干热和药剂处理对瓠瓜种子CGMMV的抑制效果

CGMMV是瓠瓜上的一种重要病害,对瓠瓜种子进行消毒是防治的关键。本研究利用ELISA检测技术,分析比较干热处理和药剂处理对钝化种子中CGMMV的效果,发现两者均能有效钝化种子中的CGMMV。但干热处理后的种子随着放置时间的延长,发芽率会急剧下降,而药剂处理对种子发芽率的影响较小。     

喷施3种商品化纳米颗粒对黄瓜绿斑驳花叶病毒病的防效初探

黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)属我国进境检疫性有害生物,主要危害西瓜、甜瓜、瓠瓜等葫芦科作物,给瓜类生产造成严重的经济损失。本研究通过在西瓜叶面喷施商品化的纳米氧化锌(ZnO NPs)、纳米二氧化钛(TiO₂ NPs)、纳米二氧化硅(SiO₂ NPs),以评价3种纳米颗粒对感染CGMMV的西瓜植株生物量、叶绿素含量以及病毒积累量的影响。试验结果表明,经TiO₂ NPs和SiO₂ NPs预处理的感染CGMMV的西瓜植株的生物量与叶绿素含量均显著高于对照,TiO₂ NPs、SiO₂ NPs和ZnO NPs处理组的CGMMV外壳蛋白积累量显著低于对照组,而ZnO NPs处理组的植株生物量、叶绿素含量与对照组无明显差异,各处理组植株的株高与对照组无显著差异。本研究为黄瓜绿斑驳花叶病毒病的防控提供了新的思路,对于后续利用纳米材料辅助抗CGMMV具有一定的参考意义。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒生物学特性及对西瓜生长的影响

对黄瓜绿斑驳花叶病毒(coculnber green mottle mosaic virus,CGMMV)在辽宁省的分布、生物学特性及病毒侵染对西瓜产量和品质的影响进行了研究.结果表明:CGMMV在辽宁省的营口、鞍山、沈阳、丹东、大连、辽阳等地均有分布;在供试的5科21种植物中,病毒仅可侵染葫芦科的西瓜、黄瓜、葫芦、南瓜、角瓜、甜瓜、瓠瓜7种植物,并表现系统花叶症状.该病毒致死温度95～100℃,稀释限点104～10-5,体外保毒期119d.电镜观察病毒粒子直棒状,长300nm,宽15nm.RT-PCR检测表明,盖州、台安、新民的西瓜花叶样品为黄瓜绿斑驳花叶病毒两瓜株系.利用春秋两季大棚栽培西瓜接种试验表明,西瓜感染CGMMV后,导致植株生长缓慢,结瓜稍小,自根西瓜产量减产幅度很大,秋季大棚减产38.7%～47.6%,春季大棚减产11.4%～19.4%;采用葫芦嫁接的两瓜产量损失变化较小,秋季大棚减产3.4%～17.5%,春季大棚减产2.5%～9.1%.另外,研究结果表明,CGMMV侵染直接导致西瓜倒瓤,使西瓜丧失食用价值,血清学检测倒瓤西瓜携带CGMMV.     

江苏黄瓜绿斑驳花叶病毒的鉴定

为确定从江苏省洪泽县大棚西瓜、仪征市露地瓠瓜、东台市露地南瓜上采集到3个表现为褪绿、斑驳花叶症状的病样是否为黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)侵染,采用电子镜观察、RT-PCR和序列测定方法对其进行鉴定。电子显微镜下可见300 nm×18 nm大小的直杆状病毒粒子。根据已报道的CGMMV外壳蛋白质(cp)基因序列合成特异性引物,对所提取病样的总RNA进行RT-PCR扩增,3个分离物的RNA模板中均可扩增到大小为500 bp左右的DNA片段,测序结果表明3个分离物的片段均含有486个核苷酸,包含完整的cp基因,编码161个氨基酸。3个分离物与已报道的7个CGMMV分离物核苷酸及其所推导的氨基酸序列同源性分别为91.8%～99.8%和98.1%～100.0%,与同属的其他3个病毒(Kyuri绿斑驳花叶病毒、黄瓜果实斑驳花叶病毒和小西葫芦绿斑驳花叶病毒)cp基因核苷酸及其所推导的氨基酸序列同源性分别为40.7%～54.7%和44.4%～60.2%,表明所采集的3个病样由CGMMV侵染引起。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒抗血清制备及应用

用葫芦[Lagenaria siceraria（Molina）Stand．]作为黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV）的繁殖寄主,通过差速离心和PEG二次沉淀法进行病毒提纯,用提纯病毒液免疫新西兰兔制备CGMMV抗血清。制备的CGMMV抗血清经间接ELISA法测定效价为1：5120;利用制备的抗血清检测田间样品,证明其可以用于CGMMV的血清学及免疫捕获RT—PCR检测。研究结果对今后开展葫芦科作物CGMMV检测,及时发现疫情以便采取防控措施,避免病毒扩散为害,确保葫芦科作物的安全生产具有重要意义。     

循化线辣椒与瓠瓜套种生产技术

循化线辣椒与瓠瓜套种生产技术对提高线辣椒及瓠瓜的品质及价值、提高单位耕地面积的经济效益,促进农业增效,农民增收具有显著作用。为推广和规范循化线辣椒与瓠瓜套种生产技术,从整地施肥、起垄覆膜、种子选择、适时播种、田间管理、病虫害防治和收获七个关键环节介绍了循化线辣椒与瓠瓜套种生产技术的关键内容。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒CGMMV及葫芦科作物 抗性遗传改良研究进展

黄瓜绿斑驳花叶病毒（CGMMV）是侵染葫芦科作物的重要病毒之一,对葫芦科作物的生产造成了严重威胁。本文对CGMMV的分布和分类,全基因组序列、进化关系及结构,CGMMV的检测方法,以及葫芦科CGMMV抗性的遗传分析及遗传改良包括抗性材料的筛选及种间杂交、基于基因工程的遗传改良、miRNAs测序及人工miRNAs等方面的研究进展进行综述。另外,对葫芦科作物CGMMV抗性遗传改良中存在的问题及应对策略进行了探讨和展望。     

来自安徽不同地区黄瓜绿斑驳花叶病毒（CGMMV）cp 基因的分子进化分析

为了揭示黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)安徽分离物分子变异及系统进化情况,从安徽省5个地区采集感染CGMMV的葫芦科样本。提取感病样本总RNA,经RT-PCR扩增、克隆和测序,获得17个CGMMV分离物的cp基因序列。序列比对发现,17个CGMMV安徽分离物的cp基因核苷酸序列相似性极高,达98.4%~100%,与中国及东亚国家和地区的各个CGMMV分离物cp基因核苷酸序列相似性也非常高,达98.6%~100%,而与CGMMV西班牙分离物和俄罗斯分离物cp基因核苷酸序列相似性相对较低,为90.7%~92.6%。从构建的系统关系树可以看出,17个CGMMV安徽分离物与中国及东亚国家和地区的各个CGMMV分离物形成1个单独的分支,而CGMMV俄罗斯与西班牙分离物聚成另1个分支,说明来源于中国和东亚的CGMMV亲缘关系较近。     

SSR分子标记技术在瓠瓜种子纯度快速鉴定中的应用

当前生产上应用的瓠瓜品种众多,且商业品种间的遗传相似性愈来愈高,种子质量纠纷时有发生。为提供一种快速、准确、可靠的瓠瓜种子纯度检测方法,本研究以44份瓠瓜种质为试材,通过高通量测序自主设计开发适用于瓠瓜研究的SSR引物,从中筛选出8对诊断性引物,在此基础上建立基于SSR分子标记技术的瓠瓜种子纯度快速检测方法。根据本方法建立的瓠瓜主栽品种标准DNA指纹可高效鉴别瓠瓜种子真伪及纯度,满足瓠瓜种子产业化健康发展的需要。     

合肥地区无公害瓠瓜标准化生产技术

针对合肥地区瓠瓜栽培生产现状,提出了符合该地区无公害瓠瓜标准化栽培技术.     

免疫斑点法和免疫捕获RT-PCR检测黄瓜绿斑驳花叶病毒

黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是葫芦科作物上重要的病毒之一.用提纯的黄瓜绿斑驳花叶病毒免疫新西兰大白兔制备CGMMV的多克隆抗体.该多克隆抗体的间接ELISA效价达1∶512 000,与CGMMV17.5 ku外壳蛋白有特异性反应,而与烟草花叶病毒、齿兰环斑病毒和健康植物没有任何反应.用ACP-ELISA分析多抗灵敏度表明多抗检测1∶40 960倍稀释的CGMMV病叶时仍呈阳性反应.用该多抗建立了检测CGMMV的免疫斑点法(dot-ELISA)和免疫捕获RT-PCR方法(IC-RT-PCR).病叶汁液可被dot-ELISA检出的最大稀释度为1∶10 240.IC-RT-PCR从感染CGMMV的病叶组织中扩增到与预期大小相同的480 bp DNA条带,且当CGMMV病叶稀释1∶163 840倍时检测仍呈阳性.检测CGMMV的dot-ELISA和IC-RT-PCR方法的建立为该病毒病的诊断和控制提供了技术支撑.     

检疫性有害生物——黄瓜绿斑驳花叶病毒

黄瓜绿斑驳花叶病毒是烟草花叶病毒属成员之一,对葫芦科作物生产造成巨大损失。近年来,我国葫芦科作物种子的进口数量逐年增加,特别是每年都要从CGMMV的发生地日本引进种子,该病毒随进境种子传入的风险很高。笔者就CGMMV的分子生物学特性,检测方法,以及防控措施等方面的研究结果进行了综述,望能为该病毒的检测和防治提供参考。     

光转膜在早春瓠瓜栽培上的应用效果初报

试验研究表明,光转膜覆盖大棚在早春瓠瓜生产上的应用,可提高棚内5 cm处土温,促进瓠瓜的生长.与普通膜比较,光转膜覆盖能促进瓠瓜雌雄花提前开放,提早果实采收,瓠瓜前期产量增产96.2%,总产量增产8.1%.     

不同红蓝光组合LED灯对瓠瓜育苗的影响

研究5种不同红蓝光组合LED灯对瓠瓜育苗的影响。结果表明,5R:1B处理下瓠瓜幼苗生长最佳;7R:1B和5R:1B处理有利于瓠瓜根系生长;2R:1B处理显著促进瓠瓜叶片光合作用的电子传递效率;2R:1B、5R:1B和7R:1B处理有利于瓠瓜叶片叶绿素含量的增加。通过综合比较分析,认为瓠瓜设施育苗补光应以增加红光比重为主,可将5R:1B作为瓠瓜育苗的最适光源。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒的分子检测及云南分离物的序列分析

选取黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)全基因组中MP-CP-3′UTR的保守序列(位于全基因组中第5692~6335位点之间),设计1对特异性PCR检测引物,对云南省疑似带有CGMMV的病叶进行血清学检测和RT-PCR检测,并将目的片段的基因序列与GenBank中登录的CGMMV其他分离物相对应的序列进行比对和分析。结果表明:已报道的CGMMV主要分为4大类群,云南分离物属于第1类群;云南分离物与辽宁分离物亲缘关系最近,可能源于同一株系。     

瓠瓜变苦原因及防治对策探讨

综述瓠瓜在蔬菜生产中的地位，分析瓠瓜变苦的类型，探讨形成原因，提出防治途径与措施。     

鸦胆子素D抗黄瓜绿斑驳花叶病毒的活性

采用半叶枯斑法、叶圆盘法测定了鸦胆子素D对黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)的抑制效果,结果表明,20μg.mL-1的鸦胆子素D对CGMMV的侵染和增殖均有较强的抑制活性,其对CGMMV侵染和复制抑制率分别为92.6%和88.3%;实时荧光定量PCR测定结果表明,20μg.mL-1该化合物对CGMMV复制酶基因、运动蛋白基因和外壳蛋白基因表达的抑制率分别为88.8%、92.1%和90.5%.采用Western blot方法测定的结果表明,鸦胆子素D可显著抑制黄瓜叶片中CGMMV CP和MP蛋白的表达.     

西瓜嫁接苗工厂化穴盘育苗技术规范

1.嫁接砧木的选择根据西瓜品种选择合适的砧木.砧木选用瓠瓜、南瓜、冬瓜以及野生西瓜,并以瓠瓜和南瓜为主.瓠瓜品种有长瓠瓜、圆瓠瓜、相生、日本葫芦等,南瓜品种有新土佐、早生新土佐等.选择的原则主要是选用亲和力好、抗逆性强,且不改变西瓜品质的作物作为砧木品种.若选择新品种,则必须经过试验证明其确实可以作为砧木品种,方可在生产中规模应用.     

大棚瓠瓜平衡施肥试验研究

通过田间试验,研究平衡施肥对大棚瓠瓜产量及经济效益的影响。结果表明,3种均衡施肥处理均可促进瓠瓜增产,且均衡施肥处理组与对照之间差异极显著,与对照相比,瓠瓜产量增加5.4%~11.51%,增产效果:处理3处理2处理1对照,产投比:处理2处理3处理1对照。综合分析,在实际生产中推荐以处理2为最佳大棚瓠瓜均衡施肥方案。     

利用插入/缺失标记分析我国瓠瓜资源遗传多样性

瓠瓜作为重要的葫芦科作物之一,在我国已有悠久的栽培历史。瓠瓜分子标记研究大大落后于黄瓜、白菜等作物,应用分子标记技术开展瓠瓜种质资源的遗传多样性和亲缘关系研究,对促进瓠瓜重要种质资源的开发和利用具有重要意义。本研究选择96份具有广泛代表性的我国瓠瓜种质材料,利用插入/缺失分子标记技术,研究分析了其遗传多样性和亲缘关系,探讨我国瓠瓜品种间的基因差异和瓠瓜亚种间及亚种内的亲缘关系。结果表明,瓠瓜种质遗传相似系数0.30~1.00,在遗传相似系数0.68处可将96份瓠瓜种质材料分为8类,各种质材料分布较平均;相同瓜型的材料有聚集在一起的趋势,根据瓜型可将这96份瓠瓜种质大致分为3类。