一株高耐镉菌株的分离、鉴定及系统发育分析

采用梯度浓度驯化方法,从极度重金属污染环境的土壤中取样分离、纯化1株具有较强镉耐受性的菌株(编号为LY29-1-5)。经菌落、菌体形态观察、生理生化及系统发育分析,该菌株初步鉴定为大肠杆菌(Escherichia coli)。该菌株能耐受镉离子的最高浓度为15 mmol/L,在最低抑制浓度试验中,该菌株对铅、铜、锌也表现出了一定的耐受性。     

强抗镉真菌的分离鉴定及溶磷能力研究

通过在培养基中加入200 mg/L镉(3CdSO4.8H2O),从电子垃圾污染区土壤中筛选到1株强抗镉真菌,经ITS序列鉴定为月状旋孢腔菌Cochliobolus lunatus.该菌株可在镉质量浓度为2 000 mg/L的PDA平板上生长良好,抗性试验结果表明,菌株对镉的抗性可能与该菌在生长过程中产生碱性物质有关;菌株对镉、铅、锌和铜的最小抑菌浓度(MIC)均超过500 mg/L,菌体对9种重金属离子抗性的强弱顺序大致为:Zn2+、Cd2+>Pb2+>Cu2+>Co2+>Ni2+、Cr2+>Hg2+、Ag+.该菌株对3种难溶性的磷酸盐具有溶磷作用,溶磷能力强弱顺序为:Ca3(PO4)2(104 mg/L)>AlPO4(86 mg/L)>FePO4.4 H2 O(17 mg/L).     

杏鲍菇产漆酶的培养条件的优化

试验以杏鲍菇为供试菌株,探究了不同碳源和氮源,不同浓度的铜离子,香兰素,等培养条件对其产漆酶的影响。结果表明:在培养基中加入的碳源为果糖,氮源为蛋白胨时,杏鲍菇的产漆酶活性最高。当铜离子浓度为0.02mmol/L,香兰素的浓度为0.5mmol/L,杏鲍菇产漆酶活性最高。     

青枯菌铜抗性基因copA 的功能

【目的】 植物细菌性青枯病（bacterial wilt of plants）是由茄科雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum ）引起的一种世界性重大土传病害。作为防治青枯病等细菌性病害的重要杀菌剂,铜制剂的广泛使用造成多种植物病原细菌群体中出现了铜抗性菌株。青枯菌Po82菌株大质粒上携带了丁香假单胞菌中的铜抗性编码基因copA 的同源物,论文旨在探明青枯菌Po82菌株copA 在铜抗性、致病性等方面的生物学功能。【方法】 以青枯菌Po82菌株为研究对象,利用MEGA6.0软件包,基于邻接法构建copA 的系统发育树,探究铜抗性基因copA 在青枯菌和其他植物病原细菌中的系统进化关系。通过反向遗传学的研究手段,采用基因同源重组双交换和电击转化法,构建copA 基因缺失菌株及相应互补菌株。通过最小抑制浓度（minimal inhibition concentration,MIC）测定、RT-qPCR、Biolog代谢芯片以及致病力等基础生物学测定研究手段,解析copA 与青枯菌铜胁迫应答、代谢活性、致病性和运动性等表型生物学特征之间的关系。【结果】 同源性比对分析结果显示,copA 广泛存在于青枯菌群体中,青枯菌copA 在亲缘关系上与耐金属贪铜菌最为紧密, 与稻黄单胞菌、丁香假单胞菌和大肠杆菌的亲缘关系较远。RT-qPCR结果显示copA 的表达受到铜离子的诱导,copA 的表达量随着CuSO₄浓度的增加而增加。CuSO₄浓度为1.0 mmol·L ^-1时,基因表达量最高。铜MIC测定结果显示copA 基因缺失菌株对铜离子的敏感性增加,copA 基因缺失菌株的MIC值为0.8 mmol·L ^-1,较野生型菌株的1.2 mmol·L ^-1下降了33.3%,互补菌株恢复了铜抗性能力,表明copA 在青枯菌的铜胁迫应答过程中发挥着重要作用。与野生型菌株相比,copA 基因缺失菌株在普通NA培养基及含0.6 mmol·L ^-1 CuSO₄的NA培养基中的对数生长期的生长速率降低,表明copA 与青枯菌的生长速率相关。copA 基因缺失菌株于发病前期病情指数较野生型菌株下降,接种第10天,copA 基因缺失菌株的病情指数较Po82野生型菌株下降了11.7%。copA 的缺失导致青枯菌对α -D-葡萄糖和D-海藻糖等碳源,L-丙氨酸和葡萄糖醛酰胺等氮源的代谢利用速率降低,使青枯病发病病程延长。与野生型菌株Po82相比,copA 基因缺失菌株中III型分泌系统的转录激活因子编码基因hrpG 和hrpB ,III型效应子RipX编码基因ripX 的表达量显著下调。 【结论】 铜抗性基因copA 在青枯菌铜胁迫应答、致病性等方面发挥一定的作用,研究结果可为进一步解析青枯菌的铜抗性分子机制以及铜抗性菌株的防治提供理论依据。     

耐镉棘孢木霉的筛选鉴定及其镉吸附特性（英文）

为筛选鉴定耐镉真菌及研究其镉吸附特性,采用Cd~(2+)浓度梯度压力驯化法从镉污染稻田土壤中分离到耐镉菌株HD228,综合菌株形态特征、ITS基因序列系统进化分析,鉴定其为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)。结果表明,该菌株耐22 mmol/L Cd,对Cd的吸附率可达79.88%,对Pb、Zn、Cu具有很强耐性,Pb、Zn、Cu对HD228的最低抑制浓度(MIC)分别为>80 mmol/L、>80 mmol/L、>30 mmol/L;菌落直径与重金属浓度呈负相关,20 mmol/L时菌落不规则;能在pH值4～8、温度20～35℃条件下良好生长,最适生长和耐镉pH值为5、温度为30℃,温度和pH值均不影响其耐镉能力;其发酵液对水稻出苗、幼苗生长无抑制作用,发酵液40 mL(200 g土)用量对水稻具有促生作用,对镉胁迫水稻具有解毒作用。HD228具有应用于镉污染水稻田治理的潜力。     

耐镉棘孢木霉的筛选鉴定及其镉吸附特性研究

为了筛选鉴定耐镉真菌,采用Cd2+浓度梯度压力驯化法从镉污染稻田土壤中分离到耐镉菌株HD228,综合菌株形态特征、ITS基因序列系统进化分析,鉴定其为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)并研究了其镉吸附特性。结果表明:该菌株耐22 mmol/L Cd,对Cd的吸附率可达79.88%;对Pb、Zn、Cu具有很强耐性,Pb、Zn、Cu对HD228的最低抑制浓度(MIC)分别为 80 mmol/L、 80 mmol/L、 30 mmol/L。HD228菌落直径与重金属浓度呈负相关,20 mmol/L时菌落不规则。该菌能在pH值4～8、温度20～35℃条件下良好生长,最适生长和耐镉pH值为5、温度为30℃,温度和pH值均不影响其耐镉能力。其发酵液对水稻出苗、幼苗生长无抑制作用,发酵液40 mL(200 g土)用量对水稻具有促生作用,对镉胁迫水稻具有解毒作用。此耐镉真菌HD228具有应用于镉污染水稻田治理的潜力。     

镉对蓖麻种子萌发的影响

以2种蓖麻KM1和KM2为材料,在镉浓度为0.0、0.1、0.3、0.5、1.0和2.0 mmol/L的溶液处理下研究了镉胁迫下蓖麻种子萌发的影响.结果表明,KM1在镉离子浓度为0.1 mmol/L时出芽率就降到10％,与对照(0.0 mmol/L)90％出芽率存在极显著差异.而KM2则表现出较强的耐性,在镉离子浓度为2.0 mmol/L时仍有30％以上的出芽率.通过对KM2幼苗的根、茎长度及侧根的数量进行测量,结果表明镉对蓖麻主根长、侧根数、茎长表现低浓度时促进,高浓度时抑制,且随着镉离子浓度的增加,抑制作用增强.     

1株耐铜、锌离子土霉素降解菌的筛选鉴定及特性

【目的】铜、锌离子和土霉素作为养殖业中常用饲料添加剂,在畜禽粪便和污水中大量残留,形成了复合污染。本文在铜、锌离子的胁迫下筛选出降解土霉素的菌株。【方法】通过选择培养基,从养殖废水中筛选分离出1株土霉素降解菌DJI,优化其降解条件,测定DJ1菌株对其他四环素类抗生素和氯霉素的耐受性。【结果】通过菌株形态学特征及18S rDNA序列比对分析,确定DJ1菌株为Cutaneotrichosporon cutaneum。该菌在pH7、温度30℃、装液量50 mL(使用250 mL三角瓶)、底物质量浓度200 mg/L、接种量为1%(φ)的条件下,培养5 d后对土霉素的降解率为78.83%。在低质量浓度(50 mg/L)土霉素的培养基中,添加50 mg/L Zn~(2+)抑制了土霉素的降解;而在高质量浓度(200mg/L)土霉素培养基中,添加50 mg/L Cu~(2+)抑制了土霉素的降解。菌株DJ1对四环素类抗生素及氯霉素具有高耐受能力,耐受均超过700 mg/L,能在抗生素与重金属铜、锌离子二元交叉培养基平板上生长,具有耐抗生素与重金属的双重抗性。【结论】菌株DJI具有高耐受四环素类抗生素、氯霉素、铜和锌离子的能力,能高效降解土霉素,可在环境抗生素污染防治中发挥积极作用。     

铜、锌离子抗性菌筛选及重金属作用下富集特性研究

从湖南临乡桃林矿区土壤中分离到一株高抗铜、锌菌株,经26S rRNA D1/D2鉴定为Aspergillus aculeatus.该菌株单抗铜400 mg/L、锌800 mg/L.优化条件下:30 ℃,pH值5.0,起始离子浓度50 mg/L,摇床转速120 r/min,培养时间120 h,菌体对铜、锌离子的吸附率为54%和60%.铜、锌离子浓度50 mg/L时,菌体内谷胱甘肽含量达到最大值分别为0.98和0.88 mg/g;而正常菌体内只有0.04 mg/g.可初步认为谷胱甘肽的增加缓解了铜、锌离子对Aspergillus aculeatus的氧化损伤.     

陕西关中地区猕猴桃溃疡病菌对CuSO4的抗性评价

为明确陕西省猕猴桃细菌性溃疡病菌（Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa）对CuSO₄的抗性水平及与copA和copB基因表达量的相关性，使用最小抑菌浓度法（MIC）对分离自陕西省关中地区的84株Psa菌株对于CuSO₄的抗性进行检测。在此基础上，使用实时荧光定量PCR方法，对3株不同抗性水平Psa菌株的基因copA和copB与抗铜性的关系进行了分析。结果表明，供试的84株Psa菌株MIC分布在3.75~6.25 mmol·L^-1范围内；不同地区来源的菌株对CuSO₄的抗性表现出明显的差异，其中分离自周至的Psa菌株的抗铜水平明显高于眉县。实时荧光定量PCR分析结果显示，不同浓度CuSO₄条件诱导下，3株不同抗性水平的菌株抗铜基因copA和copB表达水平与CuSO₄浓度成正相关，且菌株的抗性水平越高，基因copA和copB相对表达水平亦越高。陕西省关中地区的Psa菌株对CuSO₄表现出较高的抗性水平，且不同地区的Psa菌株的抗性表现出明显差异；copA和copB基因参与了Psa菌株对铜离子的适应性反应。     

影响芥蓝×甘蓝RAPD标记稳定性的外部条件优化研究

通过对影响RAPD标记稳定性的引物浓度梯度、退火温度梯度、dNTP浓度梯度、Taq酶浓度梯度等外部条件的优化研究,确定了RAPD反应适宜的引物浓度为0.1~0.2pmol/μL,退火温度为48~52℃,dNTP浓度为0.3~0.15mmol/L及Taq酶浓度为0.3U/μL,提高了该反应体系中RAPD的稳定性。     

氟苯尼考对四角蛤蜊稚贝的急性毒性

[目的]研究氟苯尼考对四角蛤蜊稚贝的急性毒性作用。[方法]采用静水水生生物测试方法,分别在24、48、72和96 h观察四角蛤蜊稚贝的死亡数,并计算出氟苯尼考的安全质量浓度。[结果]氟苯尼考在24、48、72和96 h的半致死浓度分别为2 930.65、1 585.86、1 415.32和948.64 mg/L,氟苯尼考对四角蛤蜊稚贝的安全浓度为139.31 mg/L。[结论]该研究为四角蛤蜊人工苗种繁育过程中的合理用药提供了理论依据。     

水生植物对水体中放射性锶的富集动态

采用模拟污染物的同位素示踪技术研究了水生植物卡州萍、水葫芦和金鱼藻对水体中 89Sr的富集动态。结果表明 :水体中 89Sr的比活度由于水生植物和底泥的吸收或吸附作用随时间而减少 ;水生植物对水体中的 89Sr均具有一定的的富集能力 ,CF值多在 1 0～ 2 0之间 ,最大不超过 3 0 ,经综合比较 ,其中水葫芦的富集能力优于卡州萍和金鱼藻 ,因此可选用水葫芦作为净化水体中放射性锶的生物材料。此外 ,底泥对水体中的 89Sr也具有较强的吸附与固着能力。     

发芽期不同玉米自交系种子耐盐性研究

为研究7个玉米常规玉米自交系种子不同盐浓度处理(2、4、6、8、10、12、14、16、18 g/L)下的耐盐性,统计种子的发芽率、发芽势、相对胚根长度,分析其耐盐浓度、耐盐半致死浓度、耐盐极限浓度和各指标隶属函数,综合评价了各自交系的耐盐性。随着盐浓度的增加,自交系的发芽势、发芽率和胚根长度都呈下降趋势,自交系间存在显著差异。当盐浓度增加到10 g/L时,各自交系的发芽率、发芽势差异最大;在14 g/L的盐浓度下自交系间相对胚根长度差异最大。各自交系中耐盐浓度最高的为PHB1M,其次为昌7-2和PH4CV。耐盐半致死浓度、耐盐极限浓度最高的自交系为PHB1M。综合分析各指标搞盐隶属值,各自交系的耐盐性强弱顺序依次为:PHB1M>昌7-2>PH4CV>PH6WC>4112>W9706>SY90。     

种植密度对绥农22大豆产量及品质影响的研究

2007年对绥农22大豆品种进行不同密度对产量及品质影响的研究.结果表明:株高随密度增加而升高,茎粗和分枝教随密度增加而减少.在一定密度范围内百粒重随密度增加而升高,单株荚数随密度的增加而降低;密度在5万～35万株·hm-2范围内,单位面积的荚数、粒数和产量均随密度增加而增加.密度为5万～30万株·hm-2时,脂肪含量...     

不同浓度硼对黄瓜植株生长发育的影响

在温室条件下,设置系列硼浓度营养液筛选和确定培养黄瓜植株硼的最适浓度和硼毒害临界浓度。通过对不同处理黄瓜植株的根长,叶面积和不同组织鲜,干重及硼,钾,钙,铁等元素的分析,结果表明：营养液最适硼浓度和硼毒害临界浓度分别为０．１０ｍｇ．Ｌ＾－１和０．５０ｍｇ．Ｌ＾－１。     

5种水产药物对克氏原螯虾的急性毒性作用

[目的]为养殖生产中杀虫剂和杀菌药物的安全使用提供依据。[方法]采用换水式渔药毒性试验方法,研究溴氯海因等5种常用药物对克氏原螯虾成虾的急性毒性作用,求出相应的半致死浓度（TLM）和安全浓度（SC）。[结果]溴氯海因、三氯异氰脲酸、高锰酸钾、硫酸铜和二氧化氯对克氏原螯虾成虾24 h的TLM24值分别为35.76、155.88、45.58、132.45、565.00 mg/L;48 hTLM48值分别为20.28、94.76、27.54、75.25、313.31 mg/L;96 h的TLM96值分别为12.54、71.49、12.89、37.07、175.91 mg/L。5种药物的SC分别为1.96、10.51、2.65、12.82、28.95 mg/L。克氏原螯虾对5种水产药物的敏感性依次为：溴氯海因〉高锰酸钾〉三氯异氰脲酸〉硫酸铜〉二氧化氯。其中二氧化氯、硫酸铜、三氯异氰尿酸和溴氯海因可安全使用;高锰酸钾可用于成虾的泼酒消毒,药浴时浓度须低于常规用量,应根据虾规格大小调整使用浓度。[结论]克氏原螯虾对二氧化氯的耐受性最强,其次是三氯异氰脲酸和硫酸铜,而对溴氯海因、敌百虫、克虫威和敌杀死的SC要低得多,生产中需谨慎使用。     

三倍体毛白杨叶片再生体系建立研究

以三倍体毛白杨叶片为外植体,筛选适宜遗传转化叶片的诱导分化培养基和生根培养基,确定转化体最佳选择压浓度和抗生素浓度。结果表明:叶片诱导分化培养基以MS+6-BA 0.6 mg/L+NAA 0.1 mg/L附加1.5%蔗糖、0.6%琼脂效果最好,最佳生根培养基为1/2MS基本培养基附加IBA 0.4 mg/L、1.5%蔗糖、0.6%琼脂。选择压浓度以50 mg/L卡那霉素对叶片分化和嫩茎生根效果显著。培养基中附加300 mg/L的羧卞青霉素不仅有效的抑制农杆菌的生长,而且还对分化起促进作用。     

三种常用鱼药对宽体金线蛭的急性毒性作用

对给宽体金钱蛭自然资源的保护和大面积提供理论依据，研究了敌百虫、硫酸铜与硫酸亚铁合剂、生石灰3种常用鱼对宽体金线蛭的急性毒性作用。结果表明，3种药物对宽体金线蛭96h的半致死质量浓度（LC50）分别为1．55，2．68，108．74mg/L；安全质量浓度（Sc）分别为0．155，0．268，10．874mg/L。3种药物对宽体金线蛭的毒性由强至弱依次为：敌百虫、硫酸铜与硫酸亚铁合剂（5：2）和生石灰。     

商业银行信贷集中对经济金融运行的影响及对策研究

从信贷集中问题的具体表现入手,通过分析信贷集中产生的原因,如国家政策的干预、银行经营观念的转变、信贷管理体制高度集中、银行间恶性竞争等,揭示了信贷集中带来的负面影响,如引发系统性金融风险、不利于中小企业从银行获得资金、不利于区域经济的协调发展,提出了相应的解决信贷集中问题的对策建议。