石油降解细菌的筛选及培养条件的初步研究

从大庆油田分离纯化出7株能以石油作为唯一碳源的石油降解细菌,并对降解能力进行研究,发现各菌株均能产表面活性剂,其中油膜面积大于3 cm的菌株有PW01、PS01、PS02、PS04、PS05 5株细菌,各菌株均能产酸.摇瓶培养菌株PW01 7 d,发现其对石油降解率高达68.33%,最适氮源为NH4Cl、最适磷源为1∶1的KH2PO4/K2HPO4,在此基础上设计正交试验,极差R大小比较发现各因素对菌株PW01的石油降解率影响次序为:石油>KH2PO4/K2HPO4>NH4Cl.     

红树林湿地土壤萘降解菌的分离与鉴定

[目的]研究降解菌株对萘的降解能力,为其应用于被石油污染滨海湿地的生物修复提供参考。[方法]采用富集培养方法,从珠海市淇澳岛被石油污染的红树林湿地土壤中富集、分离和筛选出能降解萘的菌株,观察各菌落及菌体形态特征;研究菌株N4的生理生化特征,并应用16S rDNA序列分析方法进行鉴定。[结果]从土壤样中分离得到26个能以萘为唯一碳源生长的菌株,其中4个在平板上菌落较明显且具有不同的菌落特征,分别命名为N1、N2、N3和N4。菌株N4对萘的降解能力最强,在初始萘浓度为100 mg/L的无机盐培养基中培养5 d,萘降解率为54.2%,而菌株N1、N2和N3的降解率分别为52.7%、52.5%和47.8%。菌株N4经16S rDNA序列分析方法鉴定为赤红球菌。[结论]从被石油污染的红树林湿地土壤分离筛选出对萘具有较高降解能力的菌株。     

海洋潮间带石油烃降解菌的筛选分离与降解特性

从天津临港工业区潮间带筛选分离出17株石油烃降解菌,其中柴油降解率较高的2株细菌Y4和Y7均为革兰氏阴性短杆菌,根据理化性质初步确定为假单胞菌属细菌,均能以柴油、萘和菲为唯一碳源和能源生长,在适宜降解条件下:尿素与卵磷脂型两性表面活性剂合成的亲油氮源(氮浓度为70mmol.L-1)、25℃,200r.min-1摇床培养10d,对1%浓度柴油的降解率分别为65%和70%。氮源及溶解氧能促进二者的柴油降解能力,3%的柴油含量对降解作用产生强烈的抑制。     

复合菌群的构建及其对石油污染土壤修复的研究

从石油污染土壤中富集分离、筛选出3株高效降解石油的微生物菌株,通过生理生化特性研究及16SrRNA基因序列分析,确定3株菌均属于红球菌属(Rhodococcus sp),研究和比较了它们与实验室保存的4株菌(分别属于Gordonia sp,Comamonas sp,Pesudomonas sp)降解石油的能力。这7株菌株对石油的不同组分具有不同的降解能力,对7株菌进行不同的组合用以研究复合菌群对石油的降解。结果表明,由两株Rhodococcus sp,一株Gordonia sp和一株Pesudomonas sp组成的复合菌群D,降解石油的能力超过任何单一菌株和其他组合菌群。混合菌群D在5d的培养中能降解70.3%的石油总量和71.4%的芳香化合物。混合菌群D能降解99.8%的C13-19烷烃,92.6%的C20-26烷烃,82.2%的C27-32烷烃以及90.2%的植烷。在实验室模拟条件下,对土壤中石油的降解率达到50%以上。降解土壤中石油的最适温度为10～30℃、pH值为6.5～9.5,接种量需要在106CFU·g-1以上。     

石油污染土壤的微生物修复及其去毒效果研究

从中原油田石油污染土壤中分离到1株石油降解菌HNS-2,经16S r DNA序列分析鉴定为芽孢杆菌属。该菌在10 d内降解56.7%的石油,该菌对土壤中石油具有一定的降解能力,60 d可降解46.3%的石油,添加营养剂、秸秆、十二烷基硫酸钠以及进行扰动处理均可促进菌株对石油的降解,其中以"连续投加菌剂+营养剂+秸秆"处理的效果最佳,降解率可达66.1%。通过萝卜种子发芽试验,比较了不同处理对石油污染土壤的去毒效果,结果发现石油的降解率与发芽率基本一致,其中以"菌剂+营养剂+秸秆+扰动"处理的发芽率最高。     

海洋潮间带石油烃降解菌的筛选分离与降解特性

从天津临港工业区潮间带筛选分离出17株石油烃降解菌,其中柴油降解率较高的2株细菌Y4和Y7均为革兰氏阴性短杆菌,根据理化性质初步确定为假单胞菌属细菌,均能以柴油、萘和菲为唯一碳源和能源生长,在适宜降解条件下:尿素与卵磷脂型两性表面活性剂合成的亲油氮源(氮浓度为70mmol.L-1)、25℃,200r.min-1摇床培养10d,对1%浓度柴油的降解率分别为65%和70%。氮源及溶解氧能促进二者的柴油降解能力,3%的柴油含量对降解作用产生强烈的抑制。     

高效石油烃降解菌CQ6的分离鉴定及He-Ne激光诱变

从长庆油田石油污染土壤中分离得到一株产生生物表面活性剂的高效石油烃降解菌。通过形态学、生理生化和分子生物学研究,筛选出的菌株CQ6被鉴定为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。为了增强该菌降解石油烃的能力,对其进行He-Ne激光诱变,获得6株突变株,通过检测其表面张力、排油圈直径和烃降解率,降解石油烃能力最强且遗传性状稳定的突变株CQ66被挑选出来。本研究表明,He-Ne激光诱变育种技术可有效改良石油烃降解菌,该手段对修复石油污染土壤具有现实意义。     

三株假单胞菌对石油降解特性的研究

从大庆油田的油井采出水及采出油中分离筛选到3株以石油为唯一碳源生长的菌株,经鉴定3株菌均为假单胞菌属(Pseudomonas sp.).通过研究影响3株菌降解石油的初始pH、温度、转速、石油浓度、NaCl浓度及对不同碳源的利用情况,确定其中的优势菌株为W-2.三株菌的复配试验结果表明复合菌系W-1/W-2的石油降解率最高,达到92.5%,比单菌株W-1、W-2对石油的降解均有较大提高;而W-2/W-3复合菌系的石油降解率为57.9%,比单菌株W-2、W-3对石油的降解均有所降低.这三株菌均能耐受一定的温度和矿化度,复合菌系W-1/W-2的驱油活性较高,在微生物采油中有很好的应用潜力.     

晨鸣造纸厂污水中高效降解菌的分离与筛选

以晨鸣造纸厂污水中的活性污泥为材料,采用平板划线方法从中共分离出菌株22株,其中细菌14株,放线菌2株,酵母菌5株,霉菌1株.以CODCr值来计算不同菌株的降解率,从而筛选出降解能力较强的菌株.结果表明,晨明造纸厂污水的主要降解菌是细菌,其次是酵母菌,其中X3、X2、X4和J1的降解率较高,分别达到46.70%、45.72%、 40.01%和39.39%;各菌株进入指数生长期的时间相差不大,在28 ℃处理条件下,达到最高降解能力的时间均为闷曝处理24 h左右.     

烟碱降解微生物的筛选、鉴定及其烟碱降解效果评价

采用烟碱降解微生物平板筛选鉴别方法,从白肋烟和烤烟中筛选出11株烟碱降解微生物,经初步鉴定,3株为细菌,8株为放线菌;采用荷移光谱法测定了11株菌对纯烟碱和白肋烟叶片中烟碱的降解能力,其中放线菌K2对烟碱的降解能力最强,对白肋烟叶片中的烟碱降解率(48h)为74.77%,对纯烟碱可以完全降解。经过生理生化试验鉴定和16SrDNA序列比对,确定放线菌K2为除虫链霉菌(Streptomyces avermitilis)。