碳源及植物生长调节剂对亳芍愈伤组织生长和芍药苷积累的影响

[目的]研究不同碳源和植物生长调节剂对亳芍愈伤组织生长和芍药苷积累的影响。[方法]以亳芍根茎为外植体,改变培养基中碳源(蔗糖、果糖、葡糖糖、麦芽糖、可溶性淀粉)和植物生长调节剂种类(6-BA、NAA、2,4-D),考察亳芍愈伤组织增长量和芍药苷积累量。[结果]碳源中,对亳芍愈伤组织的增长量以蔗糖最高,葡糖糖最有利于芍药苷积累;组合使用植物生长调节剂6-BA、NAA和2,4-D比单独使用6-BA更有利于愈伤组织生长和芍药苷积累,但高浓度的2,4-D抑制愈伤组织生长和芍药苷积累。[结论]确定了亳芍愈伤组织生长和芍药苷积累的最佳碳源和植物生长调节剂组合,为葡萄糖30 g/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L。     

褐变抑制剂对黄芩愈伤组织褐变及次生代谢产物的影响

研究了不同褐变抑制剂对黄芩愈伤组织继代培养中褐变、生长以及黄芩愈伤组织次生代谢产物黄芩苷、黄芩素含量的影响。结果表明：在MS＋0．5mg／L2,4-D＋1．0mg／L6-BA继代培养基中分别添加1．0g/L植酸、10mg／L抗坏血酸、2．0g/L聚乙烯吡咯烷酮能有效抑制黄芩愈伤组织褐变,促进其生长。在综合考虑愈伤组织的褐变率、生长增殖倍数（干重）基础上,以黄芩苷产量为指标,添加10mg／L抗坏血酸＋1．0g/L植酸组合效果最好;以黄芩素产量为指标,添加1．0g/L植酸效果最好。     

玉竹愈伤组织诱导及其细胞悬浮培养体系的建立

以玉竹叶片和根状茎为外植体,研究植物生长调节剂、碳源和pH对玉竹愈伤组织诱导的影响以及植物生长调节剂对愈伤组织增殖的影响,通过正交试验初步建立并优化玉竹愈伤细胞的悬浮培养体系。结果表明,叶片和根状茎愈伤组织诱导的最佳培养基均为MS+1.0mg·L~(-1)?6-BA+0.5mg·L~(-1)?NAA+30%蔗糖,培养基最佳pH5.6,叶片和根状茎愈伤组织增殖的最佳植物生长调节剂组合均为2.0mg·L~(-1)?6-BA+0.8mg·L~(-1)NAA,且根状茎愈伤组织的诱导率和增殖倍数均明显高于叶片。根状茎愈伤细胞悬浮培养的最佳接种量80g·L-1,最佳植物生长调节剂组合1.5mg·L~(-1)6-BA+0.6mg·L~(-1)?NAA,细胞生长曲线与多糖含量变化曲线均呈"S"形,细胞最佳继代周期16d,多糖含量在培养14d时最高,培养基pH呈先下降后上升然后趋于稳定趋势。     

双色茉莉叶片初代培养物的建立及愈伤组织诱导

以双色茉莉的叶片为外植体,探讨外植体取材时期、消毒时间、不同植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导的影响,结果表明:取材时期对双色茉莉叶片诱导愈伤组织的影响较为显著,4月份和10月份是双色茉莉叶片取材的最佳时期;不同消毒时间对双色茉莉叶片愈伤组织诱导影响不同,其中在0.1%的氯化汞中消毒5~6 min污染率较低,且诱导产生的愈伤组织生长状况最优;培养基中6-苄氨基嘌呤(6-BA)质量浓度/萘乙酸(NAA)质量浓度影响了双色茉莉叶片愈伤组织的诱导,当6-BA质量浓度/NAA质量浓度为1/4~1时有利于愈伤组织的诱导,形成的愈伤组织质量较好;添加激动素(KT)则不利于双色茉莉叶片愈伤组织的诱导。该研究以双色茉莉叶片为外植体,培养获得了愈伤组织,其中愈伤组织诱导的适宜培养基有MS+1.0 mg·L^-16-BA+1.0 mg·L^-1 NAA、MS+1.0 mg·L^-16-BA+2.0 mg·L^-1 NAA、MS+1.0 mg·L^-16-BA+4.0 mg·L^-1 NAA和MS+2.0 mg·L^-16-BA+2.0 mg·L^-1 NAA,这为双色茉莉离体繁殖再生体系的建立奠定了基础。     

百蕊草愈伤组织培养影响因素研究

[目的]对影响百蕊草愈伤组织培养的因素进行研究。[方法]以百蕊草幼嫩枝条和叶片为外植体,研究不同浓度6-BA、NAA、2,4-D或其组合,碳源以及pH等因素对百蕊草愈伤组织生长的影响。[结果]3种植物生长调节剂和碳源对愈伤组织的生长都有促进作用,对愈伤组织诱导生长的培养基最佳组合为MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.15 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,碳源中蔗糖显著促进了百蕊草愈伤组织的增长,以30 g/L的蔗糖为最佳;pH 5.8~6.0有利于愈伤组织的诱导和生长。[结论]该研究为后续研究百蕊草细胞悬浮培养体系的建立提供材料。     

激素对罗汉果增殖、生根及愈伤组织大小影响研究

以罗汉果无菌苗茎段为试验材料，在附加不同种类及浓度激素的MS基本培养基上进行罗汉果适宜继代和生根配方筛选。研究结果表明：随着6-BA浓度的增加，愈伤组织大小和增殖系数均逐渐增大，罗汉果继代较优配方为MS基本培养基添加0．1mg·L^-1 6-BA、0．01mg·L^-1 NAA、30g·L^-1 白糖和5g·L^-1琼脂粉。罗汉果适宜的生根配方为MS基本培养基添加0．1mg·L^-1 NAA、30g·L^-1白糖和5g·L^-1琼脂粉，用其培养罗汉果茎段基部愈伤组织较小，生根率达到94．73％，移栽成活率高达97．78％。     

紫山药愈伤组织的诱导及其分化

以紫山药无菌苗为试材,研究了植物生长调节剂种类、材料类型、光暗条件等对其愈伤组织诱导及其分化的影响。结果表明:(1)细胞分裂素6-BA和KT对紫山药愈伤组织的诱导效果差异不显著,适合紫山药茎段愈伤组织诱导的最佳植物生长调节剂组合为KT 2.0 mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1或6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1;(2)同一培养基上不同外植体愈伤诱导效果存在差异,在植物生长调节剂配比6-BA 2.0mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1下,微型块茎、茎段的愈伤组织诱导率比叶片高,分别为91.167%、86.300%、45.167%;(3)添加0.25g·L-1的活性炭能明显减轻紫山药茎段愈伤组织的褐化,愈伤生长良好,且愈伤组织的诱导率较高;(4)光暗条件对紫山药茎段愈伤组织诱导率的影响差异不显著,但暗处有利于愈伤组织的增殖生长;(5)不同植物生长调节剂配比对愈伤组织不定芽分化的影响显著,适合紫山药愈伤组织再分化的最佳植物生长调节剂配比为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.02mg·L-1,诱导率达50%以上,芽苗生长粗壮。     

水解酪蛋白和不同碳源在猕猴桃组织培养的作用

本试验以MS(ZT1．0mg．L^-1 NAA0．1mg．L^-1)为培养基，添加不同浓度的水解酪蛋白(CH)，研究了CH对猕猴桃组培过程中愈伤组织的诱导及芽的分化的影响，并以不同浓度的蔗糖和葡萄糖作为碳源研究其对芽分化的影响。结果表明：CH对诱导愈伤组织和芽的分化并没有明显的效果，对促进芽苗的生长有一定作用，以600mg．L^-1的效果最为显著；蔗糖和葡萄糖对芽分化的效应无多大差别，低浓度的碳源(如10g．L^-1)不能很好形成芽的分化和生长，过高浓度的碳源(如40g．L^-1，50g．L^-1)虽能较好诱导芽的分化，但却抑制芽苗的生长，导致芽平均高度较低。     

碳源和植物生长调节剂对辣椒花药培养效率的影响（摘要）

[目的]为进一步提高辣椒花药培养效率。[方法]采用MS培养基,以博辣娇红为试材,研究碳源种类与浓度对花药愈伤组织诱导的影响;以佳玉为试材,按L16（4^5）正交试验设计,研究植物生长调节剂种类与浓度对辣椒花药培养效率的影响。[结果]愈伤组织和胚状体诱导率各浓度处理的均值麦芽糖虽略高于蔗糖,但未达差异显著水平;麦芽糖或蔗糖作碳源,3%～6%的浓度有利于提高愈伤组织与胚状体的诱导频率,超过6%以后,愈伤组织和胚状体诱导率随糖浓度的增加而极显著下降。生长调节剂对愈伤组织诱导率的影响为2,4-D﹥ZT﹥NAA﹥KT﹥6-BA;对胚状体诱导率的影响为2,4-D﹥NAA﹥ZT﹥KT﹥6-BA;2,4-D、ZT、NAA和KT对愈伤组织与胚状体诱导率均有显著或极显著影响;生长调节剂的使用浓度,2,4-D和ZT以1.0mg/L、NAA和KT对0.5mg/L的效果最好,ZT对提高愈伤组织和胚状体诱导率的效果比KT和6-BA都好;2,4-D1.0mg/L﹢ZT1.0mg/L﹢KT0.5mg/L﹢6-BA0.5mg/L是佳玉花药愈伤组织和胚状体诱导培养适宜的生长调节剂组合。[结论]该研究为辣椒花药培养研究提供了依据。     

树兰未成熟种子离体快繁技术

以树兰未成熟种子为外植体,研究了原球茎的诱导、增殖、萌芽及生根培养等几个关键步骤的配方。结果表明：树兰种子播种在MS＋BA0．5mg·L^-1。＋NAA0．25mg·L^-1＋蔗糖25g·L^-1培养基上,7～10d后开始有绿点产生,25d左右就可看见原球茎团;1／2MS＋6-BA1．5mg·L^-1＋NAA0．25mg·L^-1＋蔗糖20g·L^-1＋CH2．0g·L^-1的培养基对原球茎增殖的效果最佳,增殖倍数超过9倍;将原球茎转入1／2MS＋NAA0．1mg·L^-1＋6-BA0．2mg·L^-1＋蔗糖25g·L^-1的培养基上,原球茎的出芽率超过90％;将芽接种在1／2MS＋NAA0．5mg·L^-1＋BAO．1mg·L^-1＋香蕉泥70g·L^-1＋蔗糖25g·L^-1的生根培养基中,生根率达94％：以水苔作为移栽基质较理想,移栽成活率可达92．5％,且植株生长健壮。     

山麦冬组织培养及无性系建立的研究

研究了山麦冬嫩叶愈伤组织诱导和分化、不定芽的分化和生根、试管苗移栽和移植所需要的条件,建立起山麦冬嫩叶的无性系技术。结果证明：MS＋6-BA0.4 mg.L-1＋NAA 1.0 mg.L-1＋2,4-D 1.5 mg.L-1是嫩叶愈伤组织诱导的理想培养基;1/2MS＋AgNO31.2 mg.L-1＋BA0.5 mg.L-1＋NAA0.1 mg.L-1是诱导愈伤组织和不定芽分化的理想培养基;1/2MS＋IAA0.2 mg.L-1＋NAA0.1 mg.L-1是不定芽生根培养理想培养基;移植的试管苗生长旺盛、根系发达,其他生物性状保持不变。     

不同理化因子对黄芩悬浮细胞系的影响

采用植物组织培养手段建立了稳定的黄芩细胞悬浮系,通过正交试验筛选出最佳的MS液体培养基为:NH4+/NO3-30/40 mmol/L,Ca2+3 mmol/L,pH值5.4,蔗糖3%.研究了碳源、肌醇、激素、水解酪蛋白(CH)和水解乳蛋白(LH)对悬浮系中黄苓甙含量的影响.结果表明:复合碳源、较低浓度肌醇对悬浮细胞系中黄芩甙的积累和胞外释放具有促进作用,2.0 mg/L NAA+0.5 mg/L Kt最有利于悬浮系中黄芩甙的积累;水解酪蛋白和水解乳蛋白对黄芩甙的生成没有促进作用,反而起到了一定的抑制效应.     

金桔体细胞胚胎诱导的研究

采用金桔无菌苗叶片为外植体,在单因素试验的基础上,通过正交试验研究不同生长调节剂对金桔胚性愈伤组织诱导的影响。结果表明：MS＋2,4-D2.0mg·L^-1＋BA0.5mg·L^-1处理最适宜金桔胚性愈伤组织诱导,其中淡黄色愈伤组织团块胚胎发生频率较高;在附加BA 0.05 mg·L^-1的MS培养基上淡黄色愈伤组织块可形成胚状体;胚状体试管苗在1/2MS＋NAA0.1 mg · L^-1培养基上,生根率可达80％,移栽成活率达70％     

牡丹花药诱导愈伤组织

以牡丹品种‘凤丹’的带花丝的花药为外植体,诱导其产生愈伤组织,利用不同发育时期的花药诱导愈伤组织,确定了最佳的花药发育时期为单核中期,利用单核中期的花药,在确定合适激素配比的基础上,从不同的蔗糖质量浓度、4℃条件下不同处理时间等方面对花药愈伤组织诱导的影响进行了系统研究。结果表明:花药诱导愈伤组织合适的激素组合为MS+2,4-D2.0 mg.L-1+6-BA1.5 mg.L-1+NAA1.0 mg.L-1;花药在蔗糖质量浓度为6%、4℃条件下处理8 d时,愈伤组织的诱导率最高可达50.8%,优化了牡丹花药愈伤组织培养组合。     

翠菊品种库蕾娜叶片和叶柄及茎段的再生研究

为加速翠菊新品种的培育和扩繁,研究利用种子消毒接种获得的无菌苗作为外植体,以MS、1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA依次进行愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽生根。结果表明:茎段为再生体系的最佳外植体,愈伤诱导培养基为MS+2.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 NAA,不定芽最佳生根培养基为1/2MS。叶片、叶柄最佳愈伤诱导培养基MS+4.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,愈伤分化培养基只分化不定根。     

大蒜气生鳞茎愈伤诱导和植株再生

以优良品系"金蒜3号"气生鳞茎为外植体,成功地建立了再生体系。基本培养基为MS,在添加了2,4-D 1.5mg·L-1的培养基上最适于气生鳞茎愈伤诱导,愈伤诱导率为87.6%,黄色颗粒愈伤诱导率为100%,愈伤最佳继代培养基为MS+2,4-D 1.5 mg·L-1;在最佳分化培养基MS+6-BA 3.0 mg·L-1上,黄色愈伤分化率为94.6%,芽最佳生长培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+KT 1.0 mg·L-1+GA 0.2 mg.L-1+NAA 0.1 mg·L-1;试管苗最佳生根培养基为MS+NAA 0.2 mg·L-1,生根率达到92.4%;生根的试管苗移栽到装有田园土的土盆中,其存活率达到82%。试验为今后大蒜体细胞突变体筛选等工作提供了技术支持。     

楸树优良品种‘朝霞’增殖及生根培养的研究

以‘朝霞’楸带腋芽的茎段为试验材料,通过正交试验设计,研究基本培养基、植物生长调节剂成分及含量对不定芽增殖及生根的影响。结果表明,继代培养阶段,基本培养基类型是影响增殖系数的主要因素,不定芽增殖最佳培养基为:DKW+6-BA1.6mg·L^-1+NAA0.01mg·L^-1,增殖系数高达3.1。生根培养阶段,经极差分析和方差分析得知生根率最高的培养基为WPM+NAA0.1mg·L^-1,生根率高达97%,添加物活性炭对根数的增加有抑制作用,‘朝霞’楸最适生根培养基为WPM+NAA0.1mg·L^-1+活性炭0g·L^-1。本研究旨在筛选楸树优良品种‘朝霞’楸不定芽增殖和生根培养基,为建立‘朝霞’楸再生体系提供技术支持。     

黄芩毛状根的生长与产物代谢动态研究

[目的]研究黄芩毛状根生长和产物代谢的规律。[方法]采用毛状根培养技术,培养黄芩毛状根;采用HPLC法,测定黄芩苷和黄芩素含量;采用蒽酮硫酸法,测定培养液中残糖含量。[结果]黄芩毛状根的生长曲线呈"S"形。培养40 d,鲜量、干重分别达112.8、14.2g/L,黄芩苷、黄芩素含量分别为8.16%、1.78%,培养液中残留的蔗糖、总糖、果糖、葡萄糖含量分别为0.02%、2.97%、1.06%、1.89%。[结论]黄芩毛状根能有效富集黄芩苷和黄芩素。