微小隐孢子虫子孢子表面蛋白CP15/60编码基因核酸疫苗的研究

 将编码CP15 / 6 0的基因插入真核表达载体pcDNA3(+)中构建重组质粒pcDNA3 15 / 6 0 ,然后经鼻粘膜免疫怀孕成年山羊 ,观察其免疫应答的产生情况及其对后代的保护力。结果为抗CP15 / 6 0抗体存在于免疫山羊的血浆和初乳中。pcDNA3 15 / 6 0经鼻粘膜免疫的怀孕山羊产生的免疫力能传给子代 ,使子代对微小隐孢子虫 (Cryp tosporidiumparvum)感染产生保护。CP15 / 6 0 DNA免疫母羊的后代比非免疫母羊的后代排出卵囊少且排卵时间短。这就表明重组质粒pcDNA3 15 / 6 0可作为隐孢子虫候选核酸疫苗     

幼畜腹泻双价基因工程苗对牛和羊的攻毒保护试验

用幼畜腹泻双价基因工程苗以两种剂量（正常免疫剂量和１／２免疫剂量）分别免疫接种怀孕母牛和怀孕母羊，待其分娩并保证其所产幼畜（犊牛，羔羊）采食初乳后，经口灌服致幼畜腹泻的强毒活菌，结果，正常免疫剂量组，犊牛腹泻发病率为１４．３％，死亡率为零；羔羊腹泻发病率为１５．８％，死亡率为２．７％，１／２免疫剂量组，犊牛腹泻发病率为３０．７％，羔羊腹泻发病率为２４．４％，死亡率为１２．２％，未接种疫苗的对照组，     

养羊过程中应该进行的免疫

(1)每年3月、9月用羊四联苗(羊快疫、羊猝疽、羊肠毒血症、羔羊痢疾)对所有羊只预防注射1次,母羊配种后30￣40天用羊四联苗免疫注射1次,免疫期为半年;母羊如错过防疫季节的,新生羔羊在出生后1￣2周,用羊四联苗免疫注射1次,间隔6个月再免疫1次。(2)羊链球菌氢氧化铝疫苗,3日龄以上的羔羊第一次注射后,14￣21天再注射第2次,免疫期为半年。(3)山羊传染性胸膜肺炎氢氧化铝疫苗,预防山羊传染性胸膜肺炎,6日龄以下和6个月龄以上均可注射,免疫期为1年。(4)绵山羊痘弱毒冻干苗,预防山羊、绵羊痘,免疫期为1年。(5)羊传染性脓疮皮炎弱毒冻干苗,预防绵…     

努比亚山羊不同配种方法效果研究

为探明不同配种对努比亚山羊情期受胎率、年均产羔数和后代羊生长性能的影响。选择产龄和体重相近的经常努比亚母羊120只随机分成6组,每组20只;分别以情期本交配种1次和配种2次;山羊人工授精有情期配种1次,输精量0.6ml/次;配种1次,输精量0.8ml/次;配种2次,输精量为0.6ml/次,配种2次,输精量为0.8ml/次进行试验。不同配种方法对努比亚母羊情期受胎率和年均产羔数有一定影响,各组间相比较差异不显著(P0.05);山羊人工授精能提高后代羊的生长性能,但效果不显著(P0.05)。采用山羊人工授精早晚各配种1次,每次输精量0.8ml效果最佳。     

肉用羊常用的十种疫苗

及时给肉羊施用疫苗,可防止多种疾病,提高养殖效益。其常用的疫苗主要有以下十种。一、羔羊痢疾氢氧化铝菌苗用于怀孕母羊,在怀孕母羊分娩前20～30天和10～20天各注射1次,注射部位分别在两后腿内侧皮下,疫苗用量分别为2ml和3ml。注射疫苗后10天产生免疫力。羔羊通过吃奶获得被动免疫,免疫期5个月。二、羊四联苗和羊五联苗羊四联苗即快疫、猝疽、肠毒血症、羔羊痢疾苗。五联苗即快疫、猝疽、肠毒血症、羔羊痢疾、黑疫苗。每年于2月底3月初和9月下旬分2次接种,接种时不论羊只大小,每只皮下或肌肉注射5ml,注射疫苗14天后产生免疫力。三、羊痘鸡…     

坝上山羊羔羊软瘫综合征防治措施

<正>山羊羔羊软瘫综合征是一种以瘫软症状为主要特征的山羊羔羊疾病,该病近几年发病率明显增多。张家口坝上地区的山羊饲养量虽然不大,但是山羊规模养殖场羔羊发病率较高,散养的养殖户中羔羊发病率较低,规模场发病严重的羔羊死亡率可高达30-50%。该病一年四季都有发生,冬、春季节发病较多,特别是圈养母羊所生羔羊发病率较高。本地山羊经长期风土驯化对当地条件比较适应,发病率较低,与波尔山羊等杂交后代发病率较高,给养羊业造成极大的经济     

大肠杆菌K99—F41基因工程亚单位苗对牛和羊的攻毒保护试验研究

用大肠杆菌Ｋ９９－Ｆ４１基因工程亚单位苗以两种剂量分别免疫接种怀孕母牛和怀孕母羊，待其所产幼畜吃过初乳后，经口灌服幼畜腹泻的强毒活菌，犊牛５００亿／头，羔羊２５０亿只。结果，正常免疫剂量组，犊牛腹泻病率为１９％，死亡率为零；羔羊腹泻发病率为１５％，死亡率为５％。     

猪瘟病毒E2基因DNA疫苗的试验研究

用构建的E2-pcDNA4.0 DNA疫苗对Balb/c小鼠、家兔和仔猪进行免疫,经3次肌肉接种,间隔15 d免疫后,测定抗体水平.结果表明,构建的DNA疫苗能诱导小鼠产生中和性抗体,免疫家兔最少可抵抗10个最小感染剂量(M ID)的猪瘟兔化弱毒苗的攻击.攻毒试验结果表明,E2-pcDNA4.0 DNA疫苗可抵抗致死剂量的CSFV石门株强毒的攻击.     

山羊关节炎脑炎的诊断与防治

一、病因山羊关节炎脑炎是由山羊关节炎脑炎病毒引起的山羊的一种慢性病毒性传染病。二、流行特点山羊是本病的主要易感动物,各种年龄的羊均有易感性。消化道是主要的感染途径,羔羊经吮乳而感染。感染母羊所产羔羊当年发病率为16%～19%,病死率高达100%。     

主动免疫抑制素对山羊繁殖性能的影响

选取24头健康母雷州山羊平分成两组,分别在试验第1 d、第25 d和第49 d主动免疫抑制素重组蛋白,免疫原含量分别为2.0、1.5、1.5 mg/只,对照组用等量小牛血清蛋白(BSA)替代。免疫前两周用孕酮阴道海绵栓处理,免疫前一天撤去。最后1次免疫后20 d和30 d分别对山羊注射氯前列烯醇0.5 mg/只。在试验第0 d、第20 d、第40 d和第60 d进行颈静脉采血,在母羊第1次发情后摘取两侧卵巢计黄体数和各类型卵泡数,并称卵巢重。试验结果显示,经过初次免疫和两次加强免疫,山羊体内快速产生高水平抗抑制素抗体,伴随抗体水平的升高,血浆促卵泡激素(FSH)水平也逐渐升高,在加强免疫后显著高于对照组(P0.05),并且免疫组的黄体数显著和卵泡总数(P0.01)极显著高于对照组。结果表明疫抑制素基因工程苗可有效提高山羊排卵率。     

犬腺病毒2型的致弱和狐脑炎弱毒疫苗的研究

将犬腺病毒2型(CAV—2),用PK_(15)细胞继代53代后毒力减弱,然后用A_(72)细胞继续继代20代。经对继代毒的毒力测定和稳定性试验证明,53—73代毒对狐无致病性,而且毒力稳定,我们选用60—69代毒作制苗种毒成功地研制出狐狸脑炎弱毒苗。试验表明,该苗具有制造技术先进、使用安全、免疫原性好等优点。狐免疫10~(4.5)TCID_(50)/ml接种疫苗,保护率可达100％。该苗免疫21天后能耐受10~(-2)CAV—l强毒的攻击,免疫期为一年。现场应用26754头份均取得良好的免疫效果.     

羊口疮的流行病学调查

本文就羊口疮的流行病学进行了调查分析,根据座谈访问和资料记载,此病在甘肃省存在历史已久,分布地区广泛,对养羊业造成一定损失。采取病羊病料,作电镜观察,首次在我国发现了典型的羊口疮病毒粒子。绵羊、山羊对此病均易感,以羊羔发病和死亡严重。病的传播主要通过病羊与健羊直接接触,但间接接触病羊污染的饲管用具和外界环境也可使健羊感染。发病羊只在临床上呈口唇型经过,未观察到其他病型。     

山羊痘病毒结构蛋白P32基因的表达

将山羊痘病毒结构蛋白P32基因从重组质粒pMD-P32中亚克隆至pGEX-4T-1原核表达载体上,用构建的重组表达质粒pGEX-P32转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,1 mmol/L IPTG诱导表达,细菌裂解物经SDS-PAGE检测到分子量约为58 ku的目的蛋白,与预期的产物大小一致.Western-blotting表明该重组蛋白可被山羊痘阳性血清所识别.     

Identification and Phylogenetic Analysis of an Orf Virus Isolated from an Outbreak in Boer Goat in Shanxi Province

To identify and analyze the Orf virus in Shanxi Province, China, an Orr virus strain was successfully isolated from crust materials of boer goat with clinical sore mouth symptom from a goat farm of Shanxi Province by passaging in lamb testis (LT). The Orfvirus was identified by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) test, recurrent infection test, transmission electron microscopy, and PCR. The nucleotide and amino acid sequences of two genes of the Orf virus were analyzed. The results showed that under the electron microscopy the virus had a presence of typical parapoxvirus virions and there were many eosinophilic intracytoplasmic inclusions observed by hematoxylin-eosin (H&E) stain. In ELISA test, optical density (OD) readings of the sample showed a positive result, and the rabbits infected with the virus showed a typically Orf virus-infected appearance. All these findings proved that the sample was an Orf virus. The phylogenetic studies of Orf B2L and Orf F1L genes showed that the virus clustered in different branches and were closer to the Orf virus Nantou (DQ904351) and the OV-SA00 isolates (AY386264). Furthermore, the above results may provide some insight into the genotype of the etiological agent responsible for the Orf outbreak in Shanxi Province, and could also provide a comparative view of the B2L and F1L genes of parapoxvirus.     

鸡传染性喉气管炎病毒gD基因在重组痘病毒中表达及其免疫效力

将鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV) 河南长葛株gD基因重组到鸡痘病毒基因组中,获得了能高效表达糖蛋白D的重组鸡痘病毒(rFPV-gD) .将rFPV-gD经皮下刺种途径接种30日龄的固始鸡,用ILTV商品弱毒疫苗经滴鼻、点眼途径免疫试验鸡,同时设非免疫对照鸡群.分别于免疫后7、14、21、28、35和42 d采血分离血清,用微量血清中和试验测定ILTV抗体效价,并于免疫后42 d用ILTV强毒攻击所有试验鸡只.血清中和抗体检测结果表明:疫苗对照组与重组病毒组差异不显著(P>0.05) ,而重绀病毒组和疫苗对照组与空白对照组相比筹异均显著(P<0.05) .免疫42 d攻毒后鸡的发病情况表明,重组病毒组和疫苗对照组对ILTV强毒攻击的保护率均为96.67%,而空白对照组为6.67%,说明该重组病毒作为弱毒疫苗能够抵抗ILTV强毒的攻击,对免疫鸡群有较好的保护作用.     

Dot－ELISA在鸡IBD免疫检测及诊断中的应用研究

利用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）细胞适应株在鸡胚ＣＥＦ单层培养物上增殖后经超速冷冻离心制备抗原，以国产ＮＣ膜为载体建立了检测与诊断鸡ＩＢＤ的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法。经与ＡＧＰ、ＶＮ、ＥＬＩＳＡ等方法进行比较，表明本方法灵敏，快速，简易，特异性强，重复性良好。对ＩＢＤ免疫抗体的检测结果表明，采用首次以ＩＢＤ弱毒苗与灭能油乳剂苗同时免疫、再次用油乳剂苗加强免疫的接种程序，可获得显著而持久的抗体水平；带母源抗体（ＭＡｂ）的雏鸡于２１日龄首次免疫，效果良好；带ＭＡｂ的鸡胚于１８日胚龄接种ＩＢＤ弱毒苗，雏鸡出壳后可在较长时间内获得良好的保护。     

羊口疮活毒免疫接种的研究

本文利用羊口疮活毒就羊口疮的免疫特性和免疫方法进行了一系列研究.羊只接种活毒后15日即可产生明显的免疫力,按种后30日开始出现完全的免疫力,免疫持续期长达8个月。活毒对羊只的最小免疫量即为其最小感染量。在免疫持续期内,第二次免疫接种对羊只的免疫力似无明显的加强作用。股内侧皮肤毒和口唇皮肤毒具有相同的免疫作用。1—16日龄幼羔对活毒接种亦可产生免疫力。利用活毒在疫区对10,000余只羊作大规模预防接种收到良好效果。在发病群用活毒进行紧急接种,在隔离的条件下能制止疫情传播。     

应用间接竞争ELISA检测山羊痘抗体方法的建立

[目的]为山羊痘疫苗接种山羊后产生的抗体效价检测和山羊痘的诊断奠定基础。[方法]采用Vero-E6传代细胞分离山羊痘病毒抗原,建立检测山羊痘抗体的间接竞争ELISA方法。[结果]检测山羊痘抗体的间接竞争ELISA的最佳工作条件：最佳抗原包被浓度为1μg/ml,兔抗高免血清最佳稀释度为1∶16 000,待检血清的工作浓度为1∶400,阳性血清的临界值为45.19%,阴性血清的临界值为38.89%。用该试验建立的ELISA方法检测3 000份接种山羊痘疫苗的山羊血清,阳性检出率为83.33%,琼脂扩散试验检出率为77.33%,竞争抑制ELISA方法较琼脂扩散试验方法敏感。[结论]该方法具有特异性高、快速、敏感等特点,适合检测山羊痘抗体。     

不同饲养方式对妊娠期济宁青山羊繁殖性能的影响

[目的]比较舍饲和放牧补饲条件下济宁青山羊妊娠母羊的繁殖性能。[方法]分别研究舍饲和放牧补饲条件下青山羊妊娠母羊平均产羔率及产后发情率、羔羊初生重和断奶成活率,分析不同饲养方式对青山羊妊娠母羊繁殖性能的影响,探讨适宜的饲喂方式。[结果]养殖方式和营养水平对济宁青山羊发情率、受胎率和产羔率没有显著影响。由于舍饲和放牧补饲造成的管理和营养水平差异,舍饲组羔羊初生重和断奶成活率比放牧补饲分别提高10.7%和17.1%,表明饲养方式是影响济宁青山羊妊娠母羊繁殖性能的主要因素。[结论]可以通过改善饲养管理水平来提高母羊繁殖性能和羔羊成活率,从而进一步提高养殖效益,促进济宁青山羊规模养殖的发展。     

鸡传染性法氏囊病胚胎免疫研究

用ＩＢＤＢＪ８３６免疫接种１８ｄ龄鸡胚，雏鸡在１，３，６周龄用ＩＢＤ强毒攻毒，获得显著保护，其保护率分别为６６．７％，８７．５％和１００％，且早期免疫保护率高于雏鸡免疫。ＩＢＤ胚胎免疫安全，不影响孵化率和健雏率，对新城疫苗的免疫应答没有抑制作用。