组织培养快速繁殖技术讲座 第五讲 试管苗的增殖

由外植体消毒灭菌产生了无菌苗,再从少量试管苗变成大量试管苗,从一瓶发展到几十瓶,甚至成千上万瓶,这就叫试管苗的增殖。试管苗的增殖主要有两种途径:一种是外植体先长出不分化的愈伤组织,再促进愈伤组织的培殖,而后从愈伤组织上分化出不定芽、胚状     

红掌组培苗的炼苗要点

红掌组培苗(瓶苗)是在组培室中最适宜其生长的条件下完成其生长过程的。组培室同外界自然环境条件相比,差异很大。把瓶苗移出组培室,到室外栽培必须让瓶苗有一个适应的过程,也就是健化过程,通常称为炼苗。 瓶苗的过渡及移栽 瓶苗一般在恒温25℃左右的培养室中培养,为使其能够更快地适应自然环境,先把瓶苗移出培养室放到过渡室中7-10天,让瓶苗适应新的环境后打开瓶盖,让瓶内外空气进行交换,2-3天后再取出。出瓶时要用镊子将苗小心钳出,切忌用力过重,以免造成伤口,真菌侵入,引起病害。然后将苗放入清水中把根部的琼脂清洗干净。洗苗时用的清水要注意水温,冬季宜用温水,以免水温过低冻伤幼苗。洗净后的小苗在800-1000倍的多菌灵或百菌清溶液里蘸一下后再进行移植。 移栽时,要先用小木棍将穴盘的基质挖个小洞,然     

东方百合试管鳞茎培育方式的比较

为促进试管鳞茎抽薹,缩短其形成商品球的时间,以东方百合试管鳞茎为材料,采用不同的培育方式,研究其品质与抽薹率的影响。对东方百合试管鳞茎不同培育方式的比较研究,结果表明：瓶苗冷藏或用基质冷藏,冷藏后的试管鳞茎生理变化规律相同,即淀粉含量、蛋白质含量均降低,可溶性糖含量和还原糖含量均升高;而用基质冷藏或用瓶苗冷藏,暗培养的试管鳞茎抽薹率都高于光照培养;采用暗培养或光照培养,基质冷藏的抽薹率都高于用瓶苗冷藏。工厂化生产百合种苗时宜采用暗培养试管鳞茎结合种前用基质冷藏的培育方式。     

非洲菊组培种苗的炼苗与定植

非洲菊组培种苗在经过组培室培养阶段后,容易出现无根、苗小、苗弱、皱叶等瓶苗现象,需经过炼苗、移栽、定植三个环节,才能正常出圃。因此,克服瓶苗现象,提高种苗成活率和培育壮苗是种苗管理的关键。     

百合组培苗成花栽培管理技术

我国是世界上百合的分布中心。百合(Liliumspp.)是百合科多年生草本无皮鳞茎类花卉,是世界上主要切花之一。随着人们生活水平的提高,对百合切花的需求日益增加。现以我们在组培苗培养成功的基础上,对百合组培苗成花的栽培技术进行探讨。1材料选择以学院组培中心的东方型康巴斯(Compass)百合组培苗进行试验,其球根直径为6～8mm,在学院的花卉园艺场大棚内对组培苗进行成花栽培管理。2组培苗的前期炼苗管理将组培室的出瓶苗洗去苗基部的培养基,用轻松培养土基质(50%砻糠灰、25%蛭石或珍珠岩、25%园土)在穴盘中进行前期炼苗,保持土壤湿润和85%…     

蓝桉实生瓶苗繁育技术体系的建立

以蓝桉种子为试材,采用3因素5水平的均匀试验设计,以MS培养基为基础培养基,并在其中添加不同浓度的6-BA和NAA,对蓝桉种子进行无菌培养,通过对不同处理组合下测定指标的描述统计分析、方差分析和回归分析,探讨琼脂用量和外源激素(6-BA和NAA)浓度对蓝桉实生瓶苗培育的影响效应,构建蓝桉实生瓶苗培育的技术体系,为蓝桉组...     

SDIC在马铃薯脱毒组培苗开放式快繁生产中的应用试验研究

在马铃薯脱毒组培苗的快繁生产过程中常会出现污染问题,马铃薯组培工厂化发展的瓶颈是解决试管苗快繁过程的污染问题。在马铃薯脱毒组培苗的培养基中添加安全、稳定、光谱杀菌剂二氯异氰尿酸钠（SDIC）,从不同浓度的SDIC灭菌效果、培养基中加入SDIC是否高压灭菌、SDIC加入不同培养基对瓶苗生长的影响、SDIC对试管薯诱导的影响等方面进行试验,结果表明,一定浓度SDIC能有效降低脱毒试管苗组培快繁的污染率,不影响瓶苗的正常生长。采用SDIC添加到培养基中,可进行开放式快繁,进行高效、规模化生产组培苗。     

非洲紫罗兰的家庭组培及批量生产（四）

四、瓶苗培养将接种好的三角瓶,放入无菌箱内或窗台上散射光处。无菌箱内用日光灯补光,温度保持18～29℃都能正常生长,最适温是20～25℃。顺便说一下,剪切叶片时,要选生长健壮、不太老也不太嫩的叶片,接种时期最好避开炎夏。外植体经过一个多月的培养,开始叶片弯曲,部分部位变厚——都是细胞分裂增殖的征兆。不久,外植体上可长出分生组织或直接长出许多不定芽。40多天后,可根据生长情况分瓶。用手术刀对外植体进行切割,植入原配方的培养基中继代培     

利用分子标记检测霍山石斛不同继代次数试管苗的遗传稳定性

分别以霍山石斛成熟种子、茎段和愈伤组织为试管苗的初始材料进行继代培养,利用RAPD、ISSR以及DALP3种分子标记方法对不同继代次数（1-4代）的霍山石斛试管苗进行分析,结果表明：以成熟种子和茎段为材料的继代培养,其试管苗后代在所检测的范围内未探查到变异,具有较高的遗传稳定性。以愈伤组织为材料的继代培养,其试管苗后代从第4代开始,部分引物带型发生变化,但变化甚微,仅是带型强弱的改变。以愈伤组织为材料的继代培养物种内存在一定的变异,但在4代以内仍可稳定遗传。3种继代方式比较之下,以成熟种子和茎段为材料的继代培养是更能稳定遗传的组培快繁方式。     

试管苗瓶外生根的研究进展

针对组培工厂化育苗迅速发展的实际，结合国内外的发展动态，科学而客观地介绍了试管苗瓶外生根的形态解剖构造，分析了影响生根的生理原因，试管苗的质量，瓶外生根的方式，环境条件的研究现状，并对试管苗瓶外生根与瓶内生根进行了比较，同时指出未来试管苗瓶外生根的发展方向。     

甘蔗腋芽培养苗假植管理技术研究

甘蔗腋芽培养苗假植成活率较低,是目前通过组织培养的方式加速甘蔗种苗繁殖的一个“瓶颈”问题。本文在试验的基础上,分别从壮苗炼苗、一级苗假植、二级苗假植及大田移栽等环节阐述了一套行之有效的甘蔗腋芽培养苗假植管理技术操作规范。     

大岩桐在北方的栽培管理

大岩桐为苦苣苔科大岩桐属多年生球根草本花卉,原产于南美巴西等国,世界各国都有栽培,我国均作为温室花卉培养。大岩桐叶片肥厚翠绿,花形奇特,色泽艳丽,尤其是重瓣大岩桐花朵大且姹紫嫣红,更具观赏价值。炼苗移栽为获得整齐一致、性状优良的大岩桐种苗,其繁殖多采用组培的方法。当瓶苗株高5cm,根长0.5～1cm时开瓶炼苗,3～5天后移到温室。取瓶苗时要用镊子先将根部周围的琼脂轻轻搅碎,便于将瓶苗取出且不伤根,洗净根系上的琼脂(必要时用50%多菌灵可湿性粉剂500倍液浸根)沥干后,即可移栽。栽后覆薄膜保湿,但要注意遮荫通风,尽量少浇水,温室白…     

麻黄离体培养和分子生物学研究进展

从麻黄离体培养的器官再生、愈伤组织的诱导和分化、细胞悬浮培养、麻黄雌配子体离体培养单倍体植株的建立、麻黄愈伤组织再分化的发育解剖学、愈伤组织培养及其碱含量的变化等方面阐述了麻黄组织培养和麻黄分子生物学研究进展,认为应在扩大麻黄繁殖系数研究的同时,注重对从试管苗到大田移栽的中间环节研究,进而实现麻黄工厂化育苗,达到解决大规模人工栽培种源匮乏的问题。进行系统的分子生物学研究,为麻黄的优良基因导入、表达及高产与高含碱量新种质的选育奠定坚实的理论基础。     

马铃薯试管微型种薯生产的研究

脱毒马铃薯试管苗在进入大田前需要在温室中假植和定植,而假植不但费工,而且所需条件十分严格,一不小心就会脱水死苗。同时,试管苗不能长期保存,携带调运也不方便。为了解决上述问题,我们进行了马铃薯试管微型薯生产的研究。一、材料和方法本项研究在岚县脱毒种薯中心实验室进行。将切段繁殖在MA培养基上的脱毒苗在温度20℃、光照3000勒克司的培养架上培养一个半月,于1988年12月10日取20瓶,每     

小麦花培育种技术研究

对5个小麦不同组合基因型的F1,F2,F3花药进行培养,结果表明:不同组合基因型在同一杂种世代的花药愈伤组织诱导率、愈伤组织鲜重和绿苗分化率等方面存在较大差异,而同一组合基因型在不同杂种世代的花药愈伤组织诱导率、愈伤组织鲜重和绿苗分化率等方面差异较小。花药愈伤组织诱导率与绿苗分化率具有显著的相关性(r2=0.903)。以石4185为亲本配制的两个组合基因型,在F1,F2,F3都表现出较高的花药愈伤组织诱导率和绿苗分化率,说明石4185是理想的花培育种桥梁亲本。     

籼、粳、糯稻成熟种胚体细胞培养力的差异

在相同的培养条件下,比较了不同类型水稻成熟种胚体细胞培养力的差异。结果,糯稻的愈伤组织诱导率和生长速度高于粳稻和籼稻。就愈伤组织质地和色泽而论,籼稻趋向于紧密型、淡黄色,粳稻趋向于松散型、鲜淡黄色,糯稻趋向于粘质状、淡黄色。而籼稻的愈伤组织绿苗分化率、绿苗+绿芽分化率和体细胞培养力高于粳稻和糯稻。这些结果为利用种胚培养进行水稻品种改良提供了一定的理论依据。     

蝴蝶兰中小苗养殖技术

蝴蝶兰属兰科蝴蝶兰属，又称蝶兰，因花大如蝶、形态美妙、花色艳丽、色泽丰富、花期持久而深受世界各国人民的喜爱，素有“兰花皇后”的美誉。蝴蝶兰为多年生常绿附生植物，繁殖方法主要以组织培养法和无菌播种为主，从试管中移出的幼苗，1．5～2．0年时间即可开花。所以蝴蝶兰瓶苗移栽是组培室培养进入温室培养的第一步，而蝴蝶兰中小苗养殖对环境要求严格，对栽培技术要求也高，蝴蝶兰中小苗的长势直接影响到后期生长及其开花品质，是蝴蝶兰进行工业化、规模化生产的关键一步。     

观赏植物火鹤、红宝石喜林芋的快速繁殖

通过研究不同生长素和细胞分裂素组合配比对火鹤、红宝石喜林芋分化和生根的影响,确定了最佳继代、壮苗和生根培养基,并针对火鹤选择出了优良的快繁无性系作为快繁材料.探讨了恒温与变温培养对愈伤组织鲜重增殖分化壮苗的影响.试管苗移栽驯化试验结果表明,只有在基质温度达15～20 ℃,室温22～25 ℃时试管苗才能正常生长.还确定了适宜的移栽基质.试验表明以上2种植物皆可在瓶外生根.     

大葱试管苗玻璃化机理的探讨

本研究以章丘大葱组培正常苗和玻璃苗为材料,通过组织结构和生理生化特性分析,探讨了大葱试管苗玻璃化发生的可能机理。结果发现：与正常苗相比,玻璃苗的叶片横切面结构发生很大变化;玻璃苗组织含水量增加8．88％,叶绿素总含量极显著降低,降低率为67．19％,可溶性蛋白含量降低30．46％;过氧化物酶(POD)活性增加59．21％。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对蛋白质和同工酶进行分析,发现总可溶性蛋白、过氧化物酶和酯酶同工酶电泳谱带均出现增加、缺失等异常现象,这说明了玻璃苗在基因表达调控上出现差异,其内部机制可能已发生变化。通过以上结果我们初步认为：离体培养环境对试管苗造成的胁迫直接或间接地引起体内酶和蛋白质表达的失常与玻璃化密切相关。     

小麦不同杂种世代花药脱分化特性研究

对5个小麦不同组合基因型的F1，F2，F3花药进行培养，结果表明：不同组合基因型在同一杂种世代的花药愈伤组织诱导率、愈伤组织鲜重和绿苗分化率等方面存在较大差异，而同一组合基因型在不同杂种世代的花药愈伤组织诱导率、愈伤组织鲜重和绿苗分化率等方面差异较小。花药愈伤组织诱导率与绿苗分化率具有显著的相关性。以石4185为亲本配制的两个组合基因型，在F1，F2，F3都表现出较高的花药愈伤组织诱导率和绿苗分化率，说明石4185是理想的花培育种桥梁亲本。