基因枪轰击后大麦幼胚的组织培养及植株再生研究

以基因枪轰击后的6个大麦品种的幼胚为材料，研究了不同质量浓度的ABA，2，4-D，ZT和IAA对胚幼的出愈率、愈伤组织分化特性和植株再生能力的影响。结果表明：用1．0mg／L的ABA在诱导培养基上处理幼胚能大大降低胚芽鞘发生率，并对出愈率和胚性愈伤组织的形成无不良影响；经1．0mg／L的2，4-D诱导产生的胚性愈伤组织转到分化培养基上以后，芽分化率可达8％～17％，而4．0mg／L 2，4-D处理芽分化率极低。1．0mg/L ZT与0．1mg／L IAA配比能降低分化过程中不定根的发生率，有利于芽的分化。通过植株再生系统的优化，6个大麦品种的转化幼胚植株再生率达到2％～8％。     

燕麦愈伤组织诱导和分化再生影响因素的研究

以燕麦3个品种(系)幼胚、幼穗为材料,通过组织培养方法,研究了基因型、培养基、外植体对愈伤组织诱导、继代和分化再生的影响。结果表明,对愈伤组织的诱导,基因型和培养基起重要作用,对幼胚作用极显著,对幼穗作用显著;外植体不同也影响愈伤组织形成,随培养基成分改变而变化,且幼穗较幼胚更易培养;2,4-D浓度影响愈伤组织生长和胚性愈伤组织形成,3 mg/L 2,4-D有利于愈伤生长,促进胚性愈伤形成;草莜一号幼穗愈伤组织有很强的继代能力,继代培养330 d仍具有46.58%的分化率,该材料在组织培养和基因工程研究中具有很大潜力。     

VB1和干燥处理对小麦幼胚愈伤组织培养的影响

以14个小麦品种为试验材料，研究不同浓度维生素B1和分化前的干燥处理对小麦幼胚愈伤组织诱导、分化过程的影响。结果表明，小麦幼胚愈伤组织的分化率在不同基因型之间差异显著，其中最高的为郑新992(71．9％)；在愈伤组织诱导、继代以及分化培养的Ms培养基中添加维生素B1(盐酸硫胺素)10mg／L有利于小麦幼胚胚性愈伤组织的发生，同时对促进小麦幼胚愈伤组织的分化也有显著影响；在转入分化培养基前对愈伤组织进行干燥处理(12h)可有效提高其分化频率。     

通过基因枪和农杆菌介导用BADH基因转化小麦

土壤盐碱是一种严重障碍作物生产的环境因子,甜菜碱醛脱氢酶BADH基因是一种重要的可赋予植物渗透调节抗性的基因。本研究用基因枪法及农杆菌介导法向小麦幼胚和成熟胚愈伤组织导入了BADH基因。用PDS-1000／HE基因枪轰击2933块幼胚愈伤组织,分化出了45株再生植株,分化率为1．53％。PCR分析表明,其中的5株为BADH基因转化植株。用PPT涂抹其叶片,进一步证实了PCR的结果。以小麦成熟胚愈伤组织为受体,用农杆菌介导转化1968块愈伤,仅再生出了5株绿苗,PCR检测结果均为阴性。但对其转化愈伤组织的PCR检测表明,外源基因已在受体细胞中实现了整合。以幼胚愈伤组织为受体,用农杆菌介导转化2933块愈伤,共再生出了21株绿苗。对其进行PCR检测,仅有5株为BADH基因转化植株。转化处理过的幼胚愈伤组织的绿苗再生率（0．72％）高于成熟胚愈伤（0．25％）。与对照相比,所有的转化植株均能够在0．5％NaCl（w／w）条件下正常生长,表明外源BADH基因已经整合并表达。     

冬小麦幼穗不同发育期不同穗段离体培养的效应

本文主要研究了四个小麦品种不同长度的幼穗及幼穗不同穗段离体培养的效应.结果:(1)取长为0.1厘米、0.3厘米的幼穗全穗、或穗长为0.5厘米的幼穗上段或下段、或穗长为1.0厘米的幼穗上、中、下三段离体培养,愈伤组织诱导率均达100％;取穗长为2厘米的幼穗上、中、下段离体培养,愈伤组织诱导率分别为34％、80％和94％;取穗长为3厘米的幼穗上、中、下段离体培养,愈伤组织诱导率分别为14％、38％和58％.(2)用长1厘米以上和长0.1厘米的幼穗高体培养,其愈伤组织主要是分化根;将长0.3～0.5厘米的幼穗愈伤组织直接转移到分化培养基上,植株分化率为78.8％     

高粱转基因再生体系建立初探

为建立高粱转基因再生体系,本研究以XL52、‘三尺三’、M81-E、07-27、BJ-285幼穗和幼胚的愈伤组织及幼胚为材料,利用农杆菌介导法进行高粱转Bar基因转基因体系研究。结果表明:以XL52幼胚、XL52和M81-E幼胚愈伤组织、‘三尺三’幼穗愈伤组织为外植体转化都获得了抗性愈伤组织,通过分化培养只有XL52幼胚转化所获得的愈伤组织获得转基因苗。本研究成功获得了抗性愈伤组织,为以后高粱转基因再生体系建立提供借鉴。     

甘啤4号大麦幼胚愈伤组织诱导及植株再生的研究

本研究以甘啤4号的幼胚为外植体材料,以模式品种Golden promise为对照,研究了不同培养基和激素配比对甘啤4号幼胚愈伤组织的诱导及植株再生的影响。研究结果表明,在同一培养基上,甘啤4号出愈率低于Golden promise,但都达到50%以上;在诱导愈伤组织的过程中,甘啤4号在IM2培养基上的出愈率较高,达71%,IM1与IM2培养基上形成的愈伤质量较IM3好,说明培养基对愈伤组织的出愈率起决定作用;且研究发现dicamba较2,4-D能提高大麦幼胚的出愈率。在相同的培养基上,Golden promise的诱导率明显高于甘啤4号,可见基因型对大麦愈伤组织的诱导率起决定作用。且不同的培养基和不同激素配比对幼胚愈伤组织的诱导率及分化率不同,分化培养基DM1的分化率高于DM2,这说明除基因型外,激素也对植株再生产生重要影响。研究证明甘啤4号愈伤组织诱导率及分化率均较高,适合于作为遗传转化的受体材料。     

水稻愈伤组织继代培养中游离氨基酸库的变化与再分化的相关

以4个水稻品种的成熟胚诱导的愈伤组织为材料，研究了继代培养中胚性与非胚性愈伤组织的游离氨基酸库的变化和愈伤组织再分化的关系，结果表明，天冬酰胺含量随愈伤组织继代培养时间的延长而成倍增加，而酷氨酸、鸟氨酸和氨含量则显著减少，品种之间表现一致，与愈伤组织分化率的相关系数达显著或极显著水平，胚性愈伤组织经     

小麦幼胚的脱分化状态及再生性能研究

通过对30个品种（系）的研究，确立了小麦幼胚最佳取材时期的种子形 态指标：在幼种子发育到嫩绿色，脊部由光亮转变为无光泽并具一层绒毛时，幼胚刚好发育到透明的后期和半透明前期。该时期仅有几个小时。探讨了不同基因型的幼胚的致密愈伤组织诱导状况及其继代保持和分化能力，并获得了良好的再生体系。使得致密愈伤组织诱导率达到91％，在14d时分化频率达到96．7％，70d时分化频率仍可达62％。并就温室材料和大田材料以及不同年份大田材料的致密愈伤组织的继代保持和分化能力进行了比较。     

光身稻的培养特性研究

本文对光身稻培养特性进行了系统研究。结果指出:(1)光身稻的成熟胚培养力极低，其绿苗分化率几乎等于零，为0.7%，但其幼穗培养力则较高，绿苗分化率为44.8%; (2)光身稻的花药愈伤组织出现时间较早，为25天左右，而且愈伤组织诱导率也较高，为7%，但其绿苗分化率很低，仅为0.35%; (3)光身稻的适宜诱导培养基为M8; (4)花药愈     

高梁体细胞无性系变异的筛选与利用

选用幼穗、幼胚、茎尖等五种外植体进行组培,结果表明,幼穗和幼胚的分化率最高,最适宜选用进行高粱体细胞克隆变异利用研究。对9个高粱品系的166个R2代株系进行了观察分析,除两个品系外,其余7个均有变异株系出现,其中晋粱5号的变异频率高达26%,9个品系的平均变异频率为11.24%。筛选到多个高粱骨干恢复系的无性系变异材料,并且以优良变异系R111为父本育成了优良杂交种一个,已通过审定,定名为晋杂18号。     

高粱体细胞无性系变异的筛选与利用

选用幼穗、幼胚、茎尖等五种外植体进行组培,结果表明,幼穗和幼胚的分化率最高,最适宜选用进行高粱体细胞克隆变异利用研究。对9个高粱品系的166个R2代株系进行了观察分析,除两个品系外,其余7个均有变异株系出现,其中晋粱5号的变异频率高达26%,9个品系的平均变异频率为11.24%。筛选到多个高粱骨干恢复系的无性系变异材料,并且以优良变异系R111为父本育成了优良杂交种一个,已通过审定,定名为晋杂18号。     

Effect of donor plant age and inflorescence age on microspore culture of Brassica napus L.

Summary Effect of age of donor plants and age of inflorescence on embryogenesis in microspore culture of B. napus was examined. Microspores isolated from buds of older plants had a higher embryo yield than those of younger ones. The effect of the age of inflorescence showed a different pattern. In older plants, a higher embryogenesis response was observed in microspores isolated from buds of new inflorescences, while in young plants, microspores isolated from buds of old inflorescences showed high embryo yield. These different responses were considered to be attributable to a difference in the developmental stage of pollen at the time of microspore isolation. Our results indicated that microspores collected from older inflorescences and older plants have sufficient embryogenic potential when the optimum developmental stage of pollen was used. Frequency of embryo to plant conversion was influenced by the size of embryos subcultured, but not by donor plant age or the age of the inflorescence.     

In Vitro Culture of Hybrid Indica Rice Combined with Mutagenesis

The mutagenic effects of gamma radiation and sodium azide (SA) immersion of explants on culturability and frequency of somaclonal variation in indica rice were investigated. The results showed that young inflorescence and mature embryo were satisfactory explants both for in vitro culture and for mutagenesis. 1 kR gamma rays applied to immature embryos and exposure of calli derived from mature seeds at the dose range of 250—500 R led to a higher rate of callusing and plantlet regeneration, 0.5—1 kR would be the appropriate exposure for young inflorescence to produce a better culture response and higher variability, and 2.5—5.0 kR the optimal dose range for mature embryos. Immersion of mature seed in 2—4 mM sodium azide solution is a concentration level to induce these effects in indica rice. Application of optimal gamma exposure and chemical mutagen to rice explants enhanced the somaclonal variation frequency and provided a large number of variants useful for rice breeding.     

组织培养途径改良定型小麦品种的研究

选用ＣＡ９０７０、ＣＡＤ８６９４,京４１１三个定型品种进行组织培养,比较了三种培养方式的培养效果,调查了Ｈ２,Ｒ２株系主要农艺性状的遗传变异情况,结果表明,幼胚培养效率最高,基因型间差异小,花药培养的基因型间差异显著,花药培养后代农艺性状的变异率高于幼胚培养,且其性状值向更小的方向变异,而幼胚培育诱花的变异范围大于花药培养,获得了ＣＡＤ８６９４的花培变异株系９５Ｈ０５５,株高降低了１１．５ｃｍ,获     

洋葱通用型愈伤组织诱导的建立

为研究洋葱愈伤诱导体系建立问题,对洋葱种子幼苗、鳞茎盘、幼嫩花序不同组织进行愈伤诱导,同时对愈伤组织进行继代培养和发芽诱导筛选。结果表明,12份洋葱种子材料未诱导出愈伤组织,12份洋葱球的鳞茎盘只有‘早春黄3号（不育系）’诱导出愈伤组织;22份洋葱花序在黑暗条件进行愈伤诱导,诱导率为100%,说明洋葱不同组织对愈伤的诱导发生存在差异,洋葱幼嫩花序培养基诱导率100%,说明洋葱最佳诱导愈伤的组织为幼嫩花序。对不同材料愈伤进行继代培养,‘早春黄3号（不育系）’和‘黄金大玉葱’愈伤生长最快;利用液体培养基进行继代培养,能够快速、高效扩繁愈伤组织。选用27份不同梯度组合的培养基对愈伤组织进行出苗诱导,在光照条件下,开始会有绿色组织形成,全部诱导出根,均未诱导出苗。石蜡切片观察外植体诱导愈伤和继代培养愈伤无差异,再生培养基诱导后有根形态形成。说明不同成分的培养基诱导洋葱愈伤组织,其内部促进生根的激素增加,导致根的诱导发生。通用型洋葱愈伤组织的诱导形成,为不同基因型的洋葱诱导出苗、生根奠定材料基础,对洋葱基因编辑等技术应用具有促进作用。     

小麦单倍体幼胚离体培养研究

小麦单倍体幼胚由于胚乳发育异常不能提供营养物质,因此幼胚必须经过离体培养才能正常生长,而适宜的培养基是离体培养的关键。将小麦幼胚接种在8种培养基上,幼苗平均产生率分别为:30.95%、40.20%、42.20%、47.75%、45.00%、63.35%、50.00%和36.65%,结果表明1/2MS 0.2mg/LI-AA 0.2mg/L6-BAP 2%蔗糖 7.5g/L琼脂pH=5.8培养效果最好。     

利用胚挽救获得葡萄三倍体植株

为获得三倍体葡萄新种质,以葡萄四倍体‘醉金香’×二倍体‘秋黑’杂交所得幼果为试材,研究了幼果低温处理天数、培养基IAA浓度、胚珠处理方式以及不同光质等因素对胚发育及胚萌发的影响。结果表明,采集授粉后35 d的杂交幼果,先进行4℃低温处理,再取出胚珠接种,有利于胚发育和萌发,以低温40 d和30 d处理的胚发育率和萌发率最高,分别为91.8%和24.4%;培养基IAA浓度为0.2 mg/L时可显著提高胚萌发率;进行切喙处理的胚珠胚萌发率显著高于完整胚珠接种;发光二极管LED复合光(红∶蓝∶白=3∶1∶1)比日光色荧光灯(日光灯)更适合杂种胚萌发;用流式细胞仪检测了20个杂种后代株系,其中三倍体株系19个,后代三倍体株率为95.0%。     

Allelopathic Effect of Conyza albida on Avena sativa and Spirodela polyrhiza

The allelopathic influence of four plant tissues of Conyza albida (stems, leaves and inflorescences) on oat growth were investigated using in vivo tests. Oat growth (fresh and dry weights of above and underground parts) was inhibited from phytotoxic activity of upper leaves and inflorescence tissues of C. albida in pot studies. The inhibition was significantly higher than in the other tissues studied. The inhibiting action of crude extracts and volatile compounds from young plants (rosette) and mature plants were examined using two bioassay methods: (a) seed germination and radicle growth of oat and (b) fresh weight of duckweed plants. Both bioassayed species exhibited greater phytotoxic response from the young plants, collected in winter, than from the mature ones.