中华猕猴桃性别相关标记的初步研究

为寻找一种适合于中华猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.)的性别分子标记,以广东省和平县主栽中华猕猴桃的4个雌株品种、4个雄株品种以及"和平红阳"品种种子实生苗为试材,通过基因组DNA提取、RAPD扩增和比较分析,筛选出了6个带型清晰、雌雄性别差异明显的RAPD引物,并从6个引物扩增产物中分离出"和平红阳"种子实生苗雌性特征片段S1044-900和S1044-1350;另外用引物S1032对8个栽培品种雌雄植株基因组DNA扩增后发现了3个与雄性连锁的DNA标记,其中1条片段为NC     

小麦抗叶锈基因Lr34的RAPD分析

在建立了适合本实验室的RAPD反应体系基础上,用120个随机引物对含抗病基因Lr34小麦品种和感病品种Thatcher进行了RAPD分析.68个引物均能扩增出可辨条带,其中S22扩增出1条660 bp特异性条带,S130扩增出1条2 000 bp特异性条带,S503扩增出1条500 bp特异性条带.S22和S503在实验中获得较好的重复性,并将其产物命名为S22-660和S503-500.     

大麻性别相关AFLP分子标记筛选

利用扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)分子标记,用8个EcoRⅠ-NNN和8个MseⅠ-NNN组成64对引物,对大麻10个品种混合组成的雌性、雄性植株基因池进行筛选,并将筛选到的引物在此10个品种中进行验证,引物E-ACT/M-CTA在10个品种的雄株中均扩增出1条特异条带,雌株中均没有此带,对此引物扩增得到的特异性条带回收、克隆、测序,获得1条大小为348 bp的雄性特异性条带,得到的序列进行GenBank序列比对,数据库中没有与此特异条带同源的序列.该条特异条带可作为分子遗传标记用于大麻早期性别鉴定的参考.     

大麻性别相关AFLP分子标记筛选

利用扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)分子标记,用8个EcoRⅠ-NNN和8个MseⅠ-NNN组成64对引物,对大麻10个品种混合组成的雌性、雄性植株基因池进行筛选,并将筛选到的引物在此10个品种中进行验证,引物E-ACT/M-CTA在10个品种的雄株中均扩增出1条特异条带,雌株中均没有此带,对此引物扩增得到的特异性条带回收、克隆、测序,获得1条大小为348bp的雄性特异性条带,得到的序列进行GenBank序列比对,数据库中没有与此特异条带同源的序列.该条特异条带可作为分子遗传标记用于大麻早期性别鉴定的参考.     

基于RAPD标记进行水稻籼粳分类研究

应用RAPD标记方法对30个水稻栽培品种进行了籼粳分类研究。从80个随机引物中筛选出了扩增出具有多态性的谱带的18个引物,并从中选出重复性高、稳定性好的S1004,S1012,S1019,S1048,S1049,S1053,S1063,S1070,S1075共9个引物进行反应。依据随机引物对不同品种水稻总DNA扩增出的特异性扩增条带,用Ne i’s公式计算30个水稻品种间的相似系数,并以UPMGA法进行聚类分析,其结果与品种系谱基本吻合,证明RAPD标记可应用于水稻的分类。     

应用双重PCR技术鉴定猪胎儿性别及其细胞系建立

sry和zfy/x是与哺乳动物性别决定有关的重要基因。本试验针对猪sry基因设计了两对PCR引物,以zfy/x为内参基因,利用双重PCR技术对6只30d左右猪胎儿的性别进行鉴定。结果表明,所有的6个样品都有447bp(雄性)或445bp(雌性)的zfy或zfx序列的扩增带,而采用两对不同的引物对sry序列扩增后,有1个样品出现241bp和166bp的扩增带为雄性,其余的无特异性扩增带为雌性,然后采用胶原酶消化培养法建立已知性别的猪胎儿成纤维细胞系。该方法具有简单、快速、准确的特点,为转基因克隆动物研究中尽早转染目的基因以及培养特定性别的胎儿成纤维细胞系提供了可靠的依据。     

鸸鹋性别鉴定的分子标记方法

试验建立了平胸总目鸟类鸸鹋的快速、简单、准确的性别鉴定方法。利用非伤害性取样方法,从鸸鹋羽毛中提取了基因组DNA,经18对与性别相连锁引物组合的筛选,最终筛选出1对有效引物,对3对已知性别鸸鹋及60只未知性别鸸鹋的基因组DNA进行特异性扩增。结果表明,这对引物组合在雄性鸸鹋中未扩增出片段,而在雌性鸸鹋中扩增出1条片段,其片段长度为536bp。由此可知,这对引物组合可以对鸸鹋性别作出准确鉴定。     

黄瓜性别基因连锁的分子标记筛选

利用RAPD(random amplified polymorphic DNA)技术对黄瓜性别特异基因进行分子标记连锁研究。共选用300个10碱基的随机引物按BSA法对黄瓜性别表型分离群体进行PCR扩增,筛选出5个在全雌和弱雌株基因池(gene pool)中表现多态性的引物。单株检测表明,引物B11具有全雌特异性,在检测的大多数全雌性单株中均可扩增出一条约1000bp的特征带。而在雌雄同株的单株中则未见。因此,将该全雌性特异的片段命名为B11-1000。该标记的获得为黄瓜性别特异基因的分离和克隆奠定了基础。另外,以ACC合酶基因(CSACS1)特异引物检测分离群体单株,发现该酶基因存在于所有性型的单株中,不具有性别特异性。     

贵州地方辣椒材料疫病抗性鉴定的分子标记引物筛选

为贵州地方辣椒种质资源疫病抗性鉴定及抗疫病辣椒品种的分子标记辅助育种提供参考,以具有代表性的贵州地方辣椒抗疫病纯系母本S016(P_1)、高感疫病纯系父本S010(P_2)和S022(P_3)及其杂交F_1代和F_2代为试验材料,用已报道辣椒疫病抗性鉴定相关分子标记的18对引物为候选标记引物,采用育苗接种鉴定和分子标记鉴定相结合的方法对适合贵州地方辣椒品种资源疫病抗性鉴定的分子标记引物进行筛选。结果表明:在18对候选引物中有16对引物对3个亲本及其F1代材料的DNA扩增条带无特异性,Primer3引物对3个亲本材料的DNA扩增条带无特异性,该17对引物均不适合用于贵州地方辣椒品种资源疫病的抗性鉴定。Primer1引物对S016和S022亲本材料的DNA扩增条带存在特异性,经F_2代群体材料进一步验证,该引物可作为类似S016和S022亲本及其杂交后代材料的疫病抗性鉴定。     

鹌鹑性别鉴定的分子标记方法

采用PCR方法扩增北京白羽蛋用鹌鹑基因组中性别基因CHD相关片段,探讨鹌鹑性别的分子标记方法。通过特异引物2550F/2718R,对3对已知性别和14只未知性别鹌鹑性别基因片段进行特异性扩增。结果表明,这对引物从雄性鹌鹑中扩增出1条片段,从雌性鹌鹑中扩增出2条片段,可以对鹌鹑的性别作出准确鉴定。该方法可以应用于初生鹌鹑的性别筛选,降低饲养成本,提高经济效益。对2条片段进行克隆测序,片段长度分别为613和446bp。     

6种葫芦科瓜类蔬菜亲缘关系的RAPD分析

以6种葫芦科(Cucurbitaceae)瓜类蔬菜为试验材料,优化基因组DNA提取条件,用RAPD技术分析不同瓜类蔬菜基因组DNA的遗传多样性。结果表明:改良SDS法和改良CTAB法均能成功提取DNA,后者提取的DNA产量高,纯度较好,适合遗传多样性研究。用60条随机引物进行扩增筛选,有8条引物扩增条带清晰,呈现多态性,共扩增出94个条带,大小为200~3 000 bp。RAPD104软件显示:苦瓜与丝瓜、黄瓜、茭瓜、南瓜和佛手瓜的成对遗传距离指数分别为0.4393,0.4583,0.6000,0.5735,0.7306。NTSYS-PC程序的UPGMA聚类分析表明:同属的南瓜和茭瓜亲缘关系最近,其次是苦瓜与丝瓜;苦瓜与黄瓜亲缘关系较近,与南瓜和茭瓜较远,与佛手瓜亲缘关系最远。     

不同苦瓜品种降糖多肽-P粗提物含量的比较

为了研究不同品种的苦瓜中降糖多肽-P含量的基本特性,采用福林酚法测定了14种不同品种苦瓜果实和种仁中降糖多肽-P粗提物的含量。结果表明:不同品种苦瓜果实中降糖多肽-粗提物含量不同,含量最高的品种为189-4,含量最低的品种为221-2,前者含量约为后者的7倍,所有品种降糖多肽-P粗提物含量平均值为0.541 mg/g FW;不同品种苦瓜种仁中降糖多肽-P粗提物含量也不同,含量最高的品种为226,含量最低的品种为175,前者含量约为后者的15倍,所有品种降糖多肽-P粗提物含量平均值为40.42 mg/g FW。     

苦瓜皂苷和多糖的连续提取工艺及其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

 【目的】建立超声-微波法连续提取苦瓜皂苷和多糖的优化工艺,并评价其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。【方法】采用二次回归正交旋转组合设计优化超声-微波法连续提取苦瓜中皂苷和多糖的工艺条件,采用4-硝基酚-2-D吡喃葡萄糖苷(PNPG)法测定皂苷和多糖提取物对α-葡萄糖苷酶抑制率。【结果】以含水质量分数13%的苦瓜干为原料,先提取皂苷后提取多糖的条件为,将其粉碎至200目后,以体积分数75%乙醇为溶剂,料液比     1﹕18,超声-微波协同萃取（50 W,20 kHz）16 min,在该条件下,皂苷提取率达2.51%。提取皂苷后的残渣,继续以水为溶剂,料液比1﹕14,pH 8.0,时间23 min,温度84℃,超声-微波协同萃取（50 W,20 kHz）20 min,多糖提取率达12.86%。苦瓜皂苷和多糖提取物对α-葡萄糖苷酶均有不同程度的抑制作用,其IC50 分别为1.03 mg•mL-1和10.73 mg•mL-1,苦瓜皂苷的抑制效果显著强于多糖的（P＜0.05）。【结论】采用超声-微波协同作用连续提取苦瓜皂苷和多糖工艺,可有效利用原料、提高产出和效率,所得苦瓜皂苷和多糖提取物对α-糖苷酶均表现抑制作用,显示一定的降糖潜力。     

不同苦瓜品种多糖与皂苷的含量差异及最佳采摘期研究

为了研究不同苦瓜品种中多糖和皂苷含量的差异,以41个苦瓜品种为材料,进行了多糖和皂苷含量测定,并对结果进行了聚类分析。结果表明：多糖与皂苷的含量在不同品种间存在显著差异;41个苦瓜品种可聚为7大类群,在7大类群中,类群5（碧丽）为多糖与皂苷含量最高的优选品种,其余各类群多糖含量与皂苷含量的相关性并不显著。同时,又以如玉5号和早碧绿两个主栽品种为材料,进行了最适采摘期的研究。结果表明：多糖含量随着发育时间的延长逐渐增加;而皂苷含量随着发育时间的延长出现升降波动;从供试苦瓜的整体来看,如玉5号和早碧绿两个品种的的最佳采摘期分别在授粉后25和25～30d。     

中国苦瓜研究核心期刊载文计量分析

对我国2000~2010年6月在核心期刊上发表的有关苦瓜研究的论文数量、年代分布、研究主题、期刊分布、核心作者等进行统计分析,以展示我国苦瓜研究水平和科技成果,为今后我国苦瓜研究的方向和内容提供参考。     

基于SSR和SRAP标记苦瓜种质遗传多样性分析

种质资源遗传多样性是苦瓜遗传改良的材料基础。用SSR、SRAP标记对46份苦瓜种质遗传多样性进行分析及评价,结果表明,从26对SSR和196对SRAP引物中分别筛选获得14和33对多态性引物,并分别扩增出70和637条谱带,其中多态性条带分别为60和90个。利用软件进行聚类分析,46份供试苦瓜种质的遗传相似系数在0.61~0.88之间,取阈值0.656可将46份苦瓜分为4大类群。依据供试材料的亲缘关系,可以为亲本选配和杂种优势利用提供理论基础。     

苦瓜的化学成分及综合利用

苦瓜富含多种活性成分,如植物胰岛素、苦瓜素、多肽、糖类和氨基酸等,具有降血糖、抗病毒、抗肿瘤、抗生育、抗氧化和抑茵等功能。综述了苦瓜的化学成分和保健功能及其在食品、医学领域的应用进展,并展望了其研究和应用前景。     

苦瓜提取物对黄足黑守瓜的化学抗虫性初步研究

[目的]对苦瓜叶进行了提取分离,找出苦瓜叶中的抗黄足黑守瓜取食成分,阐明苦瓜叶抗虫机理。[方法]用不同极性有机溶剂分别对苦瓜叶进行提取、浓缩,得到3种有机溶剂提取物,对黄足黑守瓜进行了选择性与非选择性生物测定。[结果]3种提取物都随浓度的增加,选择性拒食作用与非选择性拒食作用增强,氯仿提取物对黄足黑守瓜的拒食作用最强,在处理浓度为8mg／ml,48h后其选择性拒食率与非选择性拒食率分别为100％和96．47％。进一步用100～200目硅胶柱层析法对氯仿提取物进行纽分分离,并进行生物测定,发现各组分对黄足黑守瓜的拒食作用差别很大,4组分、9组分显示出非常好的拒食作用,其拒食率在处理24和48h后均达100％。[结论]苦瓜叶中含有对黄足黑守瓜具有忌避作用的次生代谢物质,从而起到忌避其成虫前来取食的作用,     

苦瓜黄酮分离提纯及光谱分析

[目的]筛选最佳苦瓜黄酮吸附剂,并对其动态吸附性能进行考察。[方法]选择AB-8、DM-130和WX-I 3种大孔吸附树脂,分别测定其对苦瓜中黄酮的吸附率和解吸率。[结果]AB-8树脂对苦瓜黄酮有较好的吸附和解吸效果。纯化后,苦瓜黄酮含量达28.1%,洗脱率达84.5%。光谱分析发现,苦瓜黄酮主要为黄酮甙类。[结论]AB-8大孔树脂适合苦瓜黄酮的分离提纯。     

我国苦瓜的研究现状及展望

对我国苦瓜的生物学基础研究概况、栽培及育种研究现状进行了综述 ,并对未来苦瓜的研究进行了展望