭、PVP和Vc后，愈伤组织在培养过程中褐化程度有所减轻，但与对照相比差异并不显著。[结论]一品红愈伤组织悬浮系的适合继代周期为7～8d。     

太行菊组织培养研究

对太行菊生长期间茎顶芽和带腋芽的茎段进行组培试验。结果表明,对外殖体应用0.1%的HgCl2进行表面灭菌,5min处理茎顶芽和8min处理茎段的死亡率和感染率较低。外殖体组织分化有直接生成愈伤组织、小植株体,愈伤组织和不定芽同时生成三种形式。     

连香树愈伤组织诱导研究

[目的]为珍稀濒危树种连香树寻求组培快繁方法。[方法]以1/4MS、1/2MS、MS添加不同浓度的NAA、KT、GA3为培养基,以连香树当年生带芽茎段为外植体进行愈伤组织诱导。[结果]以4月份采集的带芽茎段作为外植体愈伤组织诱导效果相对较好;在1/4MS+NAA 1.0 mg/L+KT 0.2 mg/L+GA31.00 mg/L培养基中愈伤组织诱导效果相对较好,但总体而言愈伤组织诱导率较低。[结论]连香树愈伤组织诱导具有可行性,需进一步研究。     

不同培养条件对油茶愈伤组织和芽诱导的影响

[目的]为油茶的快速繁殖提供技术参考。[方法]以油茶品种岑软2号和岑软3号的鲜嫩带芽的茎段和顶芽为外植体,分别设置不同消毒时间,9组培养基激素浓度配置,2个光照条件,进行组织培养。[结果]在其他条件一致的情况下,不同的外植体消毒方式、培养基激素配置和光照条件对油茶愈伤组织和芽的诱导的影响各异。采用0.1%HgCl2对外植体消毒6min的诱导效果最好,岑软2号和岑软3号的成活率分别达71%和73%;激素配置为6-BA2.0mg/L和NAA0.2mg/L时,愈伤组织和芽的诱导效果达到最佳,岑软2号和岑软3号的诱导率分别为47.8%、48.5%;接种后直接进行光照培养的效果最好,岑软2号和岑软3号的愈伤组织和芽的诱导率分别为45%、62%。[结论]最佳条件：0.1%HgCl2消毒6min;激素配置为6-BA2.0mg/L和NAA0.2mg/L;接种后直接进行光照培养。     

不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响

[目的]寻求代替ZT提高猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的最佳激素组合。[方法]以美味猕猴桃离体茎段为外植体,以MS为基本培养基,附加2,4-D0.5、1、2.0mg/L和NAA0.1、0.3、0.5mg/L与6-BA0.5mg/L分别组成诱导愈伤组织的6个激素组合,并以同样浓度的2,4-D和NAA与6-BA1.0mg/L分别组成分化芽的6个组合激素,研究不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响。[结果]6种不同浓度的激素组合对猕猴桃茎段愈伤组织均有一定的诱导作用,其中2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L的组合有利于愈伤组织诱导,诱导率达86.1%;绿色愈伤组织在MS培养基附加激素2,4-D+6-BA组合中芽的分化率很低,而在附加NAA+6-BA组合中芽的分化率较高,其中,NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L的组合有利于芽分化,芽分化率为75.2%。[结论]2,4-D与6-BA组合对猕猴桃绿色愈伤组织的芽分化有一定抑制作用。     

土人参愈伤组织诱导及细胞悬浮培养研究

[目的]建立土人参愈伤组织的诱导、增殖继代培养及其细胞悬浮培养的技术体系。[方法]研究不同植物激素组合对叶片、茎段愈伤组织诱导的影响;采用液体振荡培养法测定叶片愈伤组织细胞悬浮生长曲线。[结果]叶片最易诱导产生愈伤组织,最佳诱导、增殖培养基为MS＋2,4-D1.0 mg/L＋NAA0.5 mg/L＋6-BA0.5 mg/L（pH5.8）。由叶片愈伤组织建立的细胞系生长呈＂S＂型曲线,最适继代周期为15 d。[结论]以叶片为外植体经愈伤诱导、增殖培养可建立良好的细胞悬浮系。     

不同因素对油樟愈伤组织生长的影响

[目的]筛选油樟组培条件。[方法]以油樟带芽茎段为外植体,通过愈伤组织诱导率、污染率、褐变等指标研究无机盐、光照、抗生素等因素对愈伤组织生长影响。[结果]愈伤组织在2种培养基上均能明显增殖,且MS的培养效果好于1/2MS。由带芽茎段诱导的新生愈伤组织略带绿色。继代培养后,黑暗中诱导和培养的愈伤组织为淡黄色或白色,光照下培养的愈伤组织为褐色。愈伤组织诱导率和外植体污染率都随抗生素浓度的增加而降低,25～50mg/L的链霉素处理出愈率最高(60%～72%),污染率最低(0～15%),死亡率也最低(0)。在相同浓度下,使用链霉素外植体死亡率最低。[结论]MS培养基+25～50mg/L链霉素是油樟组培的最佳条件。     

栝楼细胞悬浮系的建立

[目的]为了解决栝楼悬浮细胞系在继代培养中容易退化,生长速度减慢的问题。[方法]以栝楼的茎为外植体诱导出愈伤组织,筛选出质地疏松、生长迅速、易于分散、可以长期进行继代培养的淡黄色半透明状愈伤组织系,将该愈伤组织接种在液体培养基中进行振荡悬浮培养,建立起分散程度好的栝楼悬浮细胞系。同时对影响愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养的条件进行研究,确定适合愈伤组织生长的条件及影响细胞悬浮培养的主要因素。[结果]看护培养可以使栝楼悬浮培养细胞长势良好,并在低密度下获得由单细胞形成的细胞系。[结论]该悬浮系的建立为栝楼细胞大规模培养,进而实现有效药物成分的工业化生产奠定了理论基础。     

甘草2种类型愈伤组织的细胞学显微结构观察

[目的]比较甘草茎段愈伤组织和根段愈伤组织在细胞学显微结构方面的差异。[方法]以有再分化能力的甘草芽愈伤组织和无再分化能力的甘草根段愈伤组织为试验材料,利用非生物制片技术与生物制片技术对二者培养24d,再用涂片法和石蜡法分别进行线粒体和细胞骨架的活体染色观察。[结果]观察发现,2种愈伤组织中都存在运动型线粒体,且2种不同类型的愈伤组织细胞中运动型线粒体数目存在显著差异。芽的细胞具有运动活性的线粒体数目多于根细胞,芽较根细胞的细胞骨架网状结构较密集,说明芽诱导的愈伤组织细胞中各项生理活动旺盛,启动分化所需的能量充足,易进行再分化,而胚根诱导的愈伤组织则相反。[结论]2种类型愈伤组织脱分化结构的差异对其再分化有一定影响。     

番茄愈伤组织诱导与细胞悬浮培养方法的改良

[目的]探讨番茄愈伤组织及细胞悬浮培养的最佳培养条件。[方法]用番茄的子叶作为外植体,研究不同浓度2,4-D与6-BA组合诱导"美国红"番茄子叶愈伤组织形成、不定芽发生的情况。[方法]在MS基本培养基上附加不同水平6-BA和2,4-D的培养基中,愈伤组织形态发生的情况不同,其中激素含量起主要作用。子叶外植体以MS+2,4-D0.05mg/L+6-BA0.01mg/L为最佳再生培养基,对愈伤组织的形成和不定芽的分化都有良好的效果。不同生长调节物质对细胞的悬浮培养有一定的影响,以2,4-D0.2mg/L+NAA0.2mg/L+ZT0.05mg/L的浓度组合为最佳。[结论]该研究确认了番茄愈伤组织及细胞悬浮培养的最佳培养条件,为番茄组织培养奠定了基础。     

省沽油组培过程中外植体灭菌技术的研究

[目的]寻求省沽油组织培养中适宜的外植体灭菌方法。[方法]研究了70%乙醇、0.1%HgCl2、0.1%HgCl2+70%乙醇组合在不同灭菌时间内对外植体生长的影响。[结果]适宜的外植体灭菌技术:茎尖用1%HgCl2+70%乙醇处理时间分别为5 min+50 s,成活率100%;茎段用1%HgCl2处理时间为15 m,成活率95%;幼叶用1%HgCl2处理时间为12 min,成活率85%。[结论]1%HgCl2+70%乙醇、1%HgCl2是省沽油外植体的有效灭菌剂。     

山苍子外植体初始诱导的研究

[目的]研究山苍子外植体的诱导方法。[方法]以不同类型、不同采集时间的山苍子茎段为外植体材料进行组织培养研究。[结果]以0.1%氯化汞对外植体处理10 min效果较好,此时外植体污染率为40.0%,死亡率为15.0%;以顶芽以下2～5个芽的茎段进行初始诱导效果较好;1月份为最佳取材时间,此时诱导率高达81.1%,污染率仅为11.7%;初始诱导中,以改良MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA培养基为最适培养基配方。[结论]1月采集的半木质化茎段用0.1%氯化汞消毒10 min后,以改良MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基可较好诱导山苍子幼苗。     

红肉苹果的组织培养快繁技术

[目的]建立红肉苹果的高效植株再生体系。【方法]以红肉苹果的茎尖和带腋芽的茎段为外植体，通过组织培养试验筛选出最佳的灭菌时间、基础培养基、增殖培养基和生根培养基。[结果]随着消毒时间的延长，外植体的污染率明显下降，但外植体受到的伤害显著增加。用0．1％HgCl2灭菌5rain的外植体生长正常，污染率仅为3．3％。在增殖培养基MS＋6一BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L、MS＋6．BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L和MS＋6一BA0．5mg／L＋NAA0．5mg／L中。每个外植体平均增殖不定芽4．1、6．8和3．3个。在生根培养基1／2MS＋0．1mg／LIBA＋0．1mg／LNAA、1／2MS＋0．2mg／LIBA＋0．2mg／LN从和1／2MS＋0．5mg／LIBA＋0．5mg／LNAA上幼苗的生根率分别为56．7％、96．7％和83．3％。[结论]该研究为红肉苹果的快速离体扩繁和工厂化育苗以及园林应用奠定了良好的基础。     

一串红高效离体再生体系研究

为建立一串红高效再生体系,研究了0.1% HgCl2不同灭菌时间对一串红种子和外植体污染率和启动率(发芽率)的影响,以及不同激素组合对一串红外植体茎段、带节茎段和叶片愈伤组织诱导率及其分化率的影响。结果表明：采用0.1% HgCl2处理9 min是一串红外植体较为理想的表面灭菌时间,而一串红种子处理8 min有较低的污染率和较高的发芽率;采用无菌苗的茎段和叶片能诱导出质量较好的愈伤组织,但其进一步分化产生不定芽的能力较差,而采用带节茎段诱导愈伤获得了较多的分化苗,且1.5 mg ·L-1 6-BA+1.0 mg·L-1 2,4-D+0.2 mg ·L-1 NAA配方适于一串红愈伤组织的诱导,2.0 mg ·L-16-BA+0.1 mg ·L-1 NAA组合是适宜一串红愈伤组织分化的激素配方。此外,含0.5 mg ·L-1 NAA的1/2MS固体培养基能使一串红分化苗生根率在90%以上,且移栽后一串红成活率可达80%以上。     

孔雀草组培繁殖技术研究

[目的]对孔雀草组培繁殖技术进行研究。[方法]利用组织培养技术,在MS培养基中加入不同质量分数的6-苄基氨基腺嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA),比较各培养基对孔雀草快速繁殖的影响。[结果]以茎尖或茎段为外植体进行组织培养,适宜的消毒时间为8min;茎尖分化效果好于茎段;生长调解剂含量高时,出愈率高;以MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.5 mg/L培养基为继代增殖培养基,继代周期为4周;试管苗在1/2MS+NAA 0.2 mg/L培养基上生根率最高(97%),且根系较发达。[结论]为孔雀草的工厂化育苗提供了技术支撑。     

垂枝侧柏离体再生体系建立初探

以垂枝侧柏[Platycladus orientalis (L) Francocv Pendula]当年生鳞叶茎段作为外植体,探索灭菌和愈伤组织诱导的最佳条件.结果表明,茎段经1 g/L HgCl2和7.5 g/L多菌灵组合处理8 min,灭菌效果最好,污染率仅为10.8％;愈伤组织诱导的最佳配方是1/2MS+BA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L.     

八角科观赏植物茎尖培养技术的研究(英文)

[目的]探讨八角科观赏植物组织培养及快繁技术体系。[方法]以八角科植物"孩儿莲"的顶芽为研究对象,以MS培养基为基本培养基,调查了培养基组成及抗褐化剂对顶芽茎尖存活和生长发育的影响。[结果]春季萌动初期的顶芽是八角科植物"孩儿莲"组织培养的最适外植体材料;灭菌条件以0.1%HgCl2溶液处理6min为宜,而常规酒精表面消毒会影响外植体存活;适宜的初代培养基为改良MS(改良大量元素与有机成分)+1倍量抗褐化剂+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA,继代培养基为改良MS(改良无机成分与有机成分)+1倍量抗褐化剂+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA。[结论]该研究结果为"孩儿莲"组培快繁技术的建立奠定了试验基础。     

水榆花楸微型繁殖技术的研究

[目的]研究水榆花楸的微型繁殖技术。[方法]以带侧芽的水榆花楸茎段为外植体,研究不同外植体消毒时间、基本培养基及植物生长调节剂种类和浓度对水榆花楸侧芽诱导、丛生芽增殖及生根的影响。[结果]外植体的最佳消毒时间为7 min;侧芽的最佳诱导培养基为MS+KT 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L;丛生芽的最佳增殖培养基为MS+KT 2.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L。[结论]该研究为水榆花楸苗木的大规模工业化生产提供了技术支持。     

不同外植体对红掌初代培养及愈伤组织诱导的影响

[目的]研究红掌优良品种相配套的组培快繁技术体系。[方法]以盆栽红掌新品种‘YNG5’为研究对象,采用附加6-BA 2.0mg/L和2,4-D 0.2 mg/L的1/2MS培养基,探讨了外植体的灭菌方法、材料种类、生理状态及取材部位对红掌初代培养效果的影响。[结果]在红掌叶片、叶柄、腋芽、花序及佛焰苞片5种外植体中,叶片与叶柄的培养效果较好,出愈率可达70%以上;在选取叶片与叶柄作为外植体时,用0.1%HgCl2处理5 min,可获得良好的灭菌效果;采用叶片为外植体时,以展叶5～8 d、不带主脉的幼嫩叶片为宜,采用叶柄为外植体时,以未展开叶、形态学上端的部位为宜。[结论]研究获得了红掌新品种‘YNG5’组织培养的最适外植体种类及灭菌方法,初步建立了红掌初代培养的技术体系。     

八角科观赏植物茎尖培养技术的研究

[目的]探讨八角科观赏植物组织培养及快繁技术体系。[方法]以八角科植物"孩儿莲"的顶芽为研究对象,以MS培养基为基本培养基,调查了培养基组成及抗褐化剂对顶芽茎尖存活和生长发育的影响。[结果]春季萌动初期的顶芽是八角科植物"孩儿莲"组织培养的最适外植体材料;灭菌条件以0.1%HgCl2溶液处理6 min为宜,而常规酒精表面消毒会影响外植体存活;适宜的初代培养基为改良MS(改良大量元素与有机成分)+1倍量抗褐化剂+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,继代培养基为改良MS(改良无机成分与有机成分)+1倍量抗褐化剂+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。[结论]该研究结果为"孩儿莲"组培快繁技术的建立奠定了试验基础。