应用响应面法优化软枣猕猴桃的一步成苗培养基

以软枣猕猴桃带芽茎段为外植体,利用响应面法对其组培一步成苗试验进行优化。在单因素的试验基础上,根据Box-Behnken的中心组合试验设计原理,以6-BA、NAA、IBA的浓度为试验因子,植株再生频率为响应值,进行3因素3水平的试验设计。结果表明:3因素对植株再生频率的影响力大小为6-BA的浓度IBA的浓度NAA的浓度,最终得到的二元回归方程显示,一步成苗的培养基优化结果为MS+6-BA 2.42 mg/L+NAA 0.27 mg/L+IBA 0.32 mg/L。在此条件下,最佳再生频率预测值为4.23,实际操作结果为4.13。     

软枣猕猴桃优良品系“2008-07”组织培养繁殖技术研究

【目的】以软枣猕猴桃优良品系"2008-07"嫩茎段为外植体,研究其组织培养繁育技术。【方法】采用均匀试验设计,通过组培快繁试验,对影响软枣猕猴桃优良品系"2008-07"嫩茎段腋芽萌发生长和生根的6-BA、IAA、IBA等生长调节物质的作用及其用量进行分析与筛选。【结果】适宜软枣猕猴桃嫩茎段腋芽萌发生长、生根的培养基为基本培养基+0.12mg/L 6-BA+0.04mg/L IAA,在此条件下植株再生率为98.7%。再生植株的移栽成活率达99.5%以上。【结论】建立了软枣猕猴桃优良品系"2008-07"嫩茎段组培快繁育苗体系,该体系适合于软枣猕猴桃种苗的工厂化生产。     

软枣猕猴桃离体快速繁殖技术

以软枣猕猴桃(Actinidia arguta)枝条萌发的幼芽为外植体,以MS为基础培养基,添加不同质量浓度的细胞分裂素6-BA、生长素NAA和IBA,探索了软枣猕猴桃的离体快速繁殖技术。结果表明,软枣猕猴桃丛生芽增殖的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+30 g/L蔗糖,p H为5.8~6.0,在此条件下,其平均增殖系数为4.69,且诱导的无菌苗健壮;最适生根培养基为1/2MS+0.4 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+2.0 g/L活性炭,生根率达100%,且根系健壮、数量繁多。     

青天葵组织培养条件优化

分别以MS、1/2MS为基本培养基,采用正交试验研究植物生长调节剂对青天葵根状茎繁殖和新球茎诱导的影响,进而优化青天葵组织培养繁殖技术。结果表明:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L IAA利于根状茎增殖,增殖倍数为6.5;MS+1.5 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA适于诱导新球茎获得再生植株,诱导系数为11.5,球茎移栽发芽成活率达到90%。     

细叶百合鳞片诱导与遗传转化组培体系的建立

为扩大细叶百合(Lilium pumilun)在生物技术领域的应用,本研究以细叶百合鳞片为外植体,MS培养基为基础培养基,附加不同种类和浓度的植物生长调节物质(6-BA,NAA,IAA,IBA)诱导丛生芽及再生植株,对体系中外植体消毒时间及各阶段培养基的激素配比进行了研究.结果表明:0.1％氯化汞溶液最佳灭菌时间为8 min;最佳诱导培养基为MS+ 6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.1 mg/L;最佳继代培养基为MS+ 6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L;最佳增殖培养基为MS +6-BA 0.1 mg/L+ NAA 0.5 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+ IAA0.1 mg/L+ IBA 0.1 mg/L.     

海沃德猕猴桃带芽茎段的组织培养快繁技术

以海沃德猕猴桃带芽茎段为外植体直接诱导再生芽,对继代增殖和生根等培养基进行筛选试验,建立海沃德猕猴桃组织培养快繁技术。结果表明:75%乙醇30 s+0.1%氯化汞8 min为最佳消毒方法;诱导再生芽培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;继代增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,其增殖系数为3.60;生根培养基为1/2MS+0.7 mg/L IBA,生根率达100%,平均生根数达7.8条。     

兰州百合快速繁殖研究

优化兰州百合组织培养体系,提高其植株再生率,建立高频植株再生体系.采用正交试验设计,以鳞片为外植体,以MS和1/2MS培养基为基本培养基,附加不同浓度NAA(0.2~1.0 mg/L)、6-BA(0.5~2.0 mg/L)、KT(0.1~1.0 mg/L)、IBA(0.2~1.0 mg/L)、IAA(0.2~1.0 mg/L),对兰州百合进行鳞茎诱导、增殖和生根培养,筛选最佳激素配比.6-BA浓度过低或过高均不利于小鳞茎形成,当1.0 mg/L 6-BA与0.2~1.0 mg/L NAA配比时,鳞茎诱导率和平均生成鳞茎数较高;随着NAA浓度增加,平均生成鳞茎数不断增加,其中以1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA组合平均小鳞茎最多,为5.9个.与0.5~1.0 mg/L KT+0.2 NAA mg/I组合相比,添加0.5~1.5 mg/L6-BA+0.5~1.0 mg/L KT或0.2NAA mg/L组合培养基更利于芽增殖,但其丛芽长势较弱,其中以添加0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基从芽长势和小鳞茎长势较好,平均分化鳞茎较多.在以MS、1/2MS为基本培养基、分别添加0.2~1.0 mg/LIAA或IBA培养基中,随着IAA或IBA浓度升高,鳞茎生根率不断降低,根质量不断下降,而平均根数和根长表现有所不同.从根质量来看,MS培养基根质量不如1/2MS培养基;而在1/2MS培养基中,1/2MS与IBA组合优于与IAA组合.鳞茎诱导最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+NAA 0.5~1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA,最佳生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L IBA,生根效最好,生根率为100.0%,根中等长度、粗壮,质量最好.     

兰州百合快速繁殖研究

【目的】优化兰州百合组织培养体系,提高其植株再生率,建立高频植株再生体系。【方法】采用正交试验设计,以鳞片为外植体,以MS和1/2MS培养基为基本培养基, 附加不同浓度NAA（0.2~1.0 mg/L）、 6-BA（0.5～2.0 mg/L）、KT（0.1～1.0 mg/L）、IBA（0.2~1.0 mg/L）、IAA（0.2～1.0 mg/L）, 对兰州百合进行鳞茎诱导、增殖和生根培养,筛选最佳激素配比。【结果】6-BA浓度过低或过高均不利于小鳞茎形成,当1.0 mg/L 6-BA与0.2～1.0 mg/L NAA配比时,鳞茎诱导率和平均生成鳞茎数较高;随着NAA浓度的增加,平均生成鳞茎数不断增加,其中以1.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA组合的平均小鳞茎最多,为5.9个。与0.5～1.0 mg/L KT+0.2 NAA mg/L组合相比,添加0.5～1.5 mg/L 6-BA+0.5～1.0 mg/L KT或0.2 NAA mg/L组合的培养基更利于芽增殖,但其丛芽长势较弱,其中以添加0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基的丛芽长势和小鳞茎长势较好,平均分化鳞茎较多。在以MS、1/2MS为基本培养基、分别添加0.2～1.0 mg/L IAA或IBA的培养基中,随着IAA或IBA浓度的升高,鳞茎生根率不断降低,根质量不断下降,而平均根数和根长表现有所不同。从根的质量来看,MS培养基的根质量不如1/2MS培养基;而在1/2MS培养基中,1/2MS与IBA组合优于与IAA组合。【结论】鳞茎诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+NAA 0.5～1.0 mg/L,不定芽增殖的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,最佳生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L IBA,生根效果最好,生根率为100.0%,根中等长度、粗壮,质量最好。     

红叶石楠离体快繁技术体系的建立与优化

以红叶石楠茎尖为外植体,探讨不同植物激素6-BA、IBA、NAA的浓度对试管苗增殖以及植株再生的影响,建立了一套红叶石楠离体培养技术体系。试验结果表明:红叶石楠初代培养采用MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基、茎尖继代培养采用MS+6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.1 mg/L的培养基为宜,通过正交试验确定,植株增高选用MS+6-BA1.0+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L的培养基效果较好,生根培养选用1/2MS+IBA1.0～1.5 mg/L培养基,生根率、移栽成活率可达100%。     

大青杨再生体系的优化

采用正交试验设计,研究不同培养基和不同激素质量浓度配比对大青杨无菌苗叶片植株再生体系的影响,优化大青杨植株再生体系。结果表明:对大青杨不定芽诱导的影响最大为激素NAA,其次是培养基类型,最后是激素6-BA;不定芽增殖的影响最大是NAA,其次是培养基类型,最后是6-BA;对丛生苗生根的影响最大是激素类型,然后是培养基类型;培养基类型和激素的质量浓度对大青杨再生体系有着较明显的影响。最适宜大青杨分化的培养基为:WPM+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,诱导率达100%;最适宜大青杨丛生芽增殖的培养基为:MS+0.05 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA,芽健壮;最适宜大青杨生根的培养基为:1/2MS+0.1 mg/L IBA,经过14 d生根,生根率达100%。     

香樟涌金的组织培养和植株再生

[目的]探讨香樟涌金茎段组培快速繁殖方法,为工厂化生产香樟涌金组培苗提供技术支持.[方法]以香樟涌金带腋芽茎段(长1.0～1.5 cm)为外植体,进行腋芽诱导、丛生芽增殖及植株再生研究.[结果]香樟涌金腋芽在诱导培养基MS+6-BA l.0 mg/L+IBA 0.02 mg/L中萌发率达100.0％,并能正常伸长展叶;在MS+6-BA 3.0 mg/L+IAA 0.05mg/L培养基中腋芽能正常生长并增殖,平均有效芽数6.5个;在1/2MS+IBA 0.05 mg/L+NAA 0.03 mg/L生根培养基中培养30 d后,有87.6％的丛生芽生根,移栽成活率达90.0％.[结论]MS+6-BA l.0 mg/L+IBA 0.02 mg/L、MS+6-BA 3.0mg/L+IAA 0.05 mg/L、1/2MS+IBA 0.05 mg/L+NAA 0.03 mg/L可分别作为香樟涌金茎段腋芽最佳的诱导培养基、适宜的继代与增殖培养基和相对适合的生根培养基.     

不同基因型黄瓜离体再生及其影响因素的研究

以6个黄瓜(Cucumissativus L.)自交系为试验材料,研究不同的基因型、外植体类型和激素组合等因素对黄瓜离体植株再生的影响。结果表明,不同基因型黄瓜材料的再生能力差别较大;带柄子叶比下胚轴和不带柄子叶的再生率高,是比较理想的外植体材料;较低的6-BA/IAA配比促进黄瓜不定芽的分化;6-BA/IAA配比较高则适合再生芽的伸长;添加0.5mg/LAgNO3可以促进不定芽发生,5～6d苗龄的外植体分化再生频率较高;在供试的6个试验材料中,M8,M10的再生频率较强,分别达到96%和90%。高频率不定芽诱导分化培养基为:MS+IAA0.6mg/L+6-BA0.5mg/L+AgNO30.5mg/L;不定芽伸长的培养基为MS+IAA1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+GA31.0mg/L+AgNO30.5mg/L;高效生根诱导培养基为MS+IAA0.2mg/L+NAA0.1mg/L。     

白鹤芋花序体细胞胚胎诱导与快繁途径研究

以白鹤芋花序为外植体,研究影响白鹤芋花序体细胞胚胎诱导、增殖、萌发和植株再生转化的主要因子。结果表明,体细胞胚胎直接诱导的最适培养基为MS+5.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L KT+0.1 mg/L NAA,体细胞胚胎增殖最适培养基为MS+5.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L ZT+0.2 mg/L NAA,体细胞胚胎萌发最适培养基为MS+0.1 mg/L IBA+0.4 mg/L GA_3+30 g/L蔗糖,植株再生转化最佳激素配方为0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+0.5 mg/L GA_3。     

正交试验优化红颜草莓离体再生体系

[目的]优化红颜草莓离体再生体系。[方法]采用正交试验,研究不同培养基、植物生长调节剂的种类及浓度对红颜草莓叶片不定芽再生的影响。[结果]IBA是影响叶片不定芽增殖的重要因素;最适诱导培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L,诱导率为90.00%;最佳分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L,分化率为8.1%;最适增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2mg/L,平均每个不定芽的增殖倍数为7.67;最适继代培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,每个处理的平均苗高5.98 cm;最适生根培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,每个处理的平均根数为4.5根。[结论]为进一步研究草莓的遗传转化奠定了基础。     

影响银白杨再生体系建立的因素分析

为了获得银白杨离体再生体系的优化方案,通过对离体再生体系中银白杨无菌苗的获得、生芽培养基激素组合及诱导出芽、生根培养基激素组合及诱导生根进行了一系列优化试验。结果显示:影响银白杨植株再生的最主要因素是激素浓度和类型,其次是培养基种类和外植体类型;最利于银白杨再生植株的培养基条件为:芽增殖培养基以MS 6-BA1.0mg/L NAA0.3mg/L IBA0.6mg/L为宜,生根培养基以1/2MS NAA0.05mg/L IBA0.2mg/L为宜。     

正交设计南疆扁桃品种芽组培离体增殖研究

[目的]获得南疆地区扁桃品种幼芽诱导增殖效果较好的培养基.[方法]以新疆南疆地区扁桃品种莎车9号、莎车14号、莎车18号和白巴旦为试材,采用正交试验的方法,设计四因子三水平的培养基.[结果]最适合莎车9号增殖的培养基是MS+6-BA 1.25 mg/L +IBA 0.2 mg/L+NAA 0.3 mg/L;最适合莎车14号增殖的培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L +IBA 0.3 mg/L+NAA 0.3 mg/L;最适合莎车18号增殖培养基是MS+6-BA 1.25 mg/L+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最适宜白巴旦增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L.[结论]研究进一步优化对扁桃幼芽增殖有效的培养基,为推广应用离体繁殖扁桃奠定一定的理论基础.     

中华补血草的组织培养和快速繁殖体系的优化

以中华补血草为试材,通过优化激素配比证明:适宜补血草诱导植株再生的一次成芽培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1mg/L;对诱导再生植株生根激素的筛选结果表明,最适生根激素为IBA,其适宜浓度为0.1 mg/L;生根培养基为MS+IBA 0.1 mg/L。     

岩黄连的高频再生体系建立与优化

以岩黄连(Corydalis saxicola Bunting)茎尖为外植体,以MS、1/2MS为基本培养基,采用正交试验探讨植物生长调节剂多因素组合(6-BA、NAA、IAA、IBA、AC)对岩黄连初代诱导、不定芽分化、诱导生根的影响。结果表明,岩黄连不定芽最佳诱导培养基为:MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IAA。6-BA浓度过低会导致植物丛生芽较少、繁殖速度减缓,6-BA浓度过高又会导致丛生芽出现玻璃化、变形。在MS+0.6 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+0.2 mg/L IAA培养基中,岩黄连不定芽能够进行高效繁殖,不但增殖倍数非常高,而且芽苗质量非常好。     

无籽西瓜茎尖不定芽诱导和增殖的影响因子

为探明无籽西瓜茎尖不定芽诱导和增殖的影响因子,以无籽西瓜无菌苗的茎尖为外植体,初步筛选出不定芽诱导的培养基,再通过正交旋转试验,设计6-BA、IBA、蔗糖的三因素五水平,筛选出不定芽增殖系数最优的组合。结果表明:IBA对不定芽增殖系数影响最大;其次是蔗糖;6-BA的影响最小;不定芽诱导最适培养基为6-BA2.0 mg/L+IBA0.1 mg/L,茎尖不定芽增殖最佳培养基为MS+6-BA1.98 mg/L+IBA0.11 mg/L+蔗糖28.4g/L,不定芽的诱导系数在接种30 d时可以达到8.4。     

不同品种软枣猕猴桃愈伤组织诱导及植株再生

以软枣猕猴桃(Actinidia arguta)品种"魁绿"和"佳绿"的无芽茎段、叶片、叶柄为外植体,研究外植体及生长调节剂组合对软枣猕猴桃愈伤组织诱导及植株再生的影响,从而建立"魁绿"和"佳绿"的离体再生体系。结果表明:6-BA对软枣猕猴桃愈伤组织的诱导效果好于KT,"魁绿"和"佳绿"叶片分别在MS+2,4-D0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L和MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 1 mg/L的培养基上愈伤诱导率最高,分别为93.3%和96.2%。在不定芽再生培养过程中,6-BA和TDZ不能诱导不定芽发生,而ZT对不定芽的分化具有较好的诱导作用;"魁绿""佳绿"均在培养基MS+NAA 0.05 mg/L+ZT 3 mg/L上不定芽分化率最高,分别为72.0%、37.8%。不同品种及不同外植体的愈伤组织诱导率和不定芽再生率均存在差异,"魁绿"的不定芽分化率明显高于"佳绿";无芽茎段和叶片的愈伤组织诱导率均90%;叶片的不定芽分化率最高,显著高于茎段和叶柄。再生苗在培养基1/2 MS+IBA 0.1 mg/L上的生根率为97%。