基于环境DNA的进口凡纳滨对虾携带水传播虾肝肠胞虫风险评估

【目的】基于环境DNA（eDNA）分析进口凡纳滨对虾携带水传播和运输虾肝肠胞虫（EHP）的风险性,为环境水中疫病监测和风险评估提供参考依据。【方法】取60批进口亲虾携带水用0.45 μm硝酸纤维素膜过滤并提取eDNA,挑取10个携带水样滤膜eDNA用于凡纳滨对虾物种特异性鉴定,采用实时荧光定量PCR对所有携带水样滤膜进行EHP检测;同时以EHP阳性进口亲虾携带水开展人工感染试验,感染10 d后分别取养殖水样及虾体进行EHP检测;对进口亲虾携带水EHP阳性滤膜进行宏基因组测序分析,采用Krona对物种注释结果进行可视化展示,并将宏基因组测序分析结果与NCBI已公布的EHP氨基酸序列进行BLAST比对分析。【结果】进口亲虾携带水检测结果显示,成功从10个携带水滤膜eDNA扩增出凡纳滨对虾347 bp的特异目的片段,与原始序列片段的相似性达100%;在60批进口亲虾携带水样品中有2批携带水呈EHP阳性。EHP阳性进口亲虾携带水能成功感染虾苗组,且在虾苗肝胰腺组织分离获得成熟的EHP孢子,但亲虾组的虾体EHP检测呈阴性。宏基因组测序得到EHP的物种相对丰度值占真核动物物种的0.7%;与NCBI已公布的EHP氨基酸序列进行BLAST比对,结果获得213个同源EHP氨基酸序列;从进口亲虾携带水样品中分离鉴定获得的EHP与已报道物种黄道蟹肠孢虫（Enterospora canceri）和毕氏肠胞虫（Enterocytozoon bieneusi）的亲缘关系较近,对应的氨基酸序列相似性为别为83%和81%。【结论】进口凡纳滨对虾亲虾携带水具有传播EHP的可能性,即仅针对亲虾虾体进行EHP检测具有不完全性。eDNA检测可用来补充传统的虾体疫病监测方法,作为水环境疫病检测和风险评估的重要手段。     

越冬亲虾细挑选

为保证越冬亲虾的质量，提高亲虾越冬的成活率，对留用越冬的亲虾，一般采取初选和复选2道程序。初选是在起捕虾的现场进行，根据选择亲虾的质量要求，挑选数量较多的亲虾，放在室内水池暂养一段时间，并在暂养过程中逐渐淘汰不合格的亲虾，在放入越冬池之前再进行1次复选。选择亲虾可参照下列标准：     

如何挑选越冬亲虾

为保证越冬亲虾的质量，提高亲虾越冬的成活率，对留用越冬的亲虾，一般采取初选和复选两道程序。初选是在起捕虾的现场进行．根据选择亲虾的质量要求，挑选数量较多的亲虾。放在室内水池暂养一段时间，并在暂养过程中逐渐淘汰不合格的亲虾，     

对虾白斑综合症的研究进展

对虾白斑综合症由一种大型无包涵体杆状病毒引起，是对养虾业构成严重威胁的一种病毒。研究资料表明，世界各地的病毒分离物具有很高的同源性，该病目前尚无很好的防治方法。采用PCR方法检验亲虾，选择健康亲虾产卵、孵化，放养健康虾苗以及加强管理对提高养殖成功率有一定帮助。     

舟山蚂蚁岛双齿围沙蚕Perinereis aibuhitensis Grube生态的初步研究

双齿围沙蚕Perinereis aibuhitensis Grube是生长在海滩及河口的一种环节动物。它体大肉肥，最大体长可达300毫米(图版工1)。沙蚕不仅可作钓饵，而且是鱼、虾等的天然饵料。近年来，随着养虾业的迅速发展，它已被作为亲虾的优质活饵料。近有报道，亲虾不仅嗜食沙蚕，而且能防止性腺的退化，同时，沙蚕又是外贸出口的对象。可见沙蚕的经济价值较高，因而对沙蚕的研究就显得十分重要。     

3种来源的野生斑节对虾携带病毒情况调查

利用PCR方法,对2008年取自3个斑节对虾主产地（中国、泰国、非洲）的野生斑节对虾亲虾进行主要病毒病筛查。在所检测的210例野生亲虾样本中,均发现携带白斑综合征病毒（WSSV）、传染性皮下及造血组织坏死病毒（IHHNV）或斑节对虾杆状病毒（MBV）的阳性样本,其中泰国来源的斑节对虾亲虾WSSV携带率最高,达到89.8%,而中国来源的斑节对虾亲虾IHHNV携带率最高,为8.8%。12例样本同时检测出WSSV和IHHNV（阳性率为5.7%）。该结果揭示3种来源的斑节对虾亲虾普遍携带WSSV和IHHNV,其中WSSV仍然是感染斑节对虾的主要病原。调查结果增进了对斑节对虾主产区野生亲虾健康状况的了解,并在一定程度上揭示了WSSV感染的新规律。     

斑节对虾亲虾的越冬与培育

本文报导了斑节对虾亲虾越冬和培育的有关生态条件。亲虾越冬时的水温应维持在20℃左右，在这种条件下存活率达80%以上。通过切除亲虾单侧眼柄性腺可以诱导成熟。手术亲虾的存活率达89．6%，成活率达41.3％．     

不同饵料对脊尾白虾亲虾性腺发育的影响

通过比较投喂试验研究了水丝蚓、沙蚕、鲢鱼肉、牡蛎肉、配合饲料、鲢鱼肉+水丝蚓+牡蛎肉(1∶1∶1)及水丝蚓+沙蚕+牡蛎肉(1∶1∶1)对体质量约3 g的脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)亲虾性腺指数、性腺与肝胰腺比及产卵量等的影响。结果表明,水丝蚓+沙蚕+牡蛎肉混合组亲虾性腺与肝胰腺比为1. 425,性腺指数为2. 342,均高于配合饲料组亲虾;水丝蚓+沙蚕+牡蛎肉混合组(2 693粒/尾)亲虾产卵量明显高于鲢鱼肉、牡蛎肉和配合饲料组。表明在脊尾白虾亲虾培育过程中,水丝蚓、沙蚕、牡蛎肉混合作为饵料有利于促进脊尾白虾亲虾性腺的发育和成熟。     

一起罗氏沼虾镰刀菌病的诊断

南宁市郊某一虾苗场的罗氏沼虾亲虾，发生一种以鳃瓣呈暗褐色，外壳和附肢呈现黑褐色斑点溃疡为主要特征的疾病，通过对发病情况调查、临床症状观察、病原分离培养、真菌学检查以分离回归虾体试验等，证实是由于镰刀菌感染所致。该菌对孔雀石绿和三氯异氰尿酸敏感，分别用１００ｐｐｍｍ和１０ｐｐｍ浓度在２小时内可杀灭其分子孢子。     

罗氏沼虾人工繁殖及幼体培育技术研究

在实验室内，进行了罗氏沼虾的亲虾超冬，抱卵虾的孵化、幼体培育及仔虾淡化等人工繁育苗种技术的试验研究。其结果为在人为控制条件下，亲虾越冬存少４６．３％、受业臃８４．６％，受精亲虾的繁殖率为８１．８％，幼体育成率为２４．６％，在０．５ｍ＾３的水体中共获谈化虾苗６４０６尾。     

富硒虾生产工艺研究

探究硒元素对南美白对虾生长性能和免疫活性的影响。在动物饲料中添加富硒酵母,配制成不同浓度的有机硒饲料,饲养后检测动物体的生理指标和抗氧化酶的活性,是研究硒元素对动物体免疫活性影响的主要实验方法。主要研究成果如下：     

虾废弃物中蛋白质的资源化利用

概述了国内外虾废弃物蛋白资源化利用的情况及工艺研发的现状,介绍了虾废弃物中蛋白质的存在形式、化学组成和微观结构,详细阐述了虾废弃物蛋白的等电点沉淀法提取以及化学法与酶法水解虾废弃物蛋白,利用微生物发酵转化虾废弃物,为实现虾废弃物的资源化、无害化利用提供了研究依据。     

枯草芽孢杆菌在对虾生产中的应用

枯草芽孢杆菌作为饲料添加剂可改善养殖水质环境,增强对虾体质和提高对虾生产性能。文章就枯草芽孢杆菌在对虾生产中的应用作以简述。     

诺氟沙星在淡水青虾体内药物代谢动力学研究

在（26±1）℃的水温条件下,青虾一次性肌肉注射25mg／kg诺氟沙星后,用反相高效液相色谱法测定青虾血淋巴和肌肉组织中诺氟沙星含量。青虾血淋巴药一时曲线和肌肉药一时曲线均可以用二室开放模型来描述,诺氟沙星在青虾血淋巴液中的主要药动学参数为：分布相半衰期t1/α为1．66h,消除相半衰期t1/β为1．69h,达峰时间T（Peak）为1．82h,峰浓度C（max）为6．0081μg/mL,曲下面积AUC为30．75μg·mL^-1·h^-1,吸收相半衰期t1/2ka为1．66h。肌肉中的主要药动学参数为：分布相半衰期t1/ks为0．08h,消除相半衰期t1/2β为4．42h,达峰时间狄Peak）为0．03h,峰浓度C（max）为16．72μg/mL,曲下面积AUC为12．34μg·mL^-1·h^-1,吸收相半衰期t1/2a为0．08h。结果表明青虾肌注诺氟沙星后,能比较迅速的被吸收,并且在组织中维持较高的药物浓度。     

1株乳酸菌在凡纳滨对虾养殖中的应用效果

利用从对虾消化道分离出的1株乳酸菌优势菌株HN3,分别对哈维氏弧菌和副溶血弧菌进行体外拮抗实验,同时通过乳酸菌拌料投喂的方式开展凡纳滨对虾的养殖试验。结果表明:乳酸菌液及中和酸性后的胞外液均对2种弧菌有显著的抑制效果(P0.05);乳酸菌拌料投喂能显著提高对虾的养殖存活率、日增体质量和特定增长率(P0.05);对虾消化道和养殖水体中的乳酸菌和总细菌数量大幅增加,弧菌数量显著降低(P0.05),其中,以乳酸菌添加剂量4×106~5×106cfu·g-1的综合养殖效果最佳。此株乳酸菌适应对虾消化道的环境并能定植,对抑制对虾消化道弧菌数量、优化体内菌群组成和改善养殖环境有重要的作用。     

对虾早期死亡综合症的研究进展

早期死亡综合症(Early mortality syndrome,EMS)从2009年发现至今已给我国乃至全世界的对虾养殖业造成巨大的损失.然而,其具体致病原和致病机理并未研究透彻,国内外学术界的主流观点认为EMS的致病原是副溶血弧菌.目前,关于EMS疾病的相关防治技术仍以预防为主.从EMS的危害、特征、病理研究和防治等方面综述了对虾早期死亡综合症的研究进展.     

β-葡聚糖及其在对虾生产中的应用

β-葡聚糖作为饲料添加剂可提高对虾免疫力,增强对虾体质和改善对虾生产性能。文章就β-葡聚糖的营养特性及其在对虾生产中的应用作一简述。     

虾类专题学习网站的建设

通过“虾类专题学习网站建设”的个素制作，介绍了虾类专题学习网站的结构设计、网站管理系统的功能设计以及教育资源的技术要求。     

虾壳中虾青素提取工艺条件的确定及优化

为探讨南美白对虾虾壳中天然虾青素的提取工艺,试验通过比较不同的前处理方式、溶剂类型及提取次数对提取率的影响,确定酸浸泡脱钙前处理、乙醇溶剂提取及二次浸提等工艺技术。进一步通过单因素试验和正交试验进行条件优化,获得乙醇提取虾青素的最佳工艺参数为料液比1：10、pH3.0、温度60℃、时间3.5 h。在此条件下,虾类加工副产物中的天然虾青素提取率为271.3 μg·g-1。