春兰‘黄梅’ב黄荷’杂交F_1根状茎的组培快繁研究

【目的】筛选春兰组培各阶段的最佳培养条件,建立优良的春兰快繁体系,为春兰大规模生产开发提供科学依据。【方法】以春兰‘黄梅’ב黄荷’F1无菌播种形成的根状茎为试验材料,通过基本培养基(1/2MS、改良1/2MS、HyponexⅡ)和植物生长调节剂(6-BA、NAA、TDZ、IBA)等因子不同组合,围绕增殖、分化、生根等阶段建立其再生体系,并对培育出的组培苗进行移栽练苗。【结果】增殖最适培养基为3.0 g·L~(-1) HyponexⅡ+0.5 mg·L~(-1)6-BA+3.0 mg·L~(-1) NAA+1.0 g·L~(-1)活性炭(AC)+30.0 g·L~(-1)白砂糖(Su)+7.0 g·L~(-1)琼脂(Ag),生长速度和增殖系数分别为7.31和6.02;分化最适培养基为2.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.3 mg·L~(-1) NAA+30.0 g·L~(-1) Su+7.0 g·L~(-1) Ag,分化率、芽诱导个数和株高分别为90.00%、 5.44个和2.53 cm;生根最适培养基为1.5 mg·L~(-1) IBA+2.0 g·L~(-1)蛋白胨+1.0 g·L~(-1) AC+25.0 g·L~(-1) Su+7.0 g·L~(-1) Ag,生根率、生根数和平均根长分别为100.00%、8.03条和3.00 cm;春兰组培苗练苗移栽60 d后存活率达96.53%。【结论】新型基本培养基HyponexⅡ(3.0 g·L~(-1))对春兰增殖培养有高效促进作用,高水平的IBA(1.5 mg·L~(-1))有利于春兰组培苗生根壮苗。     

素心建兰无菌播种快繁技术研究

以素心建兰种子为外植体,通过基本培养基(1/2MS、花宝1号、改良MS)、植物激素(6-BA、TDZ、NAA)等关键因子对素心建兰种子萌发、根状茎增殖、分化等各培养阶段影响的试验,探讨了素心建兰无菌播种快繁关键技术。结果表明:种子无菌萌发较适宜的培养基配方为1/2MS+6-BA3.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+水解乳蛋白2.0g·L~(-1)+活性碳1.0g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1);根状茎较适宜的增殖培养基配方为改良1号+TDZ 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+活性碳0.5g·L~(-1)+白糖30g·L~(-1),45d增殖系数高达7.3;根状茎接种于改良1号+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+白糖30g·L~(-1)培养基上分化培养45d后,再转入1/2MS+IBA 0.5mg·L~(-1)+活性碳0.5g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)培养基上培养60d,可诱导形成完整植株,芽分化率为86.3%,生根率为100.0%。     

秋石斛离体快速繁殖技术研究

以秋石斛‘三亚阳光’幼芽为外植体,采用丛生芽诱导途径,并利用正交设计法,探讨基本培养基(花宝1号、改良1#、改良2#、改良3#)、植物生长调节剂(6-BA、NAA、IBA)、白糖等对其丛生芽诱导、增殖、生根等关键环节的影响,以期建立秋石斛‘三亚阳光’丛生芽组培快繁技术。结果表明:各试验因素对秋石斛丛生芽增殖影响的主次关系为基本培养基6-BANAA白糖;筛选出丛生芽适宜的增殖培养基配方为改良2#+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+白糖30.0g·L~(-1)+琼脂粉3.0g·L~(-1)+卡拉胶3.0g·L~(-1),50d平均增殖系数达6.25;筛选出适宜生根的培养基配方为改良3#+NAA 0.3mg·L~(-1)+IBA 0.5mg·L~(-1)+活性炭0.5g·L~(-1)+香蕉泥100.0g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)+琼脂粉3.6g·L~(-1)+卡拉胶3.6g·L~(-1),生根率为100.0%;试管苗移栽60d成活率达96.5%。     

盆花文心兰丛生芽组培快繁技术研究

以文心兰‘豹斑宝石’花梗为外植体,采用丛生芽诱导途径,利用正交设计法,探讨基本培养基(MS、花宝1号、改良1号、改良2号、改良3号)、植物生长调节剂(6-BA、NAA、IBA)、水解酪蛋白(CH)等对其丛生芽诱导、增殖、生根等关键环节的影响,以期建立文心兰‘豹斑宝石’丛生芽组培快繁技术。结果表明:各试验因素对文心兰丛生芽增殖影响的主次关系为6-BA基本培养基NAACH;筛选出丛生芽适宜的增殖培养基配方为改良1号+6-BA 3.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+CH 0.5g·L~(-1)+白糖30g·L~(-1)+琼脂粉5.0g·L~(-1),50d平均增殖系数达5.8;筛选出适宜生根的培养基配方为改良3号+IBA 0.5mg·L~(-1)+活性碳0.5g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)+琼脂粉3.6g·L~(-1)+卡拉胶3.6g·L~(-1),生根率为100.0%;试管苗移栽6个月成活率达96.8%。     

文心兰杂种胚培养研究

以文心兰‘红狐狸’与‘百万金币’杂种胚为外植体,采用种胚→原球茎→完整植株→移栽的途径,探讨植物生长调节剂、有机添加物等因素对文心兰杂种胚萌发、原球茎分化、生根等各阶段的影响,建立文心兰杂种胚离体培养及植株再生技术。结果表明,适宜萌发的培养基为花宝+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+CM 150g·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),培养90~100d后相对萌发率为155.6%,原球茎基本不增殖,利于叶的分化;适宜分化的培养基为花宝+6-BA 0.1mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+马铃薯泥150g·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1)+蔗糖25g·L~(-1),分化率显著最高,为87.8%,添加马铃薯泥能显著提高分化率,促进芽苗的粗壮;将分化的芽苗在花宝+NAA 0.2mg·L~(-1)+马铃薯泥150g·L~(-1)+AC 1.5g·L~(-1)+蔗糖25g·L~(-1)培养基上培养40d后生根率为100%,且根系发达,植株健壮;生根苗炼苗后以水苔作为基质,移栽成活率达91.7%。     

‘翠香’猕猴桃离体再生研究

本文以‘翠香’猕猴桃带腋芽茎段为外植体,研究了不同激素配比对‘翠香’猕猴桃茎段腋芽诱导、增殖培养、生根培养的影响,并进行移栽。研究表明:‘翠香’猕猴桃最优的茎段腋芽诱导培养基为MS+2.0 mg·L~(-1)6-BA+0.3mg·L~(-1)NAA,诱导率为88.89%;最优的增殖培养培养基为MS+5 mg·L~(-1) 6-BA+0.4 mg·L~(-1) NAA,增殖系数达6.20,三代连续增殖稳定;生根培养的最佳培养基为1/2MS+0.9 mg·L~(-1) IBA,生根率为94.44%,根数为11.40,根长为2.94;炼苗后移栽成活率达88.33%。此研究为‘翠香’猕猴桃的组织培养工厂化育苗提供了技术支持。     

‘高原之火’北美海棠叶片组培快繁再生体系

以‘高原之火’北美海棠叶片为外植体,研究‘高原之火’北美海棠叶片愈伤组织的诱导及不定芽再生技术体系,并对不定芽发生过程进行组织细胞学观察。结果表明:叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.15 mg·L~(-1) TDZ+1.5 mg·L~(-1) NAA,诱导率高达80%,愈伤组织不定芽分化率达60%,每块愈伤组织芽数最高达18.8个;不定芽增殖与壮苗最佳培养基为1/2MS+0.5 mg·L~(-1)BA+0.5 mg·L~(-1)IBA及1/2MS+1.0 mg·L~(-1)BA+1.0 mg·L~(-1)IBA,增殖系数达3.4,每瓶正常不定芽数达10.2个;芽苗在1/4MS+1.0 mg·L~(-1)IBA+0.15%活性炭培养基上不定根诱导率最高,达86.7%;生根小苗炼苗移栽后成活率达80%;叶片不定芽诱导过程的组织细胞学观察表明,不定芽的发育起源为混合型,一种为外起源,一种为内起源,内起源为主要方式。     

台湾速生杨树离体再生体系的建立

以台杨3号茎段和叶片为外植体材料,建立离体再生体系。结果表明:茎段在0.15%HgCl_2溶液中处理10min,污染率为23.3%,出芽率达75.3%,在MS+BA 0.3mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)培养基中诱导不定芽的效果较好,平均分化率77.8%;叶片分化培养基为MS+BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+KT 0.2mg·L~(-1)+Ad 40mg·L~(-1),分化率可达87.7%;MS+BA 0.5mg·L~(-1)+KT 0.3mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)培养基增殖效果较好;1/2MS+NAA 0.2mg·L~(-1)+CCC 0.5mg·L~(-1)为生根、壮苗培养基,生根率100%。     

红掌‘香妃’组织培养与快繁技术

以红掌‘香妃’茎尖为外植体,进行‘香妃’组培快繁技术研究。结果表明,茎尖的最佳消毒方法为0.1%Hg Cl_2处理20 min,污染率可降低到71.7%;初代培养基为MS+30 g·L~(-1)蔗糖,萌发率可达90.0%;不定芽最适继代增殖培养基为MS+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA+30 g·L~(-1)蔗糖,增殖系数达3.47,芽苗生长健壮;生根培养以1/2 MS+0.4 mg·L~(-1)NAA+20 g·L~(-1)蔗糖为最佳培养基,生根率可达100%,根系发达。     

日本茵芋雌雄株的组织培养

为营建日本茵芋雌雄株组培快繁技术体系,以雌株品种‘帕贝拉’和雄株品种‘鲁贝拉’嫩枝茎段为外植体,研究其诱导、增殖、生根培养的主要影响因素,筛选最佳培养基。结果表明:日本茵芋雄株的诱导率、增殖倍率及生根率均低于雌株,且差异均达极显著水平;在较佳诱导培养基3.0 g·L~(-1)花宝1号+1.5 mg·L~(-1)6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)上,雌雄株诱导率分别为75.6%、34.7%;结合切除芽苗顶芽的方法,在培养基3.0 g·L~(-1)花宝1号+2.5 mg·L~(-1)6-BA+4.0 mg·L~(-1)赤霉素(GA3)上,继代培养50 d,雌雄株增殖倍率分别为4.25、3.22倍;在培养基1.5 g·L~(-1)花宝1号+0.5 mg·L~(-1)生根粉1号(ABT 1号)上,雌雄株生根率分别为73%、61%;雌雄株组培苗移栽在黄心土+椰糠(3∶1)基质中,移栽成活率分别为86%、83%。     

药用野生稻胚拯救后代YF2快繁技术

取药用野生稻胚拯救后代的幼芽1~2 cm,经70%酒精消毒30 s,0.1%升汞摇动消毒8 min及无菌水洗3~5次后,将其放在诱导培养基MS+2,4-D 1.0~3.0 mg·L~(-1)+6-BA 0.1~0.5 mg·L~(-1)中培养,胚性愈伤组织的诱导率为31%;然后转入MS+IAA 1.0~3.0 mg·L~(-1)+6-BA 2.0~4.0 mg·L~(-1)+KT 1.0~2.0 mg·L~(-1)分化培养基中培养,成苗率为62%。成苗后转入1/2 MS+IAA 0.02~0.5 mg·L~(-1)生根培养基中,生根率达到99%。炼苗7 d后移栽到苗床,成活率达到90%。短期内可实现胚拯救后代YF2组培苗健康及快繁生长,为创制水稻新种质和研究抗病虫新基因克隆和利用奠定基础。     

‘海尔特兹’树莓组织培养及其叶柄再生体系的建立

为研究树莓的工厂化育苗技术,提高树莓育苗质量和效率,以树莓品种‘海尔特兹’带腋芽的茎段为试验材料,通过对其腋芽初代培养、茎段增殖、叶柄不定芽和根的诱导等过程中植物生长物质合理组合,及防止茎段褐化的最适p H值进行筛选,建立‘海尔特兹’树莓组织培养及其叶柄再生体系。结果表明,腋芽诱导的最佳培养基为MS+1.0mg·L~(-1)6-BA+1.0mg·L~(-1)IAA,萌芽率100%;茎段最佳增殖培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)6-BA+0.1mg·L~(-1)NAA,p H值为5.70,增殖系数为5.0;诱导叶柄产生愈伤组织再生不定芽的最佳培养基为MS+2.0mg·L~(-1)TDZ+1.0 mg·L~(-1)IBA,其愈伤组织诱导率为100%,不定芽再生率为53%;幼苗最佳生根培养基为1/2 MS+0.7 mg·L~(-1) IBA,生根率达95%。     

垂枝樱花组培技术研究

为了建立更高效的垂枝樱花的组织快繁体系,以垂枝樱花的当年生带腋芽茎段为外植体,进行了外植体的灭菌、启动、增殖和生根培养,探讨了适宜的外植体灭菌方法与程序,不同培养基配方对启动、增殖、生根培养效果的影响。结果表明:适宜的表面灭菌方法为75%乙醇浸泡30s,0.1%的HgCl2浸泡10min,最后无菌水冲洗5遍,成活率达66.7%;较适宜的启动培养基为1/2 MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化达68.3%;适宜的增殖培养基为:MS+6-BA 0.3mg·L~(-1)+NAA 0.05mg·L~(-1)+GA310mg·L~(-1),增殖系数为7.0,平均苗高2.9cm;适宜的生根培养基为:1/2 MS+NAA 1.0mg·L~(-1)+IBA 0.5mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),生根率达93%。     

‘闽牧6号’狼尾草组织培养再生体系的建立

为建立杂交狼尾草高效再生体系,以‘闽牧6号’狼尾草为材料,研究外植体、培养基、植物激素等对‘闽牧6号’狼尾草愈伤组织诱导、继代、分化的影响。结果表明:选择侧芽作为适宜外植体;诱导培养基采用NB+2,4-D(2mg·L~(-1)),诱导率最高,为89.9%;继代培养基采用NB+2,4-D(2mg·L~(-1))+KT(1mg·L~(-1)),愈伤组织形态最好;分化培养基采用NB+KT(1mg·L~(-1))+6-BA(2mg·L~(-1))+NAA(0.5mg·L~(-1)),分化率最高,为75%;生根培养基采用1/2MS培养基,形成了较为完善的组织培养再生体系。     

樱桃砧木吉塞拉7号茎尖快繁技术

本试验研究不同浓度激素配比对吉塞拉7号茎尖培养的影响。取春季一年生的新梢做外植体,剥取幼嫩茎尖,接种到不同配方的诱导培养基上,生长30 d左右,转移到增殖培养基上。结果表明,茎尖成活率最高的培养基是MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+IBA 0.1 mg·L~(-1),成活率达90.0%;最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0 mg·L~(-1)+IBA 0.1 mg·L~(-1)+GA_3 0.1 mg·L~(-1),增殖系数达3.9;生根率最高的培养基为1/2MS+IBA0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+Ac 0.5 mg·L~(-1),培养30 d左右,生根率达89%,平均每株生根4.3条;最佳移栽基质是蛭石,成活率达95.7%。     

河北杨叶片诱导不定芽再生体系的建立

以河北杨无菌苗叶片为外植体材料,诱导叶片分化产生不定芽,然后对不定芽进行增殖和生根培养,形成再生植株。结果表明:最佳不定芽诱导培养基为MS+0.3 mg·L~(-1)TDZ+0.5 mg·L~(-1)IBA,不定芽诱导率达到100%;最佳增殖培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)KT+0.3 mg·L~(-1)IBA,增殖率可达85%;最佳生根培养基为1/2MS+0.3 mg·L~(-1)IBA,平均生根率可达到92.86%;组培苗移栽成活率为93.7%。本研究建立了河北杨高效植株再生体系,为河北杨的遗传改良和分子育种研究奠定了基础。     

花魔芋实生种子组织培养研究初探

[目的]探索花魔芋实生种子组织培养中外源激素最佳配比,提高分化率,生产优质魔芋种芋。[方法]以花魔芋实生种子为外植体,比较不同激素浓度配比对愈伤诱导、芽分化以及生根的影响。[结果]花魔芋实生种子愈伤诱导最佳配方为MS+1.0mg·L~(-1)6-BA+0.5mg·L~(-1) NAA,诱导率高达90%,增重倍数为7.8;不定芽分化配方为MS+2.0mg·L~(-1)6-BA+0.5mg·L~(-1) NAA,分化率高达100%,增殖系数为4.6;生根配方为1/2MS+1mg·L~(-1) NAA,生根率为84%,平均生根数为38条。[结论]通过优化培养基激素配比,4个月可生产优质组培苗,水培可生产出15g左右的种芋。     

红瑞木茎段组织培养技术研究(英文)

以红瑞木茎段为外植体,研究了其组织培养技术。结果表明:适合红瑞木芽启动培养的培养基为MS+BA0.5 mg·L~(-1)+IBA0.5 mg·L~(-1),诱导率可达93%;增殖培养基以MS+BA0.5mg·L~(-1)+IBA0.3 mg·L~(-1)为最佳,增殖系数可达4.15;生根诱导的最适培养基为1/4MS+IBA0.05 mg·L~(-1),生根率可达90%;生根苗在温室条件下成活率可达80%以上。     

珍珠彩桂的快速繁殖技术

以珍珠彩桂半木质化枝条为外植体,采用丛生芽诱导途径,建立组培快繁体系。结果表明:最佳启动培养基为木本植物培养基(WPM)+2.0 mg·L~(-1)6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+0.5 mg·L~(-1)赤霉素(GA3)+6.5 g·L~(-1)琼脂+30 g·L~(-1)蔗糖,启动率高达86.4%;最佳增殖培养基为WPM+4.0 mg·L~(-1)6-BA+2.0 mg·L~(-1)6-糖基氨基嘌呤(KT)+0.5 mg·L~(-1)GA3+6.5 g·L~(-1)琼脂+30 g·L~(-1)蔗糖,继代周期25 d,增殖系数高达5.8;最佳生根培养基为1/2WPM+3.0 mg·L~(-1)3-吲哚丁酸(IBA)+6.5 g·L~(-1)琼脂+30 g·L~(-1)蔗糖,培养30 d后生根,生根率达89.5%。炼苗后,移栽到珍珠岩∶蛭石∶泥炭土体积比为1∶1∶1的混合基质中,成活率达到90%以上。     

花叶金线莲茎段诱导植株再生培养技术研究

以花叶金线莲茎段为外植体,采用正交设计,探讨基本培养基(MS、B_5、改良MS)、植物生长调节剂(TDZ、6-BA、KT、IBA)等对其茎段诱导、增殖及生根等关键环节的影响,以期建立花叶金线莲茎段诱导植株再生培养技术。结果表明:各试验因素对花叶金线莲茎段诱导丛生芽影响的主次关系为基本培养基KT6-BATDZ;筛选出适宜的增殖培养基配方为改良MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+白糖30.0g·L~(-1)+琼脂粉3.0g·L~(-1)+卡拉胶3.0g·L~(-1),60d平均增殖系数达4.58;筛选出适宜生根的培养基配方为改良MS+IBA 0.3mg·L~(-1)+活性炭0.5g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)+琼脂粉3.6g·L~(-1)+卡拉胶3.6g·L~(-1),培养60d,生根率为100.0%。