笃斯越橘愈伤组织诱导分化及试管苗生根研究

以笃斯越橘(Vaccinium ulignosum L.)优系SL-1试管苗为试验材料,研究不同浓度NAA、6-BA对笃斯越橘优系SL-1叶片、茎段的出愈率、出愈量、再生率、平均出芽苗数的影响以及培养基中添加IBA、浸蘸IBA溶液2种方法对笃斯越橘优系SL-1生根的影响。结果表明:当NAA为0.8 mg/L、6-BA为4 mg/L时,笃斯越橘优系SL-1叶片出愈率最高,达100%,出愈量最多;当NAA为0.2 mg/L、6-BA为4 mg/L时,笃斯越橘优系SL-1叶片愈伤再生分化效果最好,分化率达66.7%,平均再生分化苗数可达5.765株。当IBA浓度为300 mg/L浸蘸时,笃斯越橘试管苗生根率最高,平均生根条数最多,生根效果最佳。     

黑龙江省笃斯越橘种质资源考察与分类评价

为促进笃斯越橘的开发利用,以笃斯越橘为研究对象,对黑龙江省野生笃斯越橘种质资源进行了考察及分类评价。结果表明:笃斯越橘立地环境类型主要包括低湿沼泽、潮湿慢岗、山顶3种;不同立地环境其土壤生态型差异较大,其中含水量在30%～60%,有机质含量在15%～25%,土壤pH在4.5～5.0。笃斯越橘叶片形状主要有分椭圆、阔椭圆、细长3种,叶尖形状分钝尖、渐尖2种,叶基形状分楔形、阔楔形、圆形3种、叶面状态分抱合、平展、反卷3种;果实形状分为圆形、扁圆形、长圆形、水滴型、椭球型5种,果实颜色分为蓝、暗蓝2种,果实风味分为甜酸、酸、极酸3种。     

笃斯越橘、红豆越橘和细叶杜香中-熊果苷含量的测定

为促进大兴安岭植物中-熊果苷这一天然功效成分的开发与利用,本文对笃斯越橘、红豆越橘和细叶杜香3种杜鹃花科植物中-熊果苷含量进行了分析。结果表明,大兴安岭3种杜鹃花科植物中,红豆越橘的茎、叶和果实以及细叶杜香的茎、叶中均含有-熊果苷,其中以红豆越橘叶中含量最高,达到4.90%,红豆越橘果皮中含量次之,为1.92%,红豆越橘茎中含量0.97%。红豆越橘果肉、细叶杜香的茎、叶中虽然含有-熊果苷,但是含量极低。笃斯越橘果实中没有检测到-熊果苷。     

笃斯越橘果实、叶片矿质元素和土壤肥力因子与果实品质的多元分析

【目的】分析大兴安岭地区不同立地类型中笃斯越橘果实总酚、类黄酮、花青苷、葡萄糖、果糖及可溶性糖含量特性;探究笃斯越橘果实、叶片矿质元素和根系层土壤肥力因子间及其与几个主要果实品质指标的关系;筛选通过影响笃斯越橘叶片矿质元素含量进而影响果实黄酮类和糖类物质积累的主要土壤肥力因子,为提高果实品质的土肥管理技术提供理论依据。【方法】以大兴安岭地区水湿地有土壤、水湿地苔草和山地土坡3种立地类型中的笃斯越橘为研究对象,使用典型相关分析法研究土壤肥力因子、叶片和果实矿质元素与果实品质的相关性;应用多元线性回归分析法建立回归方程,并筛选影响笃斯越橘叶片矿质元素的主要土壤肥力因子。【结果】大兴安岭地区水湿地有土壤、山地土坡2种立地类型中,笃斯越橘果实成熟期可溶性糖以葡萄糖和果糖为主,属于单糖积累型,其总含量占可溶性糖的84.20%（水湿地有土壤类型）、95.11%（山地土坡类型）,而水湿地苔草类型中葡萄糖和果糖总含量仅占可溶性糖的56.95%;果实总酚、花青苷含量在3种立地类型中差异显著（P＜0.05）。典型相关分析表明,果实总酚含量与果实Ca、Mg、Fe、Mn元素含量呈极显著正相关,与P元素含量呈显著负相关;果实K、Zn元素显著影响果实品质特性,其中果实K元素与果实类黄酮呈极显著正相关,与花青苷、可溶性糖呈显著正相关,果实Zn元素与果实类黄酮、花青苷、葡萄糖、果糖呈极显著负相关;叶片Ca、Fe元素与果实类黄酮、花青苷、葡萄糖、果糖分别呈现显著正相关和显著负相关,但叶片Ca元素与果实Zn元素呈极显著正相关;土壤肥力因子与果实品质指标的相关性较弱。叶片N、P、K元素与果实N、P、K元素呈显著正相关,叶片P元素与果实K元素呈极显著正相关,叶片Zn元素与果实Ca、Fe元素呈显著负相关;果实矿质元素中仅有Mg、Cu元素与土壤肥力因子呈显著相关,土壤肥力因子主要影响叶片矿质元素含量,但叶片矿质元素与土壤肥力因子间的关系较复杂。多元线性回归分析表明,土壤pH对叶片矿质元素含量的影响最大,其次是土壤有机质,随土壤有机质含量的增加,叶片N、P、K、Mn元素含量升高,但叶片Zn元素随有机质含量的升高呈现降低趋势。【结论】提高土壤有机质和铵态氮含量,增强土壤酸度是笃斯越橘栽培区土壤管理的关键技术;提高果实K、Ca、Mg、Fe、Mn含量,减少果实Zn元素含量是提高笃斯越橘果实品质的重要措施。     

低温锻炼期光周期对笃斯越橘脂肪酸和碳水化合物含量的影响

利用气质联用法和高效液相色谱法研究低温锻炼期不同光周期处理对笃斯越橘(Vaccinium uligiuosum L.)枝条脂肪酸和碳水化合物含量影响,探究抗冻性与脂肪酸和碳水化合物含量关系,阐明抗冻性形成生理生态机制。文章以3年生笃斯越橘苗为材料,将苗木分别置于4℃低温下短日照(10 h)和长日照(14 h)人工环境,处理21 d后测定枝条相对电导率、脂肪酸、可溶性糖及淀粉含量。结果表明,低温和短日照共同作用显著降低饱和脂肪酸含量,提高总不饱和脂肪酸比例和脂肪酸不饱和度。硬脂酸含量和脂肪酸不饱和度与抗冻性有关。低温锻炼期蔗糖、葡萄糖、果糖和总可溶性糖含量显著提高,主要与低温诱导作用有关,受光周期影响较小。低温锻炼期短日照处理对淀粉积累诱导作用显著高于长日照。低温锻炼期温度对笃斯越橘抗冻性起主要作用;短光周期可提高低温锻炼效果,主要与脂肪酸不饱和度提高及淀粉含量增加有关。研究揭示笃斯越橘抗冻性形成的生理生态机制,为越橘属植物抗寒栽培、种质筛选和新品种培育提供理论依据。     

长白山笃斯越橘绿枝扦插育苗方法

笃斯越橘属野生蓝莓的一种,为杜鹃花科越橘属落叶灌木,在长白山区海拔1 200m以上有群落分布,是蓝莓类植物野生资源,俗称笃斯、红豆等.笃斯越橘为多年生灌木,丛生,株高20～50cm,适宜在湿润但不积水的酸性土壤中生长.天然分布于泥炭沼泽地上及沼泽地边的白桦、落叶及针阔混交林下,一般要求土壤pH为4.5～5.5,土质疏松,通气良好,有机质含量一般为8％～12％.果实多呈圆形和扁圆形,鲜果呈蓝色,被白色果粉,一般在6月下旬至7月中旬着色,8月上、中旬成熟.果实粒小,花青素含量高,富含多种维生素、微量元素和氨基酸,具有良好的营养保健作用和增强人体免疫等功能.近年来,笃斯越橘的果实以其独特的天然、营养、保健医疗等功效,倍受世人关注和青睐,是不可多得的天然绿色保健佳品,极具市场潜力.生产中笃斯越橘硬枝扦插生根率低,采用绿枝扦插可繁育大量苗木.     

笃斯越橘花青苷合成酶基因(ANR)的克隆与序列分析

以笃斯越橘的盛花期花朵为试材,克隆了笃斯越橘花青苷合成途径ANR基因并对其进行序列分析,结果表明:笃斯越橘ANR基因的cDNA序列全长为1 226bp,其中包含1 035bp ORF,编码344个氨基酸,相对分子质量为38kd,等电点值为5.34。将其氨基酸序列与其他植物的ANR基因比对后发现,笃斯越橘ANR基因分别与桃、苹果、葡萄、野草莓的ANR基因序列的一致性达61%、62%、62%和59%,表明克隆到了正确的笃斯越橘ANR基因。该序列与其他植物的ANR基因序列构建的系统发育树表明,所克隆的笃斯越橘ANR基因分别与桃、苹果、野草莓等亲缘关系较近。     

笃斯越橘新品种“紫水晶”离体培养关键技术研究

[目的]探讨笃斯越橘新品种"紫水晶"离体培养的关键技术。[方法]通过对外植体灭菌方法,取材时期,增殖、壮苗、生根培养的筛选与优化,建立适合笃斯越橘新品种"紫水晶"的无性配套繁殖体系。[结果]外植体灭菌采用0.1%Hg CI2消毒3 min;WPM(改良)+6-BA 1.0 mg/L+ZT1.0 mg/L为笃斯越橘新品种"紫水晶"分化增殖培养基;9月份将无根试管苗移栽到混配有机基质锯末∶树皮∶草炭=1∶1∶1基质中,空气相对湿度80%~90%,培养温度为20~25℃,50 d后生根率达72.4%。[结论]建立了笃斯越橘新品种"紫水晶"离体培养关键技术,为大规模工厂化育苗提供技术支持。     

笃斯越橘新品种"紫水晶"离体培养关键技术研究（英文）

[目的]探讨笃斯越橘新品种"紫水晶"离体培养的关键技术。[方法]通过对外植体灭菌方法,取材时期,增殖、壮苗、生根培养的筛选与优化,建立适合笃斯越橘新品种"紫水晶"的无性配套繁殖体系。[结果]外植体灭菌采用0.1%Hg Cl2消毒3 min;WPM(改良)+6-BA 1.0 mg/L+ZT 1.0 mg/L为笃斯越橘新品种"紫水晶"分化增殖培养基;9月份将无根试管苗移栽到混配有机基质锯末∶树皮∶草炭=1∶1∶1基质中,空气相对湿度80%~90%,培养温度为20~25℃,50 d后生根率达72.4%。[结论 ]建立了笃斯越橘新品种"紫水晶"离体培养关键技术,为大规模工厂化育苗提供技术支持。     

笃斯越橘新品种"紫水晶"离体培养关键技术研究

[目的]探讨笃斯越橘新品种"紫水晶"离体培养的关键技术。[方法]通过对外植体灭菌方法，取材时期，增殖、壮苗、生根培养的筛选与优化，建立适合笃斯越橘新品种"紫水晶"的无性配套繁殖体系。[结果]外植体灭菌采用0.1% HgCl2消毒3 min；WPM（改良）+6-BA 1.0 mg/L + ZT 1.0 mg/L为笃斯越橘新品种"紫水晶"分化增殖培养基；9月份将无根试管苗移栽到混配有机基质锯末∶树皮∶草炭=1∶1∶1基质中，空气相对湿度80%~90%，培养温度为20~25℃，50 d后生根率达72.4%。[结论]建立了笃斯越橘新品种"紫水晶"离体培养关键技术，为大规模工厂化育苗提供技术支持。     

大兴安岭笃斯越橘叶片、根系及根系层土壤养分特性研究

【目的】分析大兴安岭地区笃斯越橘叶片和根系矿质元素含量及根系集中分布层的土壤养分特性,明确土壤养分对笃斯越橘叶片及根系中矿质元素含量的影响。【方法】以大兴安岭地区水湿地有土壤类型、水湿地无土壤类型、水湿地沟谷草甸类型和山地类型中的笃斯越橘为研究对象,使用多元统计分析法,研究笃斯越橘叶片和根系中的N、P、K、Ca、Mg、Fe、Mn、Cu含量与土壤有机质、全N、全P、全K、全Ca、全Mg、全Fe、全Mn、全Cu、碱解N、有效P、速效K含量及pH间的相互关系。【结果】(1)大兴安岭笃斯越橘分布区不同立地类型中的土壤养分含量差异显著(P0.05);立地类型对笃斯越橘叶片中N、P、K含量的影响较大,而叶片Ca、Mg及根系中各矿质元素含量受其影响相对较小;根系集中分布层的土壤养分含量丰度在植株体内具有一定程度的反应。(2)从叶片矿质元素间的相关性分析得知,叶片中N与K、Mn与Cu呈极显著正相关(r=0.751**,r=0.834**),Mn与N、Fe呈显著正相关(r=0.586*,r=0.566*);简单相关分析结果表明,土壤养分含量与笃斯越橘植株矿质元素相关性复杂,仅得到叶片N、根系N和根系Fe与其对应土壤养分含量呈显著正相关(r=0.596*,r=0.587*,r=0.570*);典型相关分析表明,土壤有机质和pH对笃斯越橘叶片矿质元素含量具有重要影响,尤其土壤pH对叶片P、Fe、Mg、Mn、Cu含量影响较大,其含量随土壤pH的升高均可能呈现降低趋势;而根系矿质元素主要受土壤pH、P、Ca、Mg影响,尤其土壤全Mg对根系Ca、Mg、Fe含量影响较大。【结论】大兴安岭4种典型立地类型中的笃斯越橘植株均呈现高N、K、Mn,低P、Mg的营养特性;根系集中分布层的土壤养分总体呈现高有机质、高N、高Fe、低P的特点;提高土壤有机质、N、Fe含量并配合调节土壤pH,是笃斯越橘栽培管理的重点。     

笃斯越橘花青苷途径中CHS基因的克隆与序列分析

以笃斯越橘花朵为试材,根据兔眼蓝莓查尔酮合成酶(VaCHS)mRNA全长序列设计1对特异性引物,RT-PCR扩增出长度大约为1 400bp目的片段,经测序,结果表明,笃斯越橘CHS基因(VuCHS)cDNA序列全长1 391bp,包含1 170bp开放阅读框(ORF),编码389个氨基酸,将笃斯越橘CHS基因(VuCHS)编码的蛋白质与其他来源的查尔酮合成酶蛋白的氨基酸序列进行比对,发现与兔眼蓝莓、杜鹃花和猕猴桃的一致性分别为99%、93%和93%,该基因蛋白质的氨基酸序列与其他植物CHS基因蛋白质的氨基酸序列进化分析表明,与兔眼蓝莓和猕猴桃属于同一分支,与兔眼蓝莓亲缘关系最近。     

越橘果实发育过程中糖酸积累及抗氧化性形成的动态变化

果实口感和抗氧化性是越橘果实成熟以及品质评价的重要指标。对北高丛越橘斯巴坦和瑞卡不同发育时期果实糖酸构成及含量、花色素苷含量、总酚含量和抗氧化性进行分析。结果表明:越橘成熟果实以积累果糖和葡萄糖为主,占总糖含量的99.75%,二者比例接近1∶1,蔗糖为0.25%,柠檬酸为主要有机酸,占总酸含量的86.32%,奎宁酸和苹果酸占比9.65%和3.68%,酒石酸含量0.35%。随着果实发育成熟,花色素苷含量增加,瑞卡成熟果实的花色素苷含量在5.94mg·100g~(-1),总酚含量为2.14mg·100g~(-1)。相关性分析发现,斯巴坦果实中花色素苷的含量变化与果糖、葡萄糖和可溶性总糖呈极显著正相关,相关系数均在0.8以上;瑞卡果实中花色素苷的含量与果糖含量极显著正相关,相关系数0.9292,与葡萄糖和可溶性总糖含量的相关系数在0.6以上。相反的,两个品种果实中蔗糖的含量与花色素苷含量的积累呈相反趋势,随着果实不断发育,蔗糖含量减少,斯巴坦中花色素苷含量与蔗糖的相关系数为0.6747,瑞卡中为0.4999,均为负相关。两个品种的抗氧化活性与花色素苷含量呈正相关,而与总酚含量负相关。     

野生笃斯越橘种质资源保存效果研究

为探索影响野生笃斯越橘种子资源保存的生境因子,开展对11个试验地点的3种生境条件下的野生笃斯越橘的种质资源收集与保存试验.研究结果表明,不同生境中的笃斯越橘对环境的适应能力不同,随着郁闭度的上升,适应能力增强,保存率上升;随着郁闭度下降,适应能力减弱,保存率降低.移栽、嫁接、扦插和组织培养4种方法都可以保存种质资源.其中,嫁接技术可有效保存笃斯越橘优良单株;对于特定来源的笃斯越橘,移栽可以达到100％保存率.组织培养技术可以够达到保存极罕见特异种质的目的.扦插技术虽然也获得了成功,但是受限于各种技术与材料原因,不适于大规模应用.     

长白山笃斯越橘红色素特性的研究

探讨了长白山笃斯越橘冷冻果红色素的提取条件及外界因素对越橘色素稳定性的影响.结果表明：长白山笃斯越橘红色素乙醇溶液最大吸收峰的波长在526 nm处.长白山笃斯越橘色素易溶于乙醇等有机溶剂,不同提取液对色素的提取效果有一定的影响.越橘红色素的乙醇溶液呈深红色,澄清透明,丙酮溶液微溶,呈红褐色,有絮状物;最佳提取条件为85%的乙醇浸提3 h;越橘红色素在酸性条件下稳定,在碱性条件下变色;提取液不同越橘色素颜色变化也不同;低温加热越橘天然色素稳定性较高,但高温加热对色素有较强的降解作用;光照条件不同对越橘稳定性也有不同程度的影响.相对而言,长白山笃斯越橘红色素的稳定性要好于人工栽培的越橘.     

长白山笃斯越橘菌根形态结构及内生菌的分布特征

对长白山野生笃斯越橘菌根的形态结构及内生真菌的分布特征进行观察和分析。结果表明,笃斯越橘根的次生构造中,周皮由3～6层木栓细胞组成,其中最外1～2层呈凋落状,维管形成层和次生韧皮部均不明显,各占1～2层细胞。毛根包裹着1层或疏松或紧密的菌丝层,没有根毛;内生菌根真菌主要侵染周皮细胞,个别也有侵染木质部的情况,但没有改变根的基本解剖结构。初步观察发现,长白山笃斯越橘的根部具有欧石楠类菌根菌(ERM)、暗隔内生菌根菌(DSE)和泡囊-丛枝菌根菌(VAM)等三种类型菌根真菌的分布,含有菌丝体的表皮细胞壁具有明显加厚迹象。另外,几乎所有笃斯越橘毛根都有内生菌根真菌的寄生。     

大兴安岭笃斯越桔与其伴生植物矿质元素特性分析

【目的】分析笃斯越桔伴生植物(柴桦、杜香、红豆越橘)在不同立地条件下的矿质元素特性,研究其与笃斯越桔地上部分和地下部分矿质元素含量特征,为进一步探究笃斯越桔生境以及伴生植物对其生长发育的影响提供参考。【方法】以大兴安岭山地、水湿地冻土、水湿地有土壤3种主要立地类型中的笃斯越桔及其伴生植物和土壤为试材,应用差异及相关性分析方法,分析笃斯越桔与其伴生植物常量元素N、P、K、Ca、Mg和微量元素Fe、Mn、Zn、Cu间的差异及相关关系。【结果】(1)笃斯越桔与其伴生植物矿质养分存在差异,常量元素N、Ca含量显著高于伴生植物,Mg元素含量显著低于伴生植物(P<0.05),微量元素Fe、Zn、Cu含量相对较低。(2)笃斯越桔地上部常量元素含量均高于地下部,而伴生植物地下部除水湿地冻土和水湿地有土壤类型中的Ca、Mg含量与山地类型中K、Ca含量较高外,其余元素含量均以地上部分较高;笃斯越桔Fe、Mn元素含量以地下部高于地上部,柴桦与杜香Mn、Cu含量均为地下部高于地上部,红豆Fe、Cu含量则表现为地下部高于地上部。(3)笃斯越桔伴生植物地上部N、K、Mg、Mn含量与土壤pH呈显著或极显著负相关。地下部Fe含量与土壤全N、全Mn含量呈显著正相关,而N含量与二者呈显著负相关;Ca、Zn、Cu含量均与土壤pH呈显著或极显著正相关。(4)笃斯越桔与其不同伴生植物矿质元素含量间的相关关系存在明显差异,其中笃斯越桔矿质元素与杜香Mg元素及柴桦地上部Zn元素相关性较高,与红豆除地下部Ca元素相关性较弱外,与其余元素均有较强的相关性。【结论】笃斯越桔伴生植物常量元素(N、P、Ca)含量低于笃斯越桔,而微量元素(Fe、Zn)含量较高;笃斯越桔及其伴生植物对土壤养分的利用存在差异,且对笃斯越桔矿质元素的吸收有一定影响。     

越橘果实糖酸含量和不同发育阶段的变化及其与叶片中可溶性糖含量的相关关系

【目的】了解高丛、半高丛和矮丛越橘品种果实糖酸含量及不同发育阶段的变化特点,探讨果实糖积累与叶片中可溶性糖含量的相关关系,为越橘糖酸代谢机理和品质调控提供参考资料。【方法】应用高效液相色谱（HPLC）技术对5个越橘品种（高丛越橘：‘斯巴坦’、‘泽西’,半高丛越橘：‘北村’、‘北蓝’,矮丛越橘：‘美登’）不同发育阶段果实的糖酸组分和叶片中糖组分进行测定。【结果】供试的5个越橘品种成熟果实总糖平均含量为102.04 mg•g-1 FW,其中‘斯巴坦’含量最高,‘北村’最低。葡萄糖和果糖占总糖含量的97.90%—99.47%,二者含量比值1﹕1,均随果实发育呈迅速增加趋势,蔗糖和山梨醇在果实发育早期含量很低并随果实发育降低,在成熟果实中含量极微。供试高丛和半高丛越橘成熟果实总酸平均含量为7.10 mg•g-1 FW,柠檬酸是主要有机酸,占总酸含量的76.94%,随果实发育先上升后下降,奎宁酸和苹果酸在幼果期占较大比重,随果实成熟含量下降。供试矮丛越橘品种‘美登’和半高丛越橘品种‘北村’酸组成及变化趋势相似,即奎宁酸是成熟果实的主要酸,含量明显高于其它品种,且随果实发育持续下降,其次是柠檬酸和酒石酸。叶片中山梨醇占叶片总糖含量的67.28%,花后42 d（成熟前15 d）达到最高值,之后迅速降低。【结论】矮丛越橘品种‘美登’和半高丛越橘品种‘北村’有机酸构成特点区别于供试的高丛品种和半高丛品种‘北蓝’;山梨醇是越橘碳水化合物积累的主要形式;越橘成熟前15 d是果实膨大、糖分积累的关键时期。     

笃斯越橘果实中黄酮类化合物的分离鉴定

采用柱色谱技术对笃斯越橘（Vaccinium uliginosum L．）果实中黄酮类化舍物进行分离、提纯。分离提纯出3种黄酮类化合物,并通过^1H-NMR、^13C-NMR等表征了结构。结果表明：这3种化合物分别为二甲花翠素-3-O-葡糖苷（Ⅰ）,矢车菊-3-O-半乳糖苷（Ⅱ）,杨梅黄素（Ⅲ）,均为首次从该果实中分离得到。     

基于环境因子的笃斯越橘结实规律研究

对大兴安岭—黑河地区—小兴安岭一线开展笃斯越橘种质资源调查,了解野生资源现状。基于对笃斯越橘的形态、密度、产量、生境、物候等特征类型进行区分,发现郁闭度对笃斯越橘结实量的影响规律。随着郁闭度上升,株高上升、密度降低,平均单株结实量上升;随着郁闭度下降,株高降低、密度升高,单株结实量下降。