快生型根瘤菌营养生理的研究

本文研究了紫云英、苕子、三叶草和苜蓿根瘤菌共53个菌株对碳源、氮源和维生素的需要。研究表明: 1、甘露醇、葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、甘油、山梨醇等是供试菌株合适的碳源,它们对山梨糖、葡萄糖酸钠、苹果酸钠、丙酮酸钠和琥珀酸钠的利用十分有限,而完全不能利用淀粉和糊精。2、硝酸钾、尿素、大多数氨基酸和蛋白胨是良好的氮源,而对铵盐和芳香族氨基酸则利用有限。3、根瘤菌对维生素的需要随根瘤菌的种、甚至菌株不同而异。就必需维生素而言,在9株紫云英根瘤菌中,103不需要任何维生素就能生长良好;7653只需要硫胺素;而其余7个菌株则同时需要硫胺素和烟酰胺。在14株苕子和12株三叶草根瘤菌中,只有7130需要硫胺素和泛酸钙,其余各菌株只需要泛酸钙。在18株苜蓿根瘤菌中,只有M_2需要泛酸钙,其余17个菌株不仅不需要任何维生素,而且生物素还明显地抑制其生长。除上述的必需维生素外,有些维生素对不同菌株有刺激作用或抑制作用。4、针对菌株营养需要,采用合成培养基进行大量培养,在成本和工效上都比目前采用的天然培养基优越。     

快生型大豆根瘤菌的耐盐机制和结瘤性状

1983年,我们自天津及新疆盐碱地分离了14株快生型大豆根瘤菌,一般都能耐0.3—0.4MNaCl,其中 RT19菌株为轻度嗜盐细菌,在无盐的 YM 培养液中生长缓慢,但在含有0.3MNaCl 的 YM 培养液中生长迅速,而且在0.6MNaCl 条件下仍可生长。该茵还可在酸性(pH5.0)和碱性(pH10.5)条件下生长,表现出较强的抗逆性。从美国引进的 USDA191等11株快生型大豆根瘤菌也能在0.3—0.4MNaCl 条件下生长。将这些菌株在夏播大豆112-2-4作结瘤试验,发现除 USDA191外,其他快生型大豆根瘤菌的结瘤和固氮能力一般较差。天津快生型大豆根瘤菌也有类似现象,但其中 RT14菌株表现出较高的固氮酶活性。USDA191能在13个不同的大豆品种结瘤,表明该菌具有广谱性。在0.2MNaCl 条件下,USDA191菌株细胞内的谷氯酸含量急剧上升,以平衡培养基的渗透性。而且,它的耐盐性与培养基所含的氨基酸有关。     

引进的俄罗斯高效大豆根瘤菌培养基的选择与优化

将引进的俄罗斯高效大豆根瘤菌GF菌株在YMA、TY、PA、BSE、SM 5种培养基中进行培养,相关生长情况的试验结果表明,该菌株在YMA培养基中生长较快。在YMA培养基中进行的碳源利用试验表明,在葡萄糖为碳源的培养基中根瘤菌生长得最好。按L9(34)正交设计表对YMA培养基中的4个组分比例进行优化,对结果进行分析可得最优的培养基配方(1 L)为:10.0 g葡萄糖+0.8 g酵母粉+0.2 g MgSO4·7H2O+0.8 g K2HPO4+0.1 g NaCl+0.01 g CaCl2,去离子水补足至1 000 mL。     

快生型大豆根瘤菌血清学特性的研究

以自新疆、黑龙江、辽宁、吉林、湖北、天津和北京等地分离的16株快生型大豆根瘤菌为供试菌,用交叉凝集反应比较研究了它们与目前国内外已报道的9株快生型大豆根瘤菌标准血清型菌株之间的血清学关系,研究结果表明：（1）菌株J711,NJ16、NJ111和A212均属O#-1（2048）血清型。（2）菌株RT15、Two-7和93F41与供试标准血清型菌株的菌体抗原均不相同,命名为O#-9、O#-10和O#-（11）3种新的血清型。菌株6-1为自凝菌株,其血清型为O#-0。（3）交叉抗原吸收试验结果表明,菌株92X10、C333、RT10和2056同属O#-5血清型,并可进一步区分为O#-（5ab）、O#-（5bcd）、O#-（5def）和O#-（5fg）4个血清亚型。菌株HA10-1-3、HA12-1-12和2120分属O#-6血清型的O#-（6ab）、O#-（6bcd）和O#-（6de）3个血清亚型。（4）将2048等6个标准菌株重新命名为O#-1,O#-2,O#-3,O#-4,O#-7和O#-8血清型。     

不同相思树种根瘤菌理化特征研究

通过牛肉膏蛋白胨试验、柠檬酸盐利用试验、碳源利用试验、3-酮基乳糖试验、B.T. B反应试验及明胶水解试验等角度分析漳州中西国有林场6种相思树种根瘤茵生理及生化特征.研究结果表明:从生理特征上看.在牛肉膏蛋白胨试验中所有供试菌株都生长不良;所有供试菌株都能利用柠檬酸盐;灰木相思的碳源利用能力最强,而厚荚相思与马占相思碳源利用能力比较弱;马占相思及灰木相思可较充分利用木糖,卷荚相思、纹荚相思、薄荚相思可较充分利用半乳糖;从生化特性上看,除马占相思根瘤茵在YMA培养基上产碱外,其余相思树种菌株均产酸;卷荚相思及纹荚相思根瘤茵能产生蛋白分解酶,而其余相思树种根瘤茵则不能产生蛋白分解酶.     

洪湖市土壤中快生型大豆根瘤菌的多样性

从湖北省洪湖市土壤中分离纯化了９２株快生型大豆根瘤菌。用来自８个取样地点的１２个快生型典型菌株和１个慢生型菌株的抗血清检测了该快生型大豆根瘤菌群体的抗原构成。其中６５株菌归入１５个血清型，２０．７％属于ＵＳＤＡ２０５型，１５．２％为Ａｄ３０１（１）型。有２７株不与已知抗血清反应，为未知的血清型。对供试菌株质粒进行的快速检测结果表明，各菌株均含有２～６个质粒，其中最大的质粒在５００Ｍｄ左右。含４个质     

中国北方地区快生豇豆根瘤菌的多样性研究

从采自不同土壤中的豇豆(Vigna unguiculata)根瘤中分离、纯化并通过结瘤试验筛选出14株豇豆快生根瘤菌,将其和来自其他种属的6个参比菌株的耐盐性、耐酸碱性、天然抗药性、碳源与氮源利用和质粒图谱分析进行了系统比较,通过聚类分析得到供试菌株的数值分类树状图谱.结果表明,分离自不同土壤中的豇豆快生根瘤菌具有较大的多样性.在77%的相似水平上,快生豇豆根瘤菌与参比菌株分为4个亚群,亚群中部分菌株的相似性与分离的土壤有关,而6株参比菌株则分别独立形成两个亚群.     

快生型大豆根瘤菌生物学特性研究

由当地分离纯化并回接有效而获得的４株快生型大豆根瘤菌株，通过形态、生理鉴定，表明与慢生型菌株有明显差异；在菌株与大豆品种亲和性的盆栽试验中，其中Ａ０３４菌株与“徐州四号”、Ａ０３２与“东解选”大豆品种间具有良好共生效应；其株高、茎叶干重及含氮量、株瘤数与瘤重、及固氮酶活性等，均明显高于不接种对照；固氮率分别提高为４８．１％与４４．５％。     

快生型大豆根瘤菌生物学特性研究

由当地分离纯化并回接有效而获得的４株快生型大豆根瘤菌株，通过形态、生理鉴定，表明与慢生型菌株有明显差异；在菌株与大豆品种亲和性的盆栽试验中，其中Ａ０３４菌株与“徐州四号”、Ａ０３２与“东解选”大豆品种间具有良好共生效应；其株高、茎叶干重及含氮量、株瘤数与瘤重、及固氮酶活性等，均明显高于不接种对照；固氮率分别提高为４８．１％与４４．５％；     

锦鸡儿根瘤菌的抗逆性及其在寄主上结瘤、促生效果的研究

对3株分离于内蒙古的锦鸡儿根瘤菌进行耐盐性、耐酸碱性、唯一碳、氮源利用能力的研究,并用这些菌株对锦鸡儿进行蛭石-土壤回接试验筛选固氮高效的菌株。结果表明,菌株2-S1和5-9表现出较好的耐酸碱性,可忍耐p H范围为6.0~10.0,最佳生长p H为7-8;菌株2-S1的耐盐性最好,可在盐浓度为2%的培养基上生长,菌株DK44和5-9次之,最高可忍耐盐浓度为1%;参试的11种碳源,有8种均可被3种根瘤菌利用,3株根瘤菌均不能利用柠檬酸钠为唯一碳源,菌株5-9利用碳源的能力最强,范围最广;唯一氮源利用实验显示,除(NH4)2SO4不能被菌株DK44所利用外,所有参试的11种氮源均可被3株菌株利用,菌株5-9可充分利用7种氮源,是利用氮源能力最强的菌株;盆栽回接试验表明,3株根瘤菌均表现出较好的结瘤能力以及对植株不同程度的促生作用,菌株5-9对锦鸡儿的生长特性均表现出明显的促生作用。结论,菌株5-9有着良好的耐酸碱性以及较强的碳、氮源利用能力,同时能够明显的促进植株生长,是良好的潜力菌株。     

费氏中华根瘤菌培养基的选择及优化

费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)CCBAU110菌株在YMA、TY、PA、BSE 4种培养基中的生长情况的试验结果表明,该菌株在YMA中生长较快.在YMA培养基中进行的碳源利用试验表明,以甘露醇为碳源的培养基中根瘤菌生长最好.按均匀设计表U11(1110)设计对YMA培养基中的6个组分进行优化试验,对所得结果进行相关回归分析,获得的最优的培养基配方为:甘露醇13.861 g,酵母粉4.683 g,MgSO4·7H2O 0.099 g,K2HPO4 0.359 g, NaCl 0.335 g,CaCl2 0.010 g,H2O 1 000 mL.     

快生型花生基因工程根瘤菌株HN_（11）、HN_（12）的生物学特性试验

快生型花生基因工程根瘤菌株ＨＮ１１、ＨＮ１２与８５－７、１２－５菌株，均能利用试验的１０种糖类并产酸，不产气；液化明胶；分解牛奶产生血清环。对试验的１０种抗菌素的敏感性有所不同，在水培试验中，ＨＮ１１、ＨＮ１２对三个花生品种的结瘤、固氮能力分别较８５－７、１２－５强。     

不同地理来源的快生大豆根瘤菌的质粒研究

本研究以国产材料为主建立了一种分离效果好、快速简便的S. Fredii菌株的质粒分析方法-改良的Eckhardt in well lysis（样井内裂解）技术。对来自辽宁等9省（区）的129个S.fredii菌株的质粒组成进行分析后发现,这些菌株含有1-6条质粒,大小约在32-＞1000kb之间,菌株的质粒组成具有多样性,在菌株的质粒组成与地理来源之间存在一定的关系。37℃高温和70μg/ml吖啶橙处理对S.fredii具有消除质粒的作用,但不同的菌株对这些处理有不同的敏感性。对C331和DE332菌株消除了质粒的衍生株结瘤能力及产黑色素能力的测定结果表明,C331的结瘤作用和DE332的产黑色素能力是由质粒控制的。     

新疆快生大豆根瘤菌的数值分类

选用分离自新疆昌吉市郊土壤的快生大豆根瘤菌５０株和参比菌３株,对它们进行唯一碳氮源、抗生素抗性和抗逆性等表型性状分析,聚类结果表明,所有菌株在７０．６％相似水平上聚在一起,４６株供试的新疆快生大豆根瘤菌与新疆中华根瘤菌聚为一群;６株供试菌聚的一小群,抗逆性强,所有供试快生菌株与费氏中华根瘤菌相似性低,所以新疆快生大豆根瘤菌可能是与费氏中华根瘤菌相独立的一个种。     

快生型大豆根瘤菌的研究

根瘤菌是一类可以在豆科植物上结瘤的杆状细菌,它们是重要的土壤微生物类群。曲于根瘤菌与豆科植物共生时,能够把空气中的氮气转化成氨及其化合物,供给植物利用,因而与人类的生活、生产有十分密切的关系。人类对根瘤菌的研究已将近一百年,而把根瘤菌应用到农牧业生产上也有几十年的历史了。可以说,根瘤菌在农牧业生产上发挥了重要的作用。现在,世界上许多国家的生物固氮研究项目中,根瘤菌一直是个重要的方面。     

几类快生型根瘤菌质粒的研究

作者基本上按Hirsch等(1980)的方法,对国内的快生型紫云英根瘤菌SR72、S52,豌豆根瘤菌252、R30,三叶草根瘤菌62,大豆根瘤菌2048,2059以及根癌农杆菌702,共计42号菌株,进行了质粒分离,重复3次以上。用快生型大豆根瘤菌205菌株(已知其3个质粒的分子最分别为200、112、57Md)和根癌农杆菌C58菌株(已     

新疆二株快生型大豆根瘤菌

<正>已知大豆根瘤菌都是慢生型菌株。1982年,美国H.H.Keyser等人首次报道从我国采集的试样(土壤和根瘤)中分离出快生型大豆根瘤菌。1985年我们也从新疆阿克苏地区乌什县种植的晋豆83大豆的根瘤中分离到两株快生型大豆根瘤菌,编号为QXA001和QXA019。以北京农业大学生物工程学院微生物专业快生型大豆根瘤菌USDA205和慢生型大豆根瘤菌USDA6为对照研究表明,QXA001和QXA019的许多特性基本与USDA205相似。     

快生型大豆根瘤菌的结瘤竞争性及其田间分布调查

快生型大豆根瘤菌的结瘤竞争能力是生产应用的重要指标之一。Mcloughlin(1984)的研究指出、快、慢型大豆根瘤菌混合接种时,快型菌在“北京”黑豆的根瘤占优势,而在栽培大豆品种内为劣势。我们用快、慢型大豆根瘤菌以不同比例混合后接种栽培大豆品种“开育8号”和“吉林10号”,收获后以相应菌株抗血清去识别根瘤,观察快、慢型大豆根瘤菌的结瘤竞争能力。同时在山西、河南、山东、辽宁、黑龙江、江西、宁夏、新疆等8个省(区)的24个点采取47个大豆品种(次)的4.251个根瘤,以5个不同血清型的快型大豆根瘤菌的抗血清测定每个根瘤,计数各点快型菌出现的频率。     

16株快生型大豆根瘤菌生物学与分子生物学特性的比较研究

以快生型大豆根瘤菌标准菌株ＵＳＤＡ２０５为对照，对自我国吉林处和湖北省土壤中分离的１５株快生型大豆根瘤菌的培养特性，碳氮源利用、生长速度、耐盐性、ＰＨ适应范围、天然抗一、质粒图谱、Ｇ＋Ｃ克分子、血清学特性和共生固氮效率进行了系统的对比研究，并选择２个随机引物经ＰＣＲ扩增比较分析了供式菌ＰＡＰＤＳ扩增谱带的多样性。     

快生型大豆根瘤菌G+Cmol%测定及与其它根瘤菌之间的DNA同源性

用热变性温度法测定了快生型大豆根瘤菌DNA中G+Cmol%,结果表明其C+Cmol%为58.4-65.6,菌株间差为7%,提示了不同种的存在。以液相复性速率法测定了快生型大豆根瘤菌与其它根瘤菌种之间的DNA同源水平,测定证明它们之间的同源水平很低。快生型大豆根瘤菌与慢生型大豆根瘤菌三个DNA同源组间的同源率分别力15,10和25%,表明其亲缘关系很远。同源水平的测定为进一步研究奠定了基础。