巴东醉鱼草提取物对几种害虫的生物活性研究

研究巴东醉鱼草(Buddleja albiflora Hemsl.)95%乙醇提取物的不同极性溶剂萃取物对3种鳞翅目害虫和朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus B.)的生物活性.结果表明:巴东醉鱼草95%乙醇提取物的石油醚和乙酸乙酯萃取物对试虫有较高的生物活性,其中乙酸乙酯萃取物在24 h对3龄小菜蛾(Plutella xylostellaL.)幼虫的拒食率达到94.22%,48 h时对4龄菜青虫(Pieris rapaeL.)幼虫的拒食率达到83.94%,对3龄粘虫(Mythi mna separataW.)幼虫的24 h拒食中浓度(AFC50)为2.4185mg·mL-1,对朱砂叶螨(T.cinnabarinus)4 h致死中浓度(LC50)为0.2108 mg·mL-1;石油醚萃取物72h对3龄小菜蛾(P.xylostella)幼虫的拒食率为64.11%,48 h对4龄菜青虫(P.rapae)幼虫的拒食率为75.18%,对3龄粘虫(M.separata)幼虫48 h的AFC50值最高(1.1392 mg·mL-1),对朱砂叶螨(T.cinnabarinus)4 h LC50为0.3606 mg·mL-1;巴东醉鱼草95%乙醇提取物的不同极性溶剂萃取物还抑制试虫的生长发育,导致试虫化蛹和羽化不正常,其中石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物的作用尤为突出.     

大叶醉鱼草提取物对黄脊竹蝗的生物活性

为探讨大叶醉鱼草(Buddleja davidii Franch)提取物对黄脊竹蝗(Ceracris kiangsu Tsai)的生物活性,采用冷浸法、索氏提取法、超声波法提取大叶醉鱼草有效成分,分别对黄脊竹蝗2龄和4～5龄跳蝻进行毒力测定.结果表明,超声波法对大叶醉鱼草有效成分的提取率最高,且其提取物的杀虫效果最好,对黄脊竹蝗2龄和4～5龄跳蝻的LC<,50>分别为15.71、24.58mg/mL;其次为索氏提取法,LC<,50>分别为19.07、28.07 mg/mL;冷浸法最低,LC<,50>分别为54.53、72.80 mg/mL.同一种方法提取物的杀虫活性随提取物浓度的提高而增大,相同浓度提取物对黄脊竹蝗2龄跳蝻的杀虫效果明显高于对4～5龄跳蝻.     

鹅掌柴中总黄酮含量的测定

采用50%稀乙醇冷浸法、70%乙醇热回流法和95%乙醇超声波提取法提取鹅掌柴中总黄酮,以芸香苷为对照品,在λ=510 nm处分别测定鹅掌柴根、茎、叶中总黄酮类化合物的含量.结果表明,芸香苷在0～0.05 mg/mL范围内峰吸光度与浓度线性关系良好(r=0.999 9,n=6),仪器精密度RSD=0.31%(n=6).50%稀乙醇冷浸法中鹅掌柴根、茎、叶总黄酮含量分别为3.54%、2.01%、6.11%;70%乙醇热回流法中鹅掌柴根、茎、叶总黄酮含量分别为4.48%、3.81%、7.14%;95%乙醇超声波提取法中鹅掌柴根、茎、叶中总黄酮含量分别为4.60%、3.95%、7.26%.     

巴东醉鱼草提取物抑菌活性研究

采用生长速率法对巴东醉鱼草乙醇提取物和石油醚、乙酸乙酯和正丁醇3种溶剂萃取相的抑菌活性进行测试。结果表明:质量浓度为10g/L(干样)的巴东醉鱼草乙醇提取物对供试的24种植物病原真菌均表现出一定抑制作用,其中对油菜菌核病菌、番茄灰霉病菌、玉米小斑病菌和水稻稻瘟病菌的菌丝生长抑制率均超过80%;3种溶剂萃取相对上述4种病原菌菌丝生长也具有一定的抑制作用,乙酸乙酯萃取相活性最强,在质量浓度5g/L(干样)下,对4种病原真菌的抑制率在75%以上,对油菜菌核病菌的作用最强(89.14%);质量浓度为1g/L时,对油菜菌核的作用为71.37%,对以上4种病原真菌的EC50分别为0.492、0.534、0.531和0.938g/L。据此,可推测巴东醉鱼草提取物的抑菌活性成分主要集中在中等极性部位。     

黄连生物碱4种提取方法的比较

采用超声波法、回流法、冷浸法和酶辅助冷浸法提取黄连生物碱,采用高效液相色谱法对提取液中的生物碱含量进行检测.结果表明,超声波法、回流法、冷浸法和酶辅助冷浸法的黄连小檗碱提取率分别为26.10％、52.24％、54.15％和81.27％；总生物碱提取得率分别为28.66％、59.70％、61.58％和89.36％.酶辅助冷浸法提取黄连生物碱所得提取率较高,优于其他3种提取工艺.     

秦岭山区204种植物对粘虫生物活性测定

以粘虫为试虫，对采自秦岭山区的204种植物样品进行了室内生物活性筛选，结果表明，供试样品中，有87种对试虫有50％以上拒食或毒杀效果，其中菊科21种、蔷薇科7种、毛茛科5种；大花金挖耳、蓼子朴、天明精、南蛇藤、遏兰菜、巴东醉鱼草等植物对试虫的拒食和毒杀效果均大于80％，值得进一步研究。     

蒿属植物提取物对棉花枯萎病菌和红腐病菌的抑制活性研究

在实验条件下,采用菌丝生长速率测定法,以棉花枯萎病菌、棉红腐病菌为供试菌,对菌陈、黄蒿、艾蒿等3种蒿属植物提取物的抗菌活性进行了研究.结果表明,供试3种蒿属植物提取物对棉花枯萎病菌和棉花红腐病菌均具有较好的抗菌活性,其中尤以艾蒿提取物的抗菌活性强而稳定,48～96h对上述两病菌的菌丝抑制率均达80%以上;丙酮提取物的抗菌活性强于乙醇提取物,前者的EC50为1.4785 mg/L,后者的为3.2090 mg/L.间歇振荡法、超声波法、冷浸法提取物对供试菌的72 h菌丝抑制率分别为84.34%、84.56%、88.70%,可见同种溶剂不同提取方法所得提取物抗菌活性基本一致.     

19 种植物提取物对家蝇和赤拟谷盗的杀虫活性

用1%浓度的甲醇提取物处理试虫后,浅裂南星根、千里光叶和草乌对家蝇48 h致死率在70%以上,最高为浅裂南星根100.00%。牡蒿和野花椒种子对家蝇48 h致死率在60%以上。萱草和打火草在处理后7 d,赤拟谷盗死亡率就超过70.00%。以甲醇冷浸提取法对所采集的植物材料进行冷浸提取时,提取率分布在0.29%~14.75%之间。     

老瓜头不同极性段的杀虫活性

研究通过溶剂提取法、萃取和蒸馏获得不同极性段的老瓜头提取物。以枣飞象、粘虫、小地老虎和山楂叶螨为试虫,采用小叶碟法和玻片浸渍法对不同活性段提取物进行杀虫活性测定并对活性提物段进行柱层析获得活性成分。结果表明,正丁醇提取物对枣飞象、粘虫和小地老虎的杀虫活性较好,胃毒处理48 h校正死亡率分别为73.4%、72.3%和68.2%,触杀处理48 h校正死亡率分别为64.8%、63.9%和42.4%。采用柱层析法对老瓜头正丁醇提取物进行分离,表明活性成分主要集中在X4组分,胃毒处理48 h,对枣飞象、粘虫和小地老虎的校正死亡率大于90%,触杀处理48 h,校正死亡率为70%～80%。研究表明老瓜头正丁醇提取物具有较好的杀虫作用,为开发老瓜头植物源杀虫剂奠定理论基础。     

凹叶厚朴不同溶剂提取物对几种植物病原菌的抑制活性

以不同的溶剂和提取方法分别对凹叶厚朴皮和茎进行提取,并对所得提取物进行了5种病原真菌的生长抑制活性测试.结果表明:在供试质量浓度为1 mg/ml的情况下,当采用相同的提取方法和提取溶剂时,凹叶厚朴皮的提取物对所有供试病菌抑菌效果比茎的提取物好;当采用相同的植物部位提取物和提取溶剂时,超声波提取物对所有供试病菌抑菌效果比浸提提取物效果好;而当提取方法和提取部位都一定而改变提取溶剂时,以95%乙醇提取物对所有供试病菌抑菌效果最好,石油醚提取物抑菌活性次之,而10%氢氧化钙提取物、水提取物对所有供试病菌抑制率均比较低.凹叶厚朴皮的提取物作为植物源杀菌剂值得进一步研究.     

巴东醉鱼草浸膏对4种病害药效的初步研究

为了进一步明确巴东醉鱼草（Buddleja albiflora Hemsl.）的抑菌活性,采用菌丝生长速率法测定了其对小麦纹枯病菌、棉花黄萎病菌、水稻纹枯病菌、番茄叶霉病菌菌丝的生长抑制活性。结果表明,巴东醉鱼草对小麦纹枯病菌、棉花黄萎病菌具有较强的抑制作用,抑制率都达到了70%以上;对水稻纹枯病菌、番茄叶霉病菌菌丝生长在浓度10 mg干样/mL时抑制效果不明显,当浓度为50 mg干样/mL下,抑制率明显增高,分别为83.90%±0.19%、80.82%±0.36%,表现出较强的抑制率;正丁醇萃取物、乙酸乙酯萃取物、石油醚萃取物对上述4种病菌菌丝生长均有一定抑制作用,其中乙酸乙酯萃取物活性最强,在浓度为5mg干样/mL时,对4种病菌的抑制率都达到的70%以上,其中对水稻纹枯病菌的抑制率达到了81.88%±0.23%。由此可以推断巴东醉鱼草抑菌活性物质有进一步研究开发的潜力。     

杀虫活性化合物杠柳新苷P对东方粘虫中肠细胞上结合蛋白的影响

杠柳新苷P是从杠柳根皮提取物中分离得到的一种甾体糖苷类化合物,对东方粘虫表现出较好的杀虫活性。为了进一步研究其杀虫机理,探究杠柳新苷P作用于东方粘虫中肠疑似作用位点,通过对杠柳新苷P进行结构修饰,与东方粘虫幼虫中肠刷状缘膜囊泡(BBMV)组织体外孵育,利用其结构修饰后增强的紫外吸收特性,经蛋白分离、纯化,进而得到杠柳新苷P作用于粘虫中肠BBMV上的结合蛋白。结果表明:在粘虫中肠BBMV上存在杠柳新苷P的疑似结合蛋白,且经分离鉴定得到5种疑似结合蛋白,分别为类异翅盘蛋白、氨肽酶、二硫键异构酶、苯基贮存蛋白以及精氨酸激酶;通过进一步的分析推测,氨肽酶可能是杠柳新苷P作用于东方粘虫幼虫中肠BBMV上的结合蛋白。初步明确杠柳新苷P作用于东方粘虫中肠的疑似作用位点,但仍需进一步的验证工作进行确认,为今后研究杠柳新苷类化合物的作用机理及靶标提供依据。     

光叶铁仔提取物对小菜蛾幼虫生长发育的影响

【目的】研究光叶铁仔Myrsine stolonifera提取物对小菜蛾Plutella xylostella生长发育的影响。【方法】采用叶片载毒法,测定了光叶铁仔根、茎、叶甲醇提取物和大孔吸附树脂乙醇馏分对小菜蛾的生物活性;测定了大孔吸附树脂乙醇馏分对小菜蛾生长发育的影响。【结果】光叶铁仔根、茎、叶甲醇提取物和大孔吸附树脂乙醇馏分对小菜蛾具有胃毒作用,以叶部50%(φ)乙醇馏分的效果较佳,72 h后校正死亡率达到75.56%。根茎部95%(φ)乙醇馏分与叶部50%(φ)乙醇馏分,对小菜蛾的幼虫具有一定的拒食作用与体质量抑制效果,其拒食率与体质量抑制率整体高于90%,且对化蛹及羽化有一定的影响。【结论】光叶铁仔提取物对小菜蛾幼虫具有较强的杀虫活性,其活性成分及作用机理值得深入研究。     

全二维气相色谱-飞行时间质谱分析紫藤种子提取物及其杀蚜活性研究

【目的】通过对紫藤Wisteria sinensis种子提取物的化学成分分析及杀蚜活性测定和抗氧化活性评价,为紫藤种子资源在植物源农药领域的利用提供基础。【方法】以紫藤种子提取物为材料,采用全二维气相色谱-飞行时间质谱(GC×GC-TOF/MS)技术进行成分分析,以微量点滴法开展对棉蚜Aphis gossypii的触杀毒力测定,用2,2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)自由基清除法进行抗氧化活性评价。【结果】从紫藤种子石油醚提取物中检测到61种化合物,主要包括酯类、烷烃类、芳香烃类等化合物,其中相对含量大于9%的化合物有:对二甲苯(14.33%)、十一烷(11.89%)、1,4-二乙基苯(11.02%)和癸烷(9.54%)。紫藤种子提取物对棉蚜的致死中质量浓度(LC50)为193.22mg·L~(-1)(处理后24 h)。同时,紫藤种子提取物具有抗氧化活性,对DPPH的抑制中质量浓度(IC50)为4.15 g·L~(-1)。【结论】紫藤种子提取物具有较强的杀蚜活性,有望作为植物源杀蚜剂用于棉蚜的防治。     

Effects of Terpinen-4-ol on Four Metabolic Enzymes and Polyphenol Oxidase （PPO） in Mythimna separta Walker

To study insecticidal mechanism of terpinen-4-ol, a main insecticidal composition in the essential oil of Sabina vulgaris, the 5th instar larvae of Mythimna separta, were investigated with terpinen-4-ol by topical application. The activities of phosphatase, glutathione S-transferase （GSTs）, cytochrome P450 （P450）, and polyphenol oxidase （PPO） of tested insects were determined in all poisoning stages, including exciting stage, convulsing stage, paralysis stage, and recover stage. The result showed that the activities of both acid phosphatase （ACP） and alkaline phosphatase （AKP） in treated insects were induced by terpinen-4-ol, but ACP was inhibited in paralysis stage. The activities of GSTs were inhibited in exciting stage, convulsing stage, and paralysis stage, but gradually recovered in recover stage. O-demethylase activity of cytochrome P450 was inhibited by terpinen-4-ol, and the inhibition rate in all poisoning stages were 26.27, 46.03, 80.24, and 90.22%, respectively. PPO activities were strongly inhibited by terpinen-4-ol both in vitro and in vivo. In conclusion, the activities of P450, GSTs, and PPO could have relation with toxicity of terpinen-4-ol against larvae of the Mythimna separta, but recover stage of the poisoning insects might be related to GSTs induced. As a new insecticide or synergist, terpinen- 4-ol has a potential value in field of insecticide resistance management.     

重庆地区玉米黏虫僵虫体内虫生真菌的分离鉴定

玉米黏虫(Mythimna separata)是一种常见的鳞翅目害虫,具有暴发性和迁飞性,对农作物危害严重.虫生真菌是昆虫病原微生物中的最大类群,可以有效地控制自然界中害虫的种群数量.为了防治玉米黏虫和与玉米黏虫相近的草地贪夜蛾,丰富虫生真菌菌种资源,以采自重庆江津高粱地中的玉米黏虫僵虫为实验材料,运用传统培养方法分离鉴定了6株真菌.经过形态学观察和分子生物学鉴定将这6株真菌归类于3个属,分别为镰刀菌属(Fusarium)、青霉属(Penicillium)以及鬼伞属(Coprinellus).虫生真菌能够引发昆虫感染发病,将害虫的种群数量长期控制在较低水平以下,在生物防治方面很有意义.此次分离纯化得到镰刀菌属(Fusarium)和青霉属(Penicillium)的真菌均有潜在的杀虫能力,鬼伞属(Coprinellus)真菌具有防治线虫的潜力,这些真菌对玉米黏虫和草地贪夜蛾的杀虫效果还有待于进一步的实验研究.     

玄参叶的形态解剖学研究

目的 为玄参叶的开发利用和质量控制提供科学依据。方法 按生药学常规方法对玄参叶进行形态解剖学研究,其中组织切片采用徒手切片和石蜡切片相结合的方法,叶表面制片采用撕取表皮的方法,叶表面扫描电镜观察采用脱水、干燥、喷金后常规扫描的方法,组织、叶表面、粉末图均采用显微拍摄。结果 找出了玄参叶的性状和显微鉴别特征。结论 此研究可作为鉴定玄参叶的依据。     

香樟叶中黄酮类化合物的提取工艺

为了开发利用香樟叶资源,对超声波辅助提取香樟叶黄酮类化合物的工艺条件进行了研究,以乙醇为溶剂,考察乙醇浓度、料液比、超声时间、超声功率及温度对提取效率的影响,用L9(34)正交试验,确定了从香樟叶中提取黄酮的最佳工艺条件为超声时间40 min,乙醇浓度60%,料液比1∶20,超声温度70℃,超声功率400 W.此条件下提取的黄酮含量为10.437 mg/g.     

骆驼蓬地上部总黄酮提取工艺的优化

以骆驼蓬地上部提取液中总黄酮含量为指标,按正交试验设计,比较超声波提取和热回流提取骆驼蓬总黄酮率的高低.试验结果表明无论以茎叶或种子为提取原料,热回流提取法都获得最高的总黄酮提取率.其最佳提取工艺为以茎叶为原料提取,样液比(W/W)15∶1、时间25 min、乙醇浓度75%、次数3;以种子为原料提取,样液比25∶1、时间25 min、乙醇浓度90%、次数1.在实际应用中,有必要将种子和茎叶分开提取,并将2种提取方法有效结合起来.