农杆菌介导转化平邑甜茶子叶外植体的研究

以近轴端子叶为外植体,研究了菌液浓度、菌液浸泡时间、共培养时间及推迟筛选对根癌农杆菌介导的苹果属植物平邑甜茶转化效率的影响,建立了平邑甜茶高效的转化体系.结果表明:较优转化体系是将成熟胚接种在胚萌发培养基上培养,7～10d后剪取近轴端子叶,子叶外植体在OD600=0.5的EHA105菌液中浸泡10min后在再生培养基上共培养5d,然后在附加20mg· L-1Kan和400mg· L-1 Cef的再生培养基上选择培养,在此转化体系上平邑甜茶抗性芽再生率达9.0％.对27个Kan抗性株系的叶片进行GUS组织化学染色分析,23个株系呈现出GUS染色阳性反应.本研究为平邑甜茶的基因工程育种奠定了重要基础.     

平邑甜茶外源花粉授粉效果和生殖机能研究

以平邑甜茶(Malus hupehensis)为母本,用"红丽"观赏海棠花粉进行人工授粉,设计不去雄不授粉不套袋、去雄授粉套袋、套袋花开后去雄授粉和去雄不授粉套袋四个处理,利用物理统计、显微观察、流式细胞仪等技术,研究不同授粉处理平邑甜茶坐果率、果实生理性状、后代实生苗杂种率和倍性的差异,进一步探索平邑甜茶的生殖机能,选择出平邑甜茶杂交率较高的时期以增加平邑甜茶的杂交率和杂交种子数,扩大选择范围,提高育种效率,为育种实践提供重要的理论依据。结果显示,经授粉处理后,平邑甜茶种子千粒重增加约8.7%;坐果率显著提高,10月时相比自然授粉状态下提高约10.1%。自然状态下平邑甜茶无融合生殖率约为43.70%,各处理杂交后代实生苗大部分为三倍体,少数为二倍体、四倍体、五倍体和非整倍体,且花开前去雄授粉套袋处理显著提高四倍体形成率。综上所述,人工授粉有助于提高坐果率,促进种子形成;平邑甜茶以无融合生殖为主,同时也进行有性杂交,且花开前授粉能显著提高四倍体形成率。但三倍体后代实生苗是经有性生殖还是无融合生殖产生,需进一步鉴定。     

平邑甜茶开发利用情况及建议

在调查平邑甜茶资源分布和开发利用情况的基础上,对平邑甜茶的有效成分进行分析,并提出平邑甜茶开发利用建议,以期为平邑甜茶的开发利用提供科学参考。     

多胺含量及精胺和亚精胺对盐胁迫下平邑甜茶膜脂过氧化的影响

以一年生平邑甜茶幼苗为材料,在水培条件下研究了盐胁迫下平邑甜茶叶片内源游离态多胺、丙二醛（MDA）含量的变化以及外源多胺和多胺合成抑制剂对它们的影响。结果表明：盐胁迫下平邑甜茶叶片中MDA含量显著增加,精胺（Spm）和亚精胺（Spd）含量明显降低,腐胺（Put）含量显著增加,（Spd＋Spm）/Put显著降低,多胺总量...     

平邑甜茶根尖染色体制片技术优化及核型分析

为探讨制备平邑甜茶染色体制片的最佳技术参数,以平邑甜茶根尖为试验材料,比较材料的不同采集时间、预处理方法、酶解时间和后低渗时间对平邑甜茶根尖染色体制片的影响。结果表明:在26℃培养条件下,平邑甜茶最佳取材时间为11:00—11:30; 4℃低温冰水混合物进行预处理能够获得较为分散的染色体标本;酶解采用2. 5%果胶纤维素混合酶在37℃下处理最佳时间为2 h,后低渗最佳时间为20 min。核型分析发现平邑甜茶染色体属于小型染色体,染色体臂比变化在1. 01～2. 46之间,差异不大,核型组成成分为中部着丝点染色体(m)、亚中部着丝点染色体(sm),核型属于2B型。     

镉处理下平邑甜茶DNA的甲基化分析

采用甲基化敏感扩增多态性(Methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)技术,对镉处理的平邑甜茶叶片DNA进行甲基化位点分析,研究镉对其甲基化多态性的影响。结果表明:在0(CK)、2.5 mg·L-1、5 mg·L-1、10 mg·L-1镉处理下,9对MSAP引物扩增,甲基化出现三种不同模式即未甲基化A、半甲基化B和全甲基化C,共扩增出3150条谱带,单对引物最多扩增656条,最少为610条。5 mg.L-1镉处理的平邑甜茶甲基化较高,比例达到60.1%;10 mg.L-1镉处理的平邑甜茶甲基化较低,比例达到57.6%;与对照相比,镉处理的平邑甜茶甲基化水平降低,可能镉抑制了其基因的表达。     

重茬胁迫对不同苹果砧木叶片光合能力及抗氧化酶活性的影响

以抗重茬砧木AM1、平邑甜茶、八棱海棠、M9T337为试材,通过生长量、叶片叶绿素含量、叶片光合参数、荧光参数及叶片抗氧化酶活性研究,评价4种砧木耐重茬能力。结果表明,AM1、平邑甜茶砧木重茬土与正茬土处理间株高没有显著差异,八棱海棠、M9T337重茬土处理的株高均显著低于正茬土的,平邑甜茶、八棱海棠、M9T337三种砧木重茬土处理的新梢生长量、叶鲜重均显著低于正茬土处理的,抗重茬砧木AM1却表现出二者之间无显著差异;AM1、平邑甜茶、八棱海棠、M9T337叶片叶绿素含量显著下降,但AM1下降幅度最小,为12.8%,其次是平邑甜茶,为17.9%,AM1、平邑甜茶叶片净光合速率无显著变化,八棱海棠、M9T337叶片净光合速率显著降低;重茬土处理的新引进砧木AM1、平邑甜茶叶片荧光参数ΦPSⅡ、qP、NPQ、Fv/Fm、ETR无显著性差异,八棱海棠、M9T337叶片荧光参数ΦPSⅡ、qP、Fv/Fm、ETR均显著下降,而NPQ显著上升;SOD、POD活性均表现显著降低,但AM1下降幅度最小,分别为27.5%和20.0%,其次是平邑甜茶,为27.9%、30.6%,AM1、平邑甜茶CAT活性较对照无显著差异,八棱海棠、M9T337CAT活性显著降低。综合来看,AM1表现出很好的抗重茬能力,其次是平邑甜茶、八棱海棠,M9T337抗重茬能力最弱。     

平邑甜茶新根扩展蛋白基因MhEXP1的cDNA全序列克隆及表达

【目的】对平邑甜茶[Malus hupehensis（Pamp）Rehd. var pinyiensis Jiang]新根扩展蛋白基因进行克隆和表达分析,为揭示扩展蛋白在平邑甜茶根系生长发育中的功能打下基础。【方法】利用RT-PCR结合RACE技术克隆扩展蛋白同源基因,并通过Northern杂交研究其在不同器官中的表达情况及吲哚丁酸（IBA）的处理效应。【结果】成功地从平邑甜茶白色新根中获得了一个全长的扩展蛋白基因,命名为MhEXP1,GenBank登录号为DQ538346。MhEXP1 cDNA全长1 111 bp,含有771 bp的完整开放阅读框,编码257个氨基酸,预测分子量和等电点分别为27.8kD和8.9。序列分析表明,MhEXP1具有扩展蛋白的典型结构,即氨基酸序列N端有８个半胱氨酸残基,1个组氨酸（His-Phe-Asp,HFD）域,C末端存在4个保守的色氨酸残基。Northern杂交表明,该基因在平邑甜茶叶片中表达量很低,但在新根中大量表达并受IBA诱导,且随着IBA处理时间的延长表达量逐渐增加。【结论】成功地从平邑甜茶中克隆了一个全长的扩展蛋白基因MhEXP1,该基因在叶片中表达量很低但在新根中大量表达,并受IBA诱导;MhEXP1参与IBA调节的平邑甜茶根系生长发育。     

缺素环境中平邑甜茶根系硝酸还原酶活性及硝态氮含量的变化

以二年生平邑甜茶（M.hupehensis Rehd）实生幼树为试材,在砂培和水培条件下研究了完全营养液、缺氮、缺磷、缺钙条件下,平邑甜茶根系硝酸还原酶（NR）活性、以及硝态氮含量的动态变化,结果表明,缺氮明显降低根系硝酸还原酶活性和硝态氮含量,缺磷也降低了硝酸还原酶活性,但缺钙8d后根系硝酸还原酶活性提高,根系硝态氮含量也有所升高。     

铅对平邑甜茶·八楞海棠抗氧化物质和质膜相对透性的影响

[目的]探讨铅胁迫对苹果砧木平邑甜茶和八楞海棠的毒害机理,并比较二者耐铅性的差异。[方法]采用盆栽土壤中添加铅的方法,以平邑甜茶和八楞海棠2个常规苹果砧木为试材,研究铅胁迫对苹果砧木幼苗抗氧化物质和质膜相对透性的影响。[结果]铅胁迫导致抗坏血酸和类胡萝卜素含量下降,质膜相对透性增大。高浓度铅胁迫下八楞海棠比平邑甜茶受到的毒害更严重。[结论]铅胁迫能破坏平邑甜茶和八楞海棠体内的抗氧化物质。平邑甜茶可能比八楞海棠具有较强的耐铅毒害能力。     

黄芪种衣剂对2年生黄芪品质的影响

以不同用量(种子干质量的2%、4%、6%和8%)的黄芪种衣剂(AM)包衣为处理,以ND牌种衣剂(种子干质量的8%)包衣和空白种子为双对照,比较研究了不同处理条件下,2年生膜荚黄芪(Astagulus membranceus)植物中黄芪甲苷含量、总黄酮含量、总皂苷含量的变化情况.结果表明,黄芪种衣剂(AM)可以显著改善黄芪药材品质.各质量分数韧皮部处理均能够提高黄芪甲苷含量及总黄酮、总皂苷含量.就有效成分含量而言,在同一质量分数韧皮部下,黄芪种衣剂的处理效果优于大田作物中常用的ND种衣剂.AM(4%)处理为较适宜的包衣质量分数.     

甘草种子处理方法的研究进展

甘草种子种皮角质硬实,因吸水困难而影响种子发芽,自然发芽率仅为１０％￣２０％,所以必须对甘草种子进行处理,本文是各地经验与我们试验研究结果的总结。     

温光变异对水稻农艺性状的影响

通过不同年份生育期间有效积温和日照对水稻品种农艺性状关系的分析得知，有效积温对各农艺性状的相关表现为空秕率（0．4696**）＞穗粒数（-0．4063*）＞千粒重（-0．4014*）＞有效穗数（0．2511）＞株高（-0．0843）＞产量（0．0598）；日照对各性状相关性为穗粒数（0．5889**）＞空秕率（0．3843）＞千粒重（-0．2047）＞株高（0．0700）＞有效穗数（0．0155）＞产量（-0．O123）；温光对产量的回归方程为Y=367．74＋0．0468X1—0.0166X2。     

常温干燥贮藏年限对新型烟草种子活力的影响

通过对90个烟草材料的种子进行发芽率和发芽势的测定,结果表明:同一年代不同品种种子的发芽率和发芽势存在一定差异,且发芽率相近的品种发芽势也相近;不同年代同一品种种子的发芽率和发芽势差异也比较明显,它们随着贮藏年代的延长而降低。     

PEG模拟干旱胁迫条件下玉米种子的萌发特性研究

为了探究在土壤干旱胁迫条件下玉米种子的萌发特性,通过室内不同浓度PEG溶液模拟不同程度的干旱胁迫,以4个玉米品种为材料,调查、分析各PEG浓度下玉米种子的发芽特性。结果表明,随着PEG浓度的升高,4个玉米品种种子的萌发及相关指标均有显著的延缓效应：种子发芽率(GR)、发芽势(GP)、平均发芽速(GV)随着PEG浓度的升高而呈明显下降趋势;D第一粒、D峰值所需天数随着干旱程度的加深向后推移1~3天;在各PEG浓度下,L胚根、L胚轴、L全株长度受到明显的抑制。籽粒形态不同的各品种间延缓效应差异显著,说明当土壤处于一定程度的干旱胁迫时,玉米小籽粒种子发芽更快,而大籽粒种子表现出更强的耐旱性。     

新疆猪牙花种子生物学特性研究

[目的]对新疆猪牙花种子生物学特性进行研究,为新疆猪牙花驯化引种提供科学依据.[方法]对新疆猪牙花果实和种子的基本形态和解部特征进行研究;并对种子千粒重、含水量、种子生活力和发芽率以及种皮透性等进行测定.[结果]新疆猪牙花果实为蒴果,具3棱,鲜果粒横径11.0～35.0 mm.纵径12.0～45.5 mm,单果重量0.5 ～4.5 g.阴干种子横径为1.0～2.3 mm,纵径1.5～4.0mm,厚度1.0～1.5 mm.种子成熟期6月中旬至下旬,千粒重为7.8g,种子生活力为93.6％,含水量为12.04％,浸种12 h后,种子吸水率达70％.不同浓度的种子浸提液可明显抑制白菜种子的发芽和幼根生长并一定程度上抑制种子本身的生长,不同药物处理对新疆猪牙花种子没有影响,新疆猪牙花种子种皮无吸水障碍,新疆猪牙花种子有明显的休眠特性.种子体眠的主要原因与胚形态、晚熟及发芽抑制物有关.[结论]新疆猪牙花种子透水性较好,吸水不存在障碍,因此其种皮透性不是引起种子体眠的原因.     

驼绒藜种子发芽、出苗及成株过程的研究

对驼绒藜种子发芽、出苗、扎根及成株方面进行了调查研究.结果表明,驼绒藜在自然条件下其结籽率较低;种子具有后熟特性,在室内外温度条件下贮藏1年半后完全失去发芽力,在干燥、低温条件下贮藏3年后仍有较高的发芽率;其种子发芽的温度范围较广,土壤湿度在15%以上时在较低的温度下也能正常发芽出苗;自然散落的种子出苗后土壤孔隙度在51%,土壤湿度在15%以上的地块上幼苗扎根成株都很好;出苗后在幼苗密度大的地块其成活率逐渐下降.     

外源激素对野生蔬菜实葶葱种子萌发的影响

为更好地使激素在实葶葱种子处理上得到应用,以新疆野生蔬菜实葶葱种子为材料,利用不同浓度的GA3、NAA和6-BA溶液对实葶葱种子进行浸种处理,研究了不同浓度外源激素对实葶葱种子萌发的影响。结果表明：3种外源激素处理对实葶葱种子萌发的影响存在较大差异,50～1200mg·L-1GA。能不同程度地促进实葶葱种子的萌发,其中以浓度为200mg·L-1GA。处理的效果最佳,发芽率为85．33％,高于对照9．33个百分点;120mg·L-1的NAA处理对实葶葱种子的萌发有一定的促进作用,但不明显;5～120mg·L-1 6-BA处理抑制实葶葱种子萌发。     

同色兜兰种子非共生萌发试验

研究了基本培养基、种子成熟度及次氯酸钠溶液处理对同色兜兰种子萌发的影响。结果表明,授粉后150 d的种子在1/4MS基本培养基附加0.5 mg/L NAA、100 mL/L椰子水、1.0 g/L活性炭和20 g/L蔗糖的培养基上萌发率最高,播种后90 d萌发率可达70.3%;授粉后240 d的种子在含有0.5%有效氯的次氯酸溶液中处理40 min能最有效地提高种子的萌发率,成熟种子的萌发率从14.3%提高到69.0%。     

不同处理对银合欢种子发芽率的影响

[目的]筛选出打破种子硬实的最佳处理方式和处理时间。[方法]分别用擦破种皮、热水、无水酒精、40％氢氧化钠溶液、30％双氧水溶液和98％浓硫酸浸种对热研1号银合欢种子进行处理,研究各处理对银合欢种子发芽率的影响。[结果]银合欢种子的发芽势为20．0％,发芽率为27．3％,硬实率为89．3％。砂布磨破种皮的银合欢种子的发芽势为82．0％,发芽率为83．3％。与对照相比,其发芽势上升了62．0个百分点,发芽率上升了56．0个百分点。无水酒精、氢氧化钠和双氧水浸种处理对银合欢种子的发芽势和发芽率无显著影响。浓硫酸浸种时间从1min到9min,处理后种子的平均发芽率随着浸种时间的延长而提高,浸种9min的平均发芽率最高,达78．0％,比对照提高了50．7个百分点。[结论]该研究为银合欢的规模化栽培利用和田间大量快速育苗提供了理论依据。