小麦成熟胚愈伤组织的诱导与分化

[目的]筛选再生能力强的基因型小麦品种,建立高效的小麦成熟胚高频植株再生系统。[方法]以小麦品种抗冻早-30、百麦4411和06-4046的成熟胚为外植体,以MS为基本培养基,添加不同激素,组配诱导、继代、分化和生根培养基,通过胚性愈伤组织诱导。探讨影响小麦愈伤组织诱导和分化的因素。[结果]2,4-D浓度为1—5mg／L时对3个小麦品种愈伤组织的诱导差异不大,诱导率均高于80％,但2,4-D浓度为2mg／L时更有利于诱导胚性愈伤组织,诱导率在90％以上;在抗冻早-30和百麦4411分化培养基中加入2mg／L KT有助于提高分化率和再生率,在06-4046分化培养基中加入0．5mg／L KT对小麦成熟胚的分化和再生苗比较有利。[结论]在MS培养基中添加2mg／L2,4-D和一定量的KT可促进小麦成熟胚愈伤组织的诱导和分化再生苗。     

湿地松器官性愈伤组织诱导与增殖

以湿地松成熟合子胚、胚苗顶芽、下胚轴、胚根为外植体,选用DCR,LP,TX3种培养基,与不同浓度NAA,2,4-D及6-BA组合,研究其器官性愈伤组织诱导、增殖培养的最适条件．结果表明：成熟合子胚、胚苗顶芽是诱导器官性愈伤组织理想的外植体,最佳诱导培养基为TX＋BA0．5mg／L＋NAA2．0mg／L＋30g／L蔗糖,诱导率达50％以上;最佳增殖培养基为TX＋BA0．3mg／L＋NAA 1．0mg／L＋CH 400mg／L＋30g／L蔗糖,继代周期25-30d,增殖率达3．46．     

2,4-D对扁穗牛鞭草幼穗离体培养的影响

以雅安扁穗牛鞭草的幼穗为外植体,研究了2,4-D浓度和不同取材部位对愈伤组织诱导的影响以及继代培养时不同浓度的2,4-D对愈伤组织增殖、分化、生根的影响.结果表明:以幼穗下部为外植体接种在MS+2,4-D 7.0 mg/L培养基中,颗粒状愈伤组织的诱导率高达100.00％;MS+2,4-D 1.0 mg/L是幼穗愈伤组织较为适宜的继代增殖培养基,在该培养基上颗粒状胚性愈伤组织的出愈率为89.44％,愈伤组织的绿苗分化率和生根率都可达100％,平均绿芽点数和生根数等均极显著高于其他处理.     

2,4-D和6-BA对籼稻成熟胚愈伤组织诱导和植株再生的影响

[目的]探究2,4-D和6-BA对籼稻成熟胚愈伤组织培养的影响。[方法]在愈伤组织诱导和分化培养基中设置不同的2,4一D和6-BA浓度,研究2,4一D和6-BA对籼稻成熟胚愈伤组织诱导、成苗及再生幼苗生根的影响。[结果]在含0．5mg／L2,4-D的培养基中,嘉育948、盐恢559、扬籼6547、中二软占、明恢86、广恢998、遵籼3号等7个品种的愈伤组织诱导效果最佳;在含最适2,4一D浓度的诱导培养基中再添加0．2mg／L6-BA对愈伤组织诱导率作用不明显,但抑制愈伤组织分化成苗;在分化培养基中适当降低6-BA浓度,既能保证愈伤组织成苗率不下降甚至上升,又可以提高再生植株的质量。[结论]该研究结果为2,4一D和6-BA在籼稻愈伤组织培养中的合理使用提供借鉴。     

玉米成熟胚愈伤组织诱导及其影响因素研究

以玉米成熟胚为外植体,初步研究了不同基本培养基、不同生长素及其浓度对成熟胚愈伤组织诱导的影响。结果表明,N6培养基对玉米成熟胚愈伤组织的诱导率略高于MS培养基,而且N6培养基上诱导的愈伤组织质量好于MS培养基;培养基中所添加的生长素种类及浓度对成熟胚愈伤组织诱导有较大影响。在MS和N6培养基中添加2,4-D,诱导玉米成熟胚愈伤组织的效果优于添加NAA;中低浓度的NAA（1．O～3．Omg／L）和中高浓度的2,4-D（2．0～5．0mg／L）有利于玉米成熟胚愈伤组织的诱导。     

大麦成熟胚愈伤组织诱导、继代及分化研究

以大麦品种G1614成熟胚为研究对象,以MS培养基为基本培养基,探讨2,4-D质量浓度、碳源和成熟胚切割方式对大麦成熟胚愈伤组织诱导的影响,以及NAA/KT配比对大麦愈伤组织分化的影响。结果表明:2,4-D质量浓度为5 mg/L时,大麦成熟胚出愈率较高;30 g/L蔗糖作为碳源时,大麦成熟胚愈伤诱导率较高;纵切大麦成熟胚会促进大麦愈伤组织的诱导;在分化培养基中添加0.5 mg/L NAA和4.0 mg/L KT时,可使大麦愈伤组织获得较高的分化率。     

多年生黑麦草品种夜影再生体系的建立

分别以多年生黑麦草品种夜影的成熟胚和生长点为外植体,在6种培养基上进行愈伤组织诱导,比较接种60 d时的诱导率及愈伤组织形态,并将继代培养后的胚性愈伤组织转接到4种不同的分化培养基上进行再生苗分化。结果表明,生长点愈伤组织诱导率和分化率明显高于成熟胚,5.0 mg/L的2,4-D是诱导黑麦草品种夜影愈伤组织的最佳浓度,胚性愈伤组织在添加1.0 mg/L 6-BA的培养基上分化率最高。     

高留胚率水稻辽粳294成熟胚组织培养条件的优化

以高留胚率水稻辽粳294成熟胚为外植体,对影响高留胚率水稻愈伤组织诱导、分化的接种方式、培养基中激素水平进行研究。结果表明,用解剖刀在胚上纵切1刀后再将种子接在培养基上,种子灭菌彻底,愈伤组织诱导率高且质量较好。诱导培养基中激素6-BA和KT的浓度对愈伤组织的诱导率有极显著的影响,诱导培养基为N6+2 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT时,诱导率较高,可达90.0%;分化培养基为MS+0.8 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA时,绿苗分化效果好,分化率为73.0%。     

玉米幼胚愈伤组织诱导及植株再生研究

以玉米幼胚为外植体,研究了2,4-D不同浓度对愈伤组织诱导以及6-BA不同浓度对愈伤组织分化的影响.结果表明,2,4-D浓度显著影响愈伤组织的诱导,愈伤组织诱导培养基中2,4-D适宜的浓度范围是2～3 mg/L,但不同品种的外植体对2,4-D浓度反应不同,其中辽单565愈伤组织诱导2,4-D最佳浓度为2.62 mg/L,自交系742愈伤组织诱导2,4-D理论最佳浓度为2.60 mg/L;6-BA对植株的再生有促进作用,胚性愈伤组织分化的最适6-BA浓度为1.0 mg/L.     

超甜玉米自交系成熟胚愈伤组织诱导及再生方法研究

研究超甜玉米自交系1132成熟胚愈伤组织诱导和植株再生频率的影响因素,丰富诱导愈伤组织的外植体来源。以1132成熟胚为材料,通过比较研究蔗糖、脯氨酸、2,4-D等因素对愈伤组织诱导率和分化再生的影响,确定适合1132成熟胚外植体愈伤组织诱导和再生的方法。结果表明,蔗糖浓度40g/L,脯氨酸1.4g/L、2,4-D浓度为4 mg/L的诱导培养基上愈伤组织出现最早,且愈伤组织诱导率最高,达到75%。在继代培养基中2,4-D浓度为2 mg/L,其他相同的条件下,愈伤组织继代性最好,最易产生胚性愈伤组织。植株再生培养通过含60g/L蔗糖的MS培养基培养2~3周,后转入含30g/L蔗糖的MS培养基培养再生植株的方法最好,可实现芽和根的同步再生。利用1132成熟胚诱导产生愈伤组织,并分化再生植株是对幼胚再生体系的有效补充,可以克服玉米基因工程育种研究中幼胚受季节限制的不利条件,丰富甜玉米基因工程育种中外植体的来源。     

不同激素配比对旱稻愈伤组织诱导率的影响

以2个不同旱稻品种为材料,利用不同的培养基和激素相结合,对影响旱稻成熟种子愈伤组织诱导率的因素进行了研究.结果表明,NB培养基可提高旱稻愈伤组织出愈率,且2,4-D与6 - BA不同质量浓度配比对愈伤组织的培养效果不同.2,4-D为4.0mg/L,6- BA为1.0mg/L时品种旱1愈伤组织的诱导率最高(76.8％),...     

2，4-D和6-BA对籼稻成熟胚愈伤组织诱导和植株再生的影响

1材料与方法 1．1材料供试材料为12个籼稻品种的成熟种子（籽实）。其中,籼小粘、嘉育948、中二软占、湘晚籼1号、遵籼3号、中鉴1006个品种由国家水稻种质资源中期库提供,扬稻6号、扬籼6547、盐恢559、镇恢084、广恢998、明恢86六个品种由江苏太湖农业科学研究所提供。     

超级稻离体再生培养条件的优化

以超级稻品种两优培九成熟胚为外植体,研究了外源激素和化学试剂对超级稻离体再生培养的影响.结果表明,成熟胚在MS 2,4-D2mg/L KT1mg/L培养基上,愈伤组织诱导率达94%;愈伤组织在MS 6-BA2mg/L KT1mg/L NAA0.5mg/L培养基上,分化率为76.66%;当分化培养基中添加5mmol/LCuSO4,愈伤组织生长旺盛,分化率提高,可达86.66%.     

籼型谷秆两用稻201高频再生系统的初步研究

以籼型谷秆两用稻 2 0 1 (稻草粗蛋白含量比一般品种高 1倍左右 ,稻谷产量、品质与一般推广品种相当的新型水稻 )的幼胚作为试验材料 ,研究了基本培养基、琼脂质量浓度、激素、继代次数、培养基有机成分的处理方法等对其愈伤组织分化频率的影响 ,探索了谷秆两用稻高频再生体系 .此外还比较了 2 0 1与其它籼稻品种相同发育时期的幼胚在相同培养基上诱导愈伤组织的差异 .结果表明 ,NB是较合适的基本培养基 ,NB+0 .0 5 mg· L- 1 NAA +2 mg· L- 1 6-BA是较合适的分化培养基 ;适当提高分化培养基琼脂质量浓度 ,减少继代培养次数 ,对培养基有机成分进行超过滤处理等均有利于愈伤组织的分化和植株再生     

高效诱导及再生能力籼型水稻品系的筛选

本试验以6种籼型水稻的幼穗为外植体进行愈伤组织的诱导和分化.通过分别统计不同基因型水稻在不同培养基上的愈伤组织诱导率,不同分化时期的幼穗的愈伤组织诱导率,观察不同基因型水稻在继代培养基上的表现,并调查不同基因型水稻的分化率,筛选得到了3个高组织培养力、易分化的籼稻材料,分别为乐恢188、6188、H3620.3个籼稻材料较对照粳稻日本晴,组织培养力差异不明显,适宜作为籼稻遗传转化的材料.     

柳枝稷成熟胚愈伤组织诱导的影响因素

为优化柳枝稷愈伤组织诱导培养条件,以柳枝稷成熟胚为外植体,通过正交设计,研究基因型、2,4-D、6-BA、基本培养基、碳源和pH等因素对柳枝稷成熟胚愈伤组织诱导的影响。结果表明,6种因素中,2,4-D对柳枝稷成熟胚愈伤组织诱导的胚性愈伤率影响最大,6-BA次之,再次为基本培养基,而基因型、碳源和pH对胚性愈伤率影响较小。柳枝稷成熟胚愈伤组织诱导的最佳培养基组合为2,4-D 5 mg/L,6-BA0.2mg/L,基本培养基B5或MS或N6以及基因型西稷3号。柳枝稷成熟胚愈伤组织诱导的胚性愈伤率与出愈率、愈伤组织鲜质量和干质量均呈显著正相关关系,出愈率与愈伤组织干质量和愈伤组织鲜质量无显著相关性。     

蟆叶秋海棠离体培养的研究

以蟆叶秋海棠(Begonia rex)的幼嫩叶片为外植体,采用L25(55)正交设计,研究了不同生长调节剂和培养基对愈伤组织诱导的影响.结果表明,培养基的类型对愈伤组织诱导的影响极大,生长调节荆对愈伤组织诱导有一定的影响,愈伤组织在不添加任何生长调节剂的培养基上即可进行分化.蟆叶秋海棠最佳愈伤组织诱导培养基组合为1/2 MS+0.5～1.5 mg·L-1 KT+0.5 mg·L-16-BA+0.5～2.0 mg·L-1α-NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖,愈伤组织诱导率可高达100%.生根培养基为1/2 MS+0.2 mg·L-1α-NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖,生根率高达100%.     

水稻花药培养的影响因素研究

为更好地研究水稻单倍体育种和转基因技术，加速水稻育种进程，以10份寒地水稻品种为试验材料，采用单因素试验方法，研究培养基的琼脂浓度、激素配比、马铃薯水提取液附加物添加及培养方式等因素对水稻花药培养愈伤组织诱导率的影响，优化寒地水稻品种花药组织培养条件。结果表明：10个品种花药组织培养，愈伤组织诱导率差异明显；在琼脂浓度为0．75％左右时，愈伤组织的诱导率达到最高；培养基中激素配比为KT（2mg·L^-1）＋IAA（1mg·L^-1）时诱导效果最佳；培养方式研究中，在双态培养方式下花药愈伤组织诱导率最好，其次为液态培养，再次为固态培养；培养基中添加马铃薯水提取液各处理间差异不显著。     

空间诱变水稻H4成熟胚再生体系的建立

以空间诱变水稻H4成熟胚为外植体,通过调节2,4-D浓度、激素组合和分化途径,建立适宜的再生体系.结果表明:诱导培养基以NMB为基本培养基,添加2.5 mg/L 2,4-D、1.0 mg/L NAA和0.5 mg/L 6-BA,26℃暗培养30 d,愈伤诱导率达91.63％;继代培养基中添加2 mg/L ABA,对胚性愈伤组织的形成及后续分化率有一定的促进作用;两步分化法可提高愈伤组织的分化效率,分化率达84.76％,植株再生率为77.67％.初步建立了H4成熟胚愈伤组织的再生体系,为后续的遗传转化研究奠定基础.     

水稻成熟胚不同接种方式对愈伤组织诱导的影响

采用4种不同的接种方式,对3个水稻品种的成熟胚进行了愈伤组织诱导试验。结果表明：在胚上纵切1刀,将种子接种在培养基上的接种方式,愈伤组织诱导率最高、出芽率最低,且愈伤组织质量最好,可以在短时间内获得大量胚性愈伤组织,建立悬浮系,其愈伤组织在较短的时间即可分化出再生植株,是1种简单、方便、效果好的诱导水稻愈伤组织的理想方法。