苯胺高效降解菌的筛选及其生物学特性研究

采用富集培养法从高阳印染厂排污口土壤中分离得到209株微生物,定向筛选获得2株能够高效降解苯胺的细菌(菌株Ani-4-15和菌株Ani-5-61)。这2株细菌在苯胺浓度为400mg·L-1的培养液中培养30h后,培养液中苯胺的降解率均可达到85%以上;在苯胺浓度为1000mg·L-1的培养液中培养30h后,培养液中苯胺的降解率达70%左右。通过浊度测定法对菌株Ani-4-15和Ani-5-61在苯胺选择性培养基中的生长特性进行了研究,结果表明,两菌株最佳培养时间分别为15h和18h,最适生长温度均为30℃,最适生长pH值分别为7.0和6.0,对苯胺的耐受浓度范围在100～3200mg·L-1之间。在温室条件下,通过在灭菌土中分别接入一定量的苯胺(苯胺含量分别为400、600、800和1000mg·kg-1)和苯胺降解菌(106个菌体·g-1土),48h时菌株Ani-4-15和Ani-5-61对苯胺的降解率分别高达93.4%和96.6%。通过16SrDNA序列分析法明确了两株细菌均为假单胞菌属,利用非肠道革兰氏阴性杆菌鉴定系统(API20NE)进一步鉴定到种,菌株Ani-4-15为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida),菌株Ani-5-61为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)。     

简青霉对酚类和苯胺类污染物的降解研究

在培养4 d的简青霉培养体系中,分别加入不同浓度的酚类和苯胺类物质,观察这些有毒物质对简青霉生长的影响,并研究简青霉对这几种有毒物质的降解效果.结果表明:低浓度的酚类和苯胺类物质能促进简青霉的生长,高浓度的这些物质则对简青霉的生长有一定的抑制作用.同时简青霉能够很好地催化氧化苯酚,2,4-二氯苯酚和苯胺.当苯酚质量浓度为500 μg/mL，2,4-二氯苯酚质量浓度为50 μg/mL，苯胺的质量浓度为1 000 μg/mL时,简青霉对这三者的降解率都接近100%.在2,4-二氯苯酚质量浓度为60~125 μg/mL，苯胺质量浓度为2 000~5 000 μg/mL时,简青霉对它们的降解率分别达到60%和70%以上.简青霉对对硝基苯酚和对硝基苯胺降解效果不明显,在研究的浓度范围内,简青霉对它们的降解率只在10%左右.     

木质素快速降解细菌的初筛及相关酶活力变化规律研究

为建立木质素降解细菌的鉴定方法和初筛快速降解木质素的细菌,明确其相关酶活力的变化规律,本研究以营养琼脂(NA)为基本培养基,比较确定了每100 mL木质素降解细菌鉴定培养基中愈创木酚和苯胺蓝(1%母液)添加量分别为0.4 mL和20.0 mL。对本实验室菌种库保藏的18株细菌进行了定性鉴定,初筛获得了酶活力较强且可快速降解木质素的细菌4株,开展液态产酶活力测试。结果表明:除了菌株M1的Lac和LiP活力高峰期分别出现在第4天和第2天外,其余菌株的Lac、MnP、LiP活力高峰期均在第5天。菌株M7的Lac活力值、M1的MnP活力值和M7的LiP活力值最高分别可达189.5 U·mL~(-1)、247.8 U·mL~(-1)和75.9 U·mL~(-1),综合不同酶活力试验结果,初步判断菌株M1和M7在短时间内具有较高的木质素降解能力。研究结果可为进一步开展木质素快速降解细菌的应用研究提供参考依据。     

铈对满江红和槐叶萍降解苯胺类废水的效果分析

选取满江红和槐叶萍两种浮水植物为研究对象,通过在同等条件下的室内静态模拟试验,采用高效液相色谱法测定,分析比较了它们在稀土铈的施用下对废水中苯胺类化合物的降解效果。研究表明：满江红和槐叶萍对受试水体中的对硝基苯胺、2,4-二硝基苯胺和3-硝基苯胺均有降解效果。微量的稀土元素铈能促进植物对三类物质的降解,其中浓度为5 mg·L-1的稀土溶液促进槐叶萍效果最佳,降解率分别达到89.60%,89.86%和89.69%,但高浓度时出现抑制。满江红总体去除效果要优于槐叶萍。     

2-（4-硝基苯基）吡啶衍生物的合成研究

以对硝基苯胺和合成得到的2-溴-4-硝基苯胺为原料，采用Comberg-Bachmann芳基偶联反应．合成了两种电致磷光材料的关键中间体2-(4-硝基苯基)吡啶和2-(2-溴-4-硝基苯基)呲啶，并通过nHNMR确证了产物结构．研究结果表明．该合成方法简单、可行，芳基偶联产物2-(4-硝基苯基)呲啶和2-(2-溴-4-硝基苯基)呲啶的产率分别达到了22．5％和5．9％，其中前超过献报道水平，后未见献报道。     

N-硝基三氯苯胺类化合物的杀虫活性研究

试验了6个N-硝基三氯苯胺类化合物在500mg.L-1浓度下对菜粉蝶5龄幼虫的杀虫活性。结果表明,筛选出来的化合物N-硝基-N-(N'-对乙酰基苯基)-氨基甲酰-2,4,6-三氯苯胺、N-硝基-N-(N'-间硝基苯基)-氨基甲酰-2,4,6-三氯苯胺和N-硝基-N-(N'-对硝基苯基)-氨基甲酰-2,4,6-三氯苯胺对菜粉蝶5龄幼虫均具有一定的杀虫活性,其LC50分别为447.19mg.L-1、67.63mg.L-1和224.85mg.L-1。     

苯胺降解菌的分离及降解特性研究

[目的]筛选高效苯胺降解菌并研究其降解特性。[方法]通过驯化富集培养,从河南某化工厂活性污泥中分离出1株以苯胺为唯一碳、氮源的高效苯胺降解菌DA-K,并对该菌株进行了生理生化鉴定和生物学降解特性研究。[结果]DA-K菌株呈革兰氏阴性,细胞为杆状,菌落颜色呈灰白色,初步确定为不动细菌属。通过测定,DA-K菌株生长的最适pH为6.0,最适温度为30℃,可在苯胺质量浓度为2 500 mg/L的无机盐培养基上生长良好。DA-K菌株在苯胺浓度为1 000 mg/L,pH 6.0,30℃,180 r/min的条件下振荡培养96 h,苯胺降解率接近80%。[结论]DA-K菌株苯胺降解效率较高,具有实际处理苯胺废水的能力,为构建基因工程菌奠定了基础。     

苎麻脱胶菌株的原生质体紫外线诱变育种及应用

为实现苎麻的生物脱胶,本研究对苎麻脱胶菌株HY11原生质体进行紫外诱变筛选,以诱变菌株的果胶酶活性为筛选指标,筛选出脱胶菌株HY11-73,并对该菌株进行形态观察及脱胶试验.结果表明,菌株HY11-73果胶酶产量高于出发菌HY11 123.3%,生长速度提高了42.86%;诱变菌HY11-73对苎麻具有较好的脱胶效果,3 d可以完成脱胶,苎麻的失重率为34.04%;脱胶后纤维的化学成分分析结果表明,诱变菌HY11-73除水溶物含量外其余指标均优于出发菌HY11.     

苯胺降解菌Rhodococcus sp. E2的分离与苯胺氧化酶基因簇的初步鉴定

从江苏省南通市某农药厂的活性污泥中分离出一株苯胺降解菌株E2,根据表型特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析,将其鉴定为红球菌属(Rhodococcus sp.)的细菌。菌株E2降解苯胺的最适温度为30℃、最适pH为7.0,降解苯胺的最高浓度为800 mg·L-1。该菌能降解苯胺、邻甲基苯胺、对甲基苯胺和2,5-二氯苯胺,与已报道的苯胺降解菌的底物谱显著不同。通过扩增高度保守的片段和染色体步移,获得了菌株E2中负责苯胺降解的基因簇,该基因簇在基因组成、排布及同源性方面和已报道的基因簇有较大差异,是研究苯胺降解分子机理的较好材料。     

苯胺的微生物降解

从长期受苯胺污染的土壤中筛选到２株对苯胺降解能力很强的细菌,分别为假单胞杆菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．ＺＤ－１３）和芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｓｐ．ＳＡ－９）。２株细菌均属中温细菌,最适生长温度为３０℃,最适生长ｐＨ为７．０,在含低浓度苯胺培养基中生长比高浓度的好。在选定的最适条件下,测定了２株细菌的生长及其对苯胺的降解能力。在含２００ｍｇ／Ｌ、５００ｍｇ／Ｌ苯胺的培养基中,２８℃下振荡培养４８ｈ,苯胺降解率均为１００％,而在含１０００ｍｇ／Ｌ、１５００ｍｇ／Ｌ、２０００ｍｇ／Ｌ苯胺的培养基中,２８℃下振荡培养４８ｈ,苯胺降解率分别大于８０％、６０％和４０％。