杨树单宁对青杨天牛的抗虫性

为了研究杨树单宁含量与青杨天牛(Saperda populnea (Linnaeus))产卵时寄主选择和幼虫发育的关系,测定了中黑防、3930杨、107杨、美×青、新疆杨、银中杨6个杨树品系木质部和韧皮部中的单宁含量.结果表明,供试的杨树品系在生长季节韧皮部单宁含量略高于木质部,但差异不显著.木质部和韧皮部单宁含量最低时期均在5月(美×青木质部和107杨韧皮部除外),最高时期普遍在7、8月份.各月份之间韧皮部单宁含量存在显著差异.美×青单宁含量无论在韧皮部还是在木质部中都明显高于其他品系,中黑防韧皮部和新疆杨木质部中的单宁含量都明显低于其它品系.采用实验林田间生物测定法研究了青杨天牛对6个供试杨树品系的寄主选择及生长发育情况,发现品系间幼虫发育率排列顺序为:中黑防＞3930杨＞107杨＞美×青＞新疆杨＞银中杨,青杨天牛幼虫发育率与木质部单宁总含量相关关系不显著;产卵痕密度的排列顺序为:美×青＞107杨＞中黑防＞3930杨＞银中杨＞新疆杨.5月份韧皮部单宁含量与品系间产卵痕密度无显著相关关系,表明供试杨树枝条韧皮部中的单宁含量不是影响其选择寄主的关键因子.     

不同树种树皮物理特征与光肩星天牛危害的关系

为了明确不同树种树皮物理特性对光肩星天牛Anoplohora glabripennis刻槽产卵的影响。在调查光肩星天牛对甘肃省河西地区不同树种危害情况的基础上,对其4种常见寄主（新疆杨Populus alba var.pyramidalis、二白杨Populus gansuensis、柳树Salix babylonica、沙枣Elaeagnus moorceroftii）的树皮粗糙度、厚度、硬度及木质部厚度等物理特征进行测量,并对寄主物理特征与危害程度进行相关性分析。结果表明：光肩星天牛在不同寄主上的刻槽数量为二白杨>柳树>沙枣>新疆杨,羽化孔数量为：二白杨>柳树>新疆杨>沙枣,其中沙枣虽有较多刻槽但未发现天牛羽化孔。柳树与二白杨的树皮粗糙度和树皮厚度显著大于新疆杨。沙枣木质部厚度最大,二白杨的木质部厚度最小,2种杨树的树皮硬度均较低。相关性分析显示光肩星天牛的寄主选择与寄主树皮粗糙度和树皮厚度呈正比;与木皮比值呈负相关。树皮粗糙度和树皮厚度越大对光肩星天牛危害的抗性越弱,故新疆杨受天牛危害较轻;光肩星天牛虽喜欢危害沙枣树但并不能发育成功,可作为光肩星天牛的诱杀树种。     

10种杨树酶活性与抗性的关系

测定了对青杨脊虎天牛具有不同抗性的杨树,包括小青杨、小叶杨、小青×黑杨、大青杨、小黑杨、中东杨、白城二号杨、斯大林杨、俄罗斯杨、银中杨韧皮部中的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)以及超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果表明:抗虫树种中苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶、过氧化物酶的活性普遍高于感虫树种,过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活性无明显规律。     

1O种杨树酶活性与抗性的关系

测定了对青杨脊虎天牛具有不同抗性的杨树,包括小青杨、小叶杨、小青×黑杨、大青杨、小黑杨、中东杨、白城二号杨、斯大林杨、俄罗斯杨、银中杨韧皮部中的苯丙氨酸解氨酶（PAL）、多酚氧化酶（PPO）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）以及超氧化物歧化酶（SOD）的活性。结果表明：抗虫树种中苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶、过氧化物酶的活性普遍高于感虫树种,过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活性无明显规律。     

杨树中酚及酚酸与青杨天牛寄主选择和幼虫发育关系的研究

以在东北地区适生的白杨派、黑杨派、青杨派和杂交品系杨树为材料,对其酚酸及酚类物质的种类、含量与青杨天牛成虫产卵和幼虫发育的关系进行研究,以期确定杨树所含酚酸及酚类次生代谢物质与青杨天牛发生的关系.结果表明:在12年生的银中杨、欧洲黑杨和小青杨的韧皮部中能够检测到绿原酸、对羟基苯甲酸、丁香酸和水杨酸4种酚酸,未检测到香豆酸和阿魏酸,酚酸的总含 量顺序为小青杨(0.410mg·g-1)>欧洲黑杨(0.24mg·g-1)>银中杨(0.053mg·g-1);韧皮部中均含有苯酚和邻苯二酚,银中杨的酚类物质含量最高,小青杨次之,欧洲黑杨的含量最低;在3年生的银中杨、新疆杨、荷兰3930杨、107杨、中黑防和美×青杨的木质部中检测到阿魏酸、香豆酸、丁香酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、苯酚和邻苯二酚,新疆杨的酚酸总含量最高(0.473mg·g-1),银中杨和新疆杨两种酚类物质的总含量(1.021mg·g-1和1.460mg·g-1)低于其他品系.杨树韧皮部酚酸总含量与青杨天牛的产卵痕密度有显著的正相关关系.酚类与产卵痕密度相关关系不明显;木质部中酚酸和酚类的总含量与青杨天牛幼虫发育也没有显著的相关关系.     

杨树形态特征、组织结构与天牛危害的关系

本研究对不同杨树树叶、树皮、木质部的形态特征、组织结构进行了分析。毛白杨等白杨派树种叶片具毛,栅栏组组发达,树皮较光滑是黄斑星天牛不愿取食和刻槽产卵的重要机制;相反,大官杨、Ⅰ—214杨、加隆杨等黑杨派、青杨派及其杂种树叶无毛,海绵组织发达,树皮较粗糙,树皮和木质部质地较疏松,有利于天牛取食和刻槽产卵,因而成了黄斑星天牛的嗜食树种。     

豌豆白粉病抗性相关指标的研究

为研究豌豆白粉病抗病性与各生理指标间的关系,选取4种抗性不同的豌豆品种为试材,测定各品种间叶绿素和可溶性糖含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化。结果表明,不同抗性品种中叶绿素含量、POD、PPO活性和PAL活性随豌豆白粉病抗性减弱而降低;CAT活性随豌豆白粉病抗性减弱而升高;SOD活性与豌豆白粉病抗性没有明显变化规律。方差分析结果显示,不同抗感病品种间叶绿素含量、PPO活性、PAL活性和CAT活性差异极显著(P0.01),因此可以用叶绿素含量、PPO活性、PAL活性和CAT活性来反映对豌豆白粉病抗性的强弱。     

青枯菌对木麻黄防御酶活性及可溶性蛋白含量的影响

采用移栽浸根法将青枯菌接种到木麻黄A8无性系上,研究接种后木麻黄叶片中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)等防御酶活性及可溶性蛋白含量的变化规律。结果表明:接种后木麻黄防御酶活性发生了显著变化,青枯菌诱导了SOD、PPO、PAL酶活性的增加,表现出"升—降—升—降"的变化趋势,在木麻黄枯萎前,酶活性下降。相反,青枯菌抑制了木麻黄CAT、POD的活性,酶活性明显低于对照处理。此外,可溶性蛋白的含量也增加,其含量变化与SOD、PPO和PAL酶活性变化趋势基本一致,青枯菌可诱导提高木麻黄叶片SOD、PPO和PAL防御酶活性抵抗病菌的侵害。     

镉胁迫对3种杨树光化学生理和抗氧化系统的影响

[目的]比较俄罗斯杨、新疆杨和胡杨这3种杨树对镉胁迫的耐受性和生理响应差异。[方法]设置3个镉离子浓度(0、300、500mg/kg)和3个处理时间(30、40、50 d),测定叶片光合生理特性、抗氧化酶活性和渗透调节物质含量。[结果]新疆杨叶绿素含量高,但热耗散保护能力(用非光化学淬灭系数NPQ表示)和超氧化物歧化酶(SOD)活性低,镉胁迫导致其光化学效率和叶绿素含量显著降低,丙二醛含量大幅提高。相反,胡杨叶绿素含量低,SOD活性高,而俄罗斯杨的NPQ较高,因此均有较好的抗性。另一方面,3种杨树的脯氨酸含量均随镉胁迫加重而升高,以维持其抗渗透能力。[结论]俄罗斯杨和胡杨对镉的耐受能力高于新疆杨,叶绿素含量、NPQ和SOD活性影响了杨树的镉胁迫抗性。     

套袋对巨峰葡萄果实色素形成及PPO和PAL活性的影响

以巨峰葡萄为试材,研究了套袋对葡萄果皮色素形成及PPO、PAL活性的影响.结果表明:套袋处理总体上降低了葡萄果皮叶绿素、类胡萝卜素、花青苷、类黄酮、总酚的含量及PPO、PAL活性;类黄酮、总酚、PPO含量的变化与花青苷含量的变化具有显著或极显著的相关性,套袋处理可以降低部分指标间的相关系数;葡萄果皮花青苷含量与果皮PA...     

槭属5树种木材解剖特征比较分析

以槭属树种杈叶槭、多齿长尾槭、太白深灰槭、鞑靼槭和五裂槭为材料，比较分析5个树种的木材微观结构和亲缘关系，为近缘树种的木材鉴别及分类提供科学依据。结果表明，5个树种均为小管孔的散孔材，轴向薄壁组织较少。木材微观特征在树种间差异较大。首次发现五裂槭的木射线组织为异形射线组织，包括异形单列、异形Ⅰ型、异形Ⅱ型、异形Ⅲ型，直立射线细胞有榴莲型瓦状细胞和栅状直立细胞2类。多齿长尾槭、杈叶槭、太白深灰槭和鞑靼槭为同形射线组织，偶有直立射线细胞。由木射线组织类型，较易将五裂槭与多齿长尾槭、杈叶槭、太白深灰槭和鞑靼槭区分开。五裂槭的轴向薄壁细胞中可见结晶体且导管密度较小，抗性较强，材质较好。5个槭属植物的木材解剖结构均表现为较原始的特征，其中五裂槭和鞑靼槭进化程度相对较高。经聚类分析，多齿长尾槭、杈叶槭与太白深灰槭先聚为一类，再分别和五裂槭、鞑靼槭相聚；鞑靼槭和其他4个树种亲缘关系最远；聚类分析结果支持5树种现有的分类关系。     

三株柑橘溃疡病生防内生细菌对脐橙感染溃疡病后几种防御酶活性的影响

防御酶活性是寄主防卫反应能力的重要指标,很多生防因子可引起植物的防御酶活性增强。在前期工作中筛选到3株对柑橘溃疡病有防治效果的内生细菌Bacillus sp.、GN222、Kosakonia cowanii GN223和Bacillus subtilis GN232,为明确其防病机理,测定了3株细菌对纽荷尔脐橙感染溃疡病菌后几种防御酶活性的影响。结果表明,在感染溃疡病菌的情况下,3株内生细菌均可不同程度地诱导和增强脐橙树体内防御酶的活性。其中内生细菌对树体多酚氧化酶(PPO)和超氧化物歧化酶(SOD)的诱导强度小于溃疡病菌对这2种酶的诱导;菌株GN222对树体过氧化氢酶(CAT)的增强作用明显强于其他菌株;菌株GN223对树体过氧化物酶(POD)的诱导作用强于其他菌株;各处理中SOD活性总体较弱。总之,待测内生细菌对脐橙感染溃疡病菌过程中防御酶具有一定的诱导作用,但酶活性变化的时间和幅度因内生菌株不同而有明显的差异。试验结果可为3株内生细菌应用于柑橘溃疡病的生物防治提供理论依据。     

大花白麻和罗布麻种子萌发对温度的响应

为研究和探讨干旱荒漠区常见药用经济植物罗布麻和大花白麻种子萌发期耐盐性特征,以罗布麻和大花白麻种子为试验材料,测定不同温度条件下种子发芽率、发芽势、发芽指数、幼苗长度等指标。结果表明:1）低温和高温均会显著抑制种子萌发,罗布麻种子发芽率较高的范围为10℃～35℃,发芽率在82.5%～95.83%;大花白麻种子发芽率温度范围为10℃～40℃,发芽率在88.33%～94.17%。2）罗布麻和大花白麻发芽指数出现最大值的温度不一致,罗布麻在20℃出现最大值,发芽指数为54.20,大花白麻在35℃出现最大值,发芽指数为66.13。3）低温和高温均会影响罗布麻和大花白麻种子萌发进程,温度在10℃和40℃时罗布麻发芽进程缓慢,最终发芽率仅为80.83%和62.5%,而大花白麻仅在40℃发芽进程缓慢,最终发芽率也高达88.33%。表明在低温和高温对罗布麻种子发芽进程影响比大花白麻大。4）罗布麻和大花白麻胚芽和胚根长度出现最大值的温度均为30℃,长度分别为0.73 cm和0.69 cm、0.54 cm和0.61 cm。低温和高温使罗布麻和大花白麻胚芽胚根均显著降低,对幼苗生长产生了显著影响,在同一温度条件下,罗布麻的胚根胚芽长度大于大花白麻。综合分析大花白麻和罗布麻各项发芽指标,表明罗布麻和大花白麻适宜的种子发芽温度范围分别为15℃～35℃、10℃～35℃,大花白麻种子对温度的耐受性强于罗布麻。     

香豆素对灰葡萄孢霉菌的生长代谢及保护酶活性的影响

为探究香豆素对灰葡萄孢霉菌作用机理的影响，通过酶活试验、丙二醛（MDA)含量、葡萄糖含量变化试验，来分析香豆素对灰葡萄孢霉菌体内保护酶（SOD、POD、PPO）活性的影响，探究灰葡萄孢霉菌细胞代谢活动的强弱和细胞膜损伤程度变化。运用菌丝处理对照前后菌丝干重变化的方法来进行抑菌活性测定，以及用试剂盒测定的方法来进行酶活测定、MDA含量测定、葡萄糖含量的测定。结果表明，在液体培养基中香豆素对灰葡萄孢霉菌的EC₅₀为101 μg·mL^-1；香豆素对灰葡萄孢霉菌孢内的过氧化物酶（POD）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、多酚氧化酶（PPO）的最高抑制率分别为82.7%、66.67%、56.36%；经香豆素处理的菌丝体各时间点的丙二醛（MDA）含量明显>对照组，细胞膜透性显著增强，第72 h时，处理组MDA含量为16.53 nmol·mg^-1 prot，为对照组MDA含量的1.5倍；处理组葡萄糖含量始终<对照组，第36 h与对照组相比，处理组下降了45.63%。可见，香豆素可抑制灰葡萄孢霉菌的生长，致使细胞膜菌丝膜酯损伤，抑制灰葡萄孢霉菌酶的活性，降低细胞中葡萄糖的含量，影响细胞正常代谢生长，为灰霉病的防治提供一定的理论参考。     

甘蓝型油菜防御酶活性变化与抗病性的关系

对不同抗性油菜品种7～8叶期及盛花期感染油菜菌核病后及对照叶片中几种重要防御酶类活性变化的研究结果表明：7～8叶期叶片SOD活性极显著高于盛花期，而盛花期POD、PPO、PAL活性显著或极显著高于7～8叶期。与对照相比，感病品种处理叶片中SOD、POD活性显著增加，而抗病品种变化较小且因品种而异；7～8叶期及盛花期处理叶片中，各品种(系)PPO活性有不同程度的下降，其中抗(耐)菌核病品种(系)下降达显著水平，并且中R888达极显著水平；7～8叶期各品种(系)处理叶片中PAL活性没有明显变化，盛花期各品种(系)处理叶片中PAL活性均显著地下降，并以抗(耐)菌核病品种(系)下降较多，其中，中R888的PAL活性的下降达极显著水平。酶活与病斑直径的相关性分析也表明，品种抗性主要与7～8叶期对照叶片中SOD、POD活性及盛花期对照SOD、PPO、PAL活性水平较高有关，感病品种处理叶片中防御酶活性与对照相比增加比例较高，说明酶活增加比例与感病性有关。不同时期不同品种(系)防御酶活性的变化不同说明不同抗(耐)菌核病品种(系)在不同的发育时期存在不同的抗病机制。     

不同红树植物叶片元素重吸收特征

为明确不同红树植物养分重吸收状况,以福建漳江口拒盐红树秋茄和木榄、泌盐红树白骨壤和桐花树为对象,测定成熟叶和衰老叶中N、P、K、Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Zn含量。结果表明,4种红树植物成熟叶（Zn除外）、衰老叶（Cu除外）养分含量差异显著（P<0.05）,衰老叶N、P、K、Cu、Zn含量均低于成熟叶,为正转移,平均转移率分别为65.88%、38.35%、44.27%、35.78%和66.91%;衰老叶Mg、Fe、Mn（木榄除外）含量高于成熟叶,为负转移,平均转移率分别为-120.56%、-45.93%和-30.25%。泌盐红树（白骨壤和桐花树）N和P重吸收效率显著低于拒盐红树（秋茄和木榄）（P<0.05）,而泌盐红树的K重吸收效率显著最高（P<0.05）。不同红树植物养分重吸收效率与其成熟叶养分含量呈正相关关系（Mg除外）,与其衰老叶均呈负相关关系。综上可知,不同红树植物对不同养分的重吸收具有特异性,秋茄和木榄通过较高的N、P重吸收效率适应滨海的特殊生境,而白骨壤和桐花树则通过提高凋落物的N、P、Mg、Cu、Zn输入,对土壤养分的有效性作出正反馈。     

柑橘黄龙病菌侵染对甜橙叶片糖代谢的影响

【目的】研究甜橙（Citrus sinensis）在柑橘黄龙病菌（Candidatus Liberibacter asiaticus）侵染下不同时期糖代谢的变化,以探讨其与柑橘叶片中淀粉积累间的关系,为进一步阐明柑橘黄龙病的发病机理提供理论依据。【方法】以甜橙为供试材料,采用腹接接种病原的方法,试验组植株用感染黄龙病菌的芽条进行嫁接,对照组植株用健康芽条进行接种,每个植株均嫁接3个芽条。在检测到感病的植株中选取生长状况良好且接近的3株作为后续试验材料,每月采集1次成熟叶片,至10月份结束。采集的叶片立即抽提DNA和RNA,并进行可溶性糖及淀粉含量的测定,其余叶片用液氮速冻后保存于-80℃用于测定糖代谢过程中关键酶活性的变化,同时利用实时荧光定量PCR技术比较二者关键酶基因表达量的差异。【结果】随着病原菌胁迫时间的延长,可溶性糖和淀粉含量总体呈升高趋势,均在6月达到峰值,分别为对照的1.59和3.73倍,在感病后期开始有所下降;通过对二者的比值分析发现,感病植株的比值随时间的延长不断下降。在黄龙病菌侵染的不同阶段,各种酶的作用程度有所不同。感病植株的蔗糖磷酸合成酶（SPS）活性在感病初期迅速上升至顶峰,高达58.44 μg·g^-1·min^-1,至后期已略微低于对照;酸性转化酶（AI）总体显示出较高活性,各个时期均有显著性差异（P＜0.05）,感病中期活性最高为对照的2.91倍;中性转化酶（NI）活性在感病和对照中均维持较低水平,且变化趋势基本一致;可溶性淀粉合成酶（SSs）与束缚性淀粉合成酶（GBSS）协调作用,共同参与淀粉合成的调控;淀粉酶活性在感病不同时期均有所下降,在感病中期低至0.38 U·g^-1。定量PCR分析表明,蔗糖磷酸合成酶基因SPS1表达量显著升高,与其酶活性具有显著相关性（P＜0.05）。蔗糖分解相关基因中,蔗糖合成酶基因SuSy在感病不同时期的表达差异不大,变化幅度小;细胞壁酸性转化酶基因CSCWI在不同时期均上调表达,最高上调约7.4倍,且表达量一直维持在较高水平;与CSCWI相比,液泡酸性转化酶基因CUAI1的表达水平较低。淀粉合成相关酶ADP-葡萄糖焦磷酸化酶基因最高上调3倍左右;淀粉分解相关基因BAM3、MEX1和DPE2在不同时期有所下调,达到显著性差异水平（P＜0.05）。【结论】柑橘黄龙病感染甜橙后,对植株叶片中光合产物的形成与运转产生影响,扰乱宿主糖代谢平衡,与宿主淀粉积累及后期症状的产生有密切关系。     

青藏高原东南地区松萝科地衣的鉴定研究

对采自青藏高原东南地区的212份地衣标本进行调查研究,通过形态学观察和化学显色反应法鉴定出松萝属8种:长松萝、拟长松萝、粗皮松萝、灌松萝、亚灌松萝、花松萝、须松萝、角状松萝;树发属2种:树发、沟树发;树花属1种:中国树花;金丝属1种:金丝刷。其中,角状松萝为青藏高原地区新纪录种,树发、沟树发为西藏自治区首次报道;本研究填补了近50 a来青藏高原地区地衣松萝科植物资源研究的空白,丰富该地区地衣松萝科植物资源,为进一步开发利用奠定基础。     

黎母山引进外来树种对森林群落物种多样性的影响

采用样地调查法对黎母山片区内28 a和15 a加勒比松群落、20 a和26 a马占相思群落、16 a和21 a橡胶群落、10 a和3 a桉树群落、20 a次生林群落进行调查,通过树种重要值和物种多样性指数反映林地森林植被群落特征。结果表明:1）乔木层树种种类最多的是次生林群落40个种,20 a马占相思群落乔木层树种共29个,21 a橡胶和3 a桉树群落未调查到乔木;灌木种类最多为20 a马占相思群落,共5个种,草本种类最多为3 a桉树群落,共7个种。2）次生林优势种为贡甲和青梅,重要值分别为17.87%和14.76%;28 a加勒比松群落乔木树种重要值最大为鸭脚木38.94%,15 a加勒比松群落乔木树种重要值最大为中平树37.99%,20 a马占相思群落乔木树种重要值最大为细齿叶柃18.80%,26 a马占相思群落乔木树种重要值最大为八角枫30.86%,16 a橡胶群落乔木树种重要值最大为白楸31.63%,10 a桉树群落乔木树种重要值最大为细基丸45.74%;森林群落内灌木树种与草本种类比较少。3）黎母山不同外来树种与次生林群落Simpson指数、Shannon-Wiener指数均表现为乔木层>灌木层>草本层,乔木层Pielou指数低于灌草层。4）森林群落更新层未调查到外来树种自主更新幼树,但加勒比松和马占相思群落均生长海南乡土树种。黎母山引进不同外来树种对森林群落优势树种种类具有差异,不同程度上减少了森林群落物种多样性,改变了森林群落乔灌草层次物种组成结构,降低了群落结构复杂性。     

环介导等温扩增（LAMP）技术检测蜜蜂球囊菌

【目的】建立一种快速、灵敏的检测蜜蜂球囊菌（Ascosphaera apis）的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,为监测和防治蜜蜂白垩病提供技术支撑。【方法】根据蜜蜂球囊菌特异性序列ITS区,用在线引物设计软件PrimerExplorer V4.0设计并合成4条特异性引物A.apis-F3 (5′-ACATTGCGCCCTCTGGTA-3′)、A.apis-B3 (5′-TGGTTAGACCGGACAGTCG-3′)、A.apis-FIP (5′-TAAGACGGGACGATCGCCC AACCTGTCCGAGCGTCATTG-3′)和 A.apis-BIP (5′-GAAAGGCAGTGACGGCGTCGGGCCACTAGAGCGAAAGAC-3′),进行LAMP扩增试验,分别设置Mg²⁺终浓度为0、2、4、6、8、10、12、14 mmol·L^-1, dNPTs终浓度为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 mmol·L^-1, 内引物FIB/BIF终浓度为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 mmol?L^-1,甜菜碱终浓度分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mol·L^-1,反应温度为58、60、63、65℃,反应时间分别为30、40、50、60 min,并利用实时浊度仪测定浊度值和扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳来检测LAMP反应的结果,确定优化的LAMP检测体系。以东方蜜蜂微孢子虫（Nosema ceranae）、蜜蜂微孢子虫（Nosema apis）、蜜蜂残翅病毒（Deformed wing virus,DWV）、蜜蜂囊状幼虫病毒（Sacbrood virus,SBV）、黑蜂王台病毒（Black queen cell virus,BQCV）和以色列急性麻痹病毒（Israel acute paralysis virus,IAPV）基因组为模板进行特异性验证。并用PvuⅠ酶切验证产物,最终确定LAMP反应体系的准确性;进而通过将蜜蜂球囊菌基因组DNA进行10倍梯度稀释,分别获得DNA浓度0.2231、0.2231×10^-1、0.2231×10^-2、0.2231×10^-3、0.2231×10^-4、02231×10^-5、0.2231×10^-6、0.2231×10^-7、0.2231×10^-8 μg·μL^-1作为模板,比较LAMP和普通PCR检测灵敏度,并检测验证该技术在临床应用上的可行性。【结果】建立了一种特异检测蜜蜂球囊菌的方法,反应条件优化后的检测体系为4 mmol·L^-1 Mg²⁺、1.2 mmol·L^-1 dNTPs、1.6 mmol·L^-1 FIP/BIP、0.4 mol·L^-1甜菜碱,并在63℃反应60 min可完成检测。选用蜜蜂球囊菌、东方蜜蜂微孢子虫、蜜蜂微孢子虫、蜜蜂残翅病毒、蜜蜂囊状幼虫病毒、黑蜂王台病毒和以色列急性麻痹病毒的基因组作为LAMP反应模板进行特异性检测,结果显示仅有蜜蜂球囊菌有扩增曲线和梯状条带,建立的LAMP检测体系有很好的特异性。将蜜蜂球囊菌基因组DNA浓度0.2231、0.2231×10^-1、0.2231×10^-2、0.2231×10^-3、0.2231×10^-4、0.2231×10^-5 μg·μL^-1作为模板进行PCR反应后,检测结果为阳性,随DNA浓度降低,电泳检测不能观察到PCR的扩增产物。进行LAMP反应时,浊度曲线和电泳条带显示可检测DNA浓度为0.2231×10^-6 μg·μL^-1。LAMP每反应检出量比PCR高10倍,并且方法简单、节省时间。【结论】成功建立了准确、快速、低成本的LAMP检测蜜蜂球囊菌技术,为相关研究和应用提供了技术支持。