橡胶延长因子基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

[目的]制备橡胶延长因子重组蛋白及其多克隆抗体。[方法]用RT-PCR法扩增橡胶延长因子(rubber elongation factor,REF)编码区基因,将其克隆到原核表达载体pDEST17中,转化大肠杆菌BL21-AI,用L-阿拉伯糖诱导重组蛋白的表达,并采用亲和层析法纯化重组蛋白,以之为免疫原免疫小鼠制备多克隆抗体,并用ELISA和W estern blot对抗体效价和特异性进行鉴定。[结果]高效表达和纯化了橡胶延长因子重组蛋白,用其免疫家小鼠,获得了高效价的特异性多克隆抗体,W estern blot检测显示该抗体可识别胶乳中的天然橡胶延长因子。[结论]成功获得橡胶延长因子重组蛋白,制备了效价高、特异性好的鼠抗橡胶延长因子抗体,为进一步橡胶延长因子及其他橡胶粒子膜蛋白的生物学功能研究奠定了基础。     

巴西橡胶树胶乳基因表达

天然橡胶（顺式-1，4-聚异戊二烯）是巴西橡胶树（Hevea brasiliellsis Muell．Arg．）乳管中合成的一种具有众多工业用途的高分子聚合物。就胶乳中的特异性或高丰度基因而言，它们在橡胶生物合成中可能起着十分重要的作用。本研究构建了来自巴西橡胶树胶乳的cDNA文库．并通过cDNA克隆的单向部分测序对胶乳中基因的表达进行了研究。通过序列分析共鉴定出245个表达序列标签（ESTs），其中57％与公共数据库中的已有序列具有不同程度的同源性。在数据库中能找到同源     

橡胶树胶乳中橡胶粒子凝集相关蛋白研究进展

排胶时间是限制天然橡胶产量的关键因子之一,而乳管伤口堵塞物的形成决定着排胶时间的长短。橡胶粒子凝集与乳管伤口堵塞物的形成密切相关,其凝集过程主要受胶乳中的蛋白质调节。笔者综述橡胶粒子凝集相关蛋白的研究进展,旨在为橡胶树乳管堵塞机理的研究及排胶相关分子标记的研发提供参考资料。     

橡胶树不同品系橡胶粒子蛋白的比较研究

[目的]对橡胶树不同品系橡胶粒子蛋白进行比较研究。[方法]以11个橡胶树品系为试材,采用不同离心速度分级分离方法,获得不同直径大小的纯化橡胶粒子,分别洗脱其膜蛋白并作电泳SDS-PAGE分析,并比较了高产品系和低产品系胶乳中的大橡胶粒子膜蛋白质谱。[结果]14.5、24.02、7.0、32.0、34.0和49.0 kD等蛋白条带的含量在不同直径大小的橡胶粒子上有明显变化,其中14.5 kD蛋白是橡胶延长因子,24.0 kD蛋白是小橡胶粒子蛋白。橡胶树各个品系具有各自独立的特征蛋白谱带,主要表现为在品系之间存在某些谱带表达量上的差异,其中27.0 kD橡胶粒子膜蛋白在耐乙稀利刺激的PR107中的丰度要显著高于不耐乙稀利刺激的海垦1号。[结论]橡胶粒子膜表面的一些蛋白条带可能跟橡胶粒子直径大小或发育相关。     

利用cDNA微阵列分离橡胶胶乳生物合成相关基因的研究

天然橡胶是我国重要的热带经济作物,关系到国计民生的重要战略物资。本研究通过对橡胶叶与胶乳mRNA的提取,及其逆转录产物cDNA经Cy3、Cy5荧光染料标记后,进行芯片杂交,杂交数据经分析结果显示,在橡胶胶乳中表达上调达显著的基因有105个, 其中表达极显著的基因有44个, 包括elongation factor Tu(延伸因子基因), thioredoxin H-type 1（硫氧还蛋白H型1基因）,4个zinc finger (C3HC4-type RING finger) family protein（锌指蛋白基因）等。在橡胶叶中表达显著的基因有151个, 其中表达极显著的有34个。研究结果对于发现橡胶胶乳表达相关基因有着重大的实践作用,对研究橡胶生物合成相关基因具有重要的参考作用,这将为研究橡胶生物合成机理奠定基础。     

猕猴桃钙调蛋白cDNA的克隆及测序

以“秦美”猕猴桃果实呼吸跃变初期ｃＤＮＡ第一链为模板，参考大麦钙调蛋白基因序列合成５′端和３′端引物，利用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）合成了完整的猕猴桃钙调蛋白ｃＤＮＡ，克隆并测定了其全序列。结果表明，猕猴桃钙调蛋白基因读码框架内序列由４４４个核苷酸组成，共编码１４８个氨基酸，且与植物领域里发表的大麦及苜蓿的钙调蛋白基因有很高的同源性。在核苷酸序列上与大麦有８６．１６％的同源性，与苜蓿有８５．６９％的同源性，其编码的氨基酸与大麦和苜蓿的不同分别只是一个氨基酸的差异，同源率高达９９．３％．     

传染性囊病病毒CJ801VP2基因cDNA的序列分析

用ＲＴ－ＰＣＲ从传染性囊病病毒ＣＪ８０１的第１４代囊毒中扩增编码ＶＰ２蛋白的ｃＤＮＡ基因片断，长度为１５００ｂｐ，，并对该片断进行了ＤＮＡ序列分析。结果表明，ＣＪ８０１与ＩＢＤＶ标准Ⅰ型毒株５２／７０，ＳＴＣ和Ｃｕｌ的同源性最高，分别为９７．４％，９７．６％和９６．９％，与变异株，Ａ，Ｅ，ＧＬＳ的同源性稍低，分别为９６．５％，９６．３和９６．７％。     

柬埔寨计划种植橡胶8100公顷

据悉，柬埔寨磅同省和越南太平省橡胶发展公司签署了联合种植橡胶，并建胶乳加工厂的协议，磅同省政府划拨8100公顷土地种植橡胶。该合同70年内有效，并联合越南和柬埔寨两国政府共同完成。目前已经种植60公顷橡胶。该项目预计投入约4810万美元。越南太平省橡胶公司投入51％资金，越南橡胶协会注资29％，Song Da公司注资20％。预计至2010年，     

橡胶素(Hevein)和几丁质酶在橡胶树排胶中的作用

用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺电泳技术初步研究了橡胶树排胶过程中单位质量排出的胶乳、胶塞、胶盖和胶塞以下的树皮(不排胶树皮)中的橡胶素和几丁质酶含量的动态变化.结果表明,单位质量外排胶乳中橡胶素和几丁质酶含量依次降低,且停排后复割的胶乳中2种蛋白含量有明显的恢复;单位质量胶塞中的橡胶素和几丁质酶含量在排胶过程中逐渐上升,胶盖中含量最高;而胶塞以下不排胶树皮在排胶过程中橡胶素和几丁质酶含量均无明显变化.表明这2种蛋白可能在橡胶树排胶过程中起着非常重要的作用.     

克隆和鉴定橡胶树中两个DXR的cDNA

1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶（DXR）是2C-甲基-D-赤藻糖醇-4-磷酸（MEP）途径中第二个酶，该途径是植物内合成类异戊二烯化合物途径中的其中一条。产生胶乳被认为是主要来自甲羟戊酸（MVA）途径。通过RT—PCR方法，从橡胶树叶和胶乳中分离出来的两个DXR的cDNA，分别命名为HbDXR1和Hb-DXR2。     

被子植物叶绿体基因及其表达

本文简要综述了叶绿体ＤＮＡ分子结构、叶绿体基因的功能及其表达产物。着重阐述了被子植物叶绿体ＤＮＡ与细胞质雄性不育的关系；借助ｃｐＤＮＡ限制性片段分析，许多学者认为由于ｃｐＤＮＡ分子的缺失、突变或插入，叶绿体ＤＮＡ可能涉及到ＣＭＳ的产生，为了得到ｃｐＤＮＡ在ＣＭＳ中起作用的肯定性结论和在分子水平上解释被子植物细胞质雄性不育的机理，作者提出了应该进一步采取的措施。     

猕猴桃钙调蛋白cDNA的克隆及测序

以“秦美”猕猴桃果实呼吸跃变初期ｃＤＮＡ第一链为模板，参考大麦钙调蛋白基因序更合成５端和３端引物，利用多聚酶锭式反应（ＰＣＲ）合成了完整的猕猴桃钙调蛋白ＣＤＮＡ，克隆并测定了其全序列。结果表明，猕猴桃钙调蛋白基因读码框架内序列由４４４个核苷酸组成，共编码１４８个氨基酸，且与植物领域里发表的大麦及苜蓿的钙调蛋白基因有很高的同源性。在核苷酸序列古与大麦有８６．１６％的同源性，与苜蓿有８５．６９％的同源     

均匀设计在橡胶纳米复合材料制备工艺中的应用

通过均匀设计,对橡胶纳米复合材料制备工艺中有机土浓度、分散剂浓度、胶乳浓度和土填充量4个因子进行研究.结果表明,当有机土浓度取6.97%,分散剂浓度取85%,胶乳浓度取25.86%,土填充量取6.69%时,可以使橡胶纳米复合材料的拉伸强度达到最佳值.     

一个与矮牵牛开花相关的MADS盒基因克隆与序列分析

利用逆转录－多聚酶莲反应成功地从矮牵牛花瓣总ＲＮＡ中分离出一条长７４４ｂｐ的ｃＤＮＡ片段。该片段被克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体中，序列分析表明，该ｃＤＮＡ片段与Ａｎｇｅｎｅｎｔ等发表的ｆｂｐｌ基因仅在３＇非编码区有２个核苷酸不同。它包含一个开放阅读框架，具有编码２４．６ＫＤ蛋白质能力。推导的蛋白质氨基酸序列中，Ｎ端包含一个完整的ＭＡＤＳ盒。该基因编码转录因子，参与花形态建成过程的调节机制。     

越南2008年天然橡胶产量有望增长8％

据越南橡胶业界高级官员透露，越南2008年天然橡胶产量有望增长8％，达N65万吨。越南橡胶协会秘书长表示，到2020年越南天然橡胶产量将翻一番，达到120万吨。除了加工国产鲜胶乳，越南还从邻国进口原材料用于加工和成品出口。越南已成为继泰国、印度尼西亚和马来西亚之后的世界第四大天然橡胶出口国，     

越南橡胶价格回涨

越南橡胶集团称，世界市场在过去的2周里，越南出口的主要橡胶SVR3L的价格增加至9950万盾／t。这样促使越南国内胶乳的价格每升为30000—36000越盾，提高9．4％。     

越南橡胶进出口简况

虽然越南橡胶进入世界市场比较迟,但已是世界第4大橡胶出口国。越南轮胎或其他用途的原材料胶乳缺乏,只能以高价进口胶乳。越南国内胶乳需求的增加不会影响本地橡胶公司的出口,因为他们出口橡胶拥有税收激励。越南岘港省橡胶公司（一个轮胎公司）主任DinhNgocDam称,每年该公司需要生产1．2万一1．5万t胶乳,但仅从越南橡胶集团（越南最大的橡胶生产商）购买1／3的胶乳。该公司只能从其他本地小农场购买较低品质的胶乳,以及以高价进口胶乳。该公司计划2012年扩大产量,每年增加胶乳需求量达2万t。     

“千州牌”橡胶专用有机复合肥

云南省千州生物有机肥有限公司生产的“千州牌”橡胶专用有机复合肥以热带地区平衡施肥与土壤培肥的机理和措施为宗旨，和其他复合肥相比，能够促进橡胶生长势（10％以上），提高胶乳产量（15％以上），千胶含量（10％以上）。     

一个与矮牵牛开花相关的MADS盒基因克隆与序列分析

利用逆转录－多聚酶链反应成功地从矮牵牛花瓣总ＲＮＡ中分离出一条长７４４ｂｐ的ｃＤＮＡ片段．该片段被克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体中．序列分析表明，该ｃＤＮＡ片段与Ａｎｇｅｎｅｎｔ等发表的ｆｂｐ１基因仅在３′非编码区有２个核苷酸不同．它包含一个开放阅读框架，具有编码２４．６ＫＤ蛋白质能力．推导的蛋白质氨基酸序列中，Ｎ端包含一个完整的ＭＡＤＳ盒．该基因编码转录因子，参与花形态建成过程的调节机制     

吩噻嗪防老剂在橡胶工业中的应用研究

应用２－乙烯基吩噻嗪作为二烯类橡胶的防老剂和目前所应用的防老剂相比较，它能使异戊二烯橡胶可塑度增高，使硫化橡胶的防热老化及防臭氧老化性增强，同时，该防老剂在橡胶制品表面喷霜较少，在混炼胶中使用量更高，而不会引起分层现象，是一种很好的新型防老剂，应加以推广应用。