沙门氏菌耐药性研究进展

沙门氏菌是常见的引起肠道疾病的人畜共患病原菌。随着抗菌药物的大量使用,沙门氏菌的耐药性逐渐增强,多重耐药菌株的比例不断上升,严重影响人类和动物的健康。综述了对沙门氏菌的耐药机制和国内部分地区所分离沙门氏菌的耐药性现状等。     

沙门氏菌耐药机制研究进展

综述了沙门氏菌耐药机制的研究进展。     

新疆焉耆县不同动物源耐药沙门氏菌的MLST分析

为了解新疆焉耆县不同动物源沙门氏菌（Salmonella）对临床常用抗菌药物耐药和携带耐药基因的情况，以及不同动物源耐药沙门氏菌之间的亲缘关系，从新疆焉耆县几个规模化养殖场分别采集鸡、牛、猪及羊肛拭子样；对样品中分离出的沙门氏菌运用琼脂稀释法进行13种抗菌药物的最小抑菌浓度测定；并对耐药菌株通过PCR方法进行相关耐药基因的检测；采用MLST方法分析不同动物源耐药沙门氏菌之间的亲缘关系。结果显示：①分离鸡源沙门氏菌110株（27.5%；110/400），牛源沙门氏菌63株（64.9%；63/97），猪源沙门氏菌40株（10.0%；40/400），羊源沙门氏菌17株（6.8%；17/250）。②牛源沙门氏菌对氨苄西林、卡那霉素以及氟苯尼考这3种抗菌药物的耐药率均在50.0%以上，以7耐（33.3%）为主；猪源沙门氏菌对四环素的耐药率高于本地区其他动物源菌，多药耐药结果显示在0耐~7耐均有分布。③牛源沙门氏菌和羊源沙门氏菌中blaTEM、blaOXA、oqxA、oqxB、aac(6′)-Ib-cr、ant(3″)-Ia、aadA2和tetB基因的携带率高于鸡源和猪源沙门氏菌的携带率，但blaCMY-2、qnrB、qnrS和tetA这4种耐药基因仅在猪源沙门氏菌中检出。④筛选出8株多药耐药且携带多种耐药基因的沙门氏菌，MLST分析发现8株菌的ST型均为ST34，进化树分析显示它们之间存在较近的亲缘关系。结果表明，焉耆县被检养殖场的动物粪便中均分离出沙门氏菌，且对13种不同抗菌药物表现出不同程度的耐药，存在多种耐药基因共存的情况，不同动物源耐药沙门氏菌间存在克隆传播的机制。     

海口市美兰区畜禽生鲜肉沙门氏菌分离及耐药性分析

为了解海南省海口市美兰区市售生鲜肉沙门氏菌污染情况,笔者采集了海口市美兰区市售猪肉、鸡肉和鸭肉样本共50份,进行了沙门氏菌分离、Kindy-Bauer药敏试验及耐药基因分析。结果显示:共得到4份沙门氏菌菌株,检出率为8%。4株沙门氏菌对15种抗生素产生不同耐药性,其中,对青霉素、氨苄西林、四环素和吉他霉素耐药率为100%,对氯霉素、阿莫西林和磺胺异噁唑耐药率为75%,对多西环素、红霉素、卡那霉素、诺氟沙星和链霉素耐药率达到50%。PCR结果显示,4株沙门氏菌菌株对四环素类耐药基因tetA检出率为50%,对磺胺类药物耐药基因sul2和喹诺酮类耐药基因qurB基因检出率为0。本研究结果表明,海口局部地区禽畜类生鲜肉类沙门氏菌感染率较低,但分类菌株具有较广耐药性,应加强监管。     

湖南地区猪源和鸡源沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析

为了了解湖南地区沙门氏菌的耐药表现和基因分布情况,采集了永州、怀化、长沙等地生猪养殖场、屠宰场的猪肛门拭子样本和鸡盲肠样本进行沙门氏菌分离鉴定,并对分离的沙门氏菌进行16种常见兽用抗生素耐药性检测和血清型分析以及β-内酰胺类耐药基因型分析。结果表明:从300份猪肛门拭子样本和170份鸡盲肠样本中总计分离到沙门氏菌69株,血清凝集试验显示其中鼠伤寒沙门氏菌为优势血清型,69株中的48株为鼠伤寒沙门氏菌;猪源和鸡源沙门氏菌都对四环素、氨苄西林、磺胺异恶唑具有很强的耐药性,耐药率在62%以上,其次为阿莫西林/克拉维酸、氟苯尼考,耐药率在40%左右,未有菌株对乙酰甲喹、安普霉素耐药;多重耐药性结果显示每株菌至少对1种抗生素耐药,最高出现了13重耐药菌株,尚未发现对16种抗生素全部耐药的菌株;β-内酰胺类抗生素常见耐药基因检测结果显示,耐药基因检出率普遍不高,其中Bla CTX-M检出率相对较高,为14.49%(10/69)。这表明湖南省部分地区健康来源动物样品中沙门氏菌检出率相对较高,并有一定的多重耐药情况存在,应保持监测。     

2015—2017年广西鸡源沙门氏菌耐药性与致病性的相关性分析

[目的]明确鸡源致病性沙门氏菌耐药表型与致病性的相关性,为有效防控鸡沙门氏菌病提供科学依据.[方法]采用玻片凝集试验对55株鸡源沙门氏菌广西分离株进行血清型鉴定,以纸片扩散(K-B)法和PCR分别测定其耐药表型及耐药基因,通过小鼠攻毒试验检测其致病性,并分析鸡源沙门氏菌广西分离株耐药表型与致病性的相关性.[结果]55株沙门氏菌广西分离株以鼠伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌为主,对青霉素G、阿莫西林、苯唑西林、头孢噻吩、红霉素和利福平的耐药率均达100.00%,而对庆大霉素和大观霉素较敏感(耐药率在10.00%以下).55株沙门氏菌广西分离株中有1株(占1.82%)携带7种耐药基因、6株(占10.91%)携带6种耐药基因、20株(占36.36%)携带5种耐药基因、12株(占21.82%)携带4种耐药基因、13株(占23.64%)携带3种耐药基因、3株(占5.45%)携带2种耐药基因;16种耐药基因中,blaTEM、tetX、sul3和aadA1基因检出率较高,qepA、blaCMY和tetB基因检出率较低,而qnrA、qnrB、Aph(3)-IIa、blaPSE和aadA2基因等未被检出.55株沙门氏菌广西分离株对昆明小白鼠均具有致病性,致死率为20%~100%;随机选取10株分离株对昆明小白鼠的半数致死量(LD50)为4.00×107~3.18×108 CFU/mL.沙门氏菌分离株耐药种类数量与LD50对数值的线性回归方程为y=-0.086x+8.971(R2=0.9329),耐药基因数量与LD50对数值的线性回归方程为y=-0.148x+8.673(R2=0.5748),即沙门氏菌的耐药性与其致病性呈正相关.[结论]2015—2017年从广西发病鸡分离获得的致病性沙门氏菌以鼠伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌为主,普遍存在耐药性,且多重耐药现象严重.鸡源致病性沙门氏菌的耐药表型与其致病性间呈正相关,因此,生产上要加强临床用药管理,加大细菌耐药监测与防范.     

牛羊源沙门氏菌在某定点屠宰场和农贸市场的污染分布与耐药性调查

【目的】 研究新疆地区某定点屠宰场和农贸市场中牛羊源沙门氏菌的污染和耐药性。【方法】 在新疆乌鲁木齐市某定点屠宰场、库尔勒市某定点屠宰场和农贸市场采集的胴体拭子、肉样、加工用具拭子841份,采用国家标准方法GB 4789.4-2016进行沙门氏菌的分离鉴定,并进行17种药敏纸片的耐药性调查。【结果】 共分离出47株沙门氏菌属,分离率为5.59%。在屠宰场中沙门氏菌污染程度依次为:胴体拭子＜加工用具拭子＜肉样。而在农贸市场中沙门氏菌污染程度依次为:加工用具拭子＜肉样＜胴体拭子。对17种抗菌药物均存在不同程度的耐药,耐药率为2.13%～59.57%。多重耐药沙门氏菌数量较多,其中有1株沙门氏菌耐12种抗菌药。【结论】 市场中沙门氏菌的多重耐药比屠宰场的严重。沙门氏菌在屠宰和市场环节均存在污染,且大多数都是耐药菌株。     

鸡源肠炎沙门氏菌快速检测方法的建立及其分离株的耐药性分析

为探讨鸡源肠炎沙门氏菌的耐药机制,参照Gen Bank中肠炎沙门氏菌特异性序列sdfⅠ设计引物,优化反应条件,建立鸡源肠炎沙门氏菌的PCR检测方法,用建立的检测方法对临床样品分离株进行检测,并应用K-B纸片扩散法和PCR方法检测分离株对22种药物的敏感性和耐药基因的分布情况。结果显示,建立的检测方法可有效扩增出203 bp的目的基因,DNA最低检出量为100 pg/μL,菌液最低检出浓度为4×10~3 cfu/mL,PCR方法检测结果与传统检测方法的符合率为100%;药敏试验结果表明,56株鸡源肠炎沙门氏菌分离株对22种抗生素表现出不同程度的耐药性,其中对青霉素(98.21%)和红霉素(96.43%)的耐药性最高;耐药基因检测发现,tet A、aph(3')-Ⅱa、bla CMY-2、cat1和sul1的检出率较高,均大于50%。可见,建立的PCR方法可有效检测鸡源肠炎沙门氏菌,鸡源肠炎沙门氏菌分离株耐药性严重,耐药基因广泛存在于耐药菌株中。     

苏淮仔猪腹泻细菌性病原的分离鉴定与耐药性分析

为了解淮安地区苏淮猪仔猪出现细菌性腹泻的病因并提供治疗方案,采集腹泻仔猪的肛拭子样品共95份,对采集的样品进行细菌分离与鉴定、动物致病性鉴定及耐药性分析.结果显示,本次试验共分离鉴定到78株大肠杆菌,92株沙门氏菌;动物致病性试验显示,大肠杆菌致小鼠死亡率为65.38％,沙门氏菌致小鼠死亡率为95.84％;药敏试验结果显示,大肠杆菌耐药率高于沙门氏菌,且均对青霉素类和林可霉素类高度耐药,对氟喹诺酮类耐药率最低.多重耐药结果显示,所有分离菌株均为多重耐药菌株,大肠杆菌主要表现8～10耐,沙门氏菌主要表现在6～8耐.     

狐沙门氏菌的耐药性分析

本试验对实验室分离的2株狐源沙门氏菌进行药物敏感性检测及耐药基因携带情况调查,为临床治疗提供依据。采用K-B法检测菌株的药物敏感性,并通过PCR方法检测耐药基因的携带情况。药物敏感性试验结果显示,2株沙门氏菌对头孢类药物、左氧氟沙星和多粘菌素较敏感;对氨基糖苷类药物、四环素、氨苄西林、诺氟沙星、环丙沙星和氯霉素全部表现为耐药。耐药基因检测结果显示,2株沙门氏菌均检测出aac(3')-Ⅱc、aac(3')-IV、aadA1、tet(A)、tet(C)、cat2、blaTEM-17种耐药基因。由此可知,2株沙门氏菌呈现出多重耐药现象,且携带多种耐药基因,严重影响了抗生素的使用,对临床用药治疗造成巨大的影响。     

沙门氏菌耐药机制的研究进展

沙门氏菌是一种重要的人畜共患病原菌,也是导致食物中毒的最常见致病菌,严重威胁着人类和动物的健康.本文从沙门氏菌靶位基因突变、酶解作用、药物外排作用、膜通透性、生物被膜、质粒介导、转座子介导、整合子介导等方面对沙门氏菌耐药机制作一综述.     

黄藤素对动物源耐药沙门氏菌抑菌作用的初步研究

初步研究黄藤素对动物源耐药沙门氏菌的抑菌作用。用微量肉汤稀释法检测黄藤素和12种抗生素对耐药沙门氏菌的最小抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration,MIC);用微量棋盘法测定黄藤素联合抗生素使用对耐药沙门氏菌的抑菌效果;用PCR法检测13个耐药基因;用细菌浓度OD值的变化和透射电镜检测黄藤素对耐药沙门氏菌生长曲线和形态的影响;通过碱性磷酸酶含量、电导率、可溶性蛋白浓度、胞内蛋白浓度、acrA表达等的变化来研究黄藤素对耐药沙门氏菌的抑菌作用。结果表明,黄藤素对编号为8、10、15的3株沙门氏菌的MIC分别为64μg/mL、256μg/mL和128μg/mL。黄藤素与恩诺沙星等7种抗生素联用表现为协同作用或相加作用,黄藤素与多粘菌素B等4种抗生素联用表现为拮抗作用。3株沙门氏菌均携带了多种耐药基因。0.5 MIC(32μg/mL)和1 MIC(64μg/mL)的黄藤素能抑制沙门氏菌的生长,使细菌细胞壁变薄,空腔增多,使碱性磷酸酶增多,电导率变大,可溶性蛋白与胞内蛋白含量均增加,降低acrA的表达。结果提示,黄藤素引起耐药菌形态、蛋白表达和外排泵等的变化。     

禽源沙门氏菌对四环素耐药分析

为检测分析辽宁省东部地区禽源性沙门氏菌对四环素的耐药情况,采样分离来自健康鸡群34株沙门氏菌,分别进行四环素药敏试验,及四环素基因tet(A)、tet(B)、tet(C)、tet(D)检测。结果表明,34株沙门氏菌中有30株对四环素产生耐药,30株沙门氏菌对4种耐药基因的检出率大小顺序为tet(A)tet(C)tet(B)tet(D),该试验为家禽合理使用四环素提供依据。     

藏鸡和彭县黄鸡鸡胚、弱雏中沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析

【目的】为了解藏鸡及彭县黄鸡中沙门氏菌的耐药性情况和差异,对样品中的沙门氏菌进行分离鉴定与药敏试验。【方法】运用CHR Magar显色培养基与微量生化管进行分离鉴定,采用Kirby-Bauer纸片扩散法测定其耐药性。【结果】沙门氏菌分离率为16.7%:藏鸡鸡胚(20%),彭县黄鸡弱雏(13.3%)。耐药率:对青霉素、吉他霉素和林可霉素的耐药性最高(100%);对新霉素和链霉素耐药性严重(70%以上);对诺氟沙星的耐药率为0。【结论】沙门氏菌耐药及多重耐药现象普遍,总体呈现藏鸡的耐药率高于彭县黄鸡或与其持平的趋势;藏鸡分离株的敏感率也高于彭县黄鸡分离株。     

猪源沙门氏菌的分离与耐药性分析

沙门氏菌是一种多种动物共患菌,可在动物与动物,人与人,动物与人之间相互传播,其耐药性越来越严重,给养猪业和人类健康带来严重危害。为弄清沙门氏菌在猪场的耐药情况,我们采集柯桥区三个规模猪场生猪肛拭子195份,通过增菌培养、分离培养基初筛、PCR鉴定,分离得到46株沙门氏菌,分离率为23.59%;选用庆大霉素、头孢唑啉、大观霉素等13种常用兽用抗生素进行药敏试验,发现丁胺卡那（耐药率4.35%）、恩诺沙星（耐药率17.39%）和庆大霉素（耐药率13.04%）的耐药性不高,对林可霉素（耐药率100%）和红霉素（耐药率84.78%）表现为很高耐药性;大部分分离的沙门氏菌呈现多重耐药性,对3种及以上抗菌药物耐药的菌株占84.78%（39/46）。     

中药复方制剂连黄对沙门氏菌耐药基因aph(3′)-Ⅱa mRNA表达水平的影响

通过研究中药复方制剂连黄对沙门氏菌耐药基因aph（3’）-Ⅱa的mRNA表达水平的影响．从而深入探讨连黄降低沙门氏菌对氨基糖苷类药物的耐药性作用机理。采用竞争性RT—PCR法定量分析了连黄作用前后的沙门氏菌耐药基因aph（3’）-Ⅱa的mRNA表达水平。结果表明．连黄作用后的沙门氏菌耐药基因aph（3’）-Ⅱa的mRNA表达量降低,进而降低了沙门氏菌对氨基糖苷类药物的耐药性。     

宠物犬源沙门氏菌和葡萄球菌耐药性及耐药基因检测

【目的】了解新疆乌鲁木齐市宠物犬源沙门氏菌和葡萄球菌的耐药性及耐药基因携带情况。【方法从77份宠物犬直肠粪便样品中分离沙门氏菌和葡萄球菌,采用琼脂稀释法对分离的菌株进行药敏试验,通过PCR方法对沙门氏菌6类23种耐药基因和葡萄球菌5类9种耐药基因进行检测。【结果】从77份宠物犬粪便样品中分离到沙门氏菌36株,葡萄球菌75株。除头孢噻呋、安普霉素、阿米卡星、硫酸庆大霉素和多黏菌素外,宠物犬源沙门氏菌对其他被捡抗菌药物的耐药率高达97.0%以上,多重耐药以8耐为主,tetB、blaTEM、blaOXA、qnrS、oqxA、oqxB、aac(6′)-Ib-cr、ant(3″)-Ia和floR基因检出率在97.0%以上。宠物犬源葡萄球菌对左氧氟沙星(93.5%)、苯唑西林(90.7%)和氟苯尼考(82.9%)耐药率在80.0%以上,多重耐药集中在4耐、6耐和9耐,主要检出的基因为fexA(40.0%,30/75)和femA(18.7%,14/75),其次为tetM(16.0%,12/75)、ermB(14.7%,11/75)和mecA(1.3%,1/75)。【结论】宠物犬源沙门氏菌和葡萄球菌耐药情况严重,耐药基因携带率高,使宠物犬的细菌性疾病治疗难度加大,应加强耐药菌的监测,降低宠物犬源耐药菌转移给人的潜在风险。     

不同来源沙门氏菌的分离鉴定及其耐药谱型比较

利用亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)、沙门氏-志贺氏属琼脂培养基(SS)、科玛嘉沙门氏菌显色培养基、Reveal沙门氏菌检测试剂盒和分子生物学方法对不同动物的粪便样本进行沙门氏菌(Salmonella)的分离和鉴定.采用微量肉汤稀释法对分离菌株进行恩诺沙星、安普霉素和氟苯尼考等17种抗菌药物敏感性试验,试验数据采用Whonet5.4软件统计以比较不同来源沙门氏菌的分离率和耐药谱型差异.结果表明,不同动物来源沙门氏菌的分离率和耐药谱型差异较大,其中牦牛源沙门氏菌的分离率和耐药率最低,禽源和犬源沙门氏菌的分离率差别不大,但耐药谱型差异较大.     

2019年浙江和福建沙门氏菌和弯曲杆菌的耐药性分析

为了解2019年浙江和福建动物源沙门氏菌和弯曲杆菌流行情况及其耐药特征,于2019年在浙江和福建共10市随机采集新鲜粪便和肛拭子样品共计1 480份,参考国家标准方法分离沙门氏菌和弯曲杆菌,利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法进行菌种鉴定,并使用微量肉汤稀释法分别检测沙门氏菌和弯曲杆菌对16种和9种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)。本研究从2省样品中共计分离了100株沙门氏菌和100株弯曲杆菌,其中94株沙门氏菌被鉴定出血清型,包括11种血清型,优势血清型为策维埃(20.2%)、肯塔基(15.9%)、韦太夫雷登(15.9%)、鼠伤寒(14.9%)、肠炎(14.9%)。药敏检测结果显示:分离出的沙门氏菌对四环素的耐药率最高(76%),其次为氨苄西林(70%)、磺胺异恶唑(65%),对奥格门丁(6%)的耐药率相对较低,对美罗培南全部敏感;分离出的弯曲杆菌对环丙沙星(99%)、萘啶酸(88%)和四环素(87%)的耐药率最高,对庆大霉素的耐药率较低(23%)。结果表明,浙江和福建2省动物源沙门氏菌和弯曲杆菌耐药水平较高,多重耐药情况普遍,影响畜产品质量安全,可对公共卫生安全构成威胁,需要提高警惕。     

源自合肥地区表观健康鸡的沙门氏菌耐药性与血清型、基因型相关性分析

为了解源自合肥地区表观健康鸡的沙门氏菌耐药性及其与血清型、基因型的相关性,在前期已鉴定血清型和ERIC基因型的基础上,采用K-B纸片法对21株沙门氏菌分离株进行21种抗生素药物敏感试验,利用PCR技术对耐药菌株进行32种耐药基因检测。结果显示,总耐药率为100%(21/21),耐2种以上抗生素的菌株占76.19%(16/21),多重耐药谱为青霉素-氨苄西林-阿莫西林-链霉素-复方新诺明,其中耐受β-内酰胺类抗生素的类别最多,耐药率最高达100%(21/21)。21株沙门氏菌均检出耐药基因,涉及blaPSE、sul1、strA、blaTEM、sul2、tetA、tetB、aph3-Ⅱa和catⅠ9种,其中blaPSE基因的检出率最高,为85.7%(8/21)。可见源自合肥地区表观健康鸡的沙门氏菌对β-内酰胺类抗生素耐药性最强,与其携带blaPSE基因有关;耐药表型测定结果与耐药基因检测结果基本一致;耐药性与具有相同来源的同一血清型、基因型相关。