β-1,3-葡聚糖对红螯螯虾血细胞的免疫刺激作用

[目的]明确β-1,3-葡聚糖对红螯螯虾血细胞免疫力的影响,为开发β-1,3-葡聚糖作为红螯螯虾饲料免疫增强剂提供理论依据.[方法]向红螯螯虾注射不同剂量(1和5μg/g)的β-1,3-葡聚糖,以注射生理盐水为对照,于注射后的0、6、12、24和48 h采集红螯螯虾的血淋巴,测定血细胞总数(THC)、活性氧(ROS)含量、一氧化氮(NO)含量、非特异性酯酶活力、吞噬活力及血清酚氧化酶(PO)活力.[结果]β-1,3-葡聚糖可刺激红螯螯虾血细胞THC、ROS和NO含量、酯酶和血清PO活力显著提高(P<0.05,下同),注射5μg/g的β-1,3-葡聚糖剂量还可显著提高血细胞的吞噬活力;β-1,3-葡聚糖对各类免疫应答的影响存在一定的剂量和时间效应,THC、ROS含量、NO含量及血清PO活力对β-1,3-葡聚糖的刺激更敏感;ROS含量、酯酶活力和血清PO活力呈先上升后下降的变化趋势,其指标达峰值时,处理时间在24.72~28.20 h范围内.[结论]注射β-1,3-葡聚糖能提高红螯螯虾的循环血细胞数量及其细胞免疫力,表明β-1,3-葡聚糖可开发为红螯螯虾饲料免疫增强添加剂.     

中华绒螯蟹酚氧化酶的初步研究

初步研究结果表明,在中华绒螯蟹成蟹血淋巴中均检测出酚氧化酶的活性,为1.608±1.410个活力单位,而在中华绒螯蟹大眼幼体组织匀浆上清液中亦检测到酚氧化酶的活性,为1.625±0.057个活力单位。     

硫脲对槐尺蠖酚氧化酶活性的抑制作用

以邻苯二酚为底物,采用分光光度计法测定了硫脲对已纯化的槐尺蠖酚氧化酶的影响.结果显示,在硫脲浓度为0～0.5 μmol/L时,可以抑制酚氧化酶的活力,且随着硫脲浓度的增大,酚氧化酶的活性降低;当硫脲浓度达到0.4 μmol/L时,酚氧化酶剩余活力还不到20%.采用连续测活的方法测定了不同硫脲浓度下,酚氧化酶催化氧化邻苯二酚的酶促反应动力学.结果表明,反应时间足够长时,酶促反应速率不再改变,达到最大反应速率;但最大反应速率随着硫脲浓度的增大而降低.双倒数作图法显示,硫脲对酚氧化酶的抑制作用属于非竞争性抑制.     

舞毒蛾(Lymantria dispar)酚氧化酶的酶学特征及有机溶剂对其活性的影响

经35%饱和度硫酸铵分级沉淀,将舞毒蛾(Lymantria dispar)酚氧化酶部分纯化。测定该酶最适pH值为6.5,pH在6.5～7.5范围内酶保持稳定的活力。最适温度为35℃,当温度低于25℃时,酶具有稳定的活力。以L-多巴、邻苯二酚和焦性没食子酸为底物时,测定酚氧化酶对底物的专一性,结果表明其Km值分别为3.19、10.74和19.26 mmol.L-1。本实验还研究了有机溶剂对酶活力的影响,结果表明甲醇、乙醇、丙酮和二甲苯对舞毒蛾酚氧化酶都有持续的抑制作用,其IC50分别为0.450、.430、.41和0.13 mmol.L-1。     

中华绒螯蟹血淋巴中酚氧化酶的部分生化特性

对中华绒螯蟹血淋巴的血清、血浆和血细胞裂解上清液（HLS）中酚氧化酶（PO）的活力以及该酶最适pH和温度进行了测定分析，结果表明在血清和HIS中都有PO活力，而血浆中无PO的存在，血清中的PO来自于血细胞；以L—Dopa为底物，中华绒螯蟹PO活力的最适pH值为6．5，最适温度为40℃。采用SDS、Ca^2＋、Mg^2＋以及SDS与Ca^2＋联合和SDS与Mg^2＋联合分别对酚氧化酶原（proPO）进行激活试验，血清和HLS中的PO活力都有显著的增加，其中SDS的激活作用最强，Ca^2＋、Mg^2＋的激活作用最弱，SDS与Ca^2＋联合和SDS与Mg^2＋联合的混合激活作用介于SDS和Ca^2＋、Mg^2＋之间，激活试验表明中华绒螯蟹的PO主要以酚氧化酶原（proPO）形式存在于血细胞中。     

中华绒螯蟹血淋巴中酚氧化酶的部分生化特性

对中华绒螯蟹血淋巴的血清、血浆和血细胞裂解上清液（HLS）中酚氧化酶（PO）的活力以及该酶最适pH和温度进行了测定分析，结果表明在血清和HIS中都有PO活力，而血浆中无PO的存在，血清中的PO来自于血细胞；以L—Dopa为底物，中华绒螯蟹PO活力的最适pH值为6．5，最适温度为40℃。采用SDS、Ca^2＋、Mg^2＋以及SDS与Ca^2＋联合和SDS与Mg^2＋联合分别对酚氧化酶原（proPO）进行激活试验，血清和HLS中的PO活力都有显著的增加，其中SDS的激活作用最强，Ca^2＋、Mg^2＋的激活作用最弱，SDS与Ca^2＋联合和SDS与Mg^2＋联合的混合激活作用介于SDS和Ca^2＋、Mg^2＋之间，激活试验表明中华绒螯蟹的PO主要以酚氧化酶原（proPO）形式存在于血细胞中。     

对硝基酚-α-D-吡喃半乳糖法测定饲用α-半乳糖苷酶(黑曲霉)活力的方法

旨在建立一种适合于测定饲用α-半乳糖苷酶活力的检测方法。实验利用对硝基酚 -α- D-吡喃半乳糖(p- NPG)作为酶反应底物 ,通过 4 0 0 nm比色检测酶反应所释放的对硝基酚的量来测定饲用酶制剂中 α-半乳糖苷酶的活性。研究表明 ,反应液中所含的对硝基酚的量大于 15 μmol.m L-1时 ,吸光值超过仪器的检测范围 ;酶制剂稀释倍数对对硝基酚比色法的影响较小 ,本底占总酶活的 10 %～ 16 % ,当酶稀释 10 0倍时 ,本底对酶活的影响最小 ;在测定酶活反应时间为 6 min时 ,已经有约 10 %的对硝基酚 - α- D-吡喃半乳糖水解 ,当酶液的酶活在 2 .0 U.m L-1以内 ,测试结果较为准确。考虑到饲用酶制剂的作用环境 ,建议反应温度为 37℃、反应体系 p H 5 .0。     

PLPT对棉铃虫和菜粉蝶2种酶活性的影响

采用分光光度法和同工酶电泳法，测定了无色杆菌毒蛋白(PLPT)对棉铃虫和菜粉蝶血淋巴中酚氧化酶和酯酶活性的影响。结果表明，经无色杆菌毒蛋白感染的棉铃虫和菜粉蝶，3h后血淋巴中酚氧化酶比活力和酯酶活力有明显的变化。各处理中，酚氧化酶比活力变化与对照相比，均有下降，其中以6h后的活力下降最显著；酯酶活力则有所增强，其中以24h后的活力增强最明显。     

感染迟缓爱德华氏菌杂交鳢血清指标动态变化

[目的]研究感染迟缓爱德华氏菌后杂交鳢血清指标的动态变化。[方法]杂交鳢人工感染迟缓爱德华氏菌后,测定其血清指标的水平,并分析其动态变化特征。[结果]不同时间点感染组血糖浓度的平均值逐渐升高;不同时间点总蛋白、球蛋白、总胆红素、尿酸、尿素氮、肌酐、钙离子浓度的平均值以及谷丙转氨酶、谷草转氨酶、超氧化物歧化酶、碱性磷酸酶、溶菌酶、酚氧化酶活力的平均值先升高后降低,但不同时间点感染组的尿素氮之间无显著性差异(P0.05);淀粉酶、酸性磷酸酶的活力则先降低后升高。不同时间点对照组上述指标之间无显著性差异(P0.05)。[结论]杂交鳢感染迟缓爱德华氏菌后,除球蛋白和尿素氮外,其他血清指标相比对照组均发生了明显的异常变化(P﹤0.05),但最终大多数指标恢复至对照组水平。     

软、硬底质网箱对克氏原螯虾养殖效果分析

以体质量(8.02±1.65)g克氏原螯虾(Procambarus clarkii)为研究对象,探讨软、硬两种不同底质网箱对克氏原螯虾养殖效果的影响。试验分为两组,软底网箱作为对照组,硬底网箱为试验组,每组设3次重复,每个网箱随机放养60尾螯虾。养殖6周后,测定克氏原螯虾的各项生长性能指标和酶活力,分析了软、硬底质网箱中克氏原螯虾生长和生理指标的变化特征。结果表明:试验组克氏原螯虾的终末体重、存活率、饲料效率、增重率和特定生长率均显著高于对照组,而残肢率显著低于对照组;同时,各项消化酶和抗氧化酶活力也明显高于对照组。由此可知,采用硬底网箱进行克氏原螯虾养殖的效果较软底网箱更好。