玉米小斑病菌C小种毒素诱导玉米离体根冠细胞凋亡的检测

将玉米同核异质体不育细胞质CB37及其正常保持系NB37的离体根冠细胞分为4组,其中3组分别用质量浓度50μg/mL、100μg/mL和150μg/mL的玉米小斑病菌C小种(HMC)毒素诱导,1组用pH6.5PBS诱导作为对照,诱导时间分别为1h、4h和7h。然后采用中性红与伊文思蓝染色、吖啶橙(AO)与溴化乙啶(EB)复染和Hoechst33258染色3种方法检测玉米根冠细胞的凋亡状况。结果表明:HMC毒素诱导玉米根冠细胞发生凋亡,并出现凋亡小体与染色体边集形态特征。中性红与伊文思蓝染色,只能检测出活细胞和死细胞,且在3种毒素浓度、3种处理时间下,CB37的根冠细胞死亡率均高于NB37;采用AO与EB复染方法,用150μg/mLHMC毒素处理7h时,CB37细胞凋亡率达到最高值70.2%,而NB37仅为36.7%;经Hoechst33258染色后,CB37用150μg/mLHMC毒素处理7h时达到最大凋亡率为74.5%,而NB37为30.7%。专效性HMC毒素对C细胞质敏感,在毒素伤害细胞致死过程中,C细胞质的细胞死亡率远高于N细胞质;在诱导细胞凋亡程序中,C细胞质的细胞凋亡率也远高于N细胞质,且其凋亡率随...     

玉米小斑病菌毒素诱导自交系Mo17凋亡的检测

利用提取的玉米小斑病菌C小种(Helminthosporium maydis race C,HMC）毒素处理同核异质体Mo17-C和Mo17-N叶片及叶片中的原生质体并进行凋亡检测。叶片凋亡检测采用DNA凝胶电泳分析,结果表明：Mo17-C和Mo17-N均出现DNA-ladder,其中HMC毒素质量浓度为250 μg/mL时,诱导12 h后Mo17-C出现的DNA-ladder最明显,而Mo17-N在HMC毒素质量浓度升至300 μg/mL时,诱导12 h后DNA-ladder才最明显。原生质体的凋亡检测采用Hoechst 33258荧光染色法并统计其凋亡率,结果表明：Mo17-C和Mo17-N均出现细胞凋亡的特征,包括产生凋亡小体、环状染色质和染色质边集的现象,且凋亡率均随毒素浓度的增加和诱导时间的延长而呈上升趋势。但对于相同处理,C细胞质的凋亡率显著高于N细胞质,Mo17-C对HMC毒素的敏感性大于Mo17-N。     

HMC毒素处理诱导玉米幼苗根冠细胞凋亡的结果观察

以玉米小斑病菌C小种毒素(HMC-toxin)分别诱导2对同核异质体玉米的幼苗根冠细胞(即:基因型为B37的玉米C型不育细胞质CB37和同核保持系NB37,基因型为Mo17的玉米C型不育细胞质CMo17和同核保持系NMo17),采用吖啶橙(AO)与溴化乙啶(EB)荧光复染的方法,研究细胞发生凋亡的差异性及凋亡规律。结果表明:CB37的幼叶接种PBS再经150mg/L的HMC毒素处理后,其根冠细胞凋亡率达最高值为45.3%,而NB37仅为15.3%;CMo17凋亡率最高达63.7%,NMo17仅为6.39%;C细胞质的细胞死亡率远高于N细胞质,凋亡率随诱导浓度和诱导时间的增加而增加。HMC毒素诱导根冠细胞发生凋亡,活细胞核发出绿色荧光,坏死细胞核则呈现橙红色荧光,且细胞核呈松散的颗粒状或新月状,凋亡细胞则发出黄绿色或绿色荧光,染色体固缩成新月状或颗粒状。     

HMC毒素诱导玉米专效寄主原生质体细胞凋亡的检测

以2对同核异质玉米B37和Mo17叶片的原生质体为试材,并将原生质体随机分为4组,HMC毒素质量浓度分别为0、50、100、150μg/mL,处理时间分别为1、3、6h。采用吖啶橙(AO)与溴化乙啶(EB)荧光复染的方法进行检测,观察处理后原生质体的凋亡特征及细胞凋亡率的变化趋势。结果表明:HMC毒素处理玉米原生质体后发生细胞凋亡,并出现凋亡小体、染色质边集或环状染色质等凋亡特征;经不同浓度HMC毒素处理B37和Mo17玉米原生质体,CB37的最大凋亡率为10.80%,NB37为4.90%,CMo17为21.00%,NMo17为8.83%;HMC毒素对2种基因型的C、N细胞质所测结果一致,均为C细胞质对毒素敏感,先出现细胞凋亡,N细胞质出现细胞凋亡的时间相对较晚;C、N之间的细胞凋亡率差异显著,且前者高于后者。当毒素浓度不变时,细胞凋亡率随毒素处理时间的延长而递增;当处理时间不变时,细胞凋亡率随毒素浓度的增加而上升。     

球孢白僵菌NJBb2101发酵液对Sf9细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

[目的]本文分析了对多种昆虫具有高毒力的球孢白僵菌菌株NJBb2101发酵液产物对细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用,旨在为筛选球孢白僵菌杀虫成分提供理论基础。[方法]以昆虫细胞Sf9为材料,利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测发酵液产物对细胞增殖的抑制作用;利用AO/EB(吖啶橙-溴化乙锭)染色和Annexin V-FITC/PI(Annexin V-fluorescein isothiocyante/propidium iodide)染色-流式细胞仪2种检测方法测定了高、低质量浓度(1.92和0.48 mg·mL~(-1))发酵液产物对细胞凋亡的诱导作用。[结果]NJBb2101发酵液产物对Sf9细胞增殖具有很强的抑制作用,测定的抑制中浓度(IC_(50))为0.907 mg·mL~(-1)(95%置信限为0.500～3.075 mg·mL~(-1))。AO/EB和Annexin V-FITC/PI染色-流式细胞仪检测发现高浓度(1.92 mg·mL~(-1))发酵液产物可以显著增强细胞凋亡率,平均凋亡率均在70%以上。[结论]球孢白僵菌发酵液中存在有效的杀虫成分,对昆虫细胞表现出增殖抑制和诱导凋亡的作用。     

菲律宾蛤仔酶解物抗肺癌H1299细胞的活性研究

[目的]探讨菲律宾蛤仔酶解多肽的制备及体外抗肺癌H1299细胞的活性。[方法]选择胰蛋白酶酶解菲律宾蛤仔,经超滤得到3kD以下的酶解多肽,应用MTT法、HE染色和AO/EB染色等方法检测其体外抗H1299细胞的活性。[结果]3 kD以下的酶解多肽作用于H1299细胞后,MTT法检测结果表明该多肽能抑制该细胞增殖,呈剂量和时间依赖;经HE染色和AO/EB染色发现H1299细胞出现凋亡的形态学改变。[结论]菲律宾蛤仔酶解多肽能明显抑制H1299细胞的增殖并诱导细胞凋亡。     

稻瘟病毒素对水稻根冠活细胞的影响研究

利用稻瘟病的菌丝悬浊液提取稻瘟病毒素,以毒素浓度、毒素处理根尖的时间及不同品种进行复因子试验,结果表明:毒素处理的不同水稻品种间根冠细胞死亡率差异极显著;而不同毒素浓度处理不同时间的根冠细胞死亡率差异不显著.对另外13个水稻品种在毒素抗性方面的研究结果表明:稻瘟病毒素对水稻根冠活细胞有较强的毒性作用,感病品种经毒素处理后细胞死亡率极显著高于抗病品种,细胞死亡率与稻穗颈瘟发病率呈极显著正相关,相关系数为0.91.     

菲律宾蛤仔酶解多肽抗前列腺癌DU-145细胞的活性研究

[目的]探讨菲律宾蛤仔酶解多肽抗人前列腺癌DU-145细胞增殖的活性。[方法]对菲律宾蛤仔内脏进行酶解,经超滤截取3 kD以下的多肽,应用MTT法、倒置显微镜观察和AO/EB染色等方法检测其体外抗DU-145细胞的活性。[结果]MTT法检测结果表明不同浓度的多肽对DU-145细胞有明显的生长抑制作用。通过倒置显微镜观察和AO/EB荧光双染观察到DU-145细胞出现细胞凋亡的形态学特征。[结论]菲律宾蛤仔3 kD以下的多肽具有抑制DU-145细胞生长,呈浓度和时间依赖性,并诱导细胞凋亡作用。     

植物甾醇抑制SGC-7901胃癌细胞生长和诱导DNA损伤的研究

为确定和评价植物甾醇对胃癌细胞SGC-7901生长的影响,采用MTT法检测植物甾醇对SGC-7901细胞生长的抑制作用,AO/EB和DAPI染色观察细胞形态的变化,单细胞凝胶电泳检测植物甾醇对SGC-7901细胞DNA的损伤.试验结果表明,植物甾醇对SGC-7901细胞生长具有抑制作用,并呈现时间-效应关系,不呈现剂量-效应关系;植物甾醇处理5d后,细胞出现皱缩、密度变小等变化;AO/EB荧光染色后,细胞核成固缩状,出现凋亡小体等凋亡细胞形态;DAPI染色后,可见细胞核边缘不整等凋亡细胞形态;单细胞凝胶电泳实验结果表明,植物甾醇混合物处理5 d的细胞出现了彗星现象.植物甾醇对SGC-7901细胞生长具有抑制作用,诱导SGC-7901细胞DNA的损伤.     

Cu2+胁迫诱导花鲢血细胞凋亡的研究

以花鲢Aristichthys nobilis（Rich）血细胞为研究对象,选用不同浓度的铜离子Cu^2＋进行不同时间的胁迫诱导,通过瑞士姬姆萨染色和AO/EB荧光染色,在光学和荧光显微镜下观察细胞形态变化,并统计凋亡率。结果表明：在Cu^2＋的胁迫作用下,花鲢血细胞呈现细胞变圆、核变圆、核边缘化、形成凋亡小体等凋亡形态特征,且凋亡细胞随着Cu^2＋浓度的增加和作用时间的延长而增加。表明Cu^2＋能诱导花鲢血细胞发生典型的凋亡,而且细胞凋亡率与Cd^2＋的浓度和处理时间成明显的剂量-效应关系。     

不同CN比堆肥碳素物质变化规律研究

针对堆肥化过程中常伴有少量CH4等温室气体排放造成环境污染等问题,采用密闭堆肥化装置,进行了不同碳氮比和通气条件下,堆肥过程中的气体释放规律、影响因子及其对堆肥理化性质的影响研究.结果表明,C/N=25、30堆肥处理的有机物降解率高于低碳氮比处理;全氮含量随着有机物的降解而浓缩,随着堆肥的进行而不断提高,到堆肥结束时,C/N=15、20、25和30处理的全氮含量分别为23.5、24、27.8 g·kg-1和28.4 g·kg-1;堆肥过程中,C/N=15、20、25和30的堆肥处理CH4累积排放为0.67、0.95、2.25g·kg-1和1.80 g·kg-1,损失比例占初始碳物质的0.39%、0.5%、1.24%和0.92%,并且CH4气体的排放主要集中在高温前期,高温期越长,排放的温室气体越多.高温期适当增大通气量,对于控制堆肥温度和减少温室气体生成有双重作用.     

The Higher Fullerenes: Isolation and Characterization of C76, C84, C90, C94, and C70O, an Oxide of D5h-C70

The toluene extract of the fluffy carbon material produced by resistive heating of graphite contains a variety of molecules larger than C(60) and C(70) in a total amount of 3 to 4% by weight. Repeated chromatography of this material on neutral alumina has led to the isolation of stable solid samples of C(76), C(84), C(90), and C(94). The characterization, which includes mass spectrometry, (13)C nuclear magnetic resonance, electronic absorption (ultraviolet/visible) and vibrational (infrared) spectroscopy identifies these all-carbon molecules as higher fullerenes. In addition, C(70)O, a stable oxide, has been isolated that is structurally and electronically closely related to D5h-C(70). This compound forms during the resistive heating process and probably has an oxygen atom inserted between two carbon atoms on the convex external surface of the C(70) skeleton.     

C3和C4植物中PEPC的生物信息学分析

PEPC是C4光合途径中的关键酶之一,为研究C3和C4植物PEPC功能上的差异,利用一系列的生物信息学软件分别分析了4种C3和C4植物PEPC基因编码蛋白的氨基酸组成、等电点、结构域、二级结构、空间结构等性质,并进行两类植物蛋白质的比对.结果表明,PEPC基因编码蛋白为不稳定蛋白质;二级结构主要是以无规则卷曲为主.同时...     

能力型课程《植物组织培养》教学改革探讨

《植物组织培养》课程经过不断的创新改革,执行全实验教学、自行选材设计实验方案、小班教学、以实际产品为考核标准等特色教学模式,大大提高了学生的实践与创新能力,教学效果良好。     

应用巢式PCR-RFLP方法鉴别我国常见的几种隐孢子虫

应用巢式聚合酶链反应(Nested PcR)-限制片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)方法对微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)、安氏隐孢子虫(C.andersoni)、贝氏隐孢子虫(C.baileyi)和猪隐孢子虫(C.s...     

C2C模式下海鲜产品的网络营销策略分析

随着互联网技术的普及和广泛运用,以及人们工作、生活方面的影响,很多消费者开始选择在网络上购物,文章根据现有的海鲜类产品网络营销分析的研究成果,结合当前电子商务发展的形式,分析海鲜产品在C2C模式下的网络营销手段,并指出其网络销售中存在的问题,最后给出一些针对C2C模式下的海鲜类产品的卖家的改进措施,以提高其自身的核心竞争力.     

预氧丝原位炭化无粘结剂C／C复合材料工程研究

从简化工艺、降低成本的目的出发,研究了以生石油焦为基体材料,以廉 ＰＡＮ－ＯＦ（聚丙烯腈预氧丝）代替ＣＦ作为增强纤维,不加粘结剂直接成型再原位炭化制备高性能Ｃ／Ｃ复合材料的可行性。实验表明,这种新工艺具有原材料便宜,工艺流程短操作简单等特点,有大幅度降低Ｃ／Ｃ复合材料制造成本的潜力。     

C3和C4植物光能利用效率和水分利用效率的比较研究

了解C3和C4植物光能利用效率(LUE)和水分利用效率(WUE)对光的响应关系,对揭示植物的光能利用与需水规律具有重要意义。以栾树(Koelreuteria paniculata)、辣椒(Capsicum annuum)、高粱(Sorghum bicolor)和玉米(Zea mays)为研究对象,用LI-6400光合仪测量了这4种植物的气体交换参数,并利用光响应机理模型所构建的叶片光能和水分利用效率对光的响应模型分别研究了它们的光能和水分利用效率的变化规律。结果表明:(1)栾树和辣椒的最大光能利用效率(LUE_max)和最大水分利用效率(WUE_max)比高粱和玉米低,所对应的饱和光强(I_L-sat)也小于高粱和玉米;(2)高粱的最大净光合速率(P_nmax)和饱和光强(I_sat)均比玉米小,但它的LUE_max和WUE_max却比玉米大。由此可知,C3植物的栾树和辣椒LUE_max和WUE_max比C4植物的高粱和玉米低,而相应的饱和光强(I_L-sat和I_W-sat)则没有这种趋势。     

我国生鲜农产品网络销售发展研究

介绍了生鲜农产品C2C网络销售的含义,分析了我国开展生鲜农产品C2C销售的背景,主要是电子商务的发展、消费理念的转变、生活方式的改变和我国农业生产的特点。介绍了我国新鲜蔬菜类和新鲜水果类生鲜农产品C2C销售的发展现状,指出了生鲜农产品C2C销售面临的困难,分别是农村网络基础设施建设不完善;农产品网络销售专业人才缺乏;农产品质量难以保证;物流体系尚不成熟;市场存在不确定性;政府的制度保障不健全。最后展望了基于C2C的我国生鲜农产品网络销售模式的发展趋势。