白菜型油菜×白芥属间远缘杂交亲和性及杂交一代幼苗挽救技术的研究

为了探明白菜型油菜与白芥属间杂交亲和性,建立白菜型油菜与白芥属间的杂交一代壮苗及生根技术.以白菜型油菜为母本,白芥为父本进行杂交,统计杂交子房脱落率和杂交亲和指数,分析不同比例基本培养基、不同种类及浓度的生长素或细胞分裂素对诱导生根和壮苗培养的影响.结果表明:白菜型油菜与白芥属间杂交种,平均杂交亲和指数为0.5,表现为杂交不亲和;二者的杂交种子在滤纸床上萌发,只得到了缺少胚根的无根苗.将无根苗在1/2 MS培养基上进行挽救培养,能生长发育成完整植株.白菜型油菜与白芥属间杂交后代试管苗的最佳壮苗培养基为2 MS+1.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,最佳生根培养基为1/2 MS+0.3mg/L IBA,最佳移栽基质为草炭土+蛭石+灌漠土(1∶2∶1).白菜型油菜与白芥间存在杂交不亲和性,杂交后代壮苗及生根技术为:2MS+1.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA培养基上壮苗培养,1/2 MS+0.3mg/L IBA培养基上生根培养,草炭土+蛭石+灌漠土(1∶2∶1)基质中驯化移栽.     

卷丹百合远缘杂交及杂种后代的鉴定

为培育抗性强、观赏性优良的卷丹百合新种质,采用液体培养基悬滴法测定3个观赏百合品种‘Black stone’‘Tresor’‘Sorbonne’ 的花粉生活力;用蕾期授粉、正常授粉、延迟授粉、切割柱头授粉方式分别与母本卷丹百合进行杂交,对获得的杂交后代进行胚珠培养及增殖扩繁,采用SSR分子标记的方法鉴定杂种的真实性。结果表明：‘Sorbonne’的花粉萌发率总体高于‘Black stone’和‘Tresor’;蕾期授粉的结实率最高,为14.44%;卷丹בBlack stone’ 组合获得蒴果数量最多,共得到了17个蒴果;对杂交蒴果进行胚珠培养,得到9株F1代杂种苗;筛选杂种苗增殖扩繁的较适培养基为MS+30 g/L蔗糖+0. 1 mg/L NAA+1 mg/L 6–BA+8 g/L琼脂;鳞茎膨大生根较适培养基为MS+80 g/L蔗糖+0.1 mg/L NAA+ 0. 05 mg/L 6–BA+0.75 g/L活性炭+6.5 g/L琼脂,最适培养环境为黑暗培养;通过4对引物鉴定证实卷丹בTresor’的2个杂种株系为真实杂种。     

“寒富”苹果败育胚珠挽救影响因子研究

以"寒富"苹果子房及其败育胚珠为试材,研究不同接种时间、基本培养基种类、不同激素质量浓度和氨基酸组份、培养基相态组成、光照和暗培养对子房离体培养及败育胚珠发育率的影响。结果表明,在大蕾期和子房直径0.3cm(开花后5d)时最适宜胚珠生长的培养基为Nitsch培养基+叶酸5mg/L+IAA 0.5mg/L+6-BA 1mg/L+GA32mg/L,而在开花后10d,适宜败育胚珠生长的培养基为Nitsch培养基+叶酸5mg/L+IAA 1mg/L+6-BA 1mg/L+GA32mg/L,其挽救率最高,达到80%;在"寒富"苹果胚珠败育后期,起主要作用的氨基酸有半胱氨酸和谷氨酸,多种氨基酸培养效果高于任何一种单一氨基酸培养。固液双相培养基对于败育胚珠的培养效果明显优于单独相态培养;败育胚珠在连续黑暗条件下培养其发育率高于光暗交替培养,并且经TTC检测发现暗培养下胚珠的生活力显著高于光暗交替。     

金星无核葡萄胚挽救影响因素的研究

以金星无核葡萄的胚珠为试材,对胚挽救的多个影响因素包括接种时间、培养基和培养方式进行研究,以进一步确定无核葡萄胚挽救各个阶段的适宜培养条件。结果表明,影响无核葡萄胚挽救最重要的因素是接种时期,其他因素影响程度因组合而不同:在果粒着色10%左右接种胚珠发育率最高,达到63.38%;在胚珠发育阶段,附加1.5 mg/L IBA、1.0 mg/L 6-BA和0.5 mg/LGA3的ER培养基最适宜离体幼胚的发育;在胚萌发阶段,使用附加1.0 mg/L IBA、0.5 mg/L 6-BA和0.5 mg/L GA3的WP培养基萌发率最高,同时对胚珠进行横切处理可以显著提高胚珠萌发出苗率。     

西葫芦未受精子房离体培养的影响因素

【目的】探究西葫芦未受精子房离体培养的主要影响因素,以提高其胚状体诱导率和生根品质,增加再生植株数量,丰富西葫芦育种材料。【方法】以西葫芦"春玉一号"未受精子房为材料,分析MS、B5、N6和White 4种基本培养基的诱胚效果;在MS培养基中添加不同质量浓度的6-BA(0,0.5,1.0,2.0mg/L)和NAA(0,0.2,0.5,1.0mg/L),筛选2种激素的最佳组合;之后添加不同质量浓度的2,4-D(0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mg/L),筛选2,4-D的适宜质量浓度;在MS培养基中添加不同质量浓度的NAA(0,0.05,0.1,0.2,0.5,1.0mg/L),分析其对胚状体芽生根效果的影响。【结果】西葫芦未受精子房以MS为基本培养基时胚状体诱导率最高,为16.67%;在MS培养基中添加1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA时的诱导效果最好,诱导率为19.76%;在MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA培养基中添加1.0mg/L 2,4-D可以加快胚珠膨大的速度,增加胚珠转绿的数量,但对出胚的提高效果不显著。MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+0.1mg/L NAA有利于提高胚状体芽的生根品质,且根系生长健壮。【结论】MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+1.0mg/L 2,4-D是西葫芦未受精子房离体培养中胚状体诱导的最佳培养基,MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+0.1mg/L NAA是诱导其胚状体芽生根的较适宜培养基。     

切花百合杂种胚抢救方法

以东方百合杂种系(O)、亚洲百合杂种系(A)、麝香百合杂种系(L)部分品种为试材,采用子房切片培养、带胎座胚珠培养、胚培养3种方法对系间杂种幼胚进行抢救,并对系内杂种胚离体培养的影响因素进行研究。结果表明,采用子房切片培养和带胎座胚珠培养可使OA,LA型部分杂种胚萌发,且带胎座胚珠培养优于子房切片培养,采用胚培养可使OA,LA,LO型部分杂种胚萌发,最终仅1株LO型杂种苗继续生长,其余杂种苗褐化死亡;OO型杂种胚适宜在胚龄50 d培养,AA,LL型杂种胚适宜在胚龄40 d培养,且0.01～0.1 mg/L NAA的添加对胚萌发是必要的,6-BA是否添加在不同杂交组合中存在差异。     

台湾百合离体快繁技术初探

以台湾百合为实验材料,对其离体快繁技术做了初步探索。实验表明：诱导台湾百合分化愈伤组织的最适培养基为 MS +2,4-D(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L)+6-BA(2.5mg/L)；诱导台湾百合分化不定芽的最适的培养基为 MS +NAA(0.1mg/L)+6-BA(1.5mg/L)；促愈伤组织分化不定芽的最适培养基 MS +NAA(0.1mg/L)+6-BA(1.0mg/L)；最适生根培养基为 MS +NAA(0.5mg/L) +6-BA(1.0mg/L)；诱导子房分化的最适培养基为 MS +NAA(0.5mg/L)+6-BA(1.0mg/L)。     

春兰与大花蕙兰杂交后代非共生萌发育苗技术研究

为探索春兰与大花蕙兰杂交后代非共生萌发育苗技术提供参考,以♀大花蕙兰‘冰瀑’×♂春兰‘新春梅’杂交所结果荚为试验材料,分别进行基本培养基、GA₃、琼脂、AC 4因素3水平的杂交种子无菌萌发试验,基本培养基、6-BA、NAA 3因素3水平的杂交种原球茎增殖试验,基本培养基、NAA、AC 3因素3水平的杂交种原球茎分化试验,基本培养基、NAA、AC 3因素3水平的壮苗生根培养试验,筛选适宜的培养基。结果表明：1)适宜杂交种子无菌萌发的培养基为MS+GA₃0.50 mg/L+琼脂4.5 g/L+蔗糖20 g/L+AC0.50 g/L+蛋白胨1 g/L,平均萌发启动时间为50 d,平均萌发率为88.7%。2)适宜杂交种原球茎增殖的培养基为Hyponex 7-6-19 1.5 g+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂4.0 g/L+蛋白胨1.0 g/L,增殖系数达12.5。3)适宜杂交种原球茎分化的培养基为Hyponex 7-6-19 1.5 g+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/...     

菠萝百合组织培养技术研究

以菠萝百合花序上胚珠为外植体,接种于3种诱导培养基中,发现加有少量激素的MS+NAA 0.01mg/L及MS+6-BA 0.01mg/L培养基上的胚珠萌芽率明显高于未加激素的MS培养基。以启动培养获得的叶片及小鳞茎纵切块为外植体,接种到3种继代培养基中,发现两种外植体在3种继代培养基上均能分化出不定芽,MS+6-BA 1mg/L+NAA 1mg/L(S3)为最适初次继代培养基。以S3培养基为基础,设计了6种配方进行第二次继代培养研究,发现MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1 mg/L(T4培养基)上发育的不定芽数最多、质量最好,可作为最适继代培养基。离体生根研究发现:培养基中添加NAA比IBA生根质量更好,最适生根培养基为MS+NAA 0.1mg/L。至此,建立了菠萝百合组培快繁技术体系。     

条叶唇柱苣苔离体快繁技术研究（英文）

以叶片为外植体,对条叶唇柱苣苔(Chirita ophiopogoides)进行离体培养与快速繁殖研究。结果表明,培养基MS+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA适用于初代培养中的芽诱导和植株再生;培养基MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+10%香蕉+5%马铃薯和MS+0.5mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+2%香蕉分别适用于继代增殖和壮苗培养,繁殖系数分别为7.9倍/60 d和5.6倍/60 d;培养基MS适用于生根培养,培养30 d后生根率达到100%;以腐质土为基质,将条叶唇柱苣苔生根试管苗移栽到大棚,成活率达92.5%。根据上述快繁技术,理论上每株试管苗每年可繁殖条叶唇柱苣苔种苗20 176株。     

无患子优选树茎段离体培养体系的建立

【目的】筛选无患子茎段离体快繁最佳培养基,建立无患子优良种苗快速繁育体系。【方法】以野外选优获得的无患子树带腋芽茎段为外植体,采用L9(33)正交试验对影响外植体灭菌的HgCl2浓度、HgCl2与酒精的作用时间,不定芽诱导萌发中的6-BA、NAA及蔗糖用量,继代增殖中6-BA与KT用量和芽苗生根中的MS培养基无机盐水平、6-BA和2,4-D用量进行优化。【结果】75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2处理7 min是无患子茎段灭菌的最佳方法,其外植体成活率高达83.33%;MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖是无患子茎段腋芽萌发的适宜培养基,诱导率高达96.67%;MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT是无患子茎段腋芽增殖的适宜培养基,30 d可增殖4.13倍;1/3 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D是诱导芽苗生根的适宜培养基,平均生根率为41.50%。【结论】建立的无患子离体培养体系为:外植体茎段用75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2灭菌7 min,在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖培养基中诱导腋芽萌发,在MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT培养基中进行增殖培养,在1/3MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D培养基中进行生根培养。     

花生果针离体培养研究

以中华8号花生品种为试材,研究了GA、6-BA和生长素(IAA和NAA)对花生果针离体培养的影响。结果表明,花生果针离体培养的最佳培养基配方为MS培养基的无机盐成分、B5培养基的有机成分、300 mg/L水解酪蛋白、6%蔗糖、1.0 mg/L GA、0.5 mg/L IAA和0.01 mg/L 6-BA,在此条件下,花生子房膨大率为72%。     

蕙兰杂交种子的无菌萌发和快速繁殖研究

实验采用蕙兰传统品种''崔梅''与普通蕙兰进行杂交,对不同发育阶段的种子进行无菌萌发实验,并作不同培养基的对照.对萌发原球茎的增殖及分化进行研究.探讨不同培养基、6-BA和NAA对根状茎增殖和分化的影响.结果表明:110天的种子接种在KC培养基上萌发效果最佳,蕙兰原球茎增殖的最佳培养基为、W+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L,根状茎分化和生根的最佳培养基为MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA0.5mg/L.     

海南冬青组培快繁体系的建立

建立海南冬青(Ilex hainanensis Merr.)的组培快繁技术体系。以海南冬青成熟种子为材料,以MS、1/2MS为基本培养基,采用正交试验设计法研究不同植物生长调节剂组合对海南冬青种子萌发、初代诱导、增殖培养、生根培养的影响,筛选出组培快繁各环节的最佳培养基配方。研究结果,海南冬青种子萌发的最佳培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+GA30.5 mg/L,萌发率达90%以上;丛生芽诱导的最适培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导不定芽数为28.56个;最佳继代增殖培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+KT 0.75 mg/L+NAA0.1 mg/L,20 d增殖系数为7.30;最适的生根培养基为1/2MS+IBA 0.75 mg/L+NAA 0.5 mg/L,生根率为91.33%,在菜园土-细河沙(3∶1)中移栽成活率为90%。表明本组培快繁技术体系不但增殖系数高,而且组培苗质量好,可为海南冬青的规模化生产提供优质种苗与技术指导。     

西红花组培快繁技术研究

为探索快速提供西红花种苗、种球的方法,进行了西红花组培快繁技术研究,结果表明,将西红花球茎切块以及侧芽基部为外植体,以PP培养基为基本培养基,添加6-BA0.5 mg/L、2,4-D2.0 mg/L,于17℃黑暗培养诱导愈伤组织,将愈伤组织转入PP+6-BA6.0 mg/L+NAA2.0 mg/L+糖2%培养基中暗培养诱导丛芽,丛芽切成单个不定芽转入PP+6-BA0.5 mg/L+NAA2.0mg/L+糖5%培养基、12h光培养诱导球茎。     

甘蓝型油菜(Brassica napus)雄性不育材料的无性保持和繁殖

本试验对油菜不育材料花托培养诱导不定芽及其增殖进行研究。结果表明:花托带完整子房插入培养基B_5+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L是较好的培养方式和适宜培养基;在不同6—BA浓度培养基上进行芽的增殖,以B_5+6-BA5mg/L为宜,新增芽数达5.7个。子房对培养花托的芽诱导有重要作用,并且带完整子房显著优于带部分子房。     

水晶布兰卡百合花器官的组织培养

以水晶布兰卡百合的花器官子房、花瓣、花丝为外植体,研究不同培养基配方对水晶布兰卡百合不同花器官对小鳞茎诱导、愈伤组织分化及小鳞茎增殖的影响。试验结果表明,培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L较适合于初代培养,此时子房小鳞茎的诱导率达58.3%;MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L适合于不同花器官愈伤组织的分化;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L有利于小鳞茎的增殖。     

不同浓度NAA对白芨壮苗培养的影响

本次试验以经过丛芽增殖培养后获得的1.5 cm左右高的紫花白芨试管苗为壮苗培养的起始材料,以MS+6-BA 0.5 mg/L并分别添加不同浓度的NAA(0.3、0.5、0.7、0.9 mg/L)为对比培养基,对紫花白芨试管苗壮苗培养的适宜NAA浓度进行了筛选。结果表明,MS+NAA 0.9 mg/L+6-BA 0.5 mg/L培养基的壮苗培养效果最好,白芨试管苗平均株高达到了4.72 cm,平均每丛叶片数和新增芽数分别为8个和4个。在此培养基下,试管苗的新增芽数较适中,植株生长势、叶片质量和苗丛的健壮程度等均最好,能够为后续白芨试管苗的生根培养和移栽成活等提供较好的物质基础。因此,本试验筛选出的适宜白芨优质试管种苗壮苗培养的培养基激素浓度组合为NAA 0.9 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。     

秦薯5号甘薯茎尖分生组织培养脱毒及种苗快繁技术研究

为获得秦薯5号甘薯脱毒苗用于规模化种苗生产,研究了秦薯5号茎尖分生组织培养各阶段的培养基,适宜的茎尖分生组织芽诱导培养基为MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.2 mg/L+GA₃ 0.05 mg/L+蔗糖3%,适宜的试管苗增殖培养基为MS+6-BA0.1 mg/L+NAA0.05 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%, 1/2MS+NAA0.01 mg/L+蔗糖2%+琼脂0.6%适宜生根培养,繁殖倍数可达5.8。试管苗炼苗后移栽至泥炭与珍珠岩(2∶1)混合基质中,成活率可达98%以上。     

灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。