桃儿七体细胞胚胎发生的初步探究

以桃儿七种子胚培养获得7 d生的无菌苗,切取无菌苗的下胚轴、子叶做为外植体,通过调控不同生长调节剂浓度配比,诱导培养获得愈伤组织,利用愈伤组织进行体细胞胚胎发生研究,观察体细胞胚胎的发育过程,分析不同激素配比对桃儿七体细胞胚发生的影响,从而建立桃儿七体细胞胚胎发生技术体系。本研究结果表明最适宜桃儿七愈伤组织诱导的培养基是MS+0.2 mg/L NAA+0.1 mg/L GA3+1.0 mg/L 6-BA,有利于胚性愈伤组织转化和增殖的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L GA3+300 mg/L CH+40.0 g/L蔗糖,培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+GA30.1 mg/L+NAA 0.01 mg/L有利于体细胞胚的增殖和萌发。     

赤霉素及光照对白芨种子无菌萌发的影响

以白芨蒴果为材料,采用涂布法接种白芨种子,研究植物激素和光照对白芨种子无菌萌发的影响.结果表明,种子分散良好,光照显著促进白芨种子的萌发,6-BA是影响种子萌发的主要因素,赤霉素对种子萌发作用不明显.在1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L GA3的培养基上,白芨种子萌发率达90％,萌发时间较短,形成的幼苗健壮.     

野生珍稀植物虎舌红组培快繁技术研究

以虎舌红带芽茎段为外植体,研究其培养的最佳培养基配方及培养程序,建立虎舌红快繁技术体系.结果表明:芽萌发的最佳培养基为:MS+ 6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L+GA31.0 mg/L,萌发率为73.33％;芽苗增殖最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+ NAA 0.5 mg/L+ GA3 0.1 mg/L,增殖系数可达7.5,且芽苗生长良好;生根培养基以1/2 MS+ IBA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L为最好,生根率达96.67％.在此培养基上添加不同浓度的活性炭,以0.2％ AC效果更好.炼苗以碎树皮的成活率最高,达91％.     

碗莲组培快繁技术初探

以碗莲‘案头春’茎尖为实验材料,对诱导培养基成份、培养基状态、最佳取材时期以及增殖培养基筛选等方面进行了研究。结果表明：最佳取材季节为10~12月份;碗莲茎尖分化最适宜培养基为MS + 1.0 mg/L 6-BA +0.25 mg/L NAA +1.0 mg/LGA3;适宜的增殖培养基为MS +2.0 mg/L 6-BA +0.25 mg/L NAA;固液培养状态：上层为5mm厚的MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.25 mg/L NAA + 1.0 mg/L GA3液态培养基,下层为1cm厚的MS + 1.0 mg/L 6-BA +0.25 mg/L NAA + 1.0 mg/L GA3固态培养基,更有利于芽诱导;培养过程中污染的芽苗用75%酒精1min、0.1%HgCl210min灭菌效果最好。     

高山羊齿孢子的组织培养

[目的]探讨不同灭菌方式对组织培养中高山羊齿孢子成活率的影响以及不同培养基对孢子萌发率的影响.[方法]利用NaClO、NaClO+酒精、升汞、升汞+酒精、升汞+NaClO、酒精这6种不同灭菌方式研究其对高山羊齿孢子成活率的影响;考虑4因素基本培养基、蔗糖、NAA、6-BA进行L16 (44)正交设计,研究其对高山羊齿孢子萌发率的影响.[结果]6种灭菌处理中,NaClO+酒精的灭菌效果最好;酒精的灭菌效果最差;在正交实验中,以1/2 MS+3％蔗糖+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA为高山羊齿孢子萌发的最佳培养基,萌发率达63.69％,以不加任何激素的MS培养基中萌发率最低.[结论]2种不同的灭菌剂混合使用比单独使用灭菌剂的效果好;基本培养基对高山羊齿孢子萌发率的影响最大,影响顺序为:基本培养基＞6-BA＞蔗糖＞NAA.     

三种植物生长调节剂对月季离体再生的影响

为了提高月季遗传转化的体细胞胚胎的植株再生率,以月季B103 (Rosa spp.)无菌苗为材料,探究不同浓度的细胞分裂素6-BA、KT、TDZ对植株生长的影响,并以优化的培养基EB和ET对成熟的月季B103体胚进行再生诱导。结果表明：添加KT的培养基(RK)上的无菌苗全部死亡,添加6-BA (RB)和TDZ(RT)的两组生长正常,最佳培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+GA33.0 mg/L+6-BA/TDZ 0.5 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂pH=5.7。成熟月季体胚在培养基MS+NAA 0.05 mg/L+GA33.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂p H=5.7上诱导分化,30 d内再生出数量最多的正常植株,再生率为20%。ET组分化出丛生状态的子叶,再生率高于20%。本研究表明ET2可诱导月季细胞分化出正常再生植株。     

黄连种子后熟与萌发期间外源激素效应研究

目的:研究黄连种子胚发育及种子萌发过程中添加外源激素的作用.方法:三种激素GA3、NAA、6-BA不同浓度按正交设计方法,搭配处理组合,对黄连种子进行处理,统计胚率、裂口率、萌发率.结果:三种激素对胚率均有显著影响,GA3和NAA对裂口率有显著影响,NAA对萌发率有显著影响;5号处理组合(GA35 mg/L NAA 0.5 mg/L 6-BA0.1 mg/L)能显著提高胚率、裂口率及萌发率.结论:黄连种子胚发育及萌发的不同时期激素效应不同,处理组合(GA3 5 mg/L NAA 0.5 mg/L 6-BA 0.1 mg/L)是最优激素组合.     

油用牡丹凤丹种子休眠解除及组织培养研究

以油用牡丹凤丹种子为材料,分析微波辐射及赤霉素浸泡处理对其休眠解除的影响,并在此基础上探讨在组培离体再生中不同激素配比对解除休眠处理种子的胚萌发、丛生芽诱导以及生根率的影响。结果表明:在1000 mg·L^-1赤霉素(GA 3)浸泡24 h后,凤丹种子的萌发效果最佳培养基为WPM+1 mg·L^-1 PVP+5 mg·L^-1 GA 3+1.5 mg·L^-16-BA+5 mg·L^-1 Ca(NO 3)2;丛生芽诱导增殖培养基为WPM+1.5 mg·L^-1 IBA+2 mg·L^-16-BA+2 mg·L^-1 PVP+250 mg·L^-1 Ac,增殖系数为2.20;诱导丛生芽生根培养基为WPM+2 mg·L^-1 IBA+1.5 mg·L^-1 NAA,生根率为55.56%。     

蕙兰杂交种子的无菌萌发和快速繁殖研究

本实验采用蕙兰传统品种‘崔梅’与普通蕙兰进行杂交,对不同发育阶段的种子进行无菌萌发实验,并作不同培养基的对照。对萌发原球茎的增殖及分化进行研究。探讨不同培养基、6-BA和NAA对根状茎增殖和分化的影响。结果表明: 110天的种子接种在KC培养基上萌发效果最佳,蕙兰原球茎增殖的最佳培养基为W+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L,根状茎分化和生根的最佳培养基为MS+NAA 1.0 mg/L +6-BA 0.5 mg/L。     

白皮松组织培养研究

为建立高效的再生体系,以白皮松成熟胚,子叶为外植体,经过初代培养和继代增殖培养,研究了不同植物生长调节剂种类及浓度、活性炭、GA3在组培各阶段的作用。结果表明：适合子叶诱导芽的培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.1 mg/L+TDZ 0.01 mg/L,适合胚诱导芽的培养基为MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L;适宜的继代培养基为MS+NAA 0.05 mg/L;以预处理胚（切除下胚轴）为外植体适宜生根培养基为1/2MS+IBA 0.3 mg/L;活性炭对芽增殖无显著作用,随活性炭浓度提高增殖系数有下降趋势;适量的活性炭和GA3可有效促进芽伸长。     

滇重楼种子休眠机理研究

探讨滇重楼种子休眠机理,为打破种子休眠促进滇重楼实生育苗提供理论基础。采用重量法、胚率测定、ELISA等方法对种子吸水特性、萌发抑制物及种胚休眠与发育的内源机理进行了研究。结果表明,滇重楼种子休眠属于形态学-生理学休眠类型。滇重楼种胚发育不完全、种子中存在萌发抑制物质是种子休眠的主要原因。种子不存在吸水障碍,与休眠无关。内源激素ABA和GA3在滇重楼种子休眠与萌发过程中起着重要作用,ABA是引起休眠的关键因素,ABA含量的降低是滇重楼种胚发育的始动因子,GA3有助于种子的生理后熟。萌发抑制物的存在可能抑制了种胚发育,而与生理学后熟过程无关。在自然条件下,滇重楼生境中较长的低温时期可能是滇重楼种子具有较长时间休眠的外界原因。     

植物生长调节剂对罗勒种子发芽及幼苗生长的影响

此实验研究不同浓度NAA、GA3、IBA和6-BA对罗勒种子发芽和幼苗生长的影响,用不同浓度的NAA、GA3、IBA和6-BA浸种24 h,通过浸种后种子发芽率的高低以及幼苗各项指标的不同来研究植物生长调节剂浸种对罗勒种子发芽和幼苗生长的影响。结果表明100 mg/L的GA3浸种后种子发芽率提高26.6%,总叶绿素含量增加30%,过氧化物酶活力增加70%;25 mg/L的IBA浸种后种子发芽率提高26.6%,总叶绿素含量增加25%,过氧化物酶活力增加60%,各项指标与对照相比均明显增加,因此,100 mg/L的GA3和25 mg/L的IBA浸种能够促进罗勒种子发芽和幼苗生长,建议在生产上使用。     

植物生长调节剂对‘秦冠’苹果花粉管生长和花粉萌发的影响

研究吲哚乙酸、萘乙酸、赤霉素、2,4-D、6-BA5种植物生长调节剂对苹果花粉管生长和花粉萌发的影响。以贮藏6个月的‘秦冠’花粉为材料,配制不同浓度梯度植物生长调节剂的固体培养基培养花粉,研究不同浓度植物激素对花粉管生长和花粉萌发的影响。结果表明,当吲哚乙酸≤1 mg/L、萘乙酸≤1 mg/L、6-BA≤5 mg/L、赤霉素≤10 mg/L时对花粉萌发有轻微促进作用,当浓度增大时抑制作用较突出;2,4-D对花粉萌发存在明显抑制作用;当赤霉素、2,4-D、吲哚乙酸、萘乙酸、6-BA浓度分别达到50、30、30、15、25 mg/L时,花粉遭受浓度迫害出现畸形扭曲。吲哚乙酸、萘乙酸、赤霉素、2,4-D、6-BA对‘秦冠’花粉管生长和花粉萌发均无明显促进作用,并且随浓度增大抑制作用较明显,人工辅助授粉时用于添加剂效果不理想。     

离体胚培养途径探索东北刺人参种子的休眠原因

为深入探索东北刺人参（Oplopanaxelatus Nakai）种子休眠的原因,在WPM培养基上对经过不同处理的东北刺人参种子胚进行离体萌发试验.结果表明：由于胚乳的存在,即使种胚已经完成了形态后熟,胚仍然不能萌发;种子胚在尚未分化完全时处于休眠状态,在离体条件下不能萌发;当胚完成分化以后,胚本身不是休眠的,在适宜的离体条件下能正常萌发,而且胚发育越接近成熟其萌发力就越强.在一定的范围内,外源激素对离体胚萌发有促进作用.     

露薇花‘爱丽丝’系列外植体诱导及增殖试验分析

以露薇花种子无菌播种苗和穴盘播种苗为试验材料,比较两种条件下种子发芽情况,并将两种幼苗作为外植体,移入初代培养基内进行诱导培养和继代增殖。运用主成分分析法和相关性分析法,并通过建立拟合生长曲线,量化评价不同播种方式幼苗离体培养下生长情况。结果表明,穴盘播种发芽率较无菌播种发芽率高,幼苗根系发达,但苗离体培养污染率较高;离体无菌培养更有利于露薇花植株生长发育的进行,可将穴盘发芽幼苗灭菌后移植进培养基培养;继代培养穴盘播种和无菌播种苗之间无差异;继代培养3次,单瓶接种两株植株,植株长势最好,萌芽数,萌芽均高,增殖倍数高。通过本次实验,为露薇花高效生产繁殖提供理论依据,从而为西北地区新优特异花卉的引进,提供可行的途径方法。     

水果型番木瓜组培无菌系的构建

用无菌水、GA3 和6-BA等不同试剂对水果型番木瓜种子进行预处理后接种于培养基中,通过研究不同试剂对种子发芽率、胚芽和胚根的伸长、幼苗苗高的影响,筛选出构建水果型番木瓜组培无菌系的较好种子预处理方式。结果表明,无菌条件下用75%酒精均匀擦拭水果型番木瓜果皮表面,取出种子,用无菌水冲洗3次是较好的灭菌方法,种子污染率为2.52%;水果型番木瓜种子灭菌后经GA3 1000 mg/L+6-BA 1 mg/L（等体积混合）浸泡18 h处理后,接种于MS培养基中培养,种子发芽率、胚芽、胚根和苗高等各指标平均数达到较高值,分别为68.42%、2.25cm、0.8 cm、1.52 cm,幼苗整体生长情况较好,构建了良好的水果型番木瓜组培无菌系。     

高抗寒毛白杨杂种离体培养及玻璃化苗研究

[目的]为了能够将毛白杨优良资源应用到北纬41°以北地区,为我国北方生态防护林建设提供优良苗木,特进行高抗寒性毛白杨杂种—‘蒙树1号杨’组织培养技术研究。[方法]利用‘蒙树1号杨’切枝水培嫩芽为外植体,开展了最佳消毒剂和消毒时间筛选,以及无菌苗茎段增殖、叶片分化、生根培养和玻璃化苗恢复培养研究。[结果]嫩芽在0.10%升汞中灭菌5 min效果最佳,外植体污染率为15.60%、萌芽率达77.70%；最佳茎段增殖培养基为MS + 0.20 mg/L 6-BA + 0.05 mg/L NAA,平均分化出芽4.21个；不定根最佳诱导培养基为1/2 MS + 0.50 mg/L IBA + 0.20 mg/L NAA,生根率达93.90%；玻璃化苗在MS + 0.2 mg/L 6-BA + 0.05 mg/L NAA + 30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂培养基中恢复效果最好,恢复率达82.38%。[结论]‘蒙树1号杨’离体快繁体系的建立,为毛白杨体细胞多倍体育种及我国西北地区园林绿化和生态建设夯实了基础。     

平铺白珠种子萌发特性研究

为提高平铺白珠的繁殖效率,以采集的平铺白珠‘极速贵族’种子为供试材料,测量种子形态、千粒重、吸水特性;并通过培养皿滤纸萌发法统计不同GA₃处理和温度处理下种子的发芽率;将无菌萌发所获幼苗与常规播种苗长势进行对比。结果表明,平铺白珠‘极速贵族’种子属小粒种子(千粒重(0.2995±0.0111) g),种子种皮薄且透水性良好。GA₃浸种时间、GA₃浸种浓度和温度三者间存在交互作用,其中GA₃浓度和温度是影响种子萌发的关键因子,浓度为1000 mg/L的GA₃溶液浸泡种子12～24 h,环境温度为白天25℃、夜晚15℃的条件有利于促进种子萌发,种子发芽率可达90%以上,显著高于对照(64.67%)。无菌苗长势要优于常规播种苗,无菌萌发1500 mg/L GA₃预处理种苗的平均株高(12.17 mm)和平均根长(18.15 mm)均高于常规播种苗的株高(9.65 mm)和根长(13.31 mm),培养基配方为WPM+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L ...     

Study on Hybridation and Aseptic Seeding as Well as Rapid Propogation of Demdrobium officinale and Dendrobium aduncum

[Objective]To study the system of aseptic seeding and rapid propogationtin of hybrid seeds of Demdrobium officinale and Dendrobium aduncum [Methods] Demdrobium officinale and Dendrobium aduncum were the objects of research,and their hybrid seeds were gained by artificially auxiliary hybridation. The seeds were induced to germinate in vitro,and study on the technology of aseptic seeding was finished. [Results]Successful hybridation of Demdrobium officinale and Dendrobium aduncum could be easily realized,and hybrid fruit-bearing rate could reach 80%; the suitable culture medium for seeds was: MS +1. 0 mg/L 6-BA +0. 1 mg/L NAA,the germination rate after 30 d of cultivation was 89. 7%; appropriate culture medium for proliferation of protocorm was: MS + 1. 5 mg /L 6-BA + 0. 1 mg /L NAA + 100 g /L banana + 1. 0 mg /L AC; appropriate culture medium for differentiation of protocorm was: MS + 1. 5 mg /L 6-BA + 0. 1 mg /L NAA + 200 g /L potato + 1. 0 g /L AC; the formula of culture medium for strenghening the seedlinge and nurturing the rooting was: 1 /2 MS + 0. 6 mg /L NAA +100 g /L banana + 1. 0 g /L AC,the plant grew robustly,the rooting percentage was 100%,and the survival rate of transplanting was higher than 95%. [Conclusions]This method ascertains the optimum culture media formula in the whole regeneration process and all phases from seed germination to acclimatization and transplantation,so fine solidation is laid for its germplasm innovation and industrialized seedling production.