聚丙烯酰胺同功酶电泳法测定玉米种子纯度分离技术

聚丙烯酰胺同功酶电泳法测定玉米种子纯度分离技术山西省原平市种子公司（０３４１００）史耀先亢银平用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定种子的纯度,是一项先进的技术,现已编入国家新的种子检验规程中。用该项技术鉴定简便、快捷、准确且成本低。现将酯酶同功酶的分离技术作如下...     

Aspergillus carneus M34聚木糖酶与植酸酶同步生产的评估及聚木糖酶最适化生产

半纤维素为自然界中仅次于纤维素的木质纤维素,而聚木糖为农业废弃物中最主要的半纤维素成分,与聚木糖降解有关的酵素总称为聚木糖酶群(xylanolyticenzymes)(Collinsetal.,2005)。植酸(phyticacid)广泛存在于自然界中,植物中的含磷化合物多以此形式存在(Cosgrove,1966),植酸酶(phytase)能将植酸分解成肌醇、肌醇磷酸及无机磷。利用培养条件探讨了同步提升聚木糖酶(xylanase)与植酸酶(phytase)活性的可行性,并以茭白笋壳中获得的半纤维素为碳源,利用反应曲面法进行聚木糖酶的最适化生产。以期了解AspergilluscarneusM34之聚木糖酶与植酸酶2种酵素的生产关系,并对农业废弃物的再利用有所贡献。依据磷源、碳源与实验设计之结果,显示聚木糖酶及植酸酶,在因子种类的选择以及阶层的调整时,无法由同一个因子的改变而达到活性同步提升之目的。中心混成实验所得到的数学模式,平稳点的形式为鞍点,预估的聚木糖酶活性为11.66U/mL;而在聚木糖酶最适化生产上,当碳源为1.5%茭白笋壳半纤维素,氮源为0.8%酵母萃取物与0.4%氯化铵,起始pH值为7.00,于30℃培养5d后,可获得的最大酵素活性为(27.31±1.14)U/mL。     

用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行小麦、大麦品种鉴定的标准方法

一、原理从种子中提取的醇溶蛋白在pH3.2条件下用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离,产生的蛋白质条带与遗传基因有关,被称为品种的“指纹”(fingerprints)。由单粒种子所产生的“指纹”可用于鉴定品种的真实性和纯度。     

白木香聚酮环化酶基因AsPKC1的克隆及表达分析

聚酮环化酶是植物聚酮合成途径中的关键酶之一,可催化CoA类前体直接合成多环结构。作为聚酮合成下游产物的2-(2-苯乙基)色酮是名贵中药材沉香形成的重要标志物之一,聚酮环化酶可能在其形成过程中发挥着重要作用。本研究基于白木香结香转录组数据,首次克隆了1个白木香聚酮环化酶基因,命名为AsPKC1,该基因的编码区共含1 116个核苷酸,编码371个氨基酸残基。AsPKC1编码的蛋白序列与已报道的PKC蛋白高度相似,与锦葵科棉花、榴莲和可可树具有较近的亲缘关系,聚于进化树的同一分支;该蛋白的等电点为9.04,分子量为40.43 kD,包含3个糖基化位点和28个磷酸化位点,为非分泌型蛋白,α螺旋和无规则卷曲组成其主要二级结构。实时荧光定量PCR验证实验表明AsPKC1的表达具有组织特异性,并且在结香茎干中持续上调表达,其第9天在白木香茎干中的表达量为对照组的6.52倍。本研究为进一步解析聚酮环化酶基因在沉香标志物2-(2-苯乙基)色酮合成及白木香结香过程中的作用提供了数据支持。     

蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳测定玉米纯度研究现状

为了促进蛋自质聚丙烯酰胺凝胶电泳测定玉米纯度方法的标准化进程，本文根据本单位的实验和近年来发表的文献，总结了该方法的必要性，可靠性，谱带关系和鉴定原则，概括了其不足和研究方向。     

低聚木糖主要成分的核磁共振分析

采用核磁共振波谱分析技术,利用核磁共振碳谱、核磁共振氢谱和二维(2D)核磁共振,通过样品与木二糖、木三糖、木四糖、木五糖、木六糖标准品的图谱对比分析,确定低聚木糖混合物中各组分的1H和13C的准确归属。结果表明,木聚糖糖苷键数量越多,中间糖的共振峰强度会越大。低聚木糖样品中主要成分为木二糖、木三糖等糖链很短的低聚糖。     

低聚木糖主要成分的核磁共振分析

采用核磁共振波谱分析技术,利用核磁共振碳谱、核磁共振氢谱和二维(2D)核磁共振,通过样品与木二糖、木三糖、木四糖、木五糖、木六糖标准品的图谱对比分析,确定低聚木糖混合物中各组分的1H和13C的准确归属.结果表明,木聚糖糖苷键数量越多,中间糖的共振峰强度会越大.低聚木糖样品中主要成分为木二糖、木三糖等糖链很短的低聚糖.     

利用种子蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定向日葵种子纯度的研究

采用种子贮存蛋白SDS-PAGE技术，对13份向日葵杂交种和自交系进行了鉴别，结果表明，它们的种子蛋白电泳图谱差异明显，特征谱带稳定。种子蛋白电泳鉴定与田间小区种植鉴定种子纯度结果之间存在极显著的线性正相关性。该技术可作为向日葵杂交种和自交系种子纯度鉴定的一种新手段。     

聚氨基酸2000对芦柑的肥效试验初步研究

聚氨基酸 2 0 0 0是一种新型环保型养分吸收促进剂 ,它易被生物降解 ,无毒、无害、无残留 ,能富集营养元素 ,有效供给植物吸收利用 ,从而提高肥料利用率 ,降低肥料用量 ,减少肥料对环境的不利影响 ,系环境友好产品 ;为了确定聚氨基酸 2 0 0 0对芦柑的最佳使用浓度 ,于 2 0 0 0年 6月至 9月在福建永春进行了试验。1　材料与方法试验材料聚氨基酸 2 0 0 0 ,由北京艾实华科技有限公司提供。在福建永春天马柑桔场进行了芦柑试验 ,设 3个处理对照 (0 ppm)、4 0 ppm、80 ppm,每个处理选 5株 ,分别于 2 0 0 0年 6月 15日、8月 8日、9月 3日分3次洒…     

低场核磁共振技术在水果采后品质检测中的研究进展

低场核磁共振(LF-NMR)技术作为水果采后检测技术,因具有无损、便捷、准确、实时获得数据、样品用量少等优点,已在水果贮藏保鲜领域得到一定的研究和应用。本文介绍了低场核磁共振技术的基本原理,并从水分分析、组织结构分析、缺陷鉴别、内部失调研究、营养成分分析等方面综述了国内外低场核磁共振技术在水果采后品质检测中的研究进展,总结了该技术存在的问题,并对其应用前景进行了展望。     

花生种子脂肪酸含量的微量、快速测定

摘要：脂肪酸的含量是油料作物重要的加工指标之一,而目前的脂肪酸测定方法步骤繁琐、耗时长、需要样品量大,育种工作者要对大批的后代材料进行检测是非常困难的。并且因为籽粒粉碎后不能延续后代,在待检测材料种子量很少时,常遇到检测与繁种的矛盾。本研究建立了一种微量、快捷的花生脂肪酸检测方法,使花生脂肪酸检测变的非常简便。从花生籽粒上切取0.020 g,采用提取液（苯：石油醚＝1：1）提取5 min,0.5 mol L-1甲醇钠酯化10 min后即可进行气相色谱分析,使以往需要用几个小时的工作在15 min内完成,大大缩短了检测时间。通过与传统的索氏提取(GB/T 5009.6-2003)、甲酯化方法(GB/T 17376-1998)比较,本方法结果准确可靠。     

烤烟氯含量与有机酸类物质及感官评吸质量的关系分析

为研究烤烟叶片氯含量与有机酸类物质及感官质量的关系,在国内主产烟区采集294 份烟叶样品,采用描述统计法分析烤烟氯和有机酸含量的数量特征,采用聚类分析法研究了烤烟不同氯含量水平下有机酸含量及感官质量的变化。结果表明：烤烟样本氯含量变幅0.08%~1.60%,平均值为0.44%±0.28%;不同烟区之间烤烟叶片氯含量差异显著,不同部位之间烤烟氯含量差异不显著。基于烤烟氯含量的聚类分析将供试样本分为低、中、高3 类：在低类群中,非挥发性有机酸、有机酸总量较低,高级脂肪酸、挥发性有机酸含量中等;在中类群中,有机酸类物质含量均最高;在高类群中,非挥发性有机酸、有机酸总量中等,高级脂肪酸、挥发性有机酸含量较低。烤烟感官质量评吸总分与氯含量呈显著负相关,随氯含量的提高而逐渐降低。     

两种测定风化煤与土壤腐殖酸含量方法的比较

选择GB11957-2001中的容量法和土壤腐殖质组成测定法，比较二者对风化煤、耕层土壤（石灰性褐土）、矿区土壤（栗钙土）腐殖酸含量的测定结果，及其实验过程、样品用量的不同，并对土壤腐殖质组成测定法中重铬酸钾溶液浓度进行比较选择。结果表明，GB11957-2001中的容量法对风化煤、耕层土壤（石灰性褐土）腐殖酸含量测定结果约为土壤腐殖质组成测定法的4倍，但对于腐殖酸含量较低的矿区土壤（栗钙土），两种方法测定结果相同。相对而言，GB11957-2001中的容量法在实验过程中更易达到实验要求，具有易操作性。通过实验，提出了风化煤、土壤样品分别在两种实验方法中的合理用量，和土壤腐殖质组成测定法中重铬酸钾的合理浓度为0.4000 mol/L。     

大豆脂肪酸含量的QTL分析

利用Charleston(♀)×东农594(♂)的F14和F15代永久自交系群体154个单株后代,在2年3点条件下用气相色谱法测得其籽粒5种脂肪酸的含量,利用Win QTL Cartographer2.5复合区间作图法(CIM)进行QTL分析。结果共检测到47个相关的QTL,分布在13个连锁群上。多年多点同时检测到的QTL共有15个,其中控制软脂酸性状的2个,包括qPal-C2-2和qPal-A1-1;控制硬脂酸性状的4个,包括qSt-B1-1、qSt-B1-2、qSt-D1a-1和qSt-C2-1;控制油酸性状的3个,包括qOle-B2-1、qOle-G-1和qOle-H-1;控制亚油酸性状的有2个,包括qLin-C2-1和qLin-H-1;控制亚麻酸性状的4个,包括qLino-B1-1、qLino-C2-1、qLino-D1b-1和qLino-J-1。这些QTL的一致性较高,为特异脂肪酸含量标记辅助育种奠定了基础。大豆脂肪酸含量的主效QTL数量不多,效应大的不多,可能还受许多未能检测出来的微效基因控制。     

Half-Seed Analysis: Rapid Chromatographic Determination of the Main Fatty Acids of Sunflower Seed*

The halt-seed technique, with some recent modifications of traditional analytic methods, is proposed for selecting sunflower with modified fatty acid composition. A rapid method was used for extracting the oil and for methylating the fatty acids (about 3 min per sample). Thin-layer chromatography (TLC) plates activated with AgNO₃, and/or gas chromatography (GLC) with capillary columns were used to analyse the methylated esters. Half-seed, whole-seed and meal analysts of sunflower and other oilseed species confirmed the validity of the method with regard to sampling, analytic result and embryo germinability. In addition, GLC using a suitable internal standard can be used to evaluate the percentage oil content of the seed. About ten samples per hour can be analyzed with GLC versus 20—25 with TLC. These times can be further shortened in practice in the laboratory by partially overlapping some steps.     

Genetical and Physiological Investigations on Mutants for Polyenoic Fatty Acids in Rapeseed (Brassies napus L.) III. Breeding Behaviour and Performance*

Rapeseed oil is marked by, 1 too low content of linoleic acid and a too high, content of linolenic acid to meet the nutritional quality requirements. First mutants with a considerably improved poly en OIL fatty acid (t.a.) pattern were low in vigour and seed yield. The present experiments were set out to analyze their mode of inheritance and to check the hypothesis chat a low linolenic acid content of the thylakoid membranes inhibits sufficiently high yields of such mutants for physiological reasons. Six independently induced mutants transmitted the high linoleic and low (or in one cast high linoleic acid content of their seed oil by one recessive gene: two expressed allele mutated allele in an intermediate fashion. Of six double mutants of various origin, three revealed an independent, additive action of two loci for the changed polyenoic f.a. contents, while in the three others the mutant alleles exerted partial dominance over their plus alleles. One or two backcrosses with productive varieties improved the performance of the mutants stepwise over the original types. It is therefore, concluded that mutations towards the desired polyenoic f.a. convent are not necessarily incompatible with high seed yields, when the responsible genes are transferred into an appropriate genetic background. But strong effects of environment on yield, oil content and polyenoic f.a. content of the mutants were still seen in a yield test of second backcross progenies.     

不同时期四倍体刺槐叶片氨基酸营养及其生物量初步分析

测定了廊坊地区饲料型四倍体刺槐叶粉4个不同时期的粗蛋白质含量及18种氨基酸组分,用氨基酸分(AAS)和必需氨基酸指数(EAAI)对其氨基酸营养进行评价,并结合其生物量对最佳刈割时期进行了分析。结果表明,饲料型四倍体刺槐叶粉4个时期的粗蛋白1、8种氨基酸总量和12种必需氨基酸含量均较高,且呈现随时间的推移而逐渐下降的趋势;其必需氨基酸分(AAS)均较高,氨基酸组成较平衡;对牛、猪、鸡、鸭、鹅、草鱼、对虾和羊8种动物的必需氨基酸指数(EAAI)4个时期之间无差异,均大于0.86,可作为这些动物的优良植物饲料蛋白源;在7月中下旬其生物量和营养达到了最佳结合点,适宜采摘或刈割。     

油茶生长发育过程中脂肪酸成分的测定分析

为了研究油茶生长发育过程中脂肪含量及脂肪酸成分的变化,分析测定2个油茶品种在不同生长时期油茶籽中的脂肪酸成分。采用索氏提取法提取油茶籽中的脂溶性成分,经甲酯化处理后用气象色谱分离和鉴定,运用面积归一法确定各成分的相对百分含量。结果表明,在整个发育过程中油脂形成有两个高峰,分别在9月上旬和10月上旬;种子种脂肪酸的主要组成是不饱和脂肪酸,油酸含量最高,其次是亚油酸和油酸,饱和脂肪酸以棕榈酸和硬脂酸为主,其中油酸呈明显上升趋势,棕榈酸和亚油酸呈明显下降趋势,硬脂酸呈小幅上升趋势,亚麻酸呈小幅下降趋势。     

桑蚕蛹中氨基酸测定及分析

为开发蚕蛹新资源,本文测定了桑蚕蛹中13种氨基酸含量。采用OPA柱前衍生化,反相高效液相色谱法,梯度洗脱方法,荧光检测器检测,分析蚕蛹中各种氨基酸含量。蚕蛹中天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丙氨酸、牛磺酸、蛋氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸的含量分别为63.97 mg/g、72.48 mg/g、32.46 mg/g、52.21 mg/g、6.531 mg/g、35.63 mg/g、31.37 mg/g、21.39 mg/g、1.806 mg/g、71.01 mg/g、68.08 mg/g、35.86 mg/g、25.34 mg/g,总氨基酸含量为518.15 mg/g,其中人体必需氨基酸占45.88%。建立的反相高效液相色谱法测定微量氨基酸的方法简便、快速、灵敏、准确。     

方格星虫氨基酸含量测定及其营养价值评定

将鲜方格星虫和干方格星虫用酸水解后使用全自动氨基酸分析仪对氨基酸种类及含量进行测定,并对其营养价值进行评定。结果表明,方格星虫样品中含有18种氨基酸,鲜方格星虫谷氨酸和天门冬氨酸含量较高,分别为3.48%和2.02%,胱氨酸(0.21%)和色氨酸(0.21%)含量较低;干方格星虫中谷氨酸(11.89%)和精氨酸(7.94%)含量较高,胱氨酸(0.45%)和色氨酸(1.07%)含量较低。根据FAO/WHO理想模式评定标准,方格星虫干样品中的氨基酸均达到优质蛋白源标准,鲜方格星虫样品中的氨基酸大部分达到优质蛋白源标准。