低温胁迫对4种薹草植物生理生化的影响

[目的]了解4种薹草植物在低温胁迫下生理生化的变化情况。[方法]以条穗薹草、仲氏薹草、栗褐薹草和三穗薹草为试材,吉祥草作对照,探讨不同植物在5种低温胁迫下生理生化指标的变化及抗寒性。[结果]随低温胁迫的加强,5种植物的相对电导率呈上升的趋势,其中粟褐薹草L％的温度最低,为-20．87℃;仲氏薹草和吉祥草的可溶性蛋白含量先小幅度上升后迅速下降,条穗薹草和三穗薹草的则一直下降,栗褐薹草在0—15℃温度处理内下降程度没有差异;条穗薹草、仲氏薹草和栗褐薹草SOD活性逐渐升高,三穗薹草和吉祥草的则先升高后下降;栗褐薹草的POD活性上升,而仲氏苔草和三穗薹草的则下降,条穗薹草和吉祥草的POD活性无显著变化。[结论]5种植物的抗寒能力由强到弱依次为栗褐薹草〉条穗薹草〉吉祥草=仲氏薹草〉三穗薹草。     

遮光对花叶细辛光合特性和荧光参数的影响

探讨了在遮光度为 4 3 %、70 %、95 %的 3种遮光处理条件下 ,花叶细辛叶片的叶绿素含量及比值、净光合速率日变化、光 -光响应曲线、叶绿素a荧光参数Fv/Fm和Fv/Fo的变化。结果表明 :随遮光度增加 ,叶绿素a +b和叶绿素b含量增加 ,叶绿素a/b降低 ;绝对光能利用效率增加 ;最大净光合速率、光补偿点、光饱和点、暗呼吸速率降低。 4 3 %和 70 %遮光处理条件下 ,净光合速率日变化呈“双峰”型 ,而 95 %遮光处理条件下呈“单峰”型 ;叶绿素a荧光参数Fv/Fm和Fv/Fo值在 4 3 %和 70 %遮光处理条件下差异不显著 ,而在 95 %遮光处理条件下却显著升高     

土壤干旱胁迫对4种薹草植物生理生化特性的影响

为发展节水型园林,提供抗旱性强的植物种类,试验以条穗薹草Carex nemostachys,仲氏薹草C. chungii,栗褐薹草C. brunnea和三穗薹草C. tristachya 为试材,采用盆栽干旱处理,研究在干旱胁迫下4种薹草的形态和生理生化的变化。结果表明：随着干旱胁迫加重,4种薹草的叶片逐渐卷曲、变黄,相对电导率不断上升。干旱胁迫30 d后,栗褐薹草和仲氏薹草的相对电导率为50%,而条穗薹草达到了90%。在干旱胁迫期间,4种薹草的可溶性糖、游离脯氨酸质量分数和保护酶活性的变化存在着显著差异（P＜0.05）,条穗薹草和三穗薹草呈先升后降趋势,而栗褐薹草和仲氏薹草呈不断上升的趋势。与对照相比,栗褐薹草和仲氏薹草的可溶性糖分别增加了435%和491%,POD活性升高了93%和102%,SOD活性升高了82%和79%。通过隶属函数法对4种薹草的抗旱性进行综合分析,得出其抗旱性强弱为：栗褐薹草＞仲氏薹草＞三穗薹草＞条穗薹草。图5表4参18     

遮阴条件下大叶竹节树光合特性和荧光参数的变化

为研究大叶竹节树对弱光的适应性,通过盆栽实验,分析了不同程度(0%,25%,50%,75%)遮阴条件下大叶竹节树幼苗光合特性和荧光参数的变化.结果表明,随着遮阴程度增加,叶片净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)、水分利用效率(WUE)和光合有效辐射(PAR)随之减小,而胞间CO2浓度(Ci)随之增大,说明非气孔制限因素是大叶竹节树光合速率下降的主要原因.各遮阴条件下叶片总叶绿素(a+b)、叶绿素a和叶绿素b质量比均显著高于全光照,且随遮阴程度的增加叶绿素质量比逐渐上升,而叶绿素a/b值则随着遮阴程度的增强而下降.叶绿素荧光参数PSⅡ原初光能转化效率(Fv/Fm)和潜在活性(Fv/Fo)的日变化呈单谷曲线;各遮阴条件下Fv/Fm和Fv/Fo值均高于全光照,且与遮阴程度正相关,说明大叶竹节树是一种耐荫性很强的植物.在遮阴条件下,光补偿点、光饱和点、净光合速率、暗呼吸速率和叶绿素a/b值降低,而叶绿素a和b质量比、光能利用率、Fv/Fm以及Fv/Fo值提高,从而增强弱光条件下的生长能力.     

模拟酸雨与光强处理对芒萁叶绿素及荧光特性的影响

以盆栽芒萁Dicranopteris dichotoma为研究对象,通过人工遮阳及设置不同p H值的模拟酸雨复合处理的方式,探讨4种光环境(全光,遮光30%,遮光50%,遮光80%)和4种酸液(p H 3.0,p H 4.0,p H 5.6,p H 7.0)下芒萁色素质量分数及叶绿素荧光参数的差异。结果表明:1p H 4.0和p H 5.6处理提高了芒萁PSⅡ实际光化学效率(Yield),PSⅡ光化学效率(Fv/Fm),PSⅡ潜在活性(Fv/Fo)以及叶绿素a,叶绿素b,总叶绿素(a+b)和类胡萝卜素的质量分数,p H 3.0处理降低了荧光参数和色素质量分数。2随着遮光程度的增加,芒萁荧光参数Yield,Fv/Fm和Fv/Fo值增大,Yield在80%和30%遮光处理间均有显著差异(P0.05),叶绿素a,叶绿素b,总叶绿素(a+b)和类胡萝卜素的质量分数亦呈现显著性增大趋势(P0.05)。同时光照强度对芒萁色素质量分数和荧光参数的影响大于酸雨胁迫,且无显著性交互作用。因此,在3种遮光处理下,p H 5.6和p H 4.0的酸液对芒萁叶绿素质量分数及荧光参数有促进作用;而在同一酸液处理下,随遮光程度增加芒萁叶绿素质量分数及荧光参数值趋于增大。     

夏季遮光对川赤芍光合特性的影响

以川赤芍（Paeonia veitchii）为材料,研究了泰安地区夏季在露地栽培条件下不同程度遮光对川赤芍光合作用以及叶绿素荧光特性的影响。结果显示,自然光照下,川赤芍Pn在正午PAR达到最大时出现明显降低,即＂光合午休＂现象;Fv/Fm、Fm也降到日变化的最低值。进行遮光处理的两组川赤芍,Pn均未出现＂午休＂,Fv/Fm、Fm正午时下降幅度不大,日变化曲线相对平稳。尤其遮光30%组,Pn值一天中都保持较高水平,叶绿素总量及叶绿素b相对含量均高于其他两组。而遮光70%条件下,一天中Pn总是处于最低,叶绿素总量反而低于遮光30%条件下的川赤芍,且其叶片薄、黄绿色。综合比较,遮光30%利于川赤芍夏季生长。     

遮阴对红叶樱花光合速率和叶绿素荧光参数的影响

以一年生红叶樱花嫁接苗为试验材料,研究了24%、50%、85%遮阴处理和全光照处理对红叶樱花叶片色素含量、净光合速率以及叶绿素荧光参数的影响。结果表明,随着遮光率的增高,叶片叶绿素a、叶绿素b含量增加,叶绿素a/b减小;类胡萝卜素含量变化不大;花色苷含量减少。叶片净光合速率(Pn)、初始荧光(Fo)、最大荧光(Fm)、可变荧光(Fv)、PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)、PSⅡ潜在活性(Fv/Fo)和光化学猝灭系数(qP)增加,但非光化学猝灭系数(q N)降低。全光照条件下,Pn日变化呈双峰曲线,而24%、50%、85%遮阴条件下呈单峰曲线。红叶樱花作为园林观叶植物,遮阴降低了其花色苷的含量,因此在造景搭配时应尽量避免遮阴。     

不同光照强度对紫鸭跖草色素及叶绿素荧光的影响

为紫鸭跖草的栽培繁育和园林绿化应用上适宜光照强度的选择提供理论依据，通过MINI-PAM-Ⅱ超便携式调制叶绿素荧光仪研究100%光照、65%光照、30%光照及5%光照4种光照强度处理对紫鸭跖草叶绿素含量和叶绿素荧光参数的影响，探讨其对遮光环境的适应性。结果表明：4个光照处理下紫鸭跖草叶片的叶绿素a含量、叶绿素b含量及叶绿素总含量均随着处理时间延长呈下降趋势，60d时，叶绿素含量下降幅度：30%光照和65%光照较5%光照和100%光照大，但各处理间差异不显著；紫鸭跖草的Fm’、Fv/Fm和Fm/Fo均随着遮光程度的增大而增加，遮光处理提高其光化学效率；紫鸭跖草受到不同程度的光抑制，抑制程度依次为100%＞5%＞30%＞65%。100%光照下受到严重光抑制，30%光照和65%光照较适宜紫鸭跖草生长，65%光照下紫鸭跖草的观赏性最好。     

遮光对紫叶加拿大紫荆光合速率及叶绿素荧光参数的影响

研究了遮光30%、60%、80%和全光照处理(CK)对紫叶加拿大紫荆(Cercis canadensis‘Forest Pansy’)叶面积、叶片色素含量、净光合速率以及叶绿素荧光参数的影响。结果表明:随着遮光度增加,叶片色素含量增加,叶绿素a/b减小;叶片净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)下降,Pn、Tr日变化均呈单峰曲线;叶绿素荧光参数Fv/Fm和Fv/Fo随着遮光程度的增加而降低。说明紫叶加拿大紫荆有一定的耐荫性。     

水分胁迫对小麦叶绿素a荧光参数的影响

利用植物效能分析仪,研究水分胁迫对冬小麦叶绿素a荧光动力学参数的影响.结果表明,水分胁迫下冬小麦叶绿素a荧光动力学参数中,可变荧光(Fv)下降,光系统Ⅱ(PSⅡ)原初光能转换效率(Fv/Fm)和PSⅡ的潜在活性(Fv/F0)降低.Fv,Fv/Fm和Fv/F0在水分胁迫各处理的变化趋势为N＞L.随着水分胁迫强度的加剧,Fv,Fv/Fm和Fv/F0值也明显变小.     

枇杷叶片越冬期光合色素及矿质营养含量的变化

以枇杷品种解放钟为材料,对越冬期(2002年11月至2003年2月)叶片光合色素及矿质营养含量的变化进行了研究.结果表明,越冬过程中解放钟枇杷幼叶、成熟叶及老叶叶绿素b含量逐渐下降,而叶绿素a、叶绿素a b及类胡萝卜素(Car)含量先增加后下降,2月份其含量降至最低.11月份至翌年1月份叶片叶绿素a、叶绿素b、叶绿素a b及Car含量为:老叶>成熟叶>幼叶;2月份叶片叶绿素a b含量及叶绿素a/b表现为:成熟叶>老叶>幼叶.幼叶叶绿素a b含量大幅度降低是叶绿素a含量下降的结果.叶片N、P含量表现为先上升后下降,至2月份降至最低;成熟叶及老叶K含量保持相对稳定;叶片中Ca、Fe含量呈增加趋势,且老叶>成熟叶>幼叶;而幼叶Mg含量略高于老叶和成熟叶.枇杷成熟叶和老叶光合色素及叶片N、P、K、Ca、Fe含量的变化可能是其对冬季适应性的生理反应.     

NaCl胁迫对金银花叶片光合色素含量的影响

通过盆栽试验对不同NaCl浓度(0%,0.3%,0.6%,0.9%,1.2%)胁迫下的金银花的表观特征进行了观察并对其叶片的叶绿素a含量(Chla)、叶绿素b含量(Chlb)、叶绿素A与叶绿素B含量的比值(Chla/Chlb)、类胡萝卜素含量(Car)、叶绿素总含量(Chl)及类胡萝卜素与叶绿素含量的比值(Car/Chl)进行了测定分析,结果显示:①在盐胁迫下,金银花叶片会发生萎蔫现象,这是对盐胁迫的一种表观响应。②金银花叶片中Chla、Chlb及Chl均呈现出在处理后的第1天随盐分梯度的增加而下降的趋势,在处理后期表现出随盐分梯度的增加而增加的变化趋势,并且这种变化趋势逐步趋于稳定。方差分析显示未达显著水平(P<0.05)。③金银花叶片中Car及Car/Chl在3次处理中均表现出随盐分梯度的增加而增加。研究表明,金银花对盐胁迫有一定的耐性。     

南疆引进的52份菊芋品种资源叶片生理性状主成分和聚类分析

为菊芋种质资源评价、分类、利用、育种亲本选配、引种提供参考,对53 个菊芋材料叶片生理生化指标进行相关、主成分和聚类分析。结果表明：淀粉含量和可溶性糖含量变异系数较大,酸性转化酶活性、SLW和Chl a/b 的变异系数较小。菊芋叶片生理生化指标存在着不同程度的相关性。主成分分析将这些因子分为5 个主成分,其累计贡献率达90.301%。5 个主成分归为光合能力、光合产物、耐荫性、类胡萝卜素的保护程度、酶活性的综合指标。聚类分析将资源聚为5 类,第Ⅰ类菊芋叶片淀粉和可溶性糖含量较低;第Ⅱ类Chl a/b较高;第Ⅲ类酸性转化酶、可溶性蛋白质含量高;第Ⅳ类Car较高;第Ⅴ类Chl a、Chl b、Chl (a+b)、SLW、淀粉含量、可溶性糖含量较高。筛选出5 个今后示范推广的品种,即‘北纯29’、‘北纯32’、‘北纯15’、‘北纯52’和‘南纯56’。     

硒对铜胁迫酿酒葡萄幼苗生理特性的影响

[目的]探讨亚硒酸钠(Na2SeO3)对铜胁迫酿酒葡萄幼苗生理特性的影响,为揭示硒元素缓解酿酒葡萄幼苗铜胁迫作用提供参考依据.[方法]以宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄产区淡灰钙土在温室中盆栽酿酒葡萄赤霞珠,分析添加外源硒(1.0mg/kg)对铜胁迫(300.0mg/kg)酿酒葡萄幼苗叶片光合色素含量、抗氧化酶[过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)]活性、丙二醛(MDA)和可溶性蛋白含量的影响.[结果]与对照(CK)相比,1.0mg/kg硒处理能提高酿酒葡萄幼苗叶片的叶绿素a(Chla)、叶绿素b(Chlb)和总叶绿素(Chla+b)含量及POD和CAT活性,降低MDA含量,但对SOD活性和可溶性蛋白含量无显著影响(P>0.05);300.0mg/kg铜胁迫可显著降低葡萄幼苗叶片的叶绿素(Chl)和可溶性蛋白含量(P<0.05,下同),提高Chla/b、抗氧化酶活性及MDA含量;1.0mg/kg硒+300.0mg/kg铜处理的葡萄幼苗叶片Chl和可溶性蛋白含量与CK相当,但均高于300.0mg/kg铜胁迫处理,SOD、POD和CAT活性比300.0mg/kg铜胁迫处理略有降低,MAD含量显著低于300.0mg/kg铜胁迫处理.[结论]铜胁迫条件下,低浓度(1.0mg/kg)硒元素能提高酿酒葡萄幼苗对逆境的耐受力,提高叶片抗氧化酶活性,降低叶片细胞膜质过氧化程度,进而缓解铜对葡萄幼苗的毒害作用.     

不同光环境下小粒咖啡的生理生态特征

[目的]探究小粒咖啡对不同光照环境的生理生态适应机制,为小粒咖啡的高产和规范化栽培提供科学依据.[方法]对比100%、36%和4%光环境下小粒咖啡叶片的最大净光合速率(Pmax)、荧光参数、单位干重氮含量(N)、构建消耗(CC)、单位重量叶绿素(Chl)和类胡萝卜素(Car)含量及形态解剖结构特征,分析小粒咖啡对不同光环境的适应性.[结果]随着光照增强,小粒咖啡叶片的Pmax和非光化学猝灭系数(NPQ)增加,正午光化学效率(Fv/Fm)显著降低(P<0.05);100%光环境下小粒咖啡叶片的N和CC投入较多,Pmax较高,光合氮利用效率(PNUE)和能量利用效率(PEUE)较高;随着光照增强,Chl/Car、叶片厚度(LT)、组织结构紧密度(MTR)、气孔面积指数(SPI)和小脉密度(VD)增加,但比叶面积(SLA)和叶片组织结构疏松度(MLR)减小.[结论]小粒咖啡是需遮荫栽培的经济作物,对强光较敏感,可通过调整叶片生理生态特征以适应光照环境变化,减少强光对其光合器官的损伤.     

薇甘菊光能利用及叶绿素合成在不同光照强度下的响应

【目的】 光是植物进行光合作用的重要生态因素之一,光合色素对光的捕获和利用影响植物的生长发育进程,进而影响其在自然生态系统中的生存和适合度。明确薇甘菊（Mikania micrantha）光合生理特征与叶绿素生物合成途径的基因表达对不同光照强度的响应,以及薇甘菊光合能量与叶绿素转化的相互关系,为解析薇甘菊“快速生长”提供生理生态学证据。【方法】 以薇甘菊为研究对象,采用乙醇浸提法测定不同光照强度（0、20%、40%、100%）下各光合色素含量,分析其叶绿素a和b比值（Chl a/b）的变化规律,比较不同光合途径代表植物（C3、C4和CAM）光合特性;利用微量法和蒽酮比色法分别测定上述光照强度下薇甘菊叶片组织中ATP和淀粉含量;构建不同光照强度下薇甘菊cDNA文库并开展转录组测序;利用OrthoFinder、Blastp、HISAT2、StringTie和R包等生物信息学软件分析不同光照强度变化下薇甘菊叶绿素合成和捕光复合体（LHC）基因表达模式,阐述叶绿素合成途径相关基因表达变化规律。【结果】 在100%的光照强度下,薇甘菊叶绿素b和类胡萝卜素含量以及Chl a/b与C4植物玉米相近,并且薇甘菊和玉米叶片中Chl a/b显著高于C3（水稻和番茄）和CAM（芦荟）植物。不同光照强度下的薇甘菊叶片中叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量变化不显著,但Chl a/b呈现出随光照强度增加而显著增加的趋势;40%和100%光照强度下,薇甘菊叶片中ATP含量变化幅度较小,而淀粉含量随光照强度上升显著升高;当光照强度为0时淀粉含量急剧下降,此时ATP含量呈现升高趋势;薇甘菊叶绿素生物合成中HEMA、CHLH、CRD1和CAO基因家族的基因表达量受光诱导调控,高光照强度下捕光复合体（LHC）基因的表达量较高。【结论】 不同光照强度下薇甘菊叶片可能通过调节叶绿素a和b的合成,调控淀粉和ATP的相互转化,奠定了薇甘菊较高光合速率和较强光适应能力的基础。     

3种拟除虫菊酯类杀虫剂对小白菜幼苗叶绿素和类胡萝卜素含量的影响

[目的]探究拟除虫菊酯类杀虫剂对小白菜叶绿素含量的影响。[方法]在人工气候培养箱中培育小白菜幼苗,至三叶一心时,用微量注射器分别用10μl不同浓度的氟氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、溴氰菊酯处理第3片叶片,24 h后测定小白菜幼苗叶绿素和类胡萝卜素的含量。[结果]氯氟氰菊酯和稀释500、1 000倍的溴氰菊酯导致小白菜幼苗叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总量、类胡萝卜素含量、叶绿素a/b值上升;氟氯氰菊酯和稀释1 500倍的溴氰菊酯则导致小白菜幼苗叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总量、类胡萝卜素含量下降,叶绿素a/b值上升。[结论]氯氟氰菊酯和高浓度的溴氰菊酯处理对小白菜生长有促进作用,氟氯氰菊酯和低浓度的溴氰菊酯处理对小白菜生长有胁迫作用。     

弱光条件下东方百合的生长发育及光合特性研究

为了探明弱光条件下东方百合的生长发育及光合特性,为我国北方地区东方百合切花的耐弱光品种选育提供依据,以东方百合品种‘Marcopolo’、‘Tiber’、‘Constanta’和‘Acapulco’为试验材料,在整个生长季对其进行不同遮光处理(正常光照、50%遮光、75%遮光),测定不同光强下各品种光合参数及生长发育指标。结果表明:75%遮光条件下东方百合各品种的净光合速率(Pn)、光补偿点(LCP)、光饱和点(LSP)、暗呼吸速率(Rd)降低,表观量子效率(AQY)下降,叶绿素含量增高,叶绿素a与叶绿素b的比值降低,比叶质量减小,叶面积增大,切花观赏品质有所下降;不同百合品种的耐弱光性不同,弱光下‘Marcopolo’的LCP、Rd较低,比叶质量较小,AQY变化幅度小,表现出较强的耐弱光性;相反地,‘Acapulco’则对弱光较敏感。     

一年生三七绿紫过渡地上茎黄金分割式紫化与其色素含量纵向变化的关系

为探究三七绿紫过渡地上茎黄金分割式紫化与其色素含量纵向变化的关系,用分光光度法检测了云南文山一年生三七植株绿紫过渡地上茎各茎段的叶绿素(Chl)、类胡萝卜素(Car)和总花色苷(TA)的含量。结果表明:从茎顶向茎基,茎段的叶绿素a(Chl a)、b(Chl b)和总叶绿素[Chl(a+b)]含量均表现为"降—升—降三段式"曲线,叶绿素a和b的含量之比(Chl a/b)大致呈一不对称的"双峰"曲线,Car含量表现为"不规则波动—宽V型—阶梯型骤降三段式"曲线,总花色苷含量(TAC)、TA/Chl a、TA/Chl b、TA/Chl(a+b)和TA/(Chl+Car)均表现为单峰曲线,Chl(a+b)/Car大致表现为一"V-W形"曲线。在茎中上部的黄金分割点处,Chl a、Chl b和Chl(a+b)、Chl a/b均出现低值,而TAC、TA/Chl a、TA/Chl b、TA/Chl(a+b)和TA/(Chl+Car)却均出现最高值。在茎基部,Chl、Car和TA含量都急剧下降。不同茎段Chl a、Chl b、Chl(a+b)和Car含量之间的差异均达到极显著水平,而TAC之间的差异仅达到显著水平;此外,不同茎段Chl a、Chl b、Chl(a+b)、Car和TA的含量纵向变化之间呈不同的正相关性。所以,三七绿紫过渡地上茎的紫色源于其TA相对于Chl和Car的含量优势,但Car对茎段紫色的制约效应微小;茎的黄金分割式紫化既取决于茎的TAC,也取决于茎的TA/Chl a、TA/Chl b、TA/Chl(a+b)和TA/(Chl+Car)。     

25种南亚热带植物耐阴性的初步研究

该文研究了南亚热带不同生活型植物的耐阴性,为城市绿化植物选择配置提供实验依据.选取25种南亚热带植物的盆栽幼苗作为试验材料,其种类包括目前正在推广的园林植物和采自森林的灌木和地被植物,用LI-6200光合作用测定系统等仪器测定各种植物叶片的形态特征、光合作用和光合-光响应曲线,包括叶片厚度(LT)、叶面积(LA)、比叶面积(SLA)、含水量(LWC)、叶绿素含量(Chl)、叶绿素a/b值(Chl a/b)、光合速率(Pn)、暗呼吸速率(Rd)、光补偿点(LCP)、光饱和点(LSP)和表观量子效率(Φ)等生理指标,并对测定结果进行方差分析、相关分析和聚类分析,比较分析植物的耐阴程度.结果表明,25种植物可分为3类: 第1类为耐阴性较强的硬枝老鸭嘴、百两金、野芋、桢桐、板蓝根、狮子尾、红背桂、虾脊兰、宫粉郁金和黑骨蕨等10种,第2类为耐阴性中等的石柑子、大花鸳鸯茉莉、北江砂仁、崖爬藤、合果芋和华南胡椒等6种,第3类为耐阴性相对较弱的可爱花、鸡爪兰、咖啡、扇蕨、棕叶九尾草、草果、千年健、大叶仙茅和虎舌红等9种.Pn与Chl a/b值和Rd呈显著的正相关,与Chlb呈显著的负相关;LCP与LSP呈显著正相关;Chl b与Chl a和Chl a+b呈极其显著正相关,与Chl a/b呈显著负相关;SLA与LA呈显著正相关,与LWC呈极其显著正相关.