烟草酚酸和有机酸对黑胫病菌生长的影响

【目的】探讨烟草根系分泌物中酚酸和有机酸对烟草黑胫病菌生长的影响,为明确根系分泌物组分与黑胫病菌互作机制提供理论依据。【方法】采用外源添加方法,比较了不同酚酸和有机酸对黑胫病菌菌丝生长、孢子囊产生量及游动孢子的影响。【结果】不同酚酸物质在低浓度时促进了黑胫病菌菌丝生长和孢子囊产生量,但随着浓度增加促进作用减小甚至转变为抑制作用;除高浓度香草酸和香豆酸直接抑制游动孢子释放,其他酚酸各浓度均表现为促进作用。除添加0.05 g/L苹果酸表现为促进作用外,其他有机酸对黑胫病菌菌丝生长具表现为抑制作用;苹果酸、乳酸和富马酸对孢子囊产生和游动孢子释放表现为低浓度促进高浓度抑制,而草酸、酒石酸和丁二酸在各浓度下均表现为抑制作用;另外,乙酸基本完全抑制孢子囊产生和游动孢子释放。【结论】不同酚酸和有机酸对黑胫病生长的影响存在差异,其促进或抑制作用取决于酚酸和有机酸种类及浓度。     

烟草黑胫病菌的分离及培养性状研究

烟草黑胫病是烟草(Nicotiana tabacum)的一种毁灭性病害。试验采集云南省昭通市的烟草黑胫病病株,采用组织分离法对病原菌进行分离、纯化,对其培养性状进行研究。结果表明,燕麦培养基适合烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica)的培养,菌丝生长旺盛;烟草黑胫病菌菌丝粗细不均匀,无隔膜,具有膨大体;孢子囊顶生,具脱落性,具1个或2个乳突。这些培养性状与前人研究结果相似,表明烟草黑胫病菌的培养性状较为稳定。     

抗烟草黑胫病植物源活性物质的筛选

为筛选对烟草黑胫病有较高抗性的植物源提取物,采用菌丝生长速率法,对苦参、枳壳等45种中药材粗提液对烟草黑胫病病菌的抑制效果及施药方式进行了分析,结果表明:有土黄连、黄柏等19种中药材的提取物对烟草黑胫病病菌菌丝生长有显著的抑制效果,中药材提取物以混合杀菌方式对烟草黑胫病菌丝生长抑制作用效果最好;其中土黄连、黄柏、黄独、厚朴、前胡、雷公藤、苍术、油茶饼、瞿麦、巴戟天等16种中药材的提取物对烟草黑胫病菌丝生长有极显著的抑制效果,具有开发先导化合物的潜力;在大田生产应用上,施用中药材植物源药剂防治烟草黑胫病以灌根的施药方式较好。     

抗烟草黑胫病植物源活性物质的筛选

为筛选对烟草黑胫病有较高抗性的植物源提取物,采用菌丝生长速率法,对苦参、枳壳等45种中药材粗提液对烟草黑胫病病菌的抑制效果及施药方式进行了分析,结果表明:有土黄连、黄柏等19种中药材的提取物对烟草黑胫病病菌菌丝生长有显著的抑制效果,中药材提取物以混合杀菌方式对烟草黑胫病菌丝生长抑制作用效果最好;其中土黄连、黄柏、黄独、厚朴、前胡、雷公藤、苍术、油茶饼、瞿麦、巴戟天等16种中药材的提取物对烟草黑胫病菌丝生长有极显著的抑制效果,具有开发先导化合物的潜力;在大田生产应用上,施用中药材植物源药剂防治烟草黑胫病以灌根的施药方式较好。     

烟草黑胫病菌培养性状的研究

【目的】对烟草黑胫病菌的若干培养性状进行研究，进一步了解烟草黑胫病菌的培养特性的稳定性，为烟草黑胫病的相关研究和综合治理提供试验依据。【方法】从安徽10个主要生产烟草的市（县）多点采集发生烟草黑胫病的烟株，采用组织分离法进行病原菌分离，经纯化后获得69个烟草黑胫病菌（Phytophthora nicotianae Breda de Haan var. nicotianae Waterh.）菌株，对其进行游动孢子囊的诱导、配对培养、生长特性测定等进行研究。【结果】烟草黑胫病菌的主要培养性状为：异宗配合，与标准相对交配型菌株配对培养可以产生有性器官；卵孢子球形，满器或不满器，雄器围生，藏卵器小；孢子囊多近球形，乳突明显，有双乳突现象，孢子囊具脱落性，且孢子囊柄短，不对称孢子囊较常见，孢子囊外着生有长短不一的附属丝；菌丝最适生长温度为20～30℃，最高生长温度大于35℃，小于40℃，最低生长温度大于8℃，小于10℃。【结论】供试烟草黑胫病菌的培养性状与前人的研究结论基本一致，初步认为10多年来生态环境和农业措施的变化没有导致烟草黑胫病菌的生长性状发生较大的改变，表明烟草黑胫病菌的培养性状是较为稳定的。     

烟草内生细菌Itb295对黑胫病菌的抑制及其鉴定

[目的]确定分离自健康烟草植株的内生细菌Itb295的分类地位和生防潜能。[方法]通过平板对峙培养法测定菌株Itb295对烟草黑胫病菌的抑制作用,并结合菌株形态、生理生化特性和16S rDNA序列(GenBank登录号JF496206)比对分析确定该菌株的分类地位。[结果]鉴定Itb295菌株为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。菌株Itb295对黑胫病菌菌丝生长抑制率为34.64%,受抑制的黑胫病菌菌丝膨大、扭曲、分支增多,不能正常生长,抑菌效果的可逆性分析显示受抑制的菌丝在OA培养基上能够正常生长。[结论]为烟草黑胫病的防治及内生细菌Itb295的进一步研究提供了理论依据。     

烟草黑胫病菌拮抗内生细菌的筛选

采用稀释分离法从黔南州采集的健康烟草组织中分离获得烟草内生细菌153株,通过平板对峙试验,从中筛选出2株对烟草黑胫病菌具有明显抑制作用的菌株LPN07和LPN09,其对黑胫病菌菌丝生长的抑制率分别为68.99%和65.97%。经16S rDNA序列分析,菌株LPN07和LPN09被鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)细菌。     

6种中草药提取物对烟草黑胫病菌的抑制作用

采用生长速率法测定了A(生物碱类)、B(苷类)、C(挥发油类)、D(糖类)、E(黄酮类)、F(香豆素类)6种中草药提取物对烟草黑胫病菌的抑制效果,结果表明:6种中草药提取物对烟草黑胫病菌均有明显的抑制作用,且随使用剂量的增大而增强。A药和B药分别在使用剂量为5 mL/L和9mL/L时抑制率大于50%,与对照化学药剂72%甲霜锰锌3 000倍液和中生菌素500倍液抑制率无明显差异。C药在使用剂量为80 mL/L时,抑制率达到了70.39%,明显高于对照药剂。D药、E药、F药在使用剂量为80 mL/L、8 mL/L、12.5 mL/L时,抑制率分别达到99.22%、86.64%、79.64%,显著高于对照药剂(P<0.05),其中,D药可完全抑制烟草黑胫病菌的菌丝生长。将6种中草药提取物对烟草黑胫病菌的毒力进行比较,E药的有效抑制中浓度(EC50)最小,为2.65mL/L,其后依次为A药、F药、B药、C药、D药,EC50分别为4.56、4.76、5.99、16.55、17.66 mL/L。6种中草药提取物作为防治烟草黑胫病的抑菌活性物值得进一步研究。     

不同培养条件对烟草黑胫病菌生长和产孢的影响

烟草黑胫病是烟草生产上的毁灭性病害之一,严重影响烟草生产.为了模拟室外不同气象条件下烟草黑胫病的最适发生环境,就不同培养条件对贵州省烟草黑胫病菌生长和产孢的影响进行了研究.结果表明,温度为25～30℃、全黑暗条件最适合烟草黑胫病菌生长,且菌丝浓密;生长旺盛的菌丝块经3次换水,于28～30℃、连续光照、水浸条件下黑胫病菌产孢量达到最大.     

防治烟草根黑腐病的药剂筛选

室内测定了7种杀菌剂对烟草根黑腐病菌的抑制作用。结果表明,多菌灵在12 h和24 h对孢子萌发的抑制率分别为56.0%和58.6%,其余6种杀菌剂对孢子萌发的抑制率均为100%。甲基托布津、多菌灵、大生M-45和杀毒矾4种药剂对烟草根黑腐病菌的菌丝生长有较强的抑制作用,且效果稳定。     

消毒剂对烟草漂浮育苗材料表面青枯雷尔氏菌的杀灭作用*

 为了指导烟草漂浮育苗消毒剂使用,通过载体表面菌落杀灭试验,测定了10种消毒剂对聚苯乙烯泡沫苗盘、聚氯乙烯塑料膜和不锈钢刀片表面的青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacoarum,简称青枯菌）的杀灭效果。结果表明,除98％磷酸三钠300 mg/L和24％混脂酸铜80 mg/L对青枯菌几乎没有杀灭作用外,其余消毒剂具有较好的杀灭效果。在聚苯乙烯泡沫苗盘、聚氯乙烯塑料池膜和不锈钢刀片表面,8种消毒剂的90％致死剂量（EC₉₀）差异大,30％有效氯漂白粉为96.4～145.7 mg/L,7％有效氯次氯酸钠为53.7～215.3 mg/L,美国消毒剂为26.2～83.5 mg/L,98％硫酸铜·5H₂O 为93.8～114.0 mg/L; 98％高锰酸钾为14.8～163.0 mg/L;40％育宝为247.7～404.6 mg/L;10％二氧化氯（维绿）为185.7～472.9 mg/L;0.6％菌毒净为101.6～441.0 mg/L。消毒剂的使用剂量需要根据表面材料种类选择。     

大蒜提取液对烟草黑胫病和青枯病的防治效果初探

研究了大蒜提取液对烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var nicotianae)和青枯病菌(Ralstonia solanacearum)的抑制作用,并进一步测定了大蒜提取液防治烟草黑胫病的效果.结果表明,浓度大于1.5%的大蒜提取液对于烟草青枯病菌的抑菌半径与5000倍72%农用链霉素相当,浓度大于1.5%的大蒜提取液对烟草黑胫病菌的抑菌效果显著;而盆栽试验表明,只有稀释倍数小于10倍的大蒜提取液才对烟草黑胫病具有防治效果,而稀释倍数大于10倍的大蒜提取液对烟草黑胫病基本没有防治效果.     

烟草黑胫病菌拮抗放线菌LY18的分离筛选与鉴定

为了寻找对烟草黑胫病具有生防潜力的放线菌,笔者采用平板对峙法,从烟草黑胫病发病烟田健株根际土壤中,分离得到1株对烟草黑胫病菌具有显著拮抗效果的放线菌株LY18,其发酵液的无菌滤液对烟草黑胫病菌菌丝的抑制率达70%以上。电镜观察发现,抑菌圈周围的烟草黑胫病菌丝破裂、瘪陷。通过对LY18的形态观察、培养性状观察、生理生化测定结合16S rDNA序列分析,将该菌株鉴定为Streptomyces rajshahiensis。     

五种芳香植物精油对烟草疫霉的抑菌活性分析

为实现作物病害的绿色防控,从芳香植物源中筛选高效的杀菌活性成分,采用菌丝生长法测定了迷迭香精油、薰衣草精油、香叶天竺葵精油、香茅草精油和罗勒精油5种精油对烟草黑胫病病原烟草疫霉的抑菌活性。结果表明:当精油浓度达到225μg/m L时,5种精油对烟草疫霉均有显著的抑制作用,其中香茅草精油对烟草疫霉的抑制率均为100%。在熏蒸方式下,5种精油对烟草疫霉抑制的EC50值分别为317.8μg/m L、255.2μg/m L、151.0μg/m L、53.0μg/m L和142.8μg/m L。5种芳香植物精油对烟草疫霉菌丝生长形态均有一定的影响。研究结果表明香茅草精油具有作为防治烟草疫霉环境友好型杀菌剂的先导化合物的潜力。     

烟草黑胫病菌拮抗放线菌LY18的分离筛选与鉴定

为了寻找对烟草黑胫病具有生防潜力的放线菌,笔者采用平板对峙法,从烟草黑胫病发病烟田健株根际土壤中,分离得到1株对烟草黑胫病菌具有显著拮抗效果的放线菌株LY18,其发酵液的无菌滤液对烟草黑胫病菌菌丝的抑制率达70%以上。电镜观察发现,抑菌圈周围的烟草黑胫病菌丝破裂、瘪陷。通过对LY18的形态观察、培养性状观察、生理生化测定结合16S rDNA序列分析,将该菌株为鉴定Streptomyces rajshahiensis。     

烟草黑胫病生防茵筛选及防效初探

为筛选出烟草黑胫病生防菌,探索烟草黑胫病有效防治方法;采集了云南省9个地州29个县的141个采集土样,采用土壤稀释平板法进行微生物分离和平板对峙培养法进行筛选：分离筛选出280个对黑胫病菌有拮抗作用的菌株,其中抑菌半径大于17mm的拮抗菌有19株。盆栽和田间防效试验表明,以HJ01912表现最好,田间防效达到73．8％;综合以上结果得出：各生防菌株对黑胫病均表现一定的防效,有些生防菌田间防效与化学药剂相当,能有效控制烟草黑胫病。     

三种拮抗菌发酵液对香草兰疫病防效研究

通过盆栽和大田小区试验测定3种拮抗菌M10、WZ254和WZ159发酵液对香草兰疫病的防治效果。结果表明,3种发酵液对香草兰疫病均有一定防治效果,其中M10发酵液对香草兰疫病具有较好的保护和治疗作用．分别为70．49％、68．85％,与对照药剂25％甲霜·霜霉威WP1000倍液在0．01水平上相比差异不显著。WZ254和WZ159则防效较差。     

几种杀菌剂及其复配剂对烟草黑胫病菌的毒力测定

在室内培养条件下,采用生长速率法测定了3种杀菌剂及其复配剂对烟草黑胫病的抑菌效果。结果表明:药剂浓度与抑制作用呈显著的正相关关系,毒力回归方程的相关系数均在0.940 0以上;不同杀菌剂对烟草黑胫病菌的菌丝生长均表现出抑制作用,敌克松、银法利、烯酰吗啉的EC50分别为162.67、113.19、67.84 mg/L;银发利与烯酰吗啉1∶1比例复配增效作用明显,按1∶3比例复配略有增效,按3∶1比例为相加作用。     

茶园土壤拮抗放线菌的分离和筛选

以辣椒炭疽病菌（Colletotrichum capsici）为指示菌,采用平板对峙法,从茶园土壤中筛选到9株具有明显拮抗效果的放线菌,菌株抗菌谱较广,对茶白星病菌、烟草黑胫病菌、水稻纹枯病菌、黄瓜腐霉病菌有较好的拮抗作用．其中3株菌株发酵液对烟草黑胫病菌抑制作用较强,其抑制率分别达78．8％、61．2％、56．5％．