昆虫海藻糖酶的研究进展

为了解海藻糖酶的研究进展,从对昆虫海藻糖与海藻糖酶、昆虫海藻糖酶的酶学性质与海藻糖酶基因、昆虫海藻糖酶抑制剂等方面进行了综述,并对其作为杀虫靶标进行了展望.     

介孔分子筛固定化海藻糖合酶的研究

[目的]对介孔分子筛固定化海藻糖合酶进行研究。[方法]以基因工程菌所产海藻糖合成酶为材料,利用介孔分子筛MCM-41作为载体固定化海藻糖合成酶,并对固定化条件和固定化前后的海藻糖合酶性质进行比较研究。[结果]海藻糖合成酶可通过物理吸附法固定于介孔分子筛MCM-41孔道中,在pH为3,给酶量为62.5 mg/g的条件下,固定12 h时可得到最佳固定化效果;与游离海藻糖合酶相比,固定化后的海藻糖合酶pH稳定性和热稳定性明显改善,并具可重复操作性,有利于酶的使用和储放。[结论]该研究为开发新的固定化海藻糖合成酶提供了理论依据。     

转海藻糖合酶基因玉米株系的获得及其抗旱性研究

采用农杆菌介导玉米萌发种子转化方法,将海藻糖合酶基因(TPS)导入玉米自交系昌7-2中。PCR和Southern blot检测结果表明,目的基因已导入转化植株并整合到受体基因组上。田间抗旱性鉴定和生理生化指标结果显示,转基因植株(株系)的抗旱性明显高于对照。说明海藻糖合酶基因具有抗旱功能,利用植物基因工程技术对其进行玉米抗旱育种是切实可行的。     

海藻糖的应用及基因工程研究

简述了海藻糖的功效、生物制备、基因工程及其在医药和抗逆植物基因工程等领域中最新研究进展。并对昆虫体内海藻糖酶基因的研究进展及其前景加以展望。     

高温海藻糖合酶释放处理条件及其酶学性质的研究

[目的]对从Bacillus sp.SN02004-01菌所产高温海藻糖合酶产酶特性进行研究。[方法]通过试验研究了菌株细胞的破壁处理工艺及所得细胞海藻糖合酶性质。[结果]以2%甲苯＋0.2%EDTA为破壁试剂,菌体浓度0.05g/ml,温度为35℃,150r/min处理3.0h为最佳处理条件;该细胞酶最适反应pH值7.0,最适反应温度为60℃;Cu2＋、Zn2＋对该酶有抑制作用。[结论]在最佳处理条件下获得最高酶活为54.05u/ml,提高了2倍,说明该酶具有很好的生物反应特性。     

Streptomyces lavendulae X33海藻糖合酶基因克隆及酶学特性

[目的]海藻糖是一种由2个葡萄糖分子以α,α-1,1-糖苷键连接的非还原性双糖,在生物制品的保护剂方面具有良好的应用前景.海藻糖合酶(Trehalose Synthase,EC.5.4.99.16)可通过转糖苷作用将麦芽糖转化成为海藻糖,该反应仅需一步,且所用原料低廉,在酶法生产海藻糖上显示出一定的应用潜力.对链霉菌Streptomyces lavendulae X33中编码海藻糖合成酶的基因SlTs进行克隆,通过原核表达获得重组海藻糖合成酶,并研究其酶学性质.[方法]以Streptomyces lavendulae X33基因组DNA为模板,使用加尾PCR的方法克隆编码海藻糖合成酶的基因,构建含有组氨酸标签的重组表达载体,并将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达.重组蛋白经Ni-NTA纯化,以麦芽糖为底物研究其酶学性质,包括最适温度、最适pH和pH稳定性及金属离子和抑制剂的影响.[结果]从菌株Streptomyces lavendulae X33基因组中克隆得到了海藻糖合成酶基因片段SlTs GenBank登录号为MW217513.SlTs全长1719 bp,编码一个572个氨基酸的蛋白SlTs,分子量大小为66 ku.氨基酸序列分析表明SlTs与来源于Thermomonospora curvata DSM 43183的海藻糖合酶最高相似性为84％,与其它已报道的海藻糖合酶有较大差异.序列比对的结果显示SlTs与已解析结构的海藻糖合酶TcTs(PDB.5h2t)等具有的基序"DGGYD""NHTS""QPDLN""RXDAVPYL""LLAEANQ""LRNHDELTLE"高度保守,具有一个由Asp218-Glu260-Asp330构成的活性中心,表明SlTs归属于糖苷水解酶GH13家族.经异源表达,Ni2+-NTA亲合层析后进行纯化.重组酶rSlTs最适反应温度为20℃,最适反应pH为7.5,在以麦芽糖为底物,最适反应条件下测得的比活力为67.6 U/mg.重组酶rSITs在20℃下处理1 h活力不变,处理9 h时,残留酶活为60％.但在50℃下处理0.5 h活力丧失,表明rSITs对热敏感.重组酶rSITs在pH5.0～8.0有活性,最适反应pH为6.0,在pH6.0～7.0处理12 h活力稳定.1 mmol/L Ca2+对重组酶rSlTs有激活作用,Ni2+、Zn2+、Cu2+对重组酶rSlTs有抑制作用,其余金属离子对酶活无影响.甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂和SDS对重组酶rSlTs有显著抑制作用,TritonX-100对酶活无显著影响.[结论]首次从Streptomyces lavendulae X33中克隆得到海藻糖合成酶,并对其进行了酶学性质研究,为开发新的海藻糖合成酶提供理论基础.     

海藻糖的酶转化法生产技术

评述了海藻糖-6-磷酸合成酶和海藻糖-6-磷酸酯酶、海藻糖磷酸化酶、海藻糖合成酶和蔗糖磷酸化酶、麦芽寡糖基海藻糖合成酶和麦芽寡糖基海藻糖水解酶、糖基转移酶和淀粉酶转化法、海藻糖合酶等酶转化法生产海藻糖的技术路线和特点,并展望了海藻糖合成酶转化法生产海藻糖的前景。     

海藻糖合成途径及分子生物学研究进展

为了更好地指导海藻糖基因工程菌株的构建,进一步提高海藻糖的产量,综述了国内外近30年,尤其是最近10年海藻糖合成途径及分子生物学方面的研究,表明不同的生物中共存在5条海藻糖合成途径,虽然各途径中的酶与基因已基本分离到,工程菌株的构建也渐次展开,但大部分工程菌局限于用来研究途径中单一酶的理化性质,对海藻糖产量提高方面的研究还存在不足.随着现代生物技术尤其是DNA重组技术、宏基因组学与合成生物学的迅速发展,构建工程菌进行异源高效表达将成为今后海藻糖研究的一个热点.     

酵母海藻糖合成酶基因植物表达载体的构建与转化

以从原核表达载体中酶切得到的tps1基因为模板，设计适当的引物，利用PCR技术，克隆出大约1．5kb的片段．PCR产物经回收后，与Pc^CAMBIA1303连接并转化大肠杆菌DH5α，阳性重组子经PCR鉴定，表明已获得海藻糖磷酸合成酶基因的植物表达载体．用基因抢转化小麦幼胚，经组织培养得到了含有海藻糖合成酶基因的小麦植株．     

海藻糖的特性及其在植物抗逆中的应用

干旱、盐碱和冻害是限制植物生长发育的主要逆境因子,海藻糖是一种非还原性二糖,在胁迫条件下可有效维持生物膜、细胞内活性物质的稳定性,从而提高植物对干旱等非生物胁迫的耐受能力。结合海藻糖的理化性质,综述了海藻糖在提高植物抗旱、耐盐等抗逆性方面的研究进展。     

特效植物营养素的表观遗传效应对沙糖桔 产量及生化性状的影响

以沙糖桔为材料,采用特效植物营养素（SPNE）喷施植株进行了连续两年的试验,第1 年的试验分为用 营养素喷施和清水喷施两个类型,第2 年将试验分为上年营养素喷施的再用营养素喷施、上年营养素喷施的用清水 喷施、上年清水喷施的用营养素喷施及上年清水喷施的再用清水喷施4 个类型。结果表明,SPNE 处理的第1 年能提 高沙糖桔的产量和品质,上年经SPNE 处理的沙糖桔在下年不处理还能产生超过对照的表观遗传效应,表现为产量 性状及可溶性固形物含量、蛋白质含量、叶绿素含量和过氧化物酶等生化性状超过对照。两年都用营养素处理的表 现效果最佳。     

杜仲根段器官分化极性的研究

以杜仲根段为试材,种根竖直正插时两端根和芽的分化极性较强,上端形成芽,下段形成根。ＡＢＴ生根粉和６—ＢＡ分别可强化极性的表现。倒插时,形态学下段器官分化极性不显。     

辽河三角洲湿地重金属在土壤及植被中的分布特征

对辽河三角洲湿地土壤和植被中重金属的分布特征进行调查分析。结果表明,Cd的垂直分布规律为先降低后升高,且40~60cm土层含量最高;Cr的垂直分布表现出先升高后降低的趋势,且40~60cm土层最低;Pb的垂直分布表现出由表层向底部逐渐降低的趋势;Zn的垂直分布与Cr相似,也表现出由表层至底部先升高后降低的变化趋势;Cu无明显的垂直分布规律。在土壤重金属水平分布上,由沿海向内陆,表层土壤重金属逐渐增加,且靠近双台子河的芦苇湿地表层土壤重金属含量相对较高。翅碱蓬（Suaeda heteroptera）吸收和累积重金属的能力要高于芦苇（Phragmites communis）,但芦苇对重金属的累积量与土壤中重金属含量并不存在明显的正相关关系,且芦苇叶中吸收和累积重金属的量要高于茎。     

不同种源砂生槐种子及幼苗生长变异研究

对砂生槐4个种源的种子、幼苗性状进行系统分析。结果表明,种源间种子性状差异显著。种子性状千粒重以拉萨种源的最重,达37.64g,朗县种源种子最长,达0.50cm,拉萨、日喀则产种子形态为卵圆形,米林、朗县产种子形态为长卵圆形。砂生槐苗高生长进程符合Logistic曲线方程,苗高生长期131～134d,速生期46～57d,速生期生长量占总生长量比率为61.0%～62.3%。种源间苗木生长性状差异显著或极显著,拉萨种源的生长量最大,一年内积累的干生物量最多,朗县种源的根系发达。     

苹果梨园昆虫种类情况调查

2000～2001年，对延边大学农学院试验苹果梨园昆虫种类进行了普查，并对历年来梨园害虫发生情况进行了咨询和有关资料的查询工作．初步查明，该生态系统内主要昆虫种类包括昆虫纲的9个目、33个科、47个种和蛛形纲的2个目．主要害虫为梨木虱、梨黄粉蚜、梨叶锈螨、梨二叉蚜、红蜘蛛类等刺吸式口器害虫．主要天敌为异色瓢虫、龟纹瓢虫以及食蚜蝇等．     

宁夏引黄灌区耕地土壤有机质及养分质量分数变化趋势

通过对比1985年和2005年两次土壤调查结果,发现宁夏引黄灌区20年来耕地土壤有机质及养分质量分数趋于增加,速效磷质量分数明显增加,速效钾质量分数趋于降低.2005年灌区耕地土壤有机质质量分数平均为14.18g/kg,年增幅平均为0.4%.耕地土壤全氮质量分数趋于增加,2005年灌区耕地土壤全氮质量分数为0.945g/kg,增幅为0.9%.耕地土壤碱解氮质量分数变化不大,平均为54.48~65.77 mg/kg.2005年灌区耕地土壤速效磷质量分数为34.86 mg/kg,增幅为8.6%.耕地土壤速效钾质量分数趋于降低.2005年灌区耕地土壤速效钾质量分数为150.1 mg/kg,平均年降幅为1.8%.灌区耕地土壤有机质及养分质量分数空间变异以速效磷质量分数变异系数最大,反映出灌区耕地磷肥施用量不均衡.从影响耕地土壤有机质及养分质量分数变化的各种因素方面,阐明了其变异趋势的原因,提出要大力推广测土配方施肥技术,积极开展以增施有机肥为中心沃土工程等培肥地力的对策.     

曲靖烟区土壤养分的空间分布特征研究*

 为了解曲靖烟区土壤养分含量的分布状况,采集和分析了曲靖市2560份土壤样品,并利用地统计学方法对其养分含量进行了研究。结果表明：曲靖大部分地区植烟土壤偏酸性,会泽西部、麒麟区中部土壤偏碱;有机质含量丰富,除会泽北部外,其他地方含量均超过2.25%;碱解氮含量总体偏低,平均为12028mg/kg;速效磷含量较高,从东往西明显升高,各县差异较大;速效钾含量从东南向西北有下降的趋势;全氮含量较适宜,由东往西有下降的趋势;全磷含量在宣威、罗平、师宗分布适宜,其它地区含量均偏低;全钾含量从东往西升高,会泽西部、马龙沾益交界处含量适宜,宣威南部、沾益富源交界处含量过低。     

河南省小麦新品种(系)品质性状分析

分析了2009-2010年度河南省水地区试70个参试小麦新品种(系)的品质性状。结果表明:河南省70个小麦新品种(系)平均籽粒容重803.3g/L,蛋白质含量14.94%,湿面筋含量32.2%,沉淀值60.0mL,吸水率59.1%,形成时间4.1min,稳定时间5.3min,弱化度119FU,出粉率69.3%。不同组小麦新品种(系)各品质指标变化趋势存在差异,其中容重、吸水率、形成时间、弱化度呈现冬水组>春水组,而沉淀值、稳定时间、出粉率呈现冬水组<春水组,其中蛋白质、湿面筋含量较接近。综合品质性状达到强、中、弱筋小麦品质标准的分别有7个、63个和0个品种。提高小麦品种的吸水率、筛选合适的形成时间、提高稳定时间、降低弱化度、提高出粉率是今后河南小麦品种品质育种的主要问题。     

玉米子粒自然脱水速率的分析

对 2 3个不同熟期玉米杂交组合生理成熟后 10d内子粒自然脱水速率进行了分析。结果表明 ,生理成熟时子粒含水量在 31 96 %～ 4 3 6 0 % ,同一熟期的材料子粒脱水速率有显著差异 ,变幅在 0 18%～ 1 80 %。子粒脱水速率大小与生理成熟早晚无明显相关 ,受生理成熟时含水量影响较大     

高寒草原3种蓼科植物酚类物质含量及存在状态分析

对高寒草原3种蓼科植物全株不同部位的酚类物质含量进行了测定和比较.结果表明:植物不同的部位的酚类物质含量不同.珠芽蓼、西伯利亚蓼和圆穗蓼酚类物质含量最高的部位分别为根、茎叶和花穗,总酚含量分别为67.18、72.41、98.12 g/kg;简单酚含量分别为31.32、34.90、30.16 g/kg;单宁含量分别为35.86、37.51、67.96g/kg;缩合单宁含量依次为26.09、36.90、31.69 g/kg.珠芽蓼与西伯利亚蓼茎叶与根中酚类物质含量高于圆穗蓼,花穗中含量反之.3种植物酚类物质的蛋白质结合能力为珠芽蓼>西伯利亚蓼>圆穗蓼.