矮牵牛梅林愈伤组织诱导与植株再生

为建立矮牵牛梅林的高频再生体系,以叶器官为材料,研究不同生长调节剂配比、叶片不同部位和不同形态愈伤对不定芽再生的影响。结果表明:6-BA和NAA及其配比极显著影响矮牵牛梅林不定芽再生率,其中NAA 0.3mg·L-1极显著促进了矮牵牛梅林不定芽的再生,6-BA和NAA浓度超过1.0mg·L-1和0.5mg·L-1时,刺激玻璃化的发生。叶片不同部位极显著影响不定芽的再生,芽分化率由高到低依次是叶柄带主叶脉不带主叶脉,愈伤组织形态决定芽分化能力和质量,叶柄直接分化丛芽是梅林再生的优良外植体,分化率达98.3%。芽诱导最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg·L-1+NAA 0.3mg·L-1,其产生不定芽无玻璃化且分化率高,为68.3%。叶片愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg·L-1+NAA 0.3mg·L-1,其不定芽分化率为68.3%且未产生玻璃化苗;最佳生根培养基为1/2 MS培养基,生根率达100.0%;继代增殖培养最佳培养基为MS+6-BA 0.5mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1,丛生芽多且大小均匀。     

芥蓝高频离体再生体系的建立

以'尖叶芥蓝'、'中花粗心芥蓝'和'迟花芥蓝'3个品种为材料,研究苯基噻二唑脲(TDZ)预处理、不同激素配比、基因型和外植体类型对不定芽再生的影响,建立芥蓝离体高频再生体系.结果表明:3个品种中,'中花粗心芥蓝'再生能力最强;不同外植体类型中再生率由大到小依次为:下胚轴、带柄子叶、子叶块;不定芽再生的最佳激素组合为0.2 mg·L-1NAA+6 mg·L-16-BA;以此激素组合为基础,下胚轴经0.5 mg·L-1TDZ浸泡30 min预处理接种在分化培养基(MS+0.2 mg·L-1NAA+6 mg·L-16-BA+8 g·L-1琼脂+30 g·L-1蔗糖)上不定芽再生率最高,达98.5%.     

结球甘蓝离体叶片不定芽的再生研究

以结球甘蓝强力50组培苗叶片为外植体,研究不同激素配比、苗龄对其不定芽再生的影响。结果表明,在不含任何激素以及单独添加不同浓度的6-BA或NAA的MS培养基上,均不能诱导外植体不定芽的分化;结球甘蓝离体叶片不定芽在MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 0.80 mg·L-1分化培养基上再生频率最高,为79.86%,最适宜的苗龄为8 d;外植体在生根培养基1/2 MS+0.30 mg·L-1NAA中,不定芽的生根效果好,生根率达100.0%,且根系生长健壮。     

菊花叶片不定芽再生体系的研究

以7个不同菊花品种的叶片为外植体，探讨了基因型、苗龄、叶片着生部位、Vc、活性炭、AgNO3以及不同生长调节剂组合等因素对菊花叶片不定芽再生的影响.试验结果表明，基因型是影响不定芽再生的重要因素；15～35d苗龄的无菌苗中、上部幼嫩叶片不定芽再生能力较高；高浓度NAA有利于提高‘紫妍’叶片外植体的再生能力和消除褐化现象；AgNO3未能促进叶片外植体的再生；适宜‘紫妍’再生的培养基是MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.5mg/L和MS+6BA 2mg/L+NAA1mg/L；适宜‘L12M57’再生的培养基是MS+6BA 2mg/L+NAA 0.2mg/L和MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L      

刺槐下胚轴不定芽诱导及植株再生

以7日龄刺槐实生苗的下胚轴作为外植体进行离体培养,研究不同生长调节剂、下胚轴部位和接种方式对不定芽分化的影响。结果表明:不同质量浓度的6-BA和NAA及组合对刺槐下胚轴的不定芽分化具有较大影响;不同部位的下胚轴再生不定芽的能力存在显著差异;下胚轴在培养基中的接种方式对不定芽的分化具有一定影响;下胚轴再生具有极性现象。刺槐下胚轴不定芽分化的最佳培养基为MS+6-BA1.5 mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+3%蔗糖,最佳外植体为靠近胚根端的下胚轴部分,接种方式为水平接种,其不定芽诱导率最高,达68.52%,平均诱导不定芽数为5.56个;诱导不定芽生根的最佳培养基为MS+IBA0.20 mg·L-1+3%蔗糖,封口日光驯化1周后,以V(珍珠岩)∶V(泥炭土)∶V(蛭石)=1∶1∶1为基质移栽,生根苗经移栽成活率为100%。     

现代月季离体再生植株影响因素研究

以14个现代月季(Rosa hybrida)品种为试验材料,研究基因型、外植体、激素、暗培养及AgNO3对植株再生的影响。结果表明,基因型是影响植株再生的最重要因素,14个现代月季品种中10个品种再生出不定芽,其中Ambiance不定芽分化率最高,叶片为21.05%,叶柄为45.59%;TDZ与IBA激素配合对月季再生的影响比6-BA与NAA激素配合明显;适宜Ambiance叶片再的生最佳培养基为MS+IBA 0.1 mg.L-1+TDZ 1.5 mg.L-1;适宜Ambiance叶柄再生的最佳培养基为MS+IBA 0.05 mg.L-1+TDZ 1.5 mg.L-1;暗培养对提高诱导再生影响效果不明显,但暗培养时间太长将降低诱导率。低浓度AgNO3可提高月季叶片和叶柄不定芽的再生,AgNO3浓度为5 mg.L-1时最利于再生,随着浓度的增加,则会严重抑制月季不定芽分化。     

两个亚洲百合品种离体再生体系的建立

以亚洲百合‘普瑞头’、‘布耐罗’2个品种的外中层鳞片为外植体,培养基以MS为基础附加不同浓度的6-BA及NAA,成功诱导出了不定芽,得出:‘普瑞头’鳞片再生较适宜的生长调节剂配比为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L（单位下同）,‘布耐罗’为MS＋6-BA 0.5＋NAA 1.0.通过对再生苗叶片不同部位的再分化实验,比较得出小鳞茎叶的叶片基部分化能力非常强,而叶片上部基本不分化,鳞茎叶基部是建立高频快速再生体系的首选材料.该文进一步探讨了适宜鳞茎叶基再生的生长调节剂配比,适宜两个品种鳞茎叶基再生的生长调节剂配比为:MS＋6-BA 2.0＋NAA 0.2、MS＋6-BA 1.0＋NAA 1.0、MS＋6-BA 0.5＋NAA 0.5.最后,研究了母株不同继代次数对叶基不定芽再生率的影响,结果表明:母株继代培养5～6代后,叶基的分化能力略微下降,约为80％      

不同抗生素对矮牵牛叶片培养的敏感性试验

[目的]探讨不同抗生素对矮牵牛叶片再生的影响。[方法]以开花前顶部新展开的矮牵牛叶片为外植体,接种于添加不同抗生素(卡那霉素、头孢唑林钠和潮霉素)的基本培养基MS+2.0μg/ml BA+0.2μg/ml NAA上,研究不同抗生素对叶片再生的影响。[结果]20 mg/L卡那霉素、5 mg/L潮霉素可明显抑制矮牵牛叶片愈伤组织的形成和不定芽分化,而头孢唑林钠在400 mg/L以上时才会对不定芽分化产生不良影响。[结论]为建立矮牵牛的遗传转化体系提供了试验参考。     

文冠果叶片离体再生体系的优化研究

[目的]探明不同处理对文冠果叶片离体再生体的反应。[方法]以成熟文冠果叶片作为外植体,通过诱导和培养的方法,研究不同培养基激素配比对文冠果离体培养的影响。[结果]2,4-D及其与BA组合诱导的愈伤组织不适宜进行间接不定芽诱导;MS培养基中添加2.0mg·L-1 KT和0.2mg·L-1 NAA时,愈伤组织诱导率最高,且在愈伤组织上可分化出不定芽,是叶片通过愈伤组织诱导不定芽再生的一条最佳途径。IBA与NAA、IAA组合中,NAA、IAA浓度为1.0mg·L-1时,为最佳生长素配比;生长素速蘸方法不适宜进行试管苗生根培养。[结论]不同组合和配比生长系,对文冠果再生体有不同效果。     

翠菊品种库蕾娜叶片和叶柄及茎段的再生研究

为加速翠菊新品种的培育和扩繁,研究利用种子消毒接种获得的无菌苗作为外植体,以MS、1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA依次进行愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽生根。结果表明:茎段为再生体系的最佳外植体,愈伤诱导培养基为MS+2.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 NAA,不定芽最佳生根培养基为1/2MS。叶片、叶柄最佳愈伤诱导培养基MS+4.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,愈伤分化培养基只分化不定根。     

矮牵牛细胞的长期离体培养及再生植株的ISSR分析

 【目的】实现矮牵牛细胞的长期离体培养和再生，不但可以获得矮牵牛体细胞突变体，从中选出优良株系，而且可以为研究外源基因在矮牵牛细胞增殖与分化过程中的稳定性提供技术体系。【方法】以重瓣矮牵牛叶片为外植体，使用不同浓度BA与NAA的组合在黑暗条件下诱导愈伤组织。在不同光条件下，将愈伤组织在MS+ BA 2.0 mg•L-1+0.5 mg•L-1 NAA+200 mg•L-1 CH 与 MS+ BA 0.5 mg•L-1+0.5 mg•L-1 NAA+200 mg•L-1 CH两种培养基进行愈伤组织3年多的继代培养，并利用筛选的8个引物对20个再生植株的总DNA进行ISSR分析。【结果】不同的生长素与分裂素配比诱导的愈伤组织状态明显不同，继代后的愈伤组织在低激素培养基上分化出不定芽，再生芽复壮后可得到正常植株。对再生植株的总DNA进行ISSR分析发现，再生植株之间存在很大的遗传变异。【结论】矮牵牛愈伤组织在高BA浓度培养基上可长期继代保存；在低激素培养基上可实现植株再生。长期离体培养矮牵牛是获得其突变体的有效方法。     

矮牵牛杂交一代新品种的组培快繁技术研究

以矮牵牛幼苗的带芽短缩茎、无芽短缩茎、叶片和盆花的花托为外植体,进行其组培快繁研究。结果表明,与无芽短缩茎、嫩叶和花托相比,带芽短缩茎作外植体明显缩短了愈伤组织诱导期和芽苗的诱导分化期,是较理想的外植体;诱导愈伤组织及芽的增殖培养基均以MS+3.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA为佳;生根培养基以1/2MS+0.2 mg/L 2,4-D为好。     

‘幻想’矮牵牛遗传转化受体再生体系建立

[目的]建立‘幻想’矮牵牛的高效遗传转化受体再生体系。[方法]以‘幻想’矮牵牛嫩叶片为外植体,对其暗培养时间、出芽和生根培养基的生长素种类及浓度、筛选抗生素和抑菌抗生素进行优化。[结果]诱导叶片分化的最佳暗培养时间为2 d;最佳出芽培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳生根培养基为MS+IBA 0.1 mg/L;适宜出芽和生根阶段的卡那霉素筛选压为15 mg/L;适宜的抑菌抗生素头孢霉素浓度为300 mg/L。[结论]该研究为后期‘幻想’矮牵牛的分子及育种研究奠定了基础。     

卷柏启动培养研究

以卷柏（Selaginella tamariscina）幼叶、茎尖及茎段为外植体,研究了不同消毒方式的消毒效果以及基本培养基类型和激素组合对初代培养的影响。结果表明：以卷柏的茎尖为外植体,用5 g.L-1多菌灵处理8 h的消毒方式,取得了较好的消毒效果,无菌率可达79.8%;茎尖最佳初代培养基为MS＋KT 2 mg.L-1＋NAA0.2 mg.L-1＋IAA 0.1 mg.L-1。     

矮牵牛花药植株再生体系的建立

为了提高矮牵牛花药愈伤组织诱导率,推动矮牵牛花药培养的应用研究。对白色、紫色、粉红色、大红色四种基因型矮牵牛花药进行培养,研究了不同浓度激素配比及不同浓度蔗糖、麦芽糖和白砂糖对花药诱导的影响。结果表明,四种基因型采用6-BA和IBA组合诱导效果较好。获得较高诱导率的激素配比依次为:白色MS+6-BA1.0 mg.L-1+IBA 1.5 mg.L-1,紫色MS+6-BA 1.0 mg.L-1+IBA 1.0 mg.L-1,粉红色MS+6-BA 1.5 mg.L-1+IBA 1.5 mg.L-1,大红色MS+6-BA 1.5 mg.L-1+IBA 1.0 mg.L-1。麦芽糖诱导效果好于蔗糖,白砂糖诱导效果明显差于前两者。     

矮牵牛茎尖诱导分化研究

[目的]推动矮牵牛组培的产业化,达到使其苗木生产快速、经济的目的。[方法]共配制5种MS培养基,选择无污染、生长健壮的矮牵牛茎尖作为外植体,进行诱导分化单因素试验,研究不同浓度的NAA对矮牵牛外植体诱导成活率的影响,进而选择适合矮牵牛诱导成活的最佳培养基。[结果]培养基中NAA浓度的差异对外植体成活率的影响较大。NAA浓度为0.5mg/L的培养基为最佳诱导成活培养基,NAA浓度为0.7及0.3mg/L的培养基对矮牵牛的作用仅次于NAA浓度为0.5mg/L的培养基,但NAA浓度为0.1及0.9mg/L的培养基处理效果不是十分理想。筛选出矮牵牛组培最佳诱导分化培养基为MS＋NAA0.5mg/L＋6-BA0.3mg/L＋琼脂8g/L＋蔗糖30g/L。[结论]研究结果可为矮牵牛的组织培养提供参考。     

白首乌的组织培养条件的优化

以白首乌茎段、叶片、茎尖和带腋芽茎段为外植体,进行离体培养植株再生研究,结果表明：适合初代诱导的培养基为：MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,诱导率可达100%;最佳外植体是带腋芽茎段;芽苗增殖的最佳培养基为：MS+KT 1.5 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1,增殖系数为5.6;生根培养基为：1/2 MS+NAA 0.5 mg·L-1,生根率为93.3%。     

不同激素配比对重瓣矮牵牛组织培养的影响

[目的]研究不同激素配比对重瓣矮牵牛组织培养的影响。[方法]以重瓣矮牵牛叶片为外植体,研究不同激素配比对其愈伤组织、不定芽诱导和不定芽生根的影响。[结果]愈伤组织及不定芽的诱导以MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L最佳,不定芽生根以1/2 MS＋NAA 0.1 mg/L或1/2MS＋IBA 0.1 mg/L最佳,产生的根较粗,数量较多。[结论]该研究结果为重瓣矮牵牛的快速繁殖、种质资源的保存和遗传转化建立了基础。     

浙贝母鳞茎愈伤组织诱导分化及植株再生研究

以狭叶、宽叶和多籽浙贝母品种鳞茎为材料,研究了不同消毒方法、不同激素配比培养基对浙贝母愈伤组织诱导和分化及植株再生的影响。结果表明,0.1%升汞处理20 min为最佳的消毒方法;在诱导培养基MS+NAA 1.5 mg ·L-1+KT 0.5 mg ·L-1中诱导率最高,达到36.7%;在分化培养基MS+NAA 4.0 mg ·L-1+KT 1.0 mg ·L-1中分化率最高,达到80.7%。研究结果还发现,不同基因型浙贝母对鳞茎愈伤组织诱导与分化及植株再生有较大影响。     

潘那利番茄叶片组织培养及植株再生研究

研究以潘那利番茄的叶片为外植体,研究不同激素及其不同浓度组合对潘那利番茄愈伤组织的诱导、不定芽分化及其生根的影响.结果表明.愈伤组织诱导和芽分化的最适培养基为MS+6-BA 3.0 mg·L-1+IAA0.2 mg·L-1,生根的最适培养基为MS+IAA 0.1 mg·L-1,试管苗移栽后成活率为87%.该研究结果为潘...