一些杀菌剂和抗菌素对根癌菌和根癌抑制菌的作用

采用抑菌留法测定了6种杀菌剂和抗菌素对不同生物型根瘤上壤杆菌及其抑制菌的作用。结果表明，福美双对生物Ⅲ型根癌菌所有菌株都有较强抑制作用，抑菌圈直径（DBA）最大达23．2mm，对Ⅰ，Ⅱ型的个别菌株也有轻微抑制作用；多菌灵、乙磷铝和加瑞农对3种生物型的根癌菌无抑制作用；青霉素钠对Ⅰ，Ⅱ型根癌菌无抑制作用，对Ⅲ型抑制作用较强，最大DBA为27．0mm。硫酸链霉素对Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ型根瘤菌抑制作用显著，DBA最大值达40．8mm。对于根癌抑制菌，福美双在＜1000μg·g-1时．对K84和E26无作用，对HLB－2作用微弱，DBA为11．7mm。多菌灵、乙磷铝对3种根癌抑制菌均无作用。加瑞农对K84无作用，对E26和HLB－2作用轻微，最大DBA分别为13．2mm和10．2mm。青霉素钠对K84，HLB－2无作用，对E26的最大DBA达375mm。硫酸链霉素对HLB－2和E26无作用，对K84的最大DBA达26．2mm.     

生防菌B-09对人参灰霉病病原菌的抑制作用及生物防治效果

菌株B-09是1株从人参根际土壤中筛选出的生防菌。为明确B-09菌株在人参灰霉病生防应用中的潜力,进行了B-09室内抑菌效果和温室防治效果试验。结果表明,室内抑菌试验B-09活体菌株对人参灰霉病病原菌的抑菌圈直径达32 mm;B-09无菌发酵液对人参灰霉病病原菌菌丝生长的抑制率达90%以上,对人参灰霉病病原菌孢子萌发的抑制率达87%以上。在温室控病试验中,B-09无菌发酵液对人参灰霉病的防治效果达78.6%左右,与化学药剂处理组效果相当,表明供试生防菌可开发为生物农药的潜力。     

水稻纹枯病生防菌株筛选及防病促生研究

通过温室和大田试验研究31株生防菌对水稻纹枯病的防治效果和对水稻秧苗的促生效果.温室试验结果表明,人工接种纹枯病痛原菌20d后,31株生防菌株中有7株对水稻纹枯病的温室防治效果在50％以上,其中KJ33的防治效果最好,防效达到61.22％;有9株生防菌株对水稻秧苗生物量的增加量超过20％.选取在温室条件下防病和促生效果较好的2LN3、K J33和1LN6生防菌进行大田试验,结果表明3次统计调查结果中,2LN3在第30天防效超过常规药剂,且超过50％.生防菌株2LN3对水稻纹枯病表现出一定的防病促生效果,具有广阔的应用前景.     

玉米青枯病生防细菌的筛选

从自然界分离到细菌菌株1 193株,通过对峙培养筛选出5株对玉米青枯病病原菌(禾谷镰刀菌、禾生腐霉、肿囊腐霉)具有强抑制作用的拮抗菌,抑菌圈直径达到6~16 mm。温室盆栽试验结果表明,当接种病原菌为禾谷镰刀菌时,生防菌G28-6、K11-9、K18-5的防治效果都达到66%以上;当病原菌为禾生腐霉菌时,生防菌K3-3的防治效果达到54.29%;当病原菌为肿囊腐霉时,生防菌K18-5的防治效果为35.71%。生防菌还对玉米根的生长有显著促进作用。另外,生防菌G28-6和K18-5在玉米根部有较强的定殖能力,具有研制生防制剂的潜力。     

玫瑰根癌病病原及其敏感的生防菌

从玫瑰根癌样品中分离纯化获得31株分离物,其中15株有致病性。生理生化及纸电泳法测定结果表明,15株玫瑰根癌菌有7株属于 Agrobacterium tumefaciens(原生物Ⅰ型),8株属于 A.rhizogenes(原生物Ⅱ型),Ti 质粒全部为胭脂碱型。经平板和温室检测,根癌抑制菌 K1026,E26和 HLB-2对60%以上的玫瑰根癌菌株有抑制作用,以 E26的效果最好。     

瓦雷兹芽孢杆菌JK-XZ8对樱花根癌病的防效与抑菌物质初探

[目的]樱花根癌病近年对樱花产业的威胁日益严重,生产上亟需有效的防治措施。本研究旨在探讨瓦雷兹芽孢杆菌JK-XZ8的抑菌物质特性,同时测定其对樱花根癌病的田间防治效果。[方法]在平板拮抗测定菌株拮抗能力,通过酸沉淀提取该菌株的抑菌粗提物;利用PCR技术检测该菌是否含有推测的抑菌物质合成相关基因,测定该抑菌粗提物在不同条件下的稳定性;采用根部蘸浆法测定瓦雷兹芽孢杆菌(Bacillus velezensis)JK-XZ8对田间樱花苗木的生防效果。[结果]瓦雷兹芽孢杆菌JK-XZ8对根癌土壤杆菌存在拮抗能力且可产生抑菌物质;经PCR检测该菌株含有脂肽类基因bmyB,ituD,fenD和聚酮类化合物基因PK1、PK2、PK3等抑菌物质合成相关基因。此外粗提得到的抑菌物质,在高温、酸、碱、蛋白酶K、3 h内的紫外线的处理条件下,仍保持较高活性。田间试验表明菌株JK-XZ8对樱花根癌病的防治效果可达50%,优于市场上使用的K84生物菌肥(24%)。[结论]瓦雷兹芽孢杆菌可以产生稳定的抑菌物质拮抗病原菌,是一株可用于樱花根癌病防治的有效生防菌株。     

根癌病生防菌E26产生一种宽抑菌谱的细菌素

根癌病是葡萄生产中的一种重要病害。葡萄土壤杆菌E26(Agrobacterium vitis E26)是葡萄根癌病的生防菌株,在平皿培养时能产生抑制根癌病菌生长的细菌素(土壤杆菌素E26)。本研究针对E26菌株产生土壤杆菌素的生物学性状进行研究,初步分离纯化了土壤杆菌素E26并且分析了其部分理化性质和生物学特性。E26菌株在pH 7.0的改良AB液体培养基中能够正常生长并产生对葡萄根癌病菌K308(A.vitis K308)有明显抑制作用的土壤杆菌素E26。用活性炭吸附和70%乙醇洗脱可以从发酵液中分离土壤杆菌素E26;再经过DEAE-Cellulose阴离子交换柱层析和CM-Cellulose阳离子交换柱层析可以部分纯化土壤杆菌素E26。土壤杆菌素E26在80℃处理30min和在室温pH 3.0～9.0处理1 h,抑菌活性均不受影响。部分纯化的土壤杆菌素E26不仅对来自葡萄和其它寄主的17株供试的根癌病菌有显著抑制作用,而且对茄科青枯病菌、番茄疮痂病菌、水稻白叶枯病菌、棉花细菌性角斑病菌和白菜软腐病菌也有抑制作用。     

棉花黄萎病生防菌的筛选及挥发性抑菌物质检测

旨在筛选具有高效抑制棉花黄萎菌的芽孢杆菌并对其挥发性抑菌物质进行检测。采用稀释涂布平板法从棉花、玉米、向日葵根际以及苦豆子植株内分离得到菌株共65株,通过初筛、复筛共筛选到1株高效根际拮抗菌X4和内生菌N4,它们对棉花黄萎菌有较强抑制作用;通过 16S rDNA基因序列分析进行分子鉴定,平板对峙法检测2株生防菌对棉花黄萎菌的抑菌活性,生防菌发酵滤液处理法检测对棉花黄萎菌菌丝生长、孢子萌发、微菌核萌发、毒力蛋白产量的影响,GC-MS法对2株生防菌挥发性抑菌物质进行检测。结果表明:经分子检测2株高效拮抗菌均为芽孢杆菌;经2株1生防菌发酵滤液处理的棉花黄萎菌的菌丝生长受到抑制,菌株N4的抑制率为65.15%、菌株X4的抑制率为58.82%,且菌丝出现严重形变;经处理的黄萎菌孢子萌发率、微菌核萌发率、毒力蛋白产量均显著下降;研究发现2株拮抗菌的挥发性物质具有抑菌作用,GC-MS法检测2株菌发挥性物质主要是2,3-丁二醇、3-甲基丁酸、2-甲基丁酸和异丁酸,纯品物质检验发现2-甲基丁酸、3-甲基丁酸和异丁酸对棉花黄萎菌均有抑菌活性,2,3-丁二醇没有抑菌活性。可见:2个菌株对棉花黄萎菌具有潜在生防能力,可为生防菌剂的研发提供优良菌种。     

复合菌剂防治草莓根腐病的效果研究

为了获得草莓根腐病病原菌新棒状拟盘多毛孢（Neopestalotiopsis clavispora）的拮抗菌，筛选出3株生防效果好的菌株:贝莱斯芽胞杆菌（Bacillus velezensis-17）、解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefacen-27）和枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis-Y1-7），进行室内目标病原菌的平板对峙试验和生防效果的广谱性验证试验，对抑菌圈边缘菌丝进行10×4倍和10×10倍的显微镜观察，检测3株生防菌的代谢产物中是否含有吲哚乙酸（indoleacetic acid，IAA）和铁载体等促生物质和脂肽活性类抗病物质，并设计盆栽和田间试验检测其防病、促生和增产效果。室内平板对峙试验显示，供试3株生防菌均对目标病原菌及草莓灰霉病等6种病原菌有拮抗效果，抑菌圈边缘菌丝出现变细、扭曲、分支增多等畸形现象。3株生防菌均产生促生物质IAA和铁载体，菌株胞外粗提物具有拮抗拟盘多毛孢的效果，以上结果初步证明3株生防菌均具有促生抗病潜力。盆栽试验表明，同一生防菌的防病效果优于抗病效果，复合菌的防病促生效果优于单一菌株，防治效果高达7368%。田间试验表明，复合菌处理防病增产效果较优，防治效果高达57.18%~66.00%，每公顷增产12.97%~37.99%。盆栽和田间试验印证了3株生防菌分别具有促生防病及增产效果，以3株生防菌复合效果最优。     

水稻纹枯病的生物防治

利用从森林土和水稻生境分离得到的7株有生防潜力的拮抗细菌对水稻纹枯病进行田间防治试验,结果表明防效与菌株的生境来源无关,各生防菌对水稻均有明显的促生效果和对水稻纹枯病较好的防病能力;菌株7Ze23对水稻纹枯病的防效最高,田间防效为50.40％,与对照杀菌剂相比的相对防效为92％.同时发现平板无抑菌活性的生防菌对水稻纹枯病也有一定的防治效果.     

大樱桃根癌病原细菌分类地位鉴定

从烟台地区采集13份大樱桃根癌病样本,分离纯化出26个菌株,致病性测定表明23个菌株在指示寄主番茄上具有致病性;进一步经生理生化反应、碳源利用、选择性培养基等试验鉴定出16个根癌病菌菌株为Agrobacterium tumefaciens生物型2,占69.57%,为优势种群,其余7个菌株为生物型1.对大樱桃根癌病菌分类地位的确定为今后病原菌的系统研究和病害防治提供了理论基础.     

葡萄根癌生防菌株E26生防效果的离体检测方法研究

 【目的】筛选葡萄离体茎段和叶片的最适表面消毒条件、离体培养基和接种方法，建立生防菌株E26防治葡萄根癌病效果的离体检测方法。【方法】通过比较6种表面消毒方法，4种培养基和2种接种方法，建立最优的E26生防效果离体检测方法；并通过与温室、大田生防效果的比较以及瘤组织切片观察、冠瘿碱纸电泳检测验证该离体检测方法的准确性。【结果】 在1/2 B5培养基的基础上改良出适合于葡萄离体茎段培养用的MSC 1/2B5培养基；筛选出葡萄离体茎段的最佳消毒条件和接种方法，建立了检测E26生防效果的离体茎段接种法。该方法的检测结果与葡萄活体植株的检测结果基本一致，能够快速准确地反映E26的防效；并且，瘤组织切片观察和冠瘿碱纸电泳检测结果证实了该离体检测方法的可靠性。叶圆片法检测时，根癌瘤只能在葡萄叶圆片的叶脉处形成，瘤组织较小，难以准确反映E26的生防效果。【结论】本研究建立的离体茎段检测E26的生防效果是一种比较理想的离体检测E26生防效果的方法。     

拮抗根癌土壤杆菌的桃内生细菌的筛选鉴定

【目的】从对根癌病具有获得抗性(SAR)的桃单株"西北13-1"的枝条内分离鉴定内生细菌,分析其种群组成并从中筛选拮抗根癌土壤杆菌的高效生防菌,为桃根癌病的生物防治探索新方向并提供新的生防菌资源。【方法】首先,将根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)接种到"西北13-1"的桃树枝条上,并以无菌水接种作为对照;然后,分别于接种前、接种后10 d和接种后60 d采集接种处理和对照处理的"西北13-1"枝条。表面消毒桃树枝条样品后采用涂布平板法分离内生细菌;并结合16S r DNA序列鉴定,比对初步鉴定菌株,分析内生细菌的数量及组成差异。采用平板拮抗法、温室防病效果测定筛选拮抗根癌土壤杆菌的活性菌株,通过生理生化测定和分子鉴定,明确其分类地位。为揭示拮抗菌可能具有的其他拮抗作用机制,通过电击转化将含有GFP基因的p BBR1MCS-2质粒导入拮抗菌株中,然后进行GFP标记菌株对根癌土壤杆菌的抑菌试验、生长动力学分析、稳定性测试。采用灌根法提前接种标记菌株菌悬液,第2天接种根癌土壤杆菌菌悬液,应用激光扫描共聚焦显微镜和平板稀释法研究标记菌株在番茄根部的定殖情况。【结果】从"西北13-1"桃枝条中共分离到108株内生细菌,基于16S r DNA序列,这些菌株分别属于伽马变形菌类(Gammaproteobacteria)、阿尔法变形菌类(Alpharoteobacteria)、放线菌类(Actinobacteria)、厚壁菌类(Firmicutes)、拟杆菌(Bacteroidetes),共计5个细菌类群17个属,显示了桃树枝条中内生细菌丰富的种群多样性。其中,伽马变形菌类的肠杆菌属(Enterobacter)、泛菌属(Pantoea)和根瘤菌属(Rhizobium)最多,其数量在接种根癌土壤杆菌后显著上升,包含了14株产抑菌圈的拮抗菌中的10株细菌。经鉴定,筛选出的两株抑菌活性较高、具有生防潜力的拮抗菌10DM4-1和10DI2-2分别为泛菌(Pantoea deleyi)和肠杆菌(Enterobacter cowanii),它们可显著抑制向日葵根癌瘤的形成,防治效果分别为86.08%和89.87%。标记菌株10DM4-1-gfp和10DI2-2-gfp灌根番茄后,可在根部细胞间隙观察到目标菌落,标记菌株的数量在0—10 d时呈现急剧下降趋势,最后保持相对稳定的较低水平(104CFU/g),说明了它们在番茄根组织内具有良好的生存和定殖能力。【结论】桃"西北13-1"的内生菌中存在着能够拮抗根癌土壤杆菌的细菌,这些具有拮抗活性的菌株与桃"西北13-1"具有根癌病抗性有关。分离得到的泛菌10DM4-1和肠杆菌10DI2-2可能通过产拮抗物质、占据根部有利生态位拮抗根癌土壤杆菌。     

东北山樱桃对根癌病的抗性评价

以两年生实生苗新梢为试材,采用人工接种根癌土壤杆菌与发根土壤杆菌(浓度比为1∶1)混合液的方法,研究了东北山樱桃对根癌病的抗性。结果表明:接种后70d,接种根癌菌的东北山樱桃根部最大病瘤直径为10.24mm,病情指数为29.0,根据抗性评价标准判定东北山樱桃群体对根癌病中度抗病;其实生群体内存在显著的株间分离现象,有免疫、高度抗病、中度抗病、低度抗病、感病和易感病6种类型,分别占群体总数的18.0%、40.0%、28.0%、8.0%、5.0%和1.0%。东北山樱桃是优异的抗根癌病种质资源。     

新疆野生樱桃李抗根癌农杆菌与致瘤菌表达以及组织形态学观察

以新疆野生樱桃李实生群体为试材,通过接菌对其抗性进行鉴定,并对冠瘿瘤形成过程进行了观察,同时对抗病机理进行了初步探讨,结果显示:在对126棵新疆野生樱桃李抗根癌农杆菌的鉴定中,有25棵表现为高度抗病,约占鉴定总数的20%,说明新疆野生樱桃李是优良的抗根癌农杆菌种质资源。冠瘿瘤内部导管来源于寄主的木质部组织并先于筛管形成;冠瘿瘤形成早期对水分和养分的需求可能会大于同化产物。冠瘿瘤中存在有树状和球状2种结构维管束,树状维管束在冠瘿瘤不断扩大生长中发挥作用,而发育完成的冠瘿瘤主要以球状结构维管束行使运输功能。抗病植株中在侵染根癌农杆菌后玉米素核苷含量与对照差异不大,但感病植株在接菌18d时玉米素核苷含量显著增高;同时,ipt、iaaM和iaaH表达也明显高于抗病植株。说明ipt基因大量表达导致玉米素核苷含量在感病植株中快速上升,从而导致发病。     

宁夏设施毛桃根癌病发病情况调查及防治

2012年，在宁夏银川市贺兰园艺产业园、银川市西夏区目光温室、青铜峡金沙湾园艺产业园对设施毛桃根癌病发生情况进行了调查。结果表明：宁夏设施毛桃根癌病在6、7月为病害高发期，病瘤大部分发生于树体的根、根琐和树干等部位。针对病情提出了防治措施。     

捺细菌性根癌病菌生物型鉴定及生物防治

从福建的古田、沙县和长汀等地采集到的捺细菌性根癌病标样上分离到１２株能致癌的菌株，经细菌学鉴定后认为属根癌土壤杆菌生物型Ⅱ，其中有１０株菌株对土壤杆菌素８４（ａｇｒｏｃｉｎ８４）敏感．用Ｋ８４菌液浸捺砧木的根部３０ｍｉｎ后种植在用分离到的致癌病菌接种过的土壤中，株发病率为２．９６％；用清水处理的砧木种植在用致癌病菌接种过的土壤中和不接种的土壤中，株发病率分别为１９．８９％和３．８２％，表明Ｋ８４菌对捺细菌性根癌病有一定的防治效果     

长柄扁桃对根癌病的抗性研究

以两年实生长柄扁桃的新梢为材料,采用人工接种发根土壤杆菌的方法研究了长柄扁桃对根癌病的抗性及其分离情况。结果表明：长柄扁桃在接种后70 d时平均瘤径为3.27 mm,为中度抗病类型,实生长柄扁桃对发根土壤杆菌的抗性存在显著分离现象,其实生群体中存在高度抗病、中度抗病和中度感病3种抗病类型,分别占39.32%,42.69%和8.98%,是优异的抗根癌病植物种质资源。     

喹啉铜33.5%悬浮剂防治杨梅癌肿病田间药效评价

[目的]评价喹啉铜33.5%悬浮剂防治杨梅癌肿病的田间药效。[方法]设置不同剂量的喹啉铜33.5%悬浮剂,对杨梅癌肿病进行田间药效试验,调查防治效果、田间最佳使用剂量、持效期和对杨梅及非靶标有益生物的安全性等。[结果]在杨梅春梢抽发期,用喹啉铜33.5%悬浮剂推荐剂量有效成分335~446.7mg/kg,连续用3次,间隔7d,施药后26d防效为67.7%~71.3%,并对杨梅和其他非靶标生物安全。[结论]喹啉铜33.5%悬浮剂可以用于防治和控制梅癌肿病。