大豆DNA导入引起稻米蛋白质含量变异的遗传稳定性及赖氨酸含量分析

利用浸种及苗期浇灌法和花粉管通道法将高蛋白含量的大豆总DNA导入水稻，提高了水稻后代种子的蛋白质含量和总氨基酸及赖氨酸含量。三代水稻种子蛋白质含量的数据分析结果表明：利用大豆总NDA的导入不仅可以迅速有效地提高稻米蛋白质和赖氨酸含量，而且稻米高蛋白、高忱酸变异性状还能够稳定表达至第三代；本试验还分析比较了两种DNA直接导入法，虽然从总体而言，在提高种子蛋白质含量以及保持后代种子高蛋白性状的遗传稳定性方法，利用花粉管通道法导入外源大豆DNA，相对浸种及苗期浇灌法效果更好，但从不同株系蛋白质含量的追踪分析结果显示，连续两年采用大豆DNA溶液浸种及苗期浇灌处理获得的株系，在维持后代种子高蛋白性状的表现方面效果更明显：三代经大豆DNA处理的水稻种子，赖氨酸含量都伴随着氨基酸总含量的提高而提高，而且第二代和第三代种子的赖氨酸含量都超过0.5%。     

大豆DNA导入引起大麦籽粒蛋白含量及氨基酸含量变异的遗传稳定性分析

采用花粉管通道法和两种不同压力基因枪法将大豆总DNA导入大麦，提高了大麦后代籽粒的蛋白质含量和必需氨基酸含量。四代大麦籽粒蛋白质含量追踪分析及第四代籽粒氨基酸含量分析结果表明，部分大麦籽粒的高蛋白含量及质量变异性状能够稳定遗传。本试验还分析比较了两种DNA导入法，采用基因枪法比花粉管通道法在保持后代高蛋白遗传稳定性方面效果更好。在两种不同压力基因枪处理中，1300psi压力处理比1500psi压力处理更适合大豆总DNA的导入。在本试验中我们还获得了两个高蛋白性状较稳定的穗行，它们的蛋白质平均含量分别比对照提高20．67％和17．99％。     

离子束介导大豆DNA导入小麦的蛋白质含量稳定分析

摘要：为了提高小麦蛋白质含量,采用离子束介导法将大豆（Glycine max）豫豆23号的基因组DNA导入小麦（Triticum aestivum L.）品种中育5号和淮阴9628。获得T1代高蛋白含量（>15%）单株114株,蛋白质含量最高达21.44%,显著提高了小麦蛋白质含量。从T1到T3代连续单株选择,获得了16个遗传上基本稳定的T3代株系。结果表明,离子束介导的大豆基因组导入是小麦高蛋白含量改良的可行途径。     

大豆DNA对玉米籽粒蛋白质含量的影响

报道了采用花粉管通道法转大豆DNA的玉米在自交选育2~3年后,玉米籽粒中的蛋白质含量变化。结果表明,大豆DNA可影响玉米籽粒的蛋白质含量。3个选出的玉米材料1DA5、5DB2和26DC1的总蛋白含量均比对照提高了3个百分点以上,使玉米籽粒的总蛋白质含量分别达到13.44%、12.84%、13.83%,且材料5DB2的醇溶蛋白在其总蛋白中所占的比例较对照降低了1.7%,而材料1DA5和26DC1的醇溶蛋白在其总蛋白中所占的比例均较对照明显提高。这说明,大豆DNA的转入引起玉米发生了不同的可遗传变异。     

导入外源总DNA获得大豆早熟新品系

本文报道了在大豆自花授粉后，利用其形成的花粉管通道，将提取的含有早熟血缘供体大豆绥农８号的总ＤＮＡ，直接导入受体大豆黑农２６号中。在后代Ｄ２代中获得３个早熟株系，熟期比受体提早１５天，并迅速稳定。经异地鉴定，Ｄ９０－１０７２品系产量比对照品种提高１９．１％，于１９９３年进入省区试。经过对该组合的受体，供体及转化后代进行ＲＡＰＤ分析，证明供体ＤＮＡ片段进入受体引起后代基因组的变异。     

不同因素对花生总DNA提取的影响

为探究CTAB方法提取植物DNA中影响DNA产量和质量的诸多因素,以豫花15号花生嫩叶为材料,采用酚氯仿、1 0000 r/min、氯仿、不剪口、氯仿一步、酚氯仿一步、不摇30 min 7种不同的处理方法纯化其基因组DNA,并通过外观、紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳对所提取的DNA样品进行检测,比较不同因素对DNA提取质量的影响.在充分考虑得率、蛋白质含量及DNA分子完整性等指数后,总结出酚氯仿纯化豫花15号花生叶片DNA的最适方法.     

黑龙江省用大豆分子育种技术育成新品种

黑龙江省农科院采用外源DNA直接导入法，育成我国第1个大豆分子育种成果一优质高蛋白高产大豆新品种黑生101。此品种是研究人员应用我国创立的国际最先进的“花粉管通道直接导入外源遗传物质”技术，把抗逆性强的高蛋白半野生大豆作为供体，提取其总DNA导入受体栽培大豆，获得导入后代，经常规育种程序选择、培育、鉴定而决定，并对导入后代和受体同时进行长达7年化学跟踪分析选育而成。     

离子束法导入大豆DNA小麦的蛋白质含量分析

为了提高小麦蛋白质含量,采用离子束介导法将'豫豆23号'(Glycine max)的基因组DNA导入普通小麦(Triticum aestivum L.)品种'中育5号'和'淮阴9628',获得了114株T1代高蛋白含量(15%)单株,蛋白质含量最高达21.44%,显著提高了受体亲本小麦蛋白质含量。从T1到T3代连续单株选择,获得了16个遗传上基本稳定的T3代株系。结果表明,离子束介导大豆DNA导入小麦,可显著提高转化后代株系的蛋白质含量。随着世代的提高群体蛋白含量有逐步提高的趋势,在T3代基本形成遗传稳定的高蛋白品系。该方法是小麦蛋白质含量改良的可行途径。     

以PCR为目的的大豆叶片DNA提取方法的比较研究

模板DNA的质量直接影响PCR扩增的结果,而不同提取方法及其缓冲液的成份与浓度对提取DNA的质量有重要影响。本文以5个栽培大豆品种的叶片为材料,比较分析了SDS与CTAB两种提取方法以及不同浓度CTAB提取缓冲液对所提取的DNA质量的影响,并通过PCR进行检验。实验结果表明：用1％(W/V)、2％(W/V)浓度的CTAB提取缓冲液和1．25％(WV)SDS提取缓冲液所提取的大豆叶片DNA的质量较好,均能满足PCR扩增模板的需求,其中以1．25％(W／V)SDS提取得到的大豆叶片DNA质量最好,以其为模板扩增的效果最佳,而4％浓度的CTAB不适宜提取大豆叶片DNA。     

大豆不同生长时期基因组DNA提取方法的优化

以优质大豆品种冀豆7号、冀豆16号、五星1号、五星2号和MK（Maverick）不同生长时期的叶片为材料,分别采用不同方法提取大豆基因组,并通过对提取的DNA的含量测定、琼脂糖凝胶电泳分析和内参基因的PCR扩增,对不同方法所提取的DNA质量进行综合评价。结果表明：在嫩叶期,改进的CTAB法能够 分离出纯度高、质量好的DNA,而在开花期,采用本试验的新改良CTAB法可以有效去除多糖、酚类等物质得到完整性和纯度较好的大豆基因组,为大豆的分子生物学研究奠定了基础。     

转导外源总DNA创造农作物新种质

本文以高粱和向日葵为例介绍转导含目的性状种质总ＤＮＡ创造农作物新资源的方法。１９８８年以高粱ＩＣＳ－１２Ｂ为受体,以高粱具矮秆及早熟性状的ＩＳ７５１８Ｃ和具抗蚜性的ＢＴＡＭ４２８总ＤＮＡ为供体进行转导处理,Ｆ５得到含有不同目的性状的稳定系２３个。１９９２年以大豆辽豆１０号为外源ＤＮＡ供体,转导处理高粱１１５等３个恢复系,从Ｆ２始选择籽粒蛋白质和赖氨酸含量均高于对照（未转导的受体）的个体组成下一代,２个恢复系Ｆ４的蛋白质和赖氨酸平均含量都比对照增加,１１５分别增长７．８２％和３．６１％,０－３０分别增长２０．２７％和８．３４％。１９９２年以菊芋为供体,将其总ＤＮＡ导入向日葵保持系７７１８Ｂ中,Ｆ２和Ｆ３的接种鉴定结果显示Ｄｊ２５３和Ｄｊ２７３两个系对霜霉病（ＰＬ２）表现出完全免疫。     

通过直接引入外源DNA育成高产、 优质、 高蛋白大豆新品种黑生101

本文报道了利用花粉管通道技术, 将野生大豆DNA直接导入受体栽培大豆。 经分析、 鉴定 、 选择、 育成了集高产、 优质、 高蛋白于一体的新品种黑生101, 并经RAPD(Random Am plified Polymorphic DNA)分子验证, 证明供体DNA片段确已进入受体。 经连续7年分析, 黑生101蛋白质含量超过45%, 平均比受体高1.76个百分点; 球     

高油大豆的干燥与贮藏

高油大豆是指含油率在21％以上、蛋白质含量高于38％（干基）、主要用于榨油的大豆。据悉，大豆含油率每提高1％，加工企业就可获利2％，因此推广种植高油大豆以及对其进行深加工具有积极的意义。但是，随着全球经济一体化的发展，我国的大豆产业受到了越来越大的挑战，如何改变这一状况，已成为业界关心的话题。     

离子束辅助大豆基因群导入小麦的研究

用低能离子束辅助,将大豆全DNA分别导入中育5号、淮阴9628两个小麦品种,获得高蛋白(>18 5%)单株5株,最高株蛋白质含量为21 44%;低蛋白(<11 5%)单株3株,最低株蛋白质含量为10 96%。研究结果还表明,不同小麦受体基因型的转化效率明显不同。     

外源DNA直接导入甜玉米自交系后代性状变异

提取糯质玉米DNA利用花粉管通道法导入甜玉米自交系，其后代植株产生了变异，主要表现在株高、穗位高、叶面积等性状上的差异。经三代种植观察，D3代各变异性状趋向稳定。经品质分析，可溶性糖含量基本保持不变，蛋白质，淀粉含量有所提高。从而为今后玉米不同种之间的DNA导入创造新的变异品系，提供可参考的理论依据。     

新疆甘草DNA导入大豆性状变异的研究初报

1996年以大豆为受体，新疆甘草为供体，采用花粉管通道技术，将新疆甘 草DNA导入受体大豆中，当代种子全部收获（D0代） 。     

作物茬口与施肥对连作大豆化学品质的影响

采用两因素有重复完全随机试验,研究苜蓿、玉米和大豆3种茬口与施肥对连作大豆化学品质的影响。试验结果表明,茬口主效应对连作大豆的蛋白质含量、蛋白和脂肪的总含量分别有极显著和显著的影响,对脂肪含量影响不显著;即连作2年的大豆蛋白质含量分别比苜蓿茬和玉米茬上连作1年的蛋白质含量高1.08%和1.32%,差异极显著;连作2年的大豆蛋白质和脂肪总含量比玉米茬上连作1年的二者总含量高1.45%,达显著水平。施肥主效应对连作大豆的蛋白质、脂肪含量及二者的总含量影响均不显著,脂肪含量随施肥量增加有升高的趋势。茬口主效应与施肥主效应的互作对连作大豆的蛋白、脂肪含量及二者的总含量影响均不显著,大豆茬上施大豆专用复合肥375 kg/hm2（A3B4）组合蛋白质含量及蛋白和脂肪总含量最高,分别达39.86%和58.19%。茬口、施肥主效应及二者互作效应对蛋白质含量及蛋白质和脂肪总含量的影响趋势基本一致。     

一种改良的快速高质大豆基因组DNA提取方法

为了探索一种适用于大豆叶片基因组DNA的快速、高效的提取方法,在传统的SDS提取方法的基础上,通过将缓冲液成分和浓度进行改良并加入表面活性剂Tween-20,优化实验流程。用限制性内切酶对该方法提取的DNA进行酶切及电泳检测,可得均一弥散条带。以提取的DNA模版扩增大豆Actin基因,测序后证实片段正确。同样以其为模版以SSR引物Sctt011进行SSR-PCR反应,并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,也可观察到特异性明显且无杂质的目的条带。实验结果表明,该方法提取的DNA完全符合各种分子实验的要求。本研究方法可用于快速提取大豆叶片基因组DNA,同时提高了提取DNA的质量。     

瘤胃微生物总DNA提取方法的比较

目前如何获得完整的瘤胃微生物总DNA是对瘤胃微生物在分子水平研究中关键的一步。瘤胃微生物总DNA分子片段很大,大概在15kb~20kb,因此需要选择一种合适的提取方法来获得完整的总DNA片段。笔者研究采用物理方法如玻璃珠研磨震荡法、反复冻融法、超声波破碎法、液氮研磨法等,化学方法如表面活性剂十二烷基磺酸钠（sodium dodecyl sulfate,SDS）、溴化十六烷三甲基铵（Cetyltrimethyl Ammonium Bromide,CTAB等）,酶解法（溶菌酶、蛋白酶K等）相结合,并对其进行比较,选择最佳的提取方法,使其符合以后PCR扩增要求以及其它后续研究工作。试验结果表明用玻璃珠研磨震荡加CTAB提取液的方法、反复冻融加SDS提取液的方法提取的瘤胃微生物总DNA的效果高于其它方法,并且通过电泳以及PCR检测,所提取的DNA的量适于进一步的分子生物学研究。     

离子注入法转大豆DNA小麦不同发育时期MDH的分析

经离子注入将大豆的DNA导入小麦栽培品种新麦9号,测定了其不同发育时期MDH同工酶的变化。结果表明:离子注入介导转大豆DNA处理后,在拔节期、抽穗期、灌浆期和成熟期均引起了小麦MDH活性和带型上的变化,且离子束介导转大豆DNA片段处理对MDH的影响大于离子束介导转大豆全长DNA的处理。