离心·冷藏对牟氏角毛藻再培养的影响

[目的]探索牟氏角毛藻经浓缩运输和冷藏保存后再作藻种和饵料的可行性效果。[方法]通过离心和低温冷藏2种方法处理牟氏角毛藻,然后再继续进行再培养,以此来延长牟氏角毛藻的储存时间并减小运输量。[结果]试验表明,经不同离心速度和不同离心时间处理后的角毛藻进行再培养,生长速率不同。在3000 r/min的转速下离心7 min的角毛藻再培养效果最好,最大生长率可达0.83,并且在此离心条件下的藻泥静置5 d之内再添加培养基进行培养仍生长良好。但是经4℃冷藏后的角毛藻常温下再培养效果不好。[结论]低温冷藏会影响藻细胞的正常生长,而且随着冷藏时间的延长,细胞再培养愈来愈困难。因此,建议科研及生产中不采用此种方法作为保种技术。     

盐度对牟氏角毛藻生长及总脂含量的影响

[目的]研究不同盐度对牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri)生长及总脂含量的影响,以确定最高油脂产率的盐度。[方法]采用微挑法进行藻株的分离纯化;采用血球计数法进行细胞计数、干重法测定藻株生物量;采用氯仿-甲醇法进行藻株总脂含量的测定。[结果]盐度为20‰时,牟氏角毛藻生长最快,最大细胞密度为2.1×106个/ml,干重为58.89 mg/L,;盐度为25‰时,牟氏角毛藻总脂含量最高,达到29.93%。[结论]综合评价其生长及总脂积累,得出盐度为20‰时,牟氏角毛藻总脂产率最高,但与盐度25‰时差异不大。     

盐度对牟氏角毛藻生产性培养的影响

采用生产性培养方式,研究盐度对牟氏角毛藻生长的影响。结果表明,牟氏角毛藻细胞生长的适宜盐度范围是18.5～23.5,最适宜的盐度为21.0。低盐度下藻细胞生长缓慢,达到稳定期的时间长;高盐度下藻细胞生长较快,生长周期较短。     

7种试剂对3种饵料微藻絮凝效应的研究

[目的]探讨絮凝剂对牟氏角毛藻、微绿球藻、湛江等鞭金藻3种海洋饵料微藻的絮凝效应。[方法]采用5种无机试剂和2种有机试剂分别以6种不同的浓度处理藻液,连续4h跟踪测定藻细胞的沉淀情况。[结果]5种无机试剂对3种海洋饵料微藻均有一定的絮凝作用,而2种有机试剂的絮凝效果均不明显。硫酸锌和硫酸铝对牟氏角毛藻的絮凝效果明显;明矾、硫酸锌和聚合氯化铝对微绿球藻的絮凝效果明显;硫酸铝对湛江等鞭金藻的絮凝效果较明显。[结论]为生产性海洋饵料微藻的采收提供理论依据。     

角毛藻冷藏存储最长时间的探讨

采用离心后不同的低温保存方式和添加新鲜培养基的方法,对角毛藻离心收集后储存的最长时间进行了研究。结果表明,添加新鲜培养基的储存方法优于直接添加藻液的方法,并且存储时间长;角毛藻在3 000 r/min或较低转数离心后,藻泥可以添加新鲜培养基储存于-2℃冰箱,至少储存35 d,再培养不影响生长。角毛藻储存温度越低,储存时间就越长,但要在角毛藻不结冰的情况下。此保藏方法可以应用于角毛藻销售中转储存。     

海水养殖废水混合培养牟氏角毛藻和盐藻研究

以f/2培养基为对照,探讨海水养殖废水对牟氏角毛藻和盐藻纯种培养和混合培养的可行性,研究培养过程中3种处理下藻生长和叶绿素累积情况,测定培养后水样中总氮、总磷含量的变化以及藻体中累积的蛋白质和多糖含量。结果表明,牟氏角毛藻和盐藻纯种培养和混合培养3种处理在f/2和海水养殖废水中能正常生长,说明利用海水养殖废水培养纯种和混合藻是可行的,培养过程中混合培养藻的生长情况均低于纯种培养,纯种培养和混合培养中牟氏角毛藻的生长情况均优于盐藻生长,叶绿素累积情况同生长情况一致,培养后各处理水体中总氮和总磷显著下降,混合培养更有利于蛋白质和多糖的累积。     

2种微藻间的化感作用

[目的]研究球等鞭金藻和纤细角毛藻间的化感作用。[方法]利用交叉培养和添加胞外滤液萃取物2种方法,确定2种微藻间的化感作用。最后,通过气相色谱测定两种微藻细胞及胞外滤液萃取物中脂肪酸的组成。[结果]球等鞭金藻滤液对纤细角毛藻的生长有显著的促进作用,仅当滤液浓度为100%时表现抑制作用。纤细角毛藻滤液对球等鞭金藻的生长有显著的抑制作用,滤液浓度越高,抑制作用越强。球等鞭金藻(或纤细角毛藻)胞外滤液萃取物对纤细角毛藻(或球等鞭金藻)生长的影响近似于其胞外滤液对纤细角毛藻(或球等鞭金藻)生长的影响,这暗示着2种微藻培养液中的化感物质可以用有机溶剂进行提取。[结论]通过气相色谱分析,笔者认为球等鞭金藻对纤细角毛藻的化感作用主要由饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的混合物共同作用引起;而纤细角毛藻对球等鞭金藻的化感作用主要由饱和脂肪酸引起。     

CO_2/空气比值对牟氏角毛藻生长和总脂含量的影响

以牟氏角毛藻作为试验材料,通过向培养液中通入5种不同比值的CO2与空气的混合气体培养牟氏角毛藻,研究了CO2/空气比值对海洋产能微藻的生长以及总脂含量的影响。结果显示:CO2/空气的比值对牟氏角毛藻的相对生长率、总脂含量、总脂日增量均有极显著影响;牟氏角毛藻在CO2/空气=1/15时相对生长率最高,为1.76 d-1;总脂含量百分比最高,为31.26%;总脂日增量也最高,为样品藻初始干重的0.75倍。牟氏角毛藻的总不饱和脂肪酸的含量随CO2/空气比值的减小而增加,CO2/空气=1/25时最高,达70.27%;CO2/空气=1/5时最低,为65.28%。研究表明,CO2/空气=1/15的混合气体最适合牟氏角毛藻的生长以及粗脂肪的积累;CO2/空气=1/25最适合牟氏角毛藻不饱和脂肪酸的积累。     

水产养殖用微量元素肥料的研制

该项目系统研究确定了铁、锰、锌、铜、钼、钴、镍等微量元素为牟氏角毛藻和球等鞭金藻培养的必需营养元素,并确定了最佳浓度。研究结果较著名的M-f/2配方增加了镍,并对其它的五种元素浓度进行了修订。在国内率先研制出水产养殖用商品微量元素肥料,具有稳定性好、使用和运输方便等优点。应用于牟氏角毛藻和球等鞭金藻的培养,可提高细胞浓度和叶绿素浓度,分别为20.4%～43.2%和19.7%～25.6%;在室内规模培养牟氏角毛藻和球等鞭金藻,提高叶绿素浓度分别为19.7%和24.0%在对虾养殖池肥水中应用,叶绿素提高13.5%～90.3%。用微肥繁殖的牟氏角毛藻投喂对虾蚤状幼体的试验结果表明,蚤状幼体到糠虾幼体的变态率提高14.0%。可广泛应用于海水育苗和养殖池基础植物饵料生物的繁殖。经鉴定委员会鉴定认为该成果居国内先进水平。该成果1999年通过鉴定。 (黄海水产研究所)     

几种生态因子对偏顶蛤浮游幼虫生长和发育的影响

为了解偏顶蛤Modiolus modiolus最适培育条件,采用实验生态学方法研究了海水盐度、 pH和饵料对偏顶蛤浮游幼虫生长和发育的影响。结果表明：3种生态因子对偏顶蛤浮游幼虫的生长发育均有显著影响(P<0·05);幼虫生长发育的适宜盐度为25~35,最适盐度为30,但幼虫对高盐度的耐受力比对低盐度的耐受力强;幼虫生长发育的适宜pH为6~9,最适pH为8;饵料试验中,湛江等鞭金藻Isochrysis zhan：jiangensis、新月菱形藻Nitzschia closterium和牟氏角毛藻Chaetoceros muelleri Lemmerman 3种饵料混合投喂的效果最好,牟氏角毛藻单独投喂以及牟氏角毛藻与新月菱形藻混合投喂的效果最差,湛江等鞭金藻基本上能够满足偏顶蛤早期浮游幼虫生长发育的营养需求,单一投喂湛江等鞭金藻和新月菱形藻组与投喂含金藻的混合饵料组对幼虫的饲喂效果无显著性差异(P>0·05)。     

3种重金属离子对牟氏角毛藻生长的影响

采用f/2培养基,研究了不同浓度的Cu(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)和Pb(Ⅱ))对牟氏角毛藻Chaetoceros muelleri生长的影响。结果表明:在特定浓度条件下,3种重金属离子对牟氏角毛藻的生长具有显著影响。当Cu(Ⅱ)浓度为0.1 mg/L、Zn(Ⅱ)和Pb(Ⅱ)浓度为0.1~1.0 mg/L时,能促进牟氏角毛藻的生长;Zn(Ⅱ)和Pb(Ⅱ)浓度为10~50 mg/L时,牟氏角毛藻能维持一定的速率生长;Cu(Ⅱ)浓度为1~50 mg/L时,牟氏角毛藻的生长受到显著抑制。     

杀鲑气单胞菌杀藻作用的初步研究

为了研究几丁质酶对硅藻杀灭作用,以杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)和其几丁质酶敲除菌为研究对象对牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri)进行共培养并探究其作用差异。结果表明:杀鲑气单胞菌野生株和缺失株分别与牟氏角毛藻共培养48 h后,野生株对牟氏角毛藻的杀藻率达到9.18%,而缺失株无明显杀藻活性;通过扫描电镜进一步发现野生株细菌能够裂解牟氏角毛藻的细胞壁,而缺失株不能。结果证实杀鲑气单胞菌因具有几丁质酶而对藻类具有杀灭作用。     

利球等鞭金藻生长抑制物的抑藻机理

    通过球等鞭金藻生长抑制物(1-羟基,丙二酸二乙酯-十二烯酸异丙酯)对6种海洋微藻(牟氏角毛藻、纤细角毛藻、三角褐指藻、新月菱形藻、扁藻和盐藻)的生长及细胞内主要生化成分的影响,对该抑藻物质的抑藻机理进行探讨.结果表明,该生长抑制物对6种微藻生长不仅具有明显的抑制作用,而且对微藻细胞内的一些主要生化成分有显著的影响.在该抑制物作用下,6种微藻细胞内的叶绿素含量显著降低,丙二醛含量以及胞外可溶性蛋白质和多糖含量明显提高,硝酸还原酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性也有不同程度的升高或降低.可见,球等鞭金藻生长抑制物是通过对微藻细胞内的某些主要生化成分的合成过程及其活性的调控,实现对微藻藻细胞的生长控制.     

温度及光照对4种饵料微藻生长的影响

微藻是许多贝类、海参、虾类等经济动物苗种生产、幼体培育的重要饵料生物,其生长速度和营养成分组成对育苗的效率和质量都有重要影响。由于在苗种大规模人工繁育过程中控制水体盐度、生化组成以及病害防治等成本过高,同时为了减少水产兽药使用对苗种产生的不必要影响,本文采用试验与生产相结合的方法,主要研究了温度和光照强度等因素对威氏海链藻9021(Thalassiosira weissflogii)、牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri)、湛江叉鞭金藻(Dicrateria zhanjiangensis)和亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)4种常用饵料微藻大规模生产培养的影响。温度试验结果表明:牟氏角毛藻和亚心形扁藻的适宜生长温度为26~29 ℃,此温度下比生长率最大,μ_{牟氏角毛藻}为0.565,μ_{亚心形扁藻}为0.358;湛江叉鞭金藻的适宜温度为29~32 ℃,此温度下μ_{湛江叉鞭金藻}为0.533;威氏海链藻9021的适宜温度为23~26 ℃,此温度下μ_{威氏海链藻9021}为0.278。光照强度试验结果表明:晴天条件下牟氏角毛藻、湛江叉鞭金藻和亚心形扁藻的生长均优于阴天,而威氏海链藻9021在阴天条件下的生长要快于晴天。温度和光照强度对湛江叉鞭金藻、威氏海链藻9021的双因子影响分析表明:不同水体温度以及光照强度对湛江叉鞭金藻和威氏海链藻9021的生长有显著性差异,共同影响着微藻的比生长速率和最大生物量,因此,实际生产培养中不能单看比生长率来判断一个藻种的适宜培养条件。本研究确定了4种常用微藻生产性培养的适宜环境条件,为不同季节气候条件下选择适合培养的饵料微藻种类提供参考,有助于水生生物养殖生产过程中幼虫培育存活率、苗种产量的提高。     

盐度、温度和光照对广西沿海牟氏角毛藻生长的影响

[目的]结合广西防城港海区的水质和环境条件,探讨影响牟氏角毛藻生长的主要理化因子,筛选最佳理化参数,为规模化扩培生产提供技术数据.[方法]采用单因子变量方法研究盐度、温度、光照强度对牟氏角毛藻生长的影响,其中盐度设置0‰、5‰、10‰、20‰、30‰、35‰、40‰共7个梯度,温度设置25、28、31、34℃共4个梯度...     

阳光紫外辐射对2种微藻的短期影响

为了阐明2种赤潮藻柔弱角毛藻(Chaetoceros debilis)和绿色巴夫藻(Pavlova viridis)对阳光紫外辐射(UVR, 280～400 nm)变化的响应,比较研究了它们在全波段阳光下和滤除UVR/UV-B条件下的有效光化学效率变化,同时探讨了室内无UVR的低光条件下其有效光化学效率的恢复。结果表明,阳光UVR抑制藻细胞的有效光化学效率,其抑制程度随着接受辐射处理时间的延长而增大,在10 min左右细胞内的修复与损伤速率达到平衡,抑制率不变,且阳光UVR对二种藻的抑制程度相差不大。转移到无UVR的弱光条件下,藻细胞的有效光化学效率得到恢复,但恢复过程中柔弱角毛藻恢复明显快于绿色巴夫藻,体现了不同藻细胞对阳光UVR响应的种间差异。     

植物生长调节物质对饵料微藻蛋白质和氨基酸的影响

在三角褐指藻、牟氏角毛藻、湛江等鞭藻的f／2培养液中分别添加植物生长调节物质三十烷醇(TA)、6-糠基腺嘌呤(6-FA)和生长素(2，4-D)，在指数生长后期采收微藻，测定三种微藻的蛋白质和氨基酸含量。结果表明，分别添加0．1μg/LTA、0．05μg/L6-FA、0．05μg/L2，4-D能够极显著提高三角褐指藻的蛋白质及必需氨基酸的含量，分别添加0．1μg/LTA、0．25μg／L6-FA、0．05μg/L2，4-D能够显著或极显著提高牟氏角毛藻的蛋白质及必需氨基酸的含量，而三种植物生长调节物质使湛江等鞭藻的蛋白质及必需氨基酸的含量显著减少。     

植物生长调节物质对饵料微藻蛋白质和氨基酸的影响

在三角褐指藻、牟氏角毛藻、湛江等鞭藻的f／2培养液中分别添加植物生长调节物质三十烷醇(TA)、6-糠基腺嘌呤(6-FA)和生长素(2，4-D)，在指数生长后期采收微藻，测定三种微藻的蛋白质和氨基酸含量。结果表明，分别添加0．1μg/LTA、0．05μg/L6-FA、0．05μg/L2，4-D能够极显著提高三角褐指藻的蛋白质及必需氨基酸的含量，分别添加0．1μg/LTA、0．25μg／L6-FA、0．05μg/L2，4-D能够显著或极显著提高牟氏角毛藻的蛋白质及必需氨基酸的含量，而三种植物生长调节物质使湛江等鞭藻的蛋白质及必需氨基酸的含量显著减少。     

4种水生植物水浸提液对水华微囊藻生长的影响

[目的]为了研究芦苇、红蓼、穗状狐尾藻和香蒲4种水生植物水浸提液对水华微囊藻生长的抑制效应。[方法]培养水华微囊藻细胞,制备4种水生植物的水浸提液,处理后通过藻细胞密度的测定计算抑制率。[结果]芦苇、红蓼、穗状狐尾藻和香蒲水浸提液对水华微囊藻的生长都表现出一定的抑制作用,其中芦苇的抑制效果最明显。[结论]利用水生植物分泌的化感物质抑制水华微囊藻生长是一种有效的控藻方式。     

pH及浓度对次氯酸钠除藻效果的影响

[目的]研究次氯酸钠在不同浓度和不同pH奈件下对羊角月牙藻的杀灭效果。[方法]以细胞数和叶绿素a作为检测项目,研究次氟酸钠在不同条件下对羊角月牙藻的杀灭效果以及叶绿素a褪色后的藻细胞活性。[结果]次氯酸钠浓度越高,叶绿素a的褪色效果越好,但细胞数减少量变化不明显。在3mg／L的NaCIO条件下,pH为4．7的藻液中叶绿素a褪色率（62％）是pH为9．4（5％）的12倍。叶绿素a褪色率为95％和100％的藻液离心后重新接种到新鲜培养基中,藻细胞的数量呈逐渐下降趋势。[结论]pH越低,次氯酸钠的除藻效果越好。叶绿素i褪色后藻细胞失去了生长繁殖的能力。通过调节pH和NaCIO浓度相结合的方法可有效抑制藻类生长,控制藻类的爆发。